⑴ 病毒感染的血清学诊断方法
常用的血清学方法有中和试验、补体结合试验、血凝抑制试验等传统的方法,以及应用免疫学标记技术发展的酶联免疫吸附试验(ELISA)、放射免疫试验(RIA)及免疫荧光试验(IF)等特异、灵敏的微量血清学方法。
1.中和试验(NT)是指病毒在活体内或细胞培养中,被特异性抗体中和而失去感染性的一种试验。它既可用来检查患病后或人工免疫后机体血清中抗体的增长情况,也可用来鉴定病毒或研究其抗原结构。中和抗体特异性高、持续时间较长,因此流行病学调查也常用此指征。
2.血凝抑制试验许多病毒能凝集鸡、豚鼠、人等的红细胞,称为血凝现象。这种现象能被相应抗体所抑制,称血凝抑制试验。其原理是相应抗体与病毒结合后,阻抑了病毒表面的血凝素与红细胞的结合。
3.酶联免疫吸附试验(ELISA)、放射免疫试验(RIA)及免疫荧光试验(IF)参见第八节细菌感染的血清学诊断方法的介绍。
4.蛋白印迹试验(Westernblot,WB)用于检测HIV抗体,是HIV感染的确认试验。应用WB也可检测病毒抗原,但一般不常用。
5.检测病毒核酸的分子生物学试验检测患者血清等标本或病毒培养物中病毒基因或核酸片段的技术有多种:①病毒核酸扩增试验即聚合酶链反应(PCR);②核酸杂交技术,包括点杂交、原位杂交、DNA-DNA印迹杂交(Southernblot)及RNA-DNA印迹杂交(Northernblot)等;③基因芯片技术(genechip);④病毒基因测序等。目前,分子生物学技术日益广泛地应用于对病毒及其感染的检测和研究中。
幽门螺旋杆菌(Hp)感染的检查方法很多,主要包括细菌的直接检查、尿毒酶活性测定、免疫学检测及聚合酶链反应等方法。
(1)细菌的直接检查。指通过胃镜检查钳取胃黏膜(多为胃窦黏膜)做直接涂片、染色及细菌培养来检测Hp。其中胃黏膜细菌培养是诊断Hp 最可靠的方法,可作为验证其他诊断性试验的“金标准”,同时又能进行药敏试验,指导临床选用药物。
(2)尿毒酶检查。因为Hp 是人胃内唯一能够产生大量尿毒酶的细菌,故可通过检测尿毒酶来诊断Hp 感染。尿毒酶分解胃内尿毒生成氨和二氧化碳,使尿素浓度降低、氨浓度升高。基于此原理已发展了多种检测方法:胃活检组织尿毒酶试验;呼吸试验;胃液尿素或尿素氮测定;15N- 尿素试验。
(3)免疫学检测。目前已有多种免疫学检测方法,通过测定血清中的Hp 抗体来检测Hp 感染,包括补体结合试验、凝集试验、被动血凝测定、免疫印迹技术和酶联合吸附测定(ELISA)等。
(4)聚合酶链反应技术。正常胃黏膜很少检出Hp(0 ~ 6%),慢性胃炎患者Hp 的检出率很高,约50% ~ 80%,慢性活动性胃炎患者Hp 检出率则更高,达90% 以上。
⑶ 核酸采样pcr是什么意思
核酸采样PCR是一种基于多聚酶链反应技术的病毒检测方法,主要用于检测新型冠状病毒等病毒的感染情况。以下是关于核酸采样PCR的详细解释:
采样方式:
检测原理:
检测步骤:
应用价值: