1. 如何鑒定DNA和RNA(生物)具體做法
高中粗鑒定:用吡羅紅(DNA)和甲基綠(RNA)鑒定.
DNA的鑒定
(1)配製二苯胺試劑:取0.1 mL B液;滴入到10 mL A液中,混勻.
(2)鑒定:取4 mL DNA提取液放入試管中,加入4 mL二苯胺試劑,混勻後觀察溶液顏色(不變藍).用沸水浴(100℃)加熱10 min.在加熱過程中,隨時注意試管中溶液顏色的變化(逐漸出現淺藍色).
附1:研磨液的配製方法
Tris:10.1 g(相對分子質量為121.4),先加50 mL蒸餾水溶解,用物質的量濃度為2 mol/L的鹽酸調至pH=8.0,再加下述葯品.
NaCl:8.76 g(相對分子質量58.44)
EDTA:37.2 g(相對分子質量372.24)
SDS:20 g(相對分子質量288.3)
待上述葯品全部溶解後,再用蒸餾水定溶至1000 mL.
若在室溫低於20℃時配製葯液,SDS呈沉澱析出,此時需要加溫,才能將SDS溶解.如果提前配製的研磨液出現了沉澱,則應加溫使沉澱溶解後再使用.
附2:研磨液中幾種葯品的作用
SDS(十二烷基磺酸鈉):可使蛋白質變性,與DNA分離.
EDTA(乙二胺四乙酸二鈉):為DNA酶的抑制劑,可以防止細胞破碎後DNA酶降解DNA.
物質的量濃度為0.15 mol/L的氯化鈉溶液:能很好地溶解DNA.
Tris/HCl:提供緩沖體系,DNA在這個緩沖體系中呈穩定狀態.(Tris為三羥甲基氨基甲烷)
RNA的鑒定
取RNA沉澱約O.2 g,加2 ml 10%H2SO4→沸水浴中加熱2 min→加1.5 ml地衣酚試劑→沸水浴中加熱→觀察顏色變化。
2. 用什麼方法檢測產品是否含有DNA 和rna
DNA和RNA作為遺傳物質,本身都有自己的特性,用於檢測的方法也有很多,如下:
首先我們要知道:
DNA:為雙鏈結構,由A 、C 、G、T組成,鏈有外顯子和內含子區域,物質性質中A260/A280在1.8左右,在260nm出有最大吸收峰。
tRNA的二級和高級結構
1、抽提試劑盒分別抽提:將產品分成兩份,其中一份用來抽提DNA,此樣本加入RNA 酶,另一份用來抽提RNA,此樣本加入Dnase I,由此抽提出來的核酸進行瓊脂糖凝膠電泳或者aligent 4200/2100儀器檢測,考慮到DNA和RNA可能會降解,只有樣本完好時,才能輕易地辨別出來。
2、qPCR技術:如1中所示,用1中的樣本進行qPCR驗證,設計引物時DNA樣本跨外顯子區域,或者是單獨設計內含子區,加標准品對照,RNA正常設計即可,由此得出的結果可以根據擴增長度和兩個結果進行判定。
以上為兩個最基本的方法,操作簡單,成本可控,兩個結合起來結果准確,當然還有一些其他的方法,並設計對照試驗,採用控制變數法進行研究。
3. 分離DNA和RNA主要方法有哪些
鹽析法 DNA和蛋白質等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同 利用這一特點 選擇適當的鹽濃度就能使DNA充分溶解 而使雜質沉澱 或者相反 以達到分離目的 DNA在NaCl溶液中的溶解度先增大後減小 在DNA溶解度最低時 DNA從溶液中析出 而其他雜質還留在溶液中 達到粗提取的目的
酶水解法 採用RNase(可以買)水解雜質RNA如果混入DNase酶可以採用100度加熱15min使其失活 RNase不會失活 反之採用DNase可以提取RNA 混了RNase、時加入蛋白酶K或加碘乙酸鈉
4. 怎樣區分DNA與RNA
LS講的DNA遇甲基綠變綠,只能確定存在DNA而無法辨別內部是否存在RNA.RNA遇吡羅紅變紅,所以直觀上可以用吡羅紅檢驗.缺點就是微量的RNA無法檢測出來.粗量估計的話用這個比較直觀也方便.
還有一種方法就是取樣做光譜分析,DNA與RNA的吸收光譜不同,因此能測出微量RNA的存在.
5. 檢測DNA和RNA檢測方法有什麼區別
您好!檢測DNA的方法有:1.光密度測定。2.瓊脂糖電泳凝膠檢測法。3。二苯胺法。
檢測RNA的方法有:1.光密度測定。2.苔黒酚法。
主要的嘧啶和嘌呤具有共軛雙鍵,使鹼基,核苷,核苷酸和核酸在240-290nm的紫外波段有一段強烈的吸收峰,因此核酸具有紫外吸收特性,在260nm,處是最大的紫外光吸收值,根據朗波-比爾光吸收定律來計算出核酸含量。
6. 請教哪些操作方法區別單鏈DNA與單鏈RNA
哪些操作方法區別單鏈DNA與單鏈RNA
方法1:DNA溶於苯酚,RNA不溶,故可用苯酚來沉澱,這是最簡單的方法。
方法2.:利用吖啶橙的變色特性可鑒別DNA和RNA。吖啶橙作為一種熒光染料已被用於染色固定,非固定細胞核酸,或作溶酶體的一種標記。觀察死亡細胞熒光變色性變化以及區別分裂細胞和靜止細胞群體。雖然測定DNA和RNA含量時較難獲得好的重復性結果,但該方法已被許多實驗室廣泛採用。
7. 快速鑒別DNA和RNA的方法
簡單的應該是用甲基綠和吡羅紅兩種染色劑對DNA和RNA的親和力不同,甲基綠對DNA親和力強,使DNA顯現出綠色,而吡羅紅對RNA的親和力強,使RNA呈現出紅色。用甲基綠、吡羅紅的混合染色劑染色,可同時顯示DNA和RNA的顏色
8. 快速鑒定RNA和DNA的方法是什麼 它們的基本原理是什麼
DNA和RNA的鑒別,較常用的方法是利用兩類核酸中不同的戊糖各自具備的不同的顏色反應,而得以定性鑒別.其中鑒定DNA的方法稱為二苯胺法,鑒定RNA的方法稱為地衣酚(苔黑酚,3,5-二羥基甲苯)法.上述顏色反應不但可用於兩類核酸的定性鑒定,也是定糖法定量測定核酸的依據.
9. 請問DNA和RNA的區別
1、結構不同:
DNA是雙螺旋結構。RNA一般為單鏈長分子,不形成雙螺旋結構。它的鹼基組成與DNA的不同,RNA沒有鹼基T(胸腺嘧啶),而有鹼基U(尿嘧啶)。
2、功能不同:
脫氧核糖核酸(DNA)是分子結構復雜的有機化合物。作為染色體的一個成分而存在於細胞核內。功能為儲藏遺傳信息。
核糖核酸(RNA)存在於生物細胞以及部分病毒、類病毒中的遺傳信息載體,有催化生化反應過程的活性功能,即具有酶的活性。
3、應用不同:
鑒定親子關系用得最多的是DNA分型鑒定。人的血液、毛發、唾液、口腔細胞等都可以用於用親子鑒定,十分方便。
使RNA聚合酶可依照DNA上的鹼基序列合成相對應之信使RNA(mRNA)的過程. 在人體需要酵素或是蛋白質時,都會需要進行此過程,才能藉由信使mRNA,將密碼子帶出核模外. 好讓核糖體進一步的利用信使RNA(mRNA)來翻譯,合成所需之蛋白質。
(9)鑒別dna和rna的方法擴展閱讀:
1、DNA是高分子聚合物,DNA溶液為高分子溶液,具有很高的粘度,可被甲基綠染成綠色。DNA對紫外線(260nm)有吸收作用,利用這一特性,可以對DNA進行含量測定。當核酸變性時,吸光度升高,稱為增色效應;當變性核酸重新復性時,吸光度又會恢復到原來的水平。
較高溫度、有機溶劑、酸鹼試劑、尿素、醯胺等都可以引起DNA分子變性,即DNA雙鏈鹼基間的氫鍵斷裂,雙螺旋結構解開—也稱為DNA的解螺旋。
2、在細胞中,根據結構功能的不同,RNA主要分三類,即tRNA(轉運RNA),rRNA(核糖體RNA),mRNA(信使RNA)。mRNA是合成蛋白質的模板,rRNA是組成核糖體的組分,是蛋白質合成的工作場所。
10. 如何設計實驗區別RNA和DNA
首先要清楚DNA和RNA的區別,然後依此來設計實驗
RNA與DNA最重要的區別一是RNA只有一條鏈,二是它的鹼基組成與DNA的不同,RNA沒有鹼基T(胸腺嘧啶),而有鹼基U(尿嘧啶)。所以導致他們有以下性質上的不同。
1.兩性解離:DNA無,只有酸解離,鹼基被屏蔽(在分子內部形成了H鍵)。RNA有,有PI。
2.粘度大:DNA;RNA,粘度由分子長度/直徑決定,DNA為線狀分子,RNA為線團。
3.鹼的作用:DNA耐鹼RNA易被鹼水解。
4.顯色反應:
鑒別DNA和RNA+濃HCl RNA ------→ 綠色化合物
DNA ------→ 藍紫色化合物苔黑酚
二苯胺啡啶溴紅(熒光染料)和溴嘧啶都可對DNA染色,原理是卡在分子中,DNA的離心和電泳顯色可用它們。
DNA和RNA的鑒別染色
利用吖啶橙的變色特性可鑒別DNA和RNA。吖啶橙作為一種熒光染料已被用於染色固定,非固定細胞核酸,或作溶酶體的一種標記。觀察死亡細胞熒光變色性變化以及區別分裂細胞和靜止細胞群體。雖然測定DNA和RNA含量時較難獲得好的重復性結果,但該方法已被許多實驗室廣泛採用。
5.溶解性:都溶於水而不溶於乙醇,因此,常用乙醇來沉澱溶液中的DNA和RNA。DNA溶於苯酚而RNA不溶,故可用苯酚來沉澱RNA。
6.紫外吸收:核酸的λm=260nm,鹼基展開程度越大,紫外吸收就越厲害。當A=1時,DNA:50ug/ml,RNA和單鏈DNA:40ug/ml,寡核苷酸:20ug/ml。用A260/A280還可來表示核酸的純度。
7.沉降速度:對於拓撲異構體(核苷酸數目相同的核酸),其沉降速度從達到小依次為:RNA ; 超螺旋DNA > 解鏈環狀DNA ; 鬆弛環狀DNA ; 線形DNA也就是在離心管中最上層是線形DNA,最下面是RNA。
8.電泳:核苷酸、核酸均可以進行電泳,泳動速度主要由分子大小來決定,因此,電泳是測定核酸分子量的好方法。
9.DNA分子量測定最直接的方法:用適當濃度的EB(溴嘧啶)染色DNA,可以將其他形式的DNA變成線形DNA,用電鏡測出其長度,按B-DNA模型算出bp數,根據核苷酸的平均分子量就可計算出DNA的分子量。