检测方法说明书

1. 请问河豚鱼毒素(TTX)的检测方法是什么有国标吗有没有快速检测方法及其相关资料呀

河豚毒素（TTX）定量酶联免疫检测试剂盒说明书
ELISA-kit for TTX

本测试盒用间接竞争免疫分析法定量测定河豚鱼中的河豚毒素（TTX）。该测试盒反应孔可拆卸，可测单份样品，也可测多份样品。定量分析时需有含450nm波长的微孔板酶标仪。

1 概要
河豚毒素（TTX）是一种强神经毒素，其性质稳定，加热、盐腌及高温烹煮均不易使其被破坏。河豚鱼中常含有河豚毒素。我国沿海居民素有食用河豚鱼的习惯。因误食或食用加工不当的河豚鱼而发生人畜中毒的事件每年都有发生。故准确检测河豚鱼中的河豚毒素对预防和控制河豚毒素中毒，具有重要意义。本检测方法具有灵敏、快速、简便、特异性好、取样量小并可同时检测大量样品等优点。

2 测定原理
本试剂盒采用固相酶联免疫吸附原理，利用间接竞争ELISA法进行测定。用抗原包被微孔板，加入河豚毒素标准品或样品、抗河豚毒素单克隆抗体进行孵育后，将未与包被抗原结合的抗体洗去；再加入酶标记的抗鼠IgG抗体孵育，加入显色液，经过终止液终止后，用酶标仪在450nm处测定OD值。

3 提供的物品
微孔板
5个浓度的TTX标准溶液（各0.5mL）
标准1：0ng/mL ……………………………………………………………直接使用
标准2：10.0ng/mL ………………………………………………………直接使用
标准3：20.0ng/mL ………………………………………………………直接使用
标准4：50.0ng/mL ………………………………………………………直接使用
标准5：200.0ng/mL ………………………………………………………直接使用
抗体溶液(6mL) …………………………………………………………………直接使用
酶标物(12mL) …………………………………………………………………直接使用
显色液(12mL) …………………………………………………………………直接使用
终止液(6mL) ………………………………………………………………………直接使用
浓缩洗液(30mL) …………………………………………………………………稀释使用

4 盒中未提供，需自备物品
微孔板酶标仪（含450nm）、离心机、电炉、微量移液器、磁力搅拌器
量筒、漏斗、容量瓶、快速定性滤纸、分液漏斗
乙酸、氢氧化钠、去离子水或蒸馏水、PBS缓冲液

5 操作者注意事项
标准溶液中含有TTX毒素，应特别小心。
终止液为0.5M硫酸，避免接触皮肤。
每次加样后立即将所有试剂放回2~8 ℃。
每步加样时间应控制在5min内。
孵育过程中应避光。
不要使用过期试剂盒。
不要交叉使用不同批号试剂盒中的试剂。

6 储存条件
保存试剂盒于2~8℃。不要冷冻
显色液对光敏感，因此要避免直接暴露在光线下。
将不用的微孔板放进原铝箔袋中，置2~8℃保存。

7 试剂变质的标志
标准1的吸光度值小于0.5个单位（A450nm<0.5）时，表示试剂可能变质。

8 样品处理
8.1 鲜河豚鱼中河豚毒素的检测
----称取5g河豚鱼样品(肌肉、皮或内脏)，剪碎，加入25mL 0.1%的乙酸，用烧杯在电炉上煮沸搅拌10min。此步骤应注意不要让液体沸出容器，应控制加热温度，并不断搅拌。
----待冷却至室温后，上清用快速定性滤纸过滤于50mL离心管中
----沉淀用20mL0.1% 乙酸洗到烧杯中，再煮沸3min
----冷却至室温后，所有的液体及煮沸的样品都加到离心管中，3000rpm离心10min。
----取上清，量体积，置分液漏斗中
----加入等体积乙醚，振摇1分钟，静置分层。放出水层，量体积后至另一分液漏斗中，再加入等体积的乙醚，振摇1分钟，静止分层。
----将水层放入50mL容量瓶中，用1M氢氧化钠调节提取液中的pH值至6.5~7.4，然后加入PBS至50mL，提取液4℃保存备用。
8.2 鱼片、鱼干制品中河豚毒素的检测
-----样品中的TTX用0.1%乙酸在水浴中超声提取，提取液中的TTX用ELISA方法进行检测，若样品中TTX含量低于检出限则报告为<100mg/kg；样品中TTX含量在100~3000mg/kg之间，直接按ELISA实验结果报告；如果样品中TTX含量达到3000mg/kg，则需采用小鼠生物测定法进行验证，确认毒性反应后再按照ELISA实验结果报告。

