核酸檢測的原理和技術方法

㈠ 核酸檢測是怎麼做的

1、核酸檢測是分子生物學檢查，一般是用於檢測病原體的核酸。這種檢測方法直擊病毒的RNA或DNA結構，檢測血液中是否存在病毒核酸，診斷有無病原體感染。
2、病毒的特點就是形態非常小，在普通光學顯微鏡下看不到，肉眼更是無法直接觀察。但每種病毒都有其獨特的基因序列，通過檢測病人體內的病毒核酸，就可判斷病人體內是否存在病毒。
3、核酸檢測原理：以病毒獨特的基因序列為檢測靶標，通過PCR擴增，使我們選擇的這段靶標DNA序列指數級增加，每一個擴增出來的DNA序列，都可與我們預先加入的一段熒游標記探針結合，產生熒光信號，擴增出來的靶基因越多，累積的熒光信號就越強。而沒有病毒的樣本中，由於沒有靶基因擴增，因此就檢測不到熒光信號增強。所以，核酸檢測，其實就是通過檢測熒光信號的累積來確定樣本中是否有病毒核酸。

㈡ 核酸檢測是怎樣檢測的

眾所周知，新型冠狀病毒肺炎（COVID-19）是一種烈性呼吸道傳染病，其病原體為新型冠狀病毒。若想證實已出現的感染症狀是由本病毒所引起，最准確的方法是從患者體內分離出活病毒，並進行病毒培養。

然而，此方法並不適合大面積應用，在此次疑似病例的確診工作中，也並不適用。這是因為病毒培養所需時間較長，需要的場所條件也很高（P3級實驗室），時效性遠遠跟不上臨床需要。

而核酸檢測作為病原學的檢測手段之一，效率很高，一般情況下幾個小時就可以知道結果。因此，在此次疫情中，臨床上取得病原學證據的主要方式並不是病毒培養，而是核酸檢測。

核酸是遺傳信息載體，是對DNA（脫氧核糖核酸）和RNA（核糖核酸）的統稱。病毒則主要由遺傳物質和蛋白質組成。而新型冠狀病毒正是一種RNA病毒，其遺傳物質是單鏈RNA。核酸檢測的原理，正是檢測在被測者的咽拭子等樣本中，是否存在病毒的RNA。如果存在，說明被病毒感染。那麼，我們是否已經獲悉了病毒的RNA呢？

△RNA與DNA（圖片來源網路）

在武漢疫情初期，中國疾病預防控制中心應用宏基因組學技術，在短時間內完成該病毒的鑒定，並獲取了全基因組序列。在病毒全基因組序列公布後，實時熒光逆轉錄聚合酶鏈反應（RT-PCR）試劑被快速研發。

隨後，核酸檢測試劑盒被應用於臨床，並為確診新冠肺炎提供病原學證據。那麼，應用試劑盒進行核酸檢測，究竟是怎樣的一個過程呢？

首先，檢測人員需要在試劑的幫助下，將樣本中的核酸提取出來。再把已經分離出來的核酸加到核酸擴增試劑中，然後將其放到核酸擴增儀內，一般兩個小時內就會有結果。

事實上，在操作步驟中，擴增是很重要的一環。擴增的意義在於能讓微量的遺傳信息成指數增加。只要樣本中有核酸基因片段，就能用PCR法加以放大，從而更清晰地與病毒全基因組序列實現比對。

實時熒光逆轉錄聚合酶鏈反應（RT-PCR）法已在臨床實驗室應用多年，檢測體系成熟，具有特異性強、靈敏度高、檢測周期短和可定量檢測的優點，而且還能對病毒感染程度和治療效果進行動態監測。

中日友好醫院呼吸與危重症醫學科主任醫師陳欣在記者采訪中介紹道：核酸檢測十分敏感，只要在被檢者的分泌物樣本中找到一部分病毒的核酸，就可以通過RT-PCR擴增的方式，整合成序列。

"雖然不確定核酸是否來自於活病毒，但對於有呼吸道感染症狀的患者或疑似患者來說，如果其咽拭子有這種核酸，一般認為來源於活病毒的一部分，間接證實其體內存在著病毒的繁殖和感染。" 陳欣告訴記者。

核酸檢測容易出現"假陰性"

