❶ 定量检测单个细胞中某种蛋白质的表达量可以有哪些方法
在生物学研究领域，定量检测单个细胞中某种蛋白质的表达量是一个关键问题。CITE-seq（Cellular Identity Tagging by Sequencing）技术为解决这一问题提供了一种有效途径，结合了scRNA-seq（单细胞转录组测序）和ADT（antibody-derived tags，抗体衍生标记）技术，实现了单个细胞中mRNA和蛋白质表达量的同时检测。这一技术的理论基础是，蛋白质作为生物体功能的执行者，其表达量直接影响着细胞的功能和活性。CITE-seq技术通过检测蛋白质标记（ADT），可以更准确地对细胞进行分类，弥补了单纯基于mRNA表达量分析的局限性。
CITE-seq技术的优势在于，它能够一次性获得单个细胞的mRNA和蛋白质表达量信息，这对于理解细胞功能和细胞间的相互作用至关重要。通过对比CITE-seq与仅基于scRNA-seq的数据集，可以发现它们在细胞亚群分类上的精度相当。这意味着，通过整合蛋白质表达信息，CITE-seq技术能够提高细胞分类的准确性，尤其对于罕见细胞亚群的识别。
在实际应用中，CITE-seq技术可以应用于各种研究领域，如神经科学、免疫学、肿瘤学等。例如，在癫痫疾病的研究中，CITE-seq技术揭示了癫痫的免疫特征，表明神经炎症和促炎微环境在疾病发展中扮演了重要角色。通过CITE-seq技术，研究人员能够获得单细胞的mRNA和蛋白质表达数据，从而更准确地分析和理解细胞功能。
为了深入了解CITE-seq技术，可以从理论基础、数据来源、数据读取、scRNA-seq数据处理、ADT数据处理、数据整合等几个方面进行学习。这一技术不仅在理论层面提供了细胞功能分析的新工具，而且在实际应用中展现出显着优势。学习CITE-seq技术，能够帮助研究者在单细胞水平上深入探究生物学问题，推动科学研究的进展。
❷ 蛋白表达原理和检测方法“官方揭秘”
蛋白表达，一种分子生物学技术，通过原核或真核表达系统实现外源基因蛋白在模式生物（如细菌、酵母、动物或植物细胞）中的合成。其核心原理涉及基因转录和翻译，生成并存于细胞内的蛋白质。为了验证这一过程，我们有多种检测手段：
首先，免疫印迹法凭借其高灵敏度和特异性，是常用的检测方法。它通过电泳或蛋白质间的相互作用，将目标蛋白分离到凝胶上，利用抗体标记并检测，适用于临床检测。
其次，蛋白质芯片技术作为高通量技术，能够同时测定大量蛋白表达水平。原理是将目标蛋白吸附在芯片上，通过不同抗体检测，提供高效、准确和可重复的结果。
最后，质谱分析则通过测定蛋白质的质量、序列等信息，细致地揭示其分子特性。通过加速并分析蛋白质分子，获取质谱图谱，从而确定其分子量和功能特性。
以上是蛋白表达原理和检测方法的简要介绍，强耀生物专注于多肽合成、蛋白表达和抗体制备等领域，以高品质服务行业多年，期待您的咨询和合作。