9 酶免疫分析程序
----浓缩洗液为10倍浓缩液，使用时与去离子水或蒸馏水按体积比1:9稀释后使用。
----取所需数量的板条插入微孔架，用洗液洗涤微孔板3min×2次，记录样品及标准的位置。
----加入50mL标准品或处理好的样品到微孔，每个标准和样品必须使用新的吸头。
----加入50mL抗河豚毒素单克隆抗体溶液到每个微孔（注意移液器管尖不要接触到孔中的液体，避免交叉污染）中，37℃孵育90min。
----甩掉孔中液体，用洗液洗涤微孔板3min×3次，最后一次应在吸水纸上拍打以完全除去孔中液体。
----每孔加入酶标物100mL，37℃孵育60min。
----用洗液洗涤微孔板3min×5次，最后一次应在吸水纸上拍打以完全除去孔中液体。
----每孔加入显色液100mL（2滴），37℃孵育12min。
----每孔加入终止液50mL（1滴），立即用酶标仪在波长450nm处测定吸光度值（OD值）。
注：在定量分析中，显色液和终止液需要用移液器准确量取。

10 样品浓度计算
以标准溶液OD值与标准1的OD值的比值为纵坐标（即标准品OD比），所对应标准溶液浓度（ng/mL）的对数值为横坐标，制作标准曲线。根据样品OD值与标准1的OD的比值（即样品OD比），可从曲线上得到对应点的横坐标，即为TTX浓度的对数值，求得反对数即为测定液中TTX浓度C（ng/mL），按下列公式计算出样品中TTX含量：
TTX含量（mg/kg）= 10×C×K
式中：C：测定液中TTX浓度（ng/mL）
K：提取液的稀释倍数
11 主要技术指标及参数
11.1 最低检出浓度10.0 ng/mL。
11.2 加标回收率在70~120%，条内变异系数＜10%，条件变异系数＜15%。

2. 土壤检测方法

一、看土壤的颜色

土壤的颜色是反映土壤在肥力上的一个明显指标，也是一个最容易掌握的方法。一般土壤颜色比较深的都是肥土，颜色较浅的则为瘦土。

二、看土层深浅（耕作层）

土壤肥沃的田块土层都比较深，深度通常都大于60公分（水田除外），而贫瘠瘦土则非常浅，严重地区甚至低于20公分，只是表层有一层土而已。

三、看土壤适耕性

一般土壤肥沃的田块，土层疏松，易于耕作，“干耕像香灰，湿耕如糖化”；而土壤贫瘠的田块，土层黏犁，耕作费力，“敲敲一个洞，锄锄一条缝”。

四、看淀浆及裂纹

肥土不易淀浆，土壤裂纹多而小；瘦土极易淀浆，易板结，土壤裂纹少而大。

五、看水质

水滑腻、黏脚，日照或脚踩时冒大泡的为肥土；水质清淡无色，水田不起泡，或气泡小而易散的为瘦土。

六、看保水性

水分有下渗，但速度平缓，灌水一次可保持1周左右的为肥土地；灌水后水层不下渗或沿裂纹快速下渗的均为瘦土。

七、看是否夜潮

夜潮是指夜间表土温度降低，深层土壤中的温暖水汽上行，遇到低温表土后凝结成水而湿润表土的现象。夜潮现象能说明土壤的两个优点：第一，透气性强，温暖水汽可以上行。第二，土层较深，能够形成温差。所以，有夜潮现象的土壤基本上都是肥土；无夜潮现象，说明土质板结硬化，均为瘦土。

八、看保肥性

土壤是一种带负电的胶体，可以交换吸附一些阳离子（就是养分），而达到保肥的作用，这些被吸附的养分在作物生长过程中会逐渐从土壤中释放出来以供作物吸收利用。肥沃的土壤通常能够吸附的阳离子较多，肥效持久。而贫瘠的土壤通常阳离子吸附量较少，大部分养分随水流失，肥效来得快去的快。

3. HIV核酸检测的HIV核酸检测方法及程序

1.1 方法和试剂
1.1.1 方法
（1）检测方法为商品化试剂盒和实验室自建方法，商品化试剂应严格按说明书操作。下面介绍的方法是实验室自建方法，供参考。
（2）检测血浆或血清样品使用逆转录PCR（RT-PCR）方法，建议第一轮PCR扩增使用RT-PCR一步法；检测血细胞或组织样品使用PCR方法。一般使用扩增两轮的套式PCR方法。
（3）设立阳性、阴性及空白对照。阳性对照为与待测样品同质、含有目的基因的样品；阴性对照为与待测样品同质、不含有目的基因的样品。阳性和阴性对照样品应与待检样品处理程序一致。阴性对照的设置数量应根据实验样品的数量设置在不同的位置。
1.1.2 试剂
（1）PCR引物：一般使用扩增HIVgag和/或pol和/或env和/或LTR等引物。进行RNA逆转录时可使用下游特异性引物或随机引物。引物设计可参考文献或自行设计，应尽量涵盖常见的HIV流行毒株，也可使用兼并性引物。
（2）主要试剂：包括核酸提取纯化、逆转录、PCR所需的试剂。使用商品化核酸提取纯化试剂、逆转录酶反应试剂和PCR扩增试剂。
（3）抗污染试剂：实验室自建检测方法可使用抗污染试剂，参考尿嘧啶DNA糖基化酶抗污染方法。
1.2 扩增目的基因片段
1.2.1 样品的采集和处理
1.2.2 核酸提取
可使用硅胶柱离心、磁性硅胶颗粒分离方法以及自动化仪器等商品化试剂或设备并按说明书操作。提取RNA时应注意防止RNA降解。DNA应置于-20℃保存，RNA和需长期保存的DNA应置于-80℃保存。
1.2.3 逆转录合成cDNA
使用商品化试剂并按说明书操作。逆转录cDNA合成反应需使用逆转录引物、dNTPs、逆转录酶、RNA酶抑制剂、DTT、缓冲液和适量无RNA/DNA酶的超纯水以及RNA模板。在扩增仪或水浴箱中，在规定的温度和时间下进行逆转录反应。建议使用商品化RT-PCR一步法试剂进行第一轮扩增反应。
1.2.4 PCR扩增反应
使用商品化试剂按说明书操作。PCR反应需使用引物、dNTPs、DNA聚合酶（如Taq酶等）、缓冲液、和适量无RNA/DNA酶超纯水、以及模板（DNA或cDNA）。在扩增仪中，按照设定的程序进行扩增。一般使用二次扩增的套式PCR扩增方法。
1.3 扩增产物分析及结果报告
1.3.1 扩增产物分析
扩增产物常用分析方法是琼脂糖凝胶电泳法，与分子量标准比较，判断扩增片段是否在预期的分子量范围内。其它扩增产物分析方法还有限制性内切酶酶切分析、特异性探针杂交分析以及DNA序列分析等。自动化核酸扩增仪使用酶联比色分析或荧光探针杂交等原理测定。
1.3.2 结果判定和报告
（1）实验成立的条件：每一次检测需同时做两个阳性对照、两个阴性对照，只有阳性对照扩增出预期的片段、阴性对照没有扩增出任何片段、双份平行样品结果一致的情况下实验才成立，可以作出核酸阳性或阴性反应结果的判定。
（2）HIV核酸检测阳性：使用商品化检测试剂，发现核酸阳性反应，应该重复采集样品进行复测，复测结果呈核酸阳性反应则判定为核酸阳性，复测结果为核酸阴性反应则判为不确定结果，需进一步随访检测。
（3）HIV核酸检测阴性：只可报告本次实验结果阴性。
（4）应在完成检测后7个工作日内发出检测报告。 2.1 方法
HIV核酸定量检测主要基于靶核酸扩增RT-PCR和信号放大扩增两种方法。国内常用的方法中，NucliSens Esay Q HIV-1 v1.1采用国际单位（IU/ml），与NASBA的拷贝数关系基本为1:1；Amplicor Cobas 的拷贝数约为1.2～1.5国际单位；bDNA方法的拷贝数约为0.8～1.0国际单位。不同方法的关系与HIV的亚型有关。
2.2 试剂
必须使用经中国药品生物制品监督管理局注册批准的商品化试剂并严格按说明书操作。
2.2.1 靶核酸扩增试剂和性能
（1）RT-PCR扩增试剂
1）Amplicor HIV-1 Monitor v1.5（RT-PCR微孔板捕获比色分析法），核酸手工提取（异丙醇沉淀），比色分析测定。扩增靶核酸位置是gag基因区，可扩增HIV-1M组的A-H基因亚型。标准法的检测线性范围是400～750，000；超敏法的线性范围是50～100，000 RNA拷贝/毫升。
2）COBAS Amplicor HIV-1 Monitor v1.5, 核酸手工提取（异丙醇沉淀），仪器测定。扩增靶核酸位置是gag基因区，可扩增HIV-1M组的A-H基因亚型。标准法的检测线性范围是400～750，000；超敏法的线性范围是50～100，000 RNA拷贝/毫升。
3）COBAS AmpliPrep/COBAS Amplicor HIV-1 Monitor v1.5 （COBAS Amplicor 分析仪）,仪器提取核酸，仪器测定。扩增靶核酸位置是gag基因区，可扩增HIV-1M组的A-H基因亚型。标准方法的检测线性范围是400～1，000，000；超敏方法的线性范围是50～100，000 RNA拷贝/毫升。
以上三种试剂均采用基于PCR扩增靶核酸检测法，仅在设备的使用、自动化程度和样品制备的方法有所不同。
4）COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan HIV-1 Test（实时荧光探针RT-PCR分析法）, 仪器提取核酸,实时荧光探针PCR扩增仪器测定。扩增靶核酸位置是gag基因区，可扩增HIV-1M组的A-H基因亚型。检测线性范围是40～10，000，000 RNA拷贝/毫升，比上述三种方法的检测线性范围要宽，样品可不经稀释一次完成检测。
以上四种试剂均使用一个内部定量标准品，1个阴性、1个弱阳性和1个强阳性外部外部质控品。均使用dUTP/UNG防污染试剂。
5）LCx HIV RNA Quantitative Assay（竞争性RT-PCR微颗粒酶免疫分析法）,手工或仪器提取核酸（活化硅胶柱纯化），仪器测定。扩增靶核酸位置是pol（整合酶）基因区，可扩增HIV-1基因M组的A-G亚型和0组病毒，尤其可检测M组C基因亚型和一些重组病毒。检测线性范围是50～1，000，000 RNA 拷贝/毫升；使用一个内部定量标准品和六个外部定量标准品。
6）RealTime HIV-1 Assay（实时荧光探针RT-PCR分析法）,使用独特的双链荧光探针。手工或仪器提取核酸（磁性颗粒纯化），仪器测定。扩增靶核酸位置是pol（整合酶）基因区，扩增HIV-1基因亚型是M组的A-G亚型和0组以及N组病毒。检测线性范围是40～1，000，000 RNA 拷贝/毫升。使用一个内部定量标准品。检测结果与LCx HIV RNA Quantitative Assay结果高度相关。
（2）基于核酸序列扩增试剂（NASBA扩增技术）：以等温方式直接扩增HIV-1 RNA。
NucliSens Esay Q HIV-1 v1.1（实时荧光探针分析法）, 使用荧光标记的分子信标探针技术检测扩增子。手工或仪器提取核酸（硅胶纯化，异丙醇沉淀）,仪器测定。扩增靶核酸位置是gag基因区，扩增HIV-1基因亚型是M组的A-G亚型。检测线性范围是50～3，000，000 RNA 国际单位/毫升；使用一个内部定量标准品，没有阴阳性外部外部质控品。每次检测8的整数倍样品，直至48个。检测结果与Versant HIV-1 RNA、和Amplicor HIV-1 Monitor v1.5 方法的结果有着高度的相关性。国际上已经推荐使用V2.0试剂盒。
2.2.2 信号放大扩增试剂和性能
