鑒別抗體的方法

A. 抗體特異性的鑒定

正確答案:B
解析：1
.診斷單克隆丙種球蛋白血症的常用方法為免疫固定電泳
。2
.抗體特異性鑒定通常採用雙向免疫擴散法，根據沉澱線的特點判斷抗體特異性
。3
.補體C3含量測定常用免疫比濁法，該法可自動化，結果准確迅速
。4
.免疫熒光法可對待測抗原(抗體)進行定性、定位檢測
。

B. 自身抗體的檢測方法有哪些

1、抗核抗體檢測

抗核抗體是一組將自身真核細胞的各種細胞核成分作為靶抗原的自身抗體的總稱，主要是IgG，其次是IgM和IgA，無器官和種屬特異性。ANA在大多數自身免疫性疾病中均可呈陽性，正常老年人也可有低滴度的ANA。ANA檢測在臨床自身免疫病診斷與鑒別診斷中是一個重要的篩查試驗。

2、類風濕因子

類風濕因子是變性lgG刺激機體產生的一種自身抗體，主要存在於類風濕關節炎患者的血清和關節液內。主要為lgM型，也有lgG、lgA、lgD和IgE型。

3、抗中性粒細胞胞漿抗體

抗中性粒細胞胞漿抗體是指與中性粒細胞及單核細胞胞漿成分發生反應的抗體。當中性粒細胞受抗原刺激後，胞漿中的α-顆粒釋放蛋白酶-3、髓過氧化物酶等物質，刺激機體而產生ANCA。

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自身抗體的產生原因：

人體的生長、發育和生存有完整的自身免疫耐受機制的維持，正常的免疫反應有保護性防禦作用，即對自身組織、成分不發生反應。—旦自身耐受的完整性遭到破壞，則機體視自身組織、成分為「異物」，而發生自身免疫反應，產生自身抗體。

正常人體血液中可以有低滴度的自身抗體，但不會發生疾病，但如果自身抗體的滴度超過某—水平，就可能對身體產生損傷，誘發疾病。自身免疫性疾病中有許多自身抗體，其中最重要的是抗核抗體。

C. 抗體與抗原如何區分

抗體:抗體是特異性免疫產生的.B淋巴細胞偵察到抗原時,就會產生具對抗性的抗體(和記憶細胞).值得注意的是,當把抗原消滅後,當抗原再次襲擊,抗體就會較快產生,這是記憶細胞的功勞.

抗原:進入人體後能與淋巴細胞產生免疫反應的任何體外物質.通常病原體進入人體後就是抗原,但對於某些人而言,喝牛奶會過敏,則牛奶就是抗原.說到底抗原會使人體排斥.

希望我的回答你能滿意，呵呵我覺得已經說的很通俗了，希望能幫助你

D. 抗體的熒光抗體鑒定

熒光抗體在使用前應加以鑒定。鑒定指醫學標記包括效價及熒光素與蛋白質的結合比率。抗體效價可以用瓊脂雙擴散法進行滴定，效價大於1:16者較為理想。熒光素與蛋白質結合比率(F/P)的測定和計算的基本方法是：將制備的熒光抗體稀釋至A2801≈1.0，分別測讀A280 (蛋白質特異吸收峰)和標記熒光素的特異吸收峰，按公式計算。
F/P值越高，說明抗體分子上結合的熒光素越多，反之則越少。一般用於固定標本的熒光抗體以F/P=1.5為宜，用於活細胞染色的以F/P=2.4為宜。
抗體工作濃度的確定方法類似ELISA間接法中酶標抗體的滴定。將熒光抗體自1：4～1:256倍比稀釋，對切片標本作熒光抗體染色。以能清晰顯示特異熒光、且非特異染色弱的最高稀釋度為熒光抗體工作濃度。
熒光抗體的保存應注意防止抗體失活和防止熒光猝滅。最好小量分裝，-20℃凍存，這樣就可放置3～4年。在4℃中一般也可存放1～2年。

E. 如何辨別抗原和抗體

F. 實驗室中抗血清制備後，抗體特異性鑒定最常採用的方法是

正確答案:B
解析：單向免疫擴散常用於待測抗原的定量測定；親和層析和免疫吸附是分離純化的方法；可以用特異性抗原與制備的抗血清進行雙向免疫擴散試驗來鑒定抗血清的特異性
。