雖然核酸檢測有靈敏度高、檢測周期短等優點，但也存在著一定的弊端。不同於從人體內直接分離出活病毒的方式，核酸檢測採用的是一種間接的方式，有可能造成假陰性。

因為試劑盒存在最低檢測限的問題，所以只有當採到的樣本中，病毒的含量達到一定程度時才能檢測出來。少數情況下，可能康復者並未康復，但由於樣本中病毒載量低，故康復者核酸檢測的結果呈陰性，也就是我們常說的"假陰性"。

因此，在《新型冠狀病毒肺炎診療標准（試行第七版）》中，出院標准之一為連續兩次痰、鼻咽拭子等呼吸道標本核酸檢測陰性（釆樣時間至少間隔24小時）。
而之所以選取呼吸道標本進行核酸檢測，是因為新冠肺炎屬於呼吸道傳染病，故而優先考慮從呼吸道的分泌物中取得標本。呼吸道又分為上呼吸道和下呼吸道，前者主要包括鼻、咽、喉；後者主要包括氣管、主支氣管及肺內各級支氣管。

相應地，現在對疑似患者檢測病毒核酸，標本的採集一般有兩大類，上呼吸道標本和下呼吸道標本。

上呼吸道標本主要包括口咽拭子、鼻咽拭子（NPS）、鼻咽吸取物（NPA）；下呼吸道標本主要包括痰液、氣管吸取物、支氣管肺泡灌洗液（BALF）等。

㈢ 新冠肺炎核酸檢測原理是什麼

新冠肺炎核酸檢測的原理，主要是依據每一個生物的核酸都是不一樣的，都有特定的核酸序列以及DNA序列。病毒的特點就是形態非常之小，在普通的光學顯微鏡下是看不到的。但是可以根據每種病毒都有獨特的基因序列來檢測，只要檢測出人體內有新冠病毒基因序列，並且採用熒光定量PCR的方法，把這個基因序列擴增後。如果是帶有病毒的患者會檢測出熒光信號增強，這樣就可以顯示陽性的結果。如果是核酸檢測沒有病毒的患者樣本，因為沒有靶基因的擴增，就檢測不到熒光信號增強，這樣的結果就屬於新冠肺炎核酸檢測陰性。

㈣ 核酸檢測是怎麼做的具體是檢測什麼東西

核酸檢測需要去正規的醫院或者防疫中心進行檢測。

檢測步驟：

1、首先，核酸檢測盒子，也就是現在用於新冠狀病毒檢測的方式，這個盒子中主要檢測「法寶」採用咽拭子。用咽拭子擦拭咽後壁及雙側咽扁桃體處各5－10次，且不斷旋轉拭子。

2、醫務人員進行留樣，將拭子頭浸入細胞保存液中，折斷尾部後立即旋緊管蓋子。

3、保存，將樣本管放入密封袋中及時送檢，而送檢過程中需要嚴格的運輸環境，2－8攝氏度保存。

4、操作核酸提取（反應管理），將滅活病毒後的樣本進行核酸提取，用於後續檢測。

5、熒光PCR核酸檢測，也就是．上機器檢測，將提取物進行熒光PCR擴曾反應，需要70－－80分鍾。

核酸檢測就是通過檢測熒光信號的累積，來確定樣本中是否有相應的基因核酸。目前核酸檢測試劑盒，多數採用熒光定量PCR方法。檢測原理就是，以獨特的基因序列，為檢測靶標，通過PCR擴增，使我們選擇的這段靶標DNA序列指數級增加，每一個擴增出來的DNA序列，都可與我們預先加入的一段熒游標記探針結合，產生熒光信號，擴增出來的靶基因越多，累積的熒光信號就越強。如果沒有靶基因擴增，因此就檢測不到熒光信號增強。核酸檢測試劑盒的組分中，檢測引物和探針最為關鍵。靈敏特異的擴增引物，對檢測結果的准確，與否發揮著至關重要的作用。

㈤ 什麼是核酸檢測怎麼檢測

核酸檢測是在實驗室的條件下，通過分析致病微生物DNA或者RNA基因學的序列，進行臨床病因學的確診。此種核酸檢測的方法是利用PCR擴增的方法進行檢測，需要很多的步驟，最快也要6個小時才能出結果。此種檢測靈敏度高、成本高，完全手工操作，工作量非常大，同時要求實驗室的條件也非常高。它是目前及早確定病人是否感染病毒，以及及早發現和及早治療最有效的檢測方法新型冠狀病毒核酸檢測的方法，目前採用的是實時PCR熒光法這種PCR熒光法也叫聚合酶鏈式反應，是通過一種分子生物學的技術用來放大這種極少見的RNA病毒。可以將新冠病毒RNA片段擴增到百萬倍以上，這樣更容易檢測出新冠病毒

㈥ 核酸檢測是怎麼檢測

核苷酸增加無損檢測技術，是一系列立即檢驗病原菌核苷酸的技術性統稱，包含基因表達介導的核苷酸增加無損檢測技術(TMA)、即時瑩光聚合酶鏈反應(PCR)，根據對靶核苷酸立即增加或對其附加的數據信號增加的方式，使極為少量的核苷酸變為形象化的光學或可視性數據信號。

一、血液為何需要開展dna檢測？
因為基本的血液血清學無損檢測技術方法學要素，包含酶鏈免疫吸附實驗(ELISA)、電化學發光免疫力剖析實驗(CLIA)，會使一些病原菌不檢和漏驗，經血清學檢測陰性的血液也並並不是100%安全性的，仍存有靜脈注射傳播疾病的風險性。關鍵原因:基本檢測病毒的漏撿:病毒感染感染者「潛伏期」捐血、病毒變異、免疫力緘默性感染(immunosilent infection)、人工服務實際操作不正確。一些己知病毒感染未檢驗:如CMV、B19、HTY、登革熱病、Pion等。未知病毒:探索與發現病毒感染，如WNV、SARS、寨卡病毒等。選用核苷酸增加檢驗則可減少經血液傳播疾病的風險性。

二、血液dna檢測的實際意義
1.減少乙肝檢測潛伏期，減少靜脈注射風險性。說白了「潛伏期」，就是指從感染病源剛開始，直到用某類檢驗方式可以檢驗到該病源存有才行的這一段時間。因為感染後病毒顆粒在於抗原體、抗原釋放出來入血，如HCV感染後，在將近1～3月的時間里，感染者身體沒有或僅有少量而沒法檢驗出的抗原，而血液卻具備感染性。因而抗原體、抗體檢測的「潛伏期」較長，如HBsAg、抗HIV檢驗的「潛伏期」各自為56d和22d，抗-HCV檢驗的「潛伏期」則長達70d。研究表明，(NAT)檢驗的確可以減少潛伏期，但針對不一樣的病毒感染，其高效率也是有差別，這與血清學檢驗的基本值和dna檢測實驗試劑的敏感度相關。
2、別的優點：血液dna檢測除開能顯著減少潛伏期外，與血清學方式對比，也有本身優點：
(1)敏感度高，特異性強:dna檢測敏感度遠超醫學免疫學方式檢驗，此外，核苷酸鹼基配對的精確性決策了dna檢測的特異性能比醫學免疫學檢驗強。

(2)一些特殊情況dna檢測可能是唯一的方式:如外周血單核細胞中或肝臟中融合的病毒感染;病毒感染的亞型或變異性;抗原體基因變異後抗原融合結構域轉變或不產生抗體;產生抗原體一抗原一氧化氮合酶，使醫學免疫學檢驗展現假陰性;感染中後期或漫性感染時抗原體/抗原
三、在我國血液dna檢測狀況

㈦ 核酸檢測是怎樣檢測的新冠病毒核酸檢測的原理是什麼

除朊病毒外的所有生物都含有核酸，核酸包括脫氧核糖核酸（DNA)和核糖核酸（RNA)。新型冠狀病毒是一種只含有核糖核酸的病毒。在新冠病毒出現後，我國科學家在短時間內完成了對新冠病毒的全基因組序列的分析。在核酸檢測過程中，如果在患者樣本中發現新型冠狀病毒特殊的核酸序列，則說明該患者可能感染新型冠狀病毒。

在臨床核酸檢測中，首先需要根據試劑盒的樣本要求進行樣本的收集。樣本類型主要包括咽拭子，鼻拭子，痰液，支氣管灌洗液，肺泡灌洗液等。考慮到利於操作等多種因素，核酸檢測樣本多為鼻拭子。鼻拭子和口咽拭子的提取方法如下：

用一根較長的棉簽插入鼻孔，通過鼻腔取鼻咽後部的分泌物；口咽拭子則是從口腔進入，擦拭扁桃體和咽隱窩附近的分泌物。

核酸檢測全程時間比較短，無創口，高效快速。檢測完就可以離開，回去等待結果就好。考慮到新型冠狀病毒 感染症狀的特殊性，有條件以及所處地區有要求的人要積極配合完成核酸檢測。