Versant HIV-1 RNA 3.0.bDNA（分枝状DNA探针杂交微孔板捕获比色分析法）, 利用分枝状DNA多级信号放大原理。无需RNA纯化和PCR扩增步骤。离心浓缩病毒子并用去垢剂和蛋白酶K消化病毒释放病毒RNA，仪器测定。扩增靶核酸位置是pol基因区，扩增HIV-1基因亚型是M组的A-H亚型，检测线性范围是50～500，000 RNA 拷贝/毫升；使用六个外部定量标准品，1个阴性、1个弱阳性和1个强阳性外部外部质控品。每次可检测12的整数倍样品。
以上试剂均可使用EDTA和ACD作为样品的抗凝剂，NucliSens HIV-1 QT和NucliSens Esay Q HIV-1 v1.1以及Versant HIV-1 RNA 3.0.bDNA试剂还可以使用肝素作为抗凝剂。如果必须使用经肝素处理的血浆样品进行RT-PCR扩增，则必须在样品中直接加肝素酶消化肝素。
2.2.3 实时荧光定量PCR技术
实时荧光定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。每个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数Ct值与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关系。利用已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线，其中横坐标代表起始拷贝数的对数，纵坐标代表Ct值）。因此，只要获得未知样品的Ct值，即可从标准曲线上计算出该样品的起始拷贝数。
实时荧光定量PCR扩增的实验检测过程可分为：（1）样品制备,抽提和浓缩目标RNA分子，并除去可能存在的抑制因子。（2）Real-time PCR，检测PCR的产物使用荧光标记的寡核苷酸探针。检测的原理基于荧光信号增长曲线与循环数相关。（3）RT-PCR反应，病毒RNA利用逆转录酶将RNA逆转录为cDNA，然后通过DNA聚合酶对特定片段进行扩增。（4）扩增产物的检测，基于检测阈值的设定，当病毒载量高时，低循环数即能检测到荧光信号，当病毒载量低时，高循环数时才能检测到荧光。循环数与样品载量成线性关系。利用标准品制作循环数与载量的标准曲线就能对样品载量进行定量检测。 使用集合核酸扩增检测技术和方法，利用核酸检测方法的高度敏感性，对高度怀疑感染人群且抗体阴性的样品进行集合核酸检测，可及时发现窗口期感染者。该方法较单份样品的核酸检测具有更高的成本效益。
3.1 样品集合程序
3.1.1 根据预处理样品量，计算预形成一级和二级集合数量，在登记表格上记录一级和二级集合及对应的原始样品编号。
3.1.2 吸取130mL样品，移入标记二级集合的离心管中；10份样品形成一个1300mL的二级集合样品，充分涡旋震荡混匀。
3.1.3 从5个二级集合管中分别吸取210mL样品，移入标记有一级集合的离心管中，形成由50份样品1050mL体积组成的一级集合样品，充分涡旋震荡混匀。
3.1.4 从每个一、二级集合管中吸取500mL集合样品，分装至另一相应标记的离心管，用超敏感核酸检测试剂进行检测。
3.1.5 制备阴性集合外部质控品：使用50份HIV抗体和核酸阴性样品，按上述步骤，分别集合成5个阴性二级集合外部质控品和1个一级集合外部质控品。
3.1.6 制备阳性集合外部质控品：从9份HIV抗体和核酸阴性样品和一份至少含有HIV RNA10c/ml阳性样品中，分别移取130mL加入离心管中，形成一个1300mL的阳性二级集合外部质控品。再分别从4个已制备好的阴性二级集合外部质控品和上述阳性二级集合外部质控品中，移取210mL至标记为一级阳性集合外部质控品的离心管中，形成一级阳性集合外部质控品。
