大豆蛋白快速沉澱方法

㈠ 如何提取大豆中的蛋白質（至少兩種方法）、a、b兩種大豆蛋白如何區別其純度高低

可以用等電點法、鹽析法、有機溶劑的分級沉澱法來提取

用考馬斯亮藍結合法測定它們的純度高低

㈡ 蛋白質沉澱的方法有那些，各有什麼特點

沉澱蛋白質的方法主要有：鹽析、有機溶劑、生物鹼試劑、重金屬鹽、加熱凝固。
分析如下：
（1）鹽析破壞蛋白質的水化膜和電荷，採用不同濃度鹽可將不同的蛋白質分段析出，鹽析的蛋白質不變性，鹽析作用是可逆的。（2）有機溶劑可破壞蛋白質的水化膜，若調節pH=pI，則更易沉澱。低溫操作，快速分離溶劑不會使蛋白質變性，而常溫操作，蛋白質易變性。（3）沉澱生物鹼試劑：鎢酸、三氯乙酸等的酸根與帶正電荷的蛋白質結合沉澱，會使蛋白質變性。（4）重金屬離子可與帶負電荷的蛋白質結合沉澱，會使蛋白質變性。（5）在等電點加熱蛋白質可形成凝塊沉澱，會使蛋白質變性。

㈢ 大豆蛋白有幾種提取方法

大豆分離蛋白的提取方法有鹼溶酸沉法、膜分離法、吸附法和醇溶法；大豆濃縮蛋白的提取方法有稀酸沉澱法和醇洗法；大豆組織蛋白的提取方法有擠壓膨化法、紡絲法。

㈣ 蛋白質分離提純方法

1、鹽析法：

鹽析法的根據是蛋白質在稀鹽溶液中，溶解度會隨鹽濃度的增高而上升，但當鹽濃度增高到一定數值時，使水活度降低，進而導致蛋白質分子表面電荷逐漸被中和，水化膜逐漸被破壞，最終引起蛋白質分子間互相凝聚並從溶液中析出。

2、有機溶劑沉澱法：

有機溶劑能降低蛋白質溶解度的原因有二：其一、與鹽溶液一樣具有脫水作用；其二、有機溶劑的介電常數比水小，導致溶劑的極性減小。

3、蛋白質沉澱劑：

蛋白質沉澱劑僅對一類或一種蛋白質沉澱起作用，常見的有鹼性蛋白質、凝集素和重金屬等。

4、聚乙二醇沉澱作用：

聚乙二醇和右旋糖酐硫酸鈉等水溶性非離子型聚合物可使蛋白質發生沉澱作用。

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吸附層析

1、吸附柱層析

吸附柱層析是以固體吸附劑為固定相，以有機溶劑或緩沖液為流動相構成柱的一種層析方法。

2、薄層層析

薄層層析是以塗布於玻板或滌綸片等載體上的基質為固定相，以液體為流動相的一種層析方法。這種層析方法是把吸附劑等物質塗布於載體上形成薄層，然後按紙層析操作進行展層。

3、聚醯胺薄膜層析

聚醯胺對極性物質的吸附作用是由於它能和被分離物之間形成氫鍵。這種氫鍵的強弱就決定了被分離物與聚醯胺薄膜之間吸附能力的大小。

層析時，展層劑與被分離物在聚醯胺膜表面競爭形成氫鍵。因此選擇適當的展層劑使分離在聚醯胺膜表面發生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的連續過程，就能導致分離物質達到分離目的。