A. 流式細胞儀的原理是什麼
最近一直在了解流式細胞術和流式分選的知識，看到這個問題想回答一下：
流式細胞儀是以流式細胞術為基礎，快速精確的對單個細胞的理化性質進行定量分析和分選。分析流程為：制備單細胞懸液，用特異性熒光染料標記的抗體進行染色，經染色後的待測細胞在一定氣體壓力下被壓入流動室，在鞘液的包裹下細胞呈單行排列，依次通過檢測區域，在激光束的照射下細胞會產生散射光和激發熒光。這兩種信號會同時被光電倍增管( PMT) 接收。接收後可轉換為電信號，通過模/數轉換器，將連續的電信號轉換為可被計算機識別的數字信號，進行分析。
如上所述，流式細胞儀是由液流系統、光路系統以及檢測分析系統三部分組成，部分儀器還具有分選功能，能對粒子進行充電和偏轉從而實現細胞分選。
液流系統：通過產生壓力使含有目的細胞的樣本快速進入儀器，在封閉的樣品管中利用樣品和鞘液之間的壓力差是樣本聚集到光學分析系統；
光路系統：由不同的激光器發射出的激光照射到細胞表面產生光信號，而後經過不同的光路系統被接收。在流式照射室的分析點，激光照射到細胞表面發生散射和折射，並發射出散射光包括前向散射光（FSC）和側向散射光（SSC）,同時細胞表面的熒光素被激發發射出熒光。前向散射光和側向散射光檢測器收集散射光轉變為電信號；熒光則被聚光器收集，不同顏色的熒光被雙色反光鏡轉向不同的光電倍增檢測器，將熒光信號也轉變成電信號。FSC和SSC是流式分析中兩個非常基本的參數。FSC的值能代表細胞的大小，細胞的體積越大則FSC就越大。SSC則代表細胞的顆粒度，細胞內細胞器和顆粒度越大則SSC越大。
檢測分析系統：熒光信號的強度代表了所測細胞膜表面抗原強度或細胞內物質的濃度，光信號轉換為可被計算機識別的電信號。計算機把所測量的各種信號進行處理分析。
流式細胞分選是在流式細胞術的基礎上進行的。在流動室的噴口上方配有一個超高頻的壓電晶體，產生的振動使噴出的液流形成均勻的液滴，待測細胞就分散在這些液滴之中。將這些液滴充以正負不同的電荷（對標有熒光素的細胞液滴帶以負電荷；未標記熒光素的細胞液滴帶以正電荷；而不含有細胞的液滴則不被帶電荷），當液滴流經偏轉板時，在高壓電場的作用下偏轉，落入各自的收集容器中，不帶電荷的液滴落入廢液容器，從而實現細胞的分離。
第一次回答希望能幫到你，如有理解不當的地方，歡迎指正！
B. 外泌體是什麼
外泌體美容是近段時間所興起的一種美容技術，主要是通過外泌體來修復曬傷以及預防和治療皮膚衰老等方面的問題。
外泌體美容之所以能夠風靡全球的美容市場，主要還是有著非常明顯的效果，外泌體不僅能夠美白嫩膚，實現抗衰修復的功能，甚至就連肌膚再生的效果也超過了很多其他同類型的產品，比如說像幹細胞等等。
外泌體其實就指的是包含了許多復雜的RNA和蛋白質的小膜泡。用通俗一點的話來說就是細胞分泌的物質，外泌體其實早在20世紀80年代就已經被發現了，但是在經過了將近40多年的研究，才真正被廣泛應用，現階段還是屬於一種發展階段，但是因為有著非常顯著的成效，所以也是被不斷的開發應用著。外泌體的價值自從被研究出來就非常的受重視，在醫學方面，不僅受腫瘤學臨床醫學，甚至還有體外檢測等等領域的資深專家拿來進行應用。
而且美國有專門的研究人員進行的實驗證明外泌體對於祛斑，美白是有著明顯作用的。也就是人們現在常說的水光針通過打開皮膚通道將這些營養物質送到表皮層以下，增加吸收的效果。
C. 為什麼運動可以促進外泌體的釋放有類似Ca+的這種機制詳細解答的文獻嗎
長期運動後產生的外泌體，確實能夠保護受損的心肌細胞。
那麼到底是外泌體中的哪種成分在起作用呢？研究人員對外泌體進行了NGS測序，發現游泳訓練組和不運動組的小鼠外泌體miRNA有很大差別，游泳訓練顯著上調了一簇多個miRNA。他們將其分別在心肌細胞缺氧復氧模型中進行功能測試和篩選。
發現多個miRNA，尤其是一種叫miR-342-5p的miRNA能夠明顯抑制細胞凋亡，降低乳酸脫氫酶的釋放，並提高細胞的存活率。檢測學員志願者的外泌體後，也發現賽艇訓練組外泌體的miR-342-5p含量較對照組也有明顯升高。
那麼，這個miR-342-5p到底是怎麼產生的呢？研究人員檢測了運動前後多種組織miR-342-5p的表達水平，發現運動後血管組織miR-342-5p增加最明顯。之前有研究發現，運動會增強血管與血流之間的剪切力，誘導血管內皮細胞產生細胞因子，對人體有益[8]。他們在體外培養條件下對動脈血管內皮細胞通過改變血流剪切力，發現血流加速所致的剪切力增加就能促進這些細胞上調miR-342-5p。
血流變化可以改變剪切力
那麼miR-342-5p是通過什麼方式保護心臟的呢？研究人員對miR-342-5p起作用的機制進行了深入研究，證實了外泌體miR-342-5p可被心肌細胞攝取；發現其能抑制Caspase 9 和 Jnk2蛋白的水平，並維持Akt蛋白的磷酸化[9,10]。這些作用最終會抑制細胞凋亡，促進心肌細胞生存，從而發揮降低心肌梗死的作用。
運動保護心臟的作用機制
這項研究揭示了長期運動保護心臟的一個新機制，首次發現了運動通過血管內皮細胞釋放的循環外泌體miRNA在其中的作用，對缺血性心臟病的預防和治療具有潛在的臨床應用價值。
而對於大多數現在心臟還健康的人，不用奇點糕多說了吧？既然心很容易受傷，那就多愛護它，多運動，讓它更強大吧~
有氧運動的第一作用，就是增強心肺功能。
D. 什麼是外泌體
外泌體是指包含了復雜 RNA 和蛋白質的小膜泡 (30-150nm)，現今，其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。1983年，外泌體首次於綿羊網織紅細胞中被發現， 1987年Johnstone將其命名為「exosome」。多種細胞在正常及病理狀態下均可分泌外泌體。其主要來源於細胞內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體，經多囊泡體外膜與細胞膜融合後釋放到胞外基質中 。
細胞外被（cell coat）又稱糖萼（glycocalyx），曾用來指細胞質膜外表面覆蓋的一層粘多糖物質，實際上，細胞外被中的糖與質膜中的蛋白分子或脂類分子是共價結合的，形成糖蛋白和糖脂，所以，細胞外被應是細胞質膜的正常結構組分，它不僅對膜蛋白起保護作用，而且在細胞識別中起重要作用。
人體的內分泌腺有甲狀腺、腎上腺、垂體、胰島等。內分泌腺無排泄管，腺細胞排列缺乏極性，多聚集成團塊狀或索狀。內分泌腺分泌的分泌物稱激素。其分泌物直接進入細胞周圍的血管和淋巴，由血液和淋巴輸送到各組織或器官中。內分泌腺與內分泌組織共同組成內分泌系統，通過體液調節方式，對機體的各方面功能起著重要的調節作用。
外分泌腺有唾液腺、汗腺、皮脂腺、肝臟、胰腺等（胰腺分為內分泌部和外分泌部，胰的大部分屬於外分泌部，但是胰島屬於內分泌部）。外分泌腺有排泄管，稱腺導管，其分泌物通過腺導管輸送到相應的組織或器官發揮其調節作用（一般為排泄作用）.
E. 外泌體還可以這樣研究嗎
外泌體的提取主要包括以下幾種方式。
一是超速離心法，這是目前外泌體提取最常用的方法 。此種方法得到的外泌體量多，但是純度不足，電鏡鑒定時發現外泌體聚集成塊， 由於微泡和外泌體沒有非常統一的鑒定標准，也有一些研究認為此種 方法得到的是微泡不是外泌體 。
二是過濾離心， 這種操作簡單、省時，不影響外泌體的生物活性 ，但同樣存在純度不足的問題。
三是密度梯度離心法， 用此種方法分離到 的外泌體純度 高，但是前期准備工作繁雜，耗時，量少。
四是免疫磁珠法，這種方法可以保證外泌體形態 的完整，特異性高、操作簡單、不需要昂貴的儀器設備，但是非中性pH 和非 生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性， 不便進行下一步的實驗 。
五是PS親和法，該方法將PS（磷脂醯絲氨酸）與磁珠結合，利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似，獲得的外泌體形態完整，純度最高。由於不使用變性劑，不影響外泌體的生物活性，外泌體可用於細胞共培養和體內注射。2016.9 nature雜志發表了該方法最新數據，表明PS法可提取相當高純度的外泌體。
六是色譜法，這種方法分離到的外泌體在 電鏡下大小均 一， 但是需要特殊的設備 ， 應用不廣泛 。
F. 使用蔗糖密度梯度離心時，不同濃度的蔗糖為什麼會分層
如果把不同濃度的蔗糖靜置時加入，很顯然它們會混合在一起形成單一濃度。
然而，如果在離心的條件下加入，情況會有所不同。當離心力與蔗糖分子擴散力相平衡時，管中由液面至底部就會形成連續的密度梯度。
G. 細胞外泌體是什麼
外泌體是指包含了復雜 RNA 和蛋白質的小膜泡 (30-150nm)，現今，其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。1983年，外泌體首次於綿羊網織紅細胞中被發現，1987年Johnstone將其命名為「exosome」。多種細胞在正常及病理狀態下均可分泌外泌體。其主要來源於細胞內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體，經多囊泡體外膜與細胞膜融合後釋放到胞外基質中 。所有培養的細胞類型均可分泌外泌體，且外泌體天然存在於體液中，包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。 有關他們分泌和攝取及其組成、「運載物」和相應功能的精確分子機制剛剛開始研究。 外泌體被視為特異性分泌的膜泡，參與細胞間通訊，對外泌體的研究興趣日益增長，無論是研究其功能還是了解如何將其用於微創診斷的開發。當外泌體在1980年首次被發現後，其被認為是細胞排泄廢物的一種方式，如今隨著大量對其生物來源、其物質構成及運輸、細胞間信號的傳導以及在體液中的分布的研究發現外泌體具有多種多樣的功能。外泌體的功能取決於其所來源的細胞類型，其可參與到機體免疫應答、抗原提呈、細胞遷移、細胞分化、腫瘤侵襲等方方面面。有研究表明腫瘤來源的外泌體參與到腫瘤細胞與基底細胞的遺傳信息的交換，從而導致大量新生血管的生成，促進了腫瘤的生長與侵襲。