G. HIV-抗體檢測方法的確認實驗

免疫印跡試驗（WB）、條帶免疫試驗（LIATEK HIVⅢ）、放射免疫沉澱試驗（RIPA）及免疫熒光試驗（IFA）。國內常用的確認試驗方法是WB。
(一_免疫印跡實驗(westernblot，WB)是廣泛用於許多傳染病診斷的實驗方法，就HIV的病原學診斷而言，它是首選的用以確認HIV抗體的確認實驗方法，WB的檢測結果常常被作為鑒別其他檢驗方法優劣的「金標准」。
確認試驗流程:
有HIV-1/2混合型和單一的HIV-1或HIV-2型。先用HIV-1/2混合型試劑進行檢測，如果呈陰性反應，則報告HIV抗體陰性；如果呈陽性反應，則報告HIV-1抗體陽性；如果不滿足陽性標准，則判為HIV抗體檢測結果不確定。如果出現HIV-2型的特異性指示條帶，需用HIV-2型免疫印跡試劑再做HIV-2的抗體確認試驗，呈陰性反應，報告HIV-2抗體陰性；呈陽性反應則報告HIV-2抗體血清學陽性,並將樣品送國家參比實驗室進行核酸序列分析，
WB的敏感性一般不低於初篩實驗，但它的特異性很高，這主要是基於HIV不同抗原組分的分離以及濃縮和純化，能夠檢測針對不同抗原成分的抗體，因而能夠用WB方法鑒別初篩實驗的准確性。從WB確認試驗結果看出，初篩試驗盡管選擇質量較好的試劑，如第三代ELISA，仍會有假陽性出現，必須通過確認試驗才能得出准確結果。
(二)免疫熒光實驗(IFA)
IFA法經濟、簡便、快速，曾被FDA推薦用於WB不確定樣品的診斷。但需要昂貴的熒光顯微鏡，需要受過良好訓練的技術人員、觀察和解釋結果易受主觀因素的影響，結果不宜長期保存，IFA不宜在一般的實驗室開展和應用。
HIV抗體確證試驗結果報告
HIV抗體確證試驗結果用附表3報告。
（1）符合HIV-1抗體陽性判斷標准，報告「HIV-1抗體陽性（+）」，並按規定做好檢測後咨詢、保密和疫情報告工作。符合HIV-2抗體陽性判斷標准，報告「HIV-2抗體陽性（+）」，並按規定做好檢測後咨詢、保密和疫情報告工作。
（2）符合HIV抗體陰性判斷標准，報告「HIV抗體陰性（－）」。如疑似「窗口期」感染，建議進一步做HIV核酸檢測，盡早明確診斷。
（3）符合HIV抗體不確定判斷標准，報告「HIV抗體不確定（±）」，在備注中應註明等待「4周後復檢」。

H. 如何測定抗體

在《抗體工程》上有親和力常數的測定方法，如平衡透析、競爭結合、熒光增強法、硫氰酸鹽洗脫法、ELISA和固相放射免疫測定法（SPRIA）等。其中ELISA和SPRIA是最敏感的檢測方法。通常採用競爭結合以及Scatchard作圖法。如果有條件用SPR方法，這是目前國際上流行的方法，該方法靈敏，客觀。

另外測親和力之前最好先測定抗體的有效濃度，方法是夾心法，用標准免疫球蛋白做標准品。因為在作OD-抗體濃度曲線時如果抗體濃度不夠，做不出來好的S形曲線，達不到最高值。所以建議你先測定抗體的濃度。如果濃度較低的話，你可以濃縮一下，方法很多，如PEG法，真空冷凍乾燥，超速離心等等。

I. 單克隆抗體的鑒定實驗

1．雜交瘤細胞染色體的檢查採用秋水仙素裂解法進行。2．單克隆抗體的類型、亞型的測定：購買兔抗小鼠Ig類型和亞型的標准抗血清，採用瓊脂擴散法或ELISA夾心法測定單抗的Ig類型和亞型。
ELISA夾心法測定單抗的Ig類型和亞型的試劑盒說明書 1、首先將試劑盒恢復室溫（大約30分），然後用純水把清洗液配成工作濃度（一份濃縮清洗液加19份純水）。
2、取出酶標板。每個標本需要6孔，陽性對照6孔。多餘的用自封袋保存，記得放入乾燥劑。
3、將細胞培養上清（或特異親和純化的抗體）50μl加入酶標微孔板，每個標本加6孔，陽性對照也是加6孔每孔50μl。然後每孔再加入50μl標本稀釋液。貼上封板膜37℃溫育30分鍾。
4、棄去板內液體，洗板5遍後在不掉纖維的吸水材料上拍干或機洗5遍。再在每個標本的6孔中分別加入6種酶標二抗各100μl，通用陽性對照的6孔也一樣。在加樣圖上或酶標板上做好標記。貼上封板膜37℃溫育30分鍾。
5、吸棄板內液體，洗板5遍後在不掉纖維的吸水材料上拍干或機洗5遍。每孔分別加入顯色劑A和顯色劑B各50μl，換一張新的封板膜貼板避光37℃顯色20分鍾。
6、本試劑盒特異性好一般肉眼即可觀察出結果，看顯色藍的那個孔所對應的酶標二抗就知道此標本的Ig類或亞類。更可將反應終止液（每孔50μl）終止反應後用酶標儀450nm測定波長，630nm參考波長雙波長測定結果，參看高值孔所對應的酶標二抗就知道此標本的Ig類或亞類。陽性對照0D小於0.5實驗無效，需要重做。 1、雖然本試劑盒過期後很久還有使用價值但還是請您在有效期內使用。
2、在檢測腹水類單抗時要稀釋到1/5萬，雖然可以分辨但並不建議您這樣做。此類樣品成分十分復雜，有干擾結果的可能。在此種情況下您可以選擇本公司的C030215抗體鑒定試劑。它會給您帶來滿意的結果。
3、手洗板子時一定要把孔加滿，停留10秒然後棄盡，最後要拍干凈。特別是在酶標二抗溫育後洗板時一定要把酶吸出而不是甩出，要吸凈。這個在手工洗板時對結果很重要。
4、一次沒用完的板子要帶乾燥劑放自封袋封好，隨盒存放。
5、拿放板子時不要劇烈抖動，以免孔間交叉污染出現錯誤結果。
6、出現異常結果請隨時咨詢我們。
3．單抗的特異性鑒定可以採用各種方法，如免疫熒光法、ELISA法、間接血凝和免疫印跡技術等，同時還需做免疫阻斷試驗等。
4．單抗的效價測定可採用凝集反應、ELISA或放射免疫測定。不同的測定方法效價不同。培養上清液的效價遠不如腹水的效價。採用凝集反應，腹水效價可達5×104。而採用ELISA檢查，腹水效價可達1.0×106。單抗的效價以培養上清和腹水的稀釋度表示。
5．必要時還可以測定單抗的親和力和識別抗原表位的能力測定。