酵母污染檢測方法

Ⅰ 黴菌和酵母菌的測定還有什麼方法

黴菌和酵母菌介紹及檢測方法
一、黴菌和酵母菌介紹：
黴菌和酵母菌及其檢驗酵母菌是真菌中的一大類，通常是單細胞，呈圓形,卵圓形、臘腸形或桿狀。黴菌也是真菌，能夠形成疏鬆的絨毛狀的菌絲體的真菌稱為黴菌。
黴菌和酵母廣泛分布於自然界並可作為食品中正常菌相的一部分。長期以來，人們利用某些黴菌和酵母加工一些食品，如用黴菌加工乾酪和肉，使其味道鮮美；還可利用黴菌和酵母釀酒、制醬；食品、化學、醫葯等工業都少不了黴菌和酵母。但在某些情況下，黴菌和酵母也可造成中腐敗變質。由於它們生長緩慢和競爭能力不強，故常常在不適於細菌生長的食品中出現，這些食品是pH低、濕度低、含鹽和含糖高的食品、低溫貯藏的食品，含有抗菌素的食品等。由於黴菌和酵母能抵抗熱、冷凍，以及抗菌素和輻照等貯藏及保藏技術，它們能轉換某些不利於細菌的物質，而促進致病細菌的生長；有些黴菌能夠合成有毒代謝產物－黴菌毒素。黴菌和酵母往往使食品表面失去色、香、味。例如，酵母在新鮮的和加工的食品中繁殖，可使食品發生難聞的異味，它還可以使液體發生混濁，產生氣泡，形成薄膜，改變顏色及散發不正常的氣味等。因此黴菌和酵母也作為評價食品衛生質量的指示菌，並以黴菌和酵母計數來制定食品被污染的程度。目前已有若干個國家制訂了某些食品的黴菌和酵母限量標准。我國已制訂了一些食品中黴菌和酵母的限量標准。
二、檢驗方法：
黴菌和酵母的計數方法，與菌落總數的測定方法基本相似。主要步驟為：將樣品製作成10倍梯度的稀釋液，選擇3個合適的稀釋度，吸取1mL於平皿，傾注培養基後，培養觀察，計數。對黴菌的計數，還可以採用顯微鏡直接鏡檢計數的方法。
具體檢測標准參見：
GB4789.15-94，《中華人民共和國國家標准食品衛生微生物檢驗黴菌和酵母計數》
三、說明：
1．樣品的處理。為了准確測定黴菌和酵母數，真實反映被檢食品的衛生質量，首先應注意樣品的代表性。對大的固體食品樣品，要用滅菌刀或鑷子從不同部位採取試驗材料，再混合磨碎。如樣品不太大，最好把全部樣品放到滅菌均質器杯內攪拌2min。液體或半固體樣品可用迅速顛倒容器25次來混勻。
2．樣品的稀釋：為了減少櫚稀釋倍數的誤差，在連續遞增稀釋時，每一稀釋度應更換一根吸管。在稀釋過程中，為了使黴菌的孢子充分散開，需用滅菌吸管反復吹吸50次。
3．培養基的選擇：在黴菌和酵母計數中，主要使用以下幾種選擇性培養基。
馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂培養基（PDA）：黴菌和酵母在PDA培養基上生長良好。用PDA作平板計數時，必項加入抗菌素以抑制細菌。
孟加拉紅（虎紅）培養基：該培養基中的孟加拉紅和抗菌素具有抑制細菌的作用。孟加拉紅還可抑制黴菌菌落的蔓延生長。在菌落背面由孟加拉紅產生的紅色有助於黴菌和酵母菌落的計數。
高鹽察氏培養基：糧食和食品中常見的麴黴和青黴在該培養基上分離效果良好，它具有抑制細菌和減緩生長速度快的毛霉科菌種的作用。
4．傾注培養。每個樣品應選擇3個適宜的稀釋度，每個稀釋度傾注2個平皿。培養基熔化後冷卻至45℃，立即傾注並旋轉混勻，先向一個方向旋轉，再轉向相反方向，充分混合均勻。培養基凝固後，把平皿翻過來放溫箱培養。大多數黴菌和酵母在25－30℃的情況下生長良好，因此培養溫度25~28℃。培養3d後開始觀察菌落生長情況，共培養5d觀察記錄結果。
5．菌落計數及報告：選取菌落數10~150之間的平板進行計數。一個稀釋度使用兩個平板，取兩個平板菌落數的平均值，乘以稀釋倍數報告。固體檢樣以g為單位報告，液體檢樣以mL 單位報告。關於稀釋倍數的選擇可參考細菌菌落總數測定。
6．黴菌直接鏡檢計數法：對黴菌計數，可以採用直接鏡檢的方法進行計數。
在顯微鏡下，黴菌菌絲具有如下特徵：
平行壁：黴菌菌絲呈管狀，多數情況下，整個菌絲的直徑是一致的。因此在顯微鏡下菌絲壁看起來象兩條平行的線。這是區別黴菌菌絲和其他纖維時最有用的特徵之一。
橫隔：許多黴菌的菌絲具有橫隔，毛霉、根霉等少數黴菌的菌絲沒有橫隔。
菌絲內呈粒狀：薄壁、呈管狀的菌絲含有原生質，在高倍顯微鏡下透過細胞壁可見其呈粒狀或點狀。
分枝：如菌絲不太短，則多數呈分枝狀，分枝與主幹的直徑幾乎相同，有分枝是鑒定霉功得出可靠的特徵之一。
菌絲的頂端：常呈鈍圓形。無折射現象。
凡有以上特徵之一的絲狀均可判定為黴菌菌絲。
觀察視野中有無菌絲，凡符合下列情況之一者為陽性視野。
一根菌絲長度超過視野直徑1/6；
一根菌絲長度加上分枝的長度超過視野直徑1/6；
兩根菌絲總長度超過視野直徑1/6；
三根菌絲總長度超過視野直徑1/6；
一叢菌絲可視為一個菌絲，所有菌絲（包括分枝）總長度超過視野直徑1/6。
根據對所有視野的觀察結果，計算陽性視野所佔比例，並以陽性視野百分數（%）報告結果。計算公式：
每件樣品陽性視野（%）=（陽性視野數 / 觀察視野數）×100

Ⅱ 如何檢測酵母菌菌量

將原溶液稀釋一定倍數後，倒入雪球計數板內，用蓋玻片蓋好搖勻，最後在顯微鏡下計數

Ⅲ 進行菌種質量檢測的常用方法有哪些

1、直接觀察。對引進菌種觀察包裝是否合乎要求，棉塞有無松動，試管、玻璃瓶和塑料袋有無破損，棉塞和管、瓶或袋中有無病蟲侵染，菌絲色澤是否正常，有無發生變化。然後在瓶塞邊作深吸氣，聞其是否具備特有的香味。原種和栽培種可取出小塊菌絲體觀察其顏色和均勻度，並用手指捏料塊檢驗含水量是否符合標准。

2、顯微鏡檢驗。若菌絲透明，呈分枝狀、有橫隔、鎖狀聯合明顯，再加上具有不同品種固有的特徵，則可認為是合格菌種。

3、觀察菌絲長速。將供測的菌種接入新配製的試管斜面培養基上，置於最適宜的溫、濕度條件下進行培養，如果菌絲生長迅速、整齊濃密、健壯有力，則表明是優良菌種，否則即是劣質菌種。

優質菌種的標准

食用菌的種類雖然繁多，但從總體上看，每一個優良菌種均有＂純、正、壯、潤、香＂的共性。其標準是：

1、菌種的純度要高，不能有雜菌感染，也不能有其他類似的菌種。

2、菌絲色澤要純正，多數種類的菌絲應純白、有光澤，原種、栽培種菌絲應連結成塊，無老化變色現象。

3、菌絲要粗壯，分枝多而密，接種到培養基吃料塊，生長旺盛。

4、培養體要濕潤，與試管（瓶）壁緊貼而不幹縮，含水適宜。

5、具有每品種特有的清香味，不可有霉、腐氣味。

Ⅳ 檢測酵母菌呼吸時產生了酒精的方法

用酸性重鉻酸鉀溶液檢驗，因為酒精能使橙色的酸性重鉻酸鉀溶液變成灰綠色。

Ⅳ 酵母菌的液體培養中懷疑有細菌污染，設計實驗證明

區分兩者的方法很多,最直觀的就是顯微鏡鏡檢!酵母細胞較細菌大,而且細菌需要染色.
細菌生長環境為弱鹼性，測定溶液PH也可以推測是否染菌，
可以採用平板檢測，即在鹼性環境下培養24H，觀察是否有小而光澤的菌落產生.既可判定!
另外要檢測具體的雜菌類型有澱粉水解實驗,V-P實驗,吲哚實驗,過氧化氫酶的產生試驗等進行檢測.

Ⅵ 純化水中的酵母菌怎麼檢

有很多種方法：
1.塗平板檢測，使用合適的培養基，將待測水塗在平板上進行恆溫培養，看有沒有菌落形成。
2.鏡檢檢測，使用懸滴法或塗片法在顯微鏡下觀測有無細菌存在。
如果檢出細菌，根據形態學以及
酵母菌
的特點，進一步鑒定是不是酵母菌。

Ⅶ 某單位要求知道一種乾酵母粉中的活菌存活率,請設計1到2種的可行的檢測方法

用待測樣品與標准樣品進行對比發酵試驗。可以根據發酵成熟時間或者發酵產物的生成量，或者產物生成速度對比，來求得樣品中的活菌的成活率。

檢測方法有：

1、發酵成熟時檢測並計算活菌存活率。

2、比校發酵產物的生成量計算活菌存活率。

3、計算生成物的生成速度對比，計算活菌的成活率。

(7)酵母污染檢測方法擴展閱讀：

培養將所試菌肉湯培養物劃線接種營養瓊脂,36 °C培養24~ 48h，自同一單個菌落取菌,分別接種單雙管法 O / F 試驗培養基,其中單管法用接種針穿刺接種至管底。同時設不加葡萄糖接種發酵型細菌和加有葡萄糖不種菌的空白對照。36°C培養24h，開始觀察結果,每24h記錄一次,共觀察4d。