㈧ 核酸檢測原理

核酸檢測原理：每一個生物的核酸是不一樣的，通過核酸檢測就是要確定人身上是否帶有病毒，也就是為了檢出病毒的攜帶者。病毒攜帶者如果有症狀的話就是病人，如果沒有症狀就是無症狀感染者。

核酸檢測也是檢測病毒的方法，它可以更早發現感染。現在臨床中對乙肝、丙肝、艾滋病都開展了核酸檢測，可以在抗體產生前檢測到血液中是否存在病毒。

而一些呼吸道疾病可以通過咽拭子或者呼吸道分泌物的核酸檢測來判斷是否感染，以及推測是否具有傳染性。季節性流感、禽流感、冠狀病毒感染等通過咽拭子檢測可以方便地判斷出上呼吸道是否存在病毒成分，從而判斷被檢測者是否屬於感染者。

(8)核酸檢測的原理和技術方法擴展閱讀：

新冠病毒的核酸檢測已經是比較成熟的檢測方法了，只要在咽喉部位擦拭幾秒鍾就可以採集到標本。通過分析判斷是否有新冠病毒的核酸成分，可以盡早發現感染者，甚至在感染者出現症狀前就可以檢測到陽性。

感染者經過隔離治療後咽拭子檢測陰性說明病毒已經清除，不具有傳染性了。目前兩次咽拭子核酸檢測陰性是確診病例和無症狀感染者解除隔離的標准之一。

㈨ 核酸檢測的原理是什麼

核酸檢測其實是檢測受測者體內是否有新冠病毒的核酸（RNA）。每種病毒的核酸內部都含有核糖核苷酸，不同的病毒所含的核糖核苷酸數量和排列順序不同，使得每種病毒都具有特異性。

新冠病毒的核酸也是獨特的，核酸檢測就是對新冠病毒的核酸進行特異性檢測。在進行核酸檢測之前，需要採集受測者的痰液、咽拭子、肺泡灌洗液、血液等樣本，對這些樣本進行檢測，就可以發現受測者的呼吸道感染了什麼病菌。新冠病毒核酸檢測常用的是咽拭子樣本檢測，將樣本裂解提純，從中提取出可能存在的新冠病毒核酸，檢測的准備工作就做好了。

新冠病毒核酸檢測主要用熒光定量RT-PCR技術，這種技術是熒光定量PCR技術與RT-PCR技術的結合。在檢測過程中，先採用RT-PCR技術將新冠病毒的核酸（RNA）逆轉錄為對應的脫氧核糖核酸（DNA）；再採用熒光定量PCR技術，將得到的DNA進行大量復制，同時，使用特異性探針對復製得到的DNA進行檢測，打上標記。

如果存在新冠病毒核酸，儀器就可以檢測到熒光信號，而且，隨著DNA的不斷復制，熒光信號不斷增強，這樣就間接檢測到了新冠病毒的存在。

核酸檢測為陽性不一定是確診

核酸檢測結果呈陽性，就可以確認受測者上呼吸道存在病毒核酸，但並不能直接確診為新冠肺炎患者。在核酸檢測為陽性的情況下，還要綜合流行病學史對受測者進行進一步的診斷，如果受測者還有發熱、咽痛、咳嗽、乏力等症狀，以及與已確診的感染者有接觸史等，就可以診斷為確診病例。

如果受測者沒有任何相關症狀，一般診斷為無症狀感染者。無症狀感染者也有傳染性，而且一些無症狀感染者後來也開始出現症狀，變成了確診患者。

以上內容參考 瀟湘晨報—核酸檢測的原理到底是什麼？為什麼會出現假陰性？

㈩ 核酸檢測的原理是什麼DNA和RNA怎麼區分什麼是假陰性

如今，疾病越來越復雜多樣，而疾病的檢測以及甄別對於治療來說就顯得至關重要了，就拿這次新冠肺炎的爆發來說，其中“核酸檢測”這種醫學檢測手段就進入了大眾的視野。那麼，核酸檢測技術的原理是什麼？為什麼核酸檢測會有的一定幾率出錯？什麼是假陰性？

實際上，從技術角度上來說，核酸檢測過程中出現的“假陰性”是不可避免的，比如有項研究就發現，新冠患者在感染期間至少會有20%的漏診概率，即會出現假陰性結果。雖然核酸檢測技術會有假陰性的問題出現，但我們對於核酸假陰性也不能掉以輕心。