3.1.7 一级和二级阴、阳性集合外部质控品分别用于RT-PCR中每一轮一级和二级集合样品的检测。
3.2 集合样品的检测和分解路线
使用商品化核酸检测试剂，应严格按照试剂说明书操作。按照各商品化核酸试剂集合PCR的方案进行检测，集合样品的数量根据各试剂方案操作。方法简述如下：
3.2.1 用HIV RNA RT-PCR超敏检测方法对一级集合样品进行检测，阳性反应的一级集合样品进入下一检测步骤。
3.2.2 用HIV RNA RT-PCR超敏检测方法对所有组成阳性一级集合的二级集合样品进行检测，阳性反应的二级集合样品进入下一检测步骤。
3.2.3 用HIV RNA RT-PCR标准检测方法检测所有组成阳性二级集合样品的的10份单个样品，确定核酸阳性的单个样品。 HIV感染产妇所生婴幼儿在出生后18个月内可应用HIV核酸（DNA或RNA）检测进行早期HIV感染诊断。尽管HIV RNA检测敏感性在感染早期较高（出生后1个月内），但是HIV DNA检测不受母亲围产期抗逆转录病毒治疗和人乳汁中抗逆转录病毒药物以及婴幼儿预防性抗逆转录病毒治疗的干扰而影响早期诊断。另外，考虑母亲血液污染因素，不推荐使用脐带血进行HIV核酸检测。婴幼儿的抗体检测流程和结果判断见第二章（HIV抗体检测）。
4.1 适用范围
未满18个月的HIV感染产妇所生婴幼儿；未满18个月的婴幼儿，其母亲HIV感染状态不详，儿童出现HIV相关临床表现，临床怀疑HIV感染者。
4.2 检测程序及结果报告
4.2.1 于婴儿出生后6周（42天）采集第一份血样本（血样本可制备成DBS或EDTA抗凝全血），送检。
4.2.2 若第一份血样本检测呈阳性反应，尽快再次采集第二份血样本进行检测。若两份血样本检测均呈阳性反应，报告“婴儿HIV感染早期诊断检测结果阳性”，诊断儿童HIV感染。及时对HIV感染儿童进行追踪和病情监测，将其转介到儿童抗病毒治疗医疗服务机构，并为其提供机会性感染预防等服务措施；若第二份血样本检测呈阴性反应，待婴儿满3个月再次采集血样本进行检测。若第一份血样本检测呈阴性反应，继续提供儿童保健和随访服务，待婴儿满3个月再次采集血样本进行检测。
4.2.3 若婴儿满3个月再次检测呈阴性反应，报告“婴儿HIV感染早期诊断检测结果阴性”，按照未感染儿童处理，继续提供儿童保健随访服务；于儿童满12个月时，按照“HIV感染产妇所生儿童HIV抗体检测流程”（图4），开始HIV抗体检测，最终确定儿童感染状态。若婴儿满3个月再次检测呈阳性反应，尽快再次采集血样本进行检测。第三份血样本检测呈阳性反应，报告“婴儿HIV感染早期诊断检测结果阳性”；若第三份血样本检测呈阴性反应，报告“婴儿HIV感染早期诊断检测结果阴性”；分别按照前述流程提供相应服务。
4.2.4 不同时间“婴儿HIV感染早期诊断”检测均呈阴性反应的喂哺母乳的儿童，应在完全停止喂哺母乳后的6周和3个月（若6周时检测结果为阳性可尽快）再次采血进行核酸定性检测，进行早期诊断。儿童满18个月后则可直接进行抗体检测。
4.2.5 如果婴儿第一次采血时已满3个月，但未满12个月，则应尽快在不同时间采集两份血样本；同时将两份血样本送检，按照前述流程进行检测。如果儿童第一次采血时已满12个月，则应首先按照“艾滋病感染产妇所生儿童HIV抗体检测流程”（ 图4）进行HIV抗体检测。若两种不同原理或厂家生产的HIV抗体检测试剂检测结果均为阴性，则排除儿童感染；若HIV抗体检测试剂检测结果呈阳性反应，不能通过抗体检测确定儿童感染状态，则可在不同时间采集两份血样本，按照前述流程进行“婴儿HIV感染早期诊断”检测。如果儿童第一次采血时已满18个月，则应按照HIV抗体检测流程（图1）进行HIV抗体检测，无需进行“婴儿HIV感染早期诊断”检测。

4. 汞的检测方法有哪些

汞的测定方法：
1 “冷原子吸收光谱法”。
2原理：汞蒸气对波长253.7nm的共振线具有强烈的吸收作用。样品经过酸消解或催化酸消解使汞转为离子状态，在强酸性介质中以氯化亚锡还原成元素汞，以氮气或干燥空气作为载体，将元素汞吹入汞测定仪，进行冷原子吸收测定，在一定浓度范围其吸收值与汞含量成正比，与标准系列比较定量。
3试剂：分析过程中全部用水均使用去离子水(电阻率在8×105以上)，所使用的化学试剂均为分析纯或优级纯。
3.1硝酸。
3.2盐酸。
3.3过氧化氢(30%)。
3.4硝酸(0.5＋99.5)：取0.5mL硝酸，慢慢加入50mL水中，然后加水稀释至100mL。
3.5高锰酸钾溶液(50g/L)：称取5.0g高锰酸钾，置于100mL棕色瓶中，以水溶解稀释至100mL。
3.6硝酸—重铬酸钾溶液(5＋0.05＋94.5)：称取0.05g重铬酸钾，溶于水中，加入5mL硝酸，用水稀释至100mL。
3.7氯化亚锡溶液(100g/L)：称取10g氯化亚锡，溶于20mL盐酸中，以水稀释至100mL，临用时现配。
3.8无水氯化钙。
3.9汞标准储备液：准确称取0.1354g经干燥器干燥过的二氧化汞，溶于硝酸重铬酸钾溶液中，移入100mL容量瓶中，以硝酸—重铬酸钾溶液稀释至刻度。混匀。此溶液每毫升含1.0mg汞。
3.10汞标准使用液：由1.0mg/mL汞标准储备液经硝酸—重铬酸钾溶液稀释成2.0，4.0，6.0，8.0，10.0ng/mL的汞标准使用液。临用时现配。
4仪器：所用玻璃仪器均需以硝酸(1＋5)浸泡过夜，用水反复冲洗，最后用去离子水冲冼干净。
4.1双光束测汞仪(附气体循环泵、气体干燥装置、汞蒸气发生装置及汞蒸气吸收瓶)。
4.2恒温干燥箱。
4.3压力消解器、压力消解罐或压力溶弹。
5分析步骤
5.1样品预处理
在采样和制备过程中，应注意不使样品污染。储于塑料瓶中，保存备用。
5.2样品消解(可根据实验室条件选用以下任何一种方法消解)
5.2.1 压力消解罐消解法：称取1.00～3.00g样品(干样、含脂肪高的样品少于1.00g，鲜样少于3.00g或按压力消解罐使用说明书称取样品)于聚四氟乙烯内罐，加硝酸2～4mL浸泡过夜。再加过氧化氢(30%)2～3mL(总量不能超过罐容积的1/3)。盖好内盖，旋紧不锈钢外套，放入恒温干燥箱，120～140℃保持3～4h，在箱内自然冷却至室温，用滴管将消化液洗入或过滤入(视消化后样品的盐分而定)10.0mL容量瓶中，用水少量多次洗涤罐，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混匀备用；同时作试剂空白。
5.3测定
5.3.1 仪器条件：打开测汞仪，预热1～2h，并将仪器性能调至最佳状态。
5.3.2 标准曲线绘制：吸取上面配制的汞标准使用液2.0，4.0，6.0，8.0，10.0ng/mL各5.0mL(相当于10.0，20.0，30.0，40.0，50.0ng汞)，置于测汞仪的汞蒸气发生器的还原瓶中，分别加入1.0mL还原剂氯化亚锡(100g/L)，迅速盖紧瓶塞，随后有气泡产生，从仪器读数显示的最高点测得其吸收值，然后，打开吸收瓶上的三通阀将产生的汞蒸气吸收于高锰酸钾溶液(50g/L)中，待测汞仪上的读数达到零点时进行下一次测定。并求得吸光值与汞质量关系的一元线性回归方程。
5.3.3样品测定：分别吸取样液和试剂空白液各5.0mL，置于测汞仪的汞蒸气发生器的还原瓶中，以下按5.3.2自“分别加入1.0mL还原剂氯化亚锡”起进行。将所测得其吸收值，代入标准系列的一元线性回归方程中求得样液中汞含量。
6计算

（m1 - m2）×（V1／V2）× 1000
X1 = ────────────────────........... (1)
m3× 1000

式中：X1——样品中汞含量，µg/kg(µg/L)；
m1——测定样品消化液中汞质量，ng；
m2——试剂空白液中汞质量，ng；
V1——样品消化液总体积，mL；
V2——测定用样品消化液体积，mL；
m3——样品质量或体积，g或mL。
结果的表述：报告算术平均值的二位有效数字。
7允许差
相对相差≤20%。

5. 核酸检测方法

对于新型冠状病毒的核酸检测，首先根据试剂盒说明书”样本要求“部分进行样本采集，常规的样本类型包括咽拭子、鼻拭子、痰液、支气管灌洗液、肺泡灌洗液等。

获得患者样本后，需尽快进行检测，如无法立即检测需要转运的样本，应按照说明书的要求进行低温封装，并送到专门的检测机构进行检测。检测机构收到样本后，对样本进行核酸提取，核酸提取试剂应使用批准产品说明书中指定的核酸提取试剂盒。

病毒RNA需要首先逆转录为cDNA，再进行扩增检测。PCR扩增和检测应使用批准产品说明书中指定的荧光定量PCR仪，通过荧光定量PCR所得到的样本Ct值的大小，可以判断患者样本中是否含有新型冠状病毒。

(5)检测方法说明书扩展阅读

核酸检测原理

所有生物除朊病毒外都含有核酸，核酸包括脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA），新型冠状病毒是一种仅含有RNA的病毒，病毒中特异性RNA序列是区分该病毒与其它病原体的标志物。新型冠状病毒出现后，我国科学家在极短的时间里完成了对新型冠状病毒全基因组序列的解析。

并通过与其它物种的基因组序列对比，发现了新型冠状病毒中的特异核酸序列。临床实验检测过程中，如果能在患者样本中检测到新型冠状病毒的特异核酸序列，应提示该患者可能被新型冠状病毒感染

6. 便携式气体检测仪的使用方法

一、使用前
①作业前仔细阅读与气体检测仪对应的使用说明书，熟悉机器的性能和操作方法。
②检查电池电量是否充足，如发现电池电量不足应及时更换电池。

③检查进气口气滤有无杂物堵住，堵住需清理干净或更换。

④开机过程中自检时应听一下分级报警声光报警、震动报警是否准确，如不符合要求设定不准使用，并应立即校订。

⑤开机启动时长按启动键保持三秒，进入自检状态，观察检测仪设定低报警值、高报警值是否设定准确（CO检测仪一级报警50ppm，二级报警100ppm；氧气检测仪一级报警报19.5%，二级报警报22%；硫化氢检测仪一级报警10 ppm，二级报警15ppm），如不符要求设定不准使用，并应立即校订。开机过程中自检时应听一下分级报警声光报警、震动报警是否准确，如不符合要求设定不准使用，并应立即校订。

⑥在清新空气条件下开机后观察初始数值是否准确（CO检测仪初始显示0 ppm；O2检测仪初始显示20.9%；硫化氢检测仪初始显示0 ppm），如显示数值不准确严禁使用，应立即校订。

二、使用过程中
①便携式气体检测仪使用时应佩戴在尽量接近口、鼻的部位，如衣服前领口、上衣口袋等，严禁将报警器放置于口袋内等不易查看的部位，影响检测数值。
②使用过程中应尽量避免碰撞，造成检测数据异常。

③气体检测仪传感器等部件属于精密部件，调整好的仪器不要随便开盖，使用过程中应注意防水和杂质进入，防止造成数据异常。

④使用时如出现指示灯连续闪亮、显示屏突然无数值显示、气体明显超标区域显示数值不动作、差距大等异常情况应立即停止作业，撤离到空气清新区域观察是何问题，并及时排除，否则严禁继续使用。

⑤各类气体检测超标情况下作业执行国家及公司规定：

煤气现场作业（不包含受限空间）浓度与作业时间要求：

CO在空气中的浓度为24ppm时，可以正常作业；

CO在空气中的浓度为40ppm时，可以工作1小时；

CO在空气中的浓度为80ppm时，可以工作半小时；

CO在空气中的浓度为160ppm时，只允许工作15~20分钟，每次工作间隔时间为2小时。

氧气作业：作业区域环境氧气含量不得低于19.5%，有限空间内氧含量一般为 19.5%～21%，在富氧环境下不得大于23.5%。

硫化氢作业：

当硫化氢浓度低于40ppm时可以佩戴过滤式防毒面具作业，并在滤毒罐表面注明适用物质；

当硫化氢浓度大于40ppm或浓度不明或二氧化硫浓度高于2ppm的区域内作业时应使用正压式空气呼吸器；

严禁任何人不佩戴合适的防护用品进入可能含有硫化氢气体的区域，禁止在有毒区域内摘除防毒用具。

⑥如在作业中出现头晕、耳鸣、眼花、恶心等情况时应立即停止作业，撤离到空气清新区域（注意空气流向，选择上风口），如事态较大应立即启动应急响应，开展自救、他救。

三、使用完毕后

①便携式气体检测仪使用完毕后按住关机键不放，显示屏显示5秒倒计，倒计时结束后LCD显示“off”，随后仪器无显示，仪器关机，严禁直接扣除电池强制关机。
②仪器关机后应对表面附着的灰尘进行清理，做好器材清洁。

③仪器长期不工作时，应关机，置于干燥、无尘、符合储存温度的环境中。

④气体检测仪实行专人专管制度，防止出现丢失等情况造成器械缺失，影响正常使用。

7. 手持甲醛检测仪的使用方法是什么

一、手持式甲醛检测仪简介 手持式甲醛检测仪用于快速检测甲醛气体浓度、温湿度测量并超标报警，主要检测原理有：电化学、红外、催化燃烧、热导、PID光离子，可以检测管道中或受限空间、大气环境中的气体浓度，也可以检测各种气体泄漏和各种背景气体为氮气或氧气的高浓度单一气体纯度，检测种类超过500多种。 该图片由注册用户"生活小当家"提供，版权声明反馈 二、手持式甲醛检测仪的特点有哪些 1、防水、防尘、防爆、防震，本安电路设计，抗静电，抗电磁干扰。 2、内置水汽、粉尘过滤器，防止因水汽和粉尘损坏传感器和仪器，可用于高湿度高粉尘环境。 3、内置泵吸式测量，响应迅速，采样距离超过10米，特殊气路设计，可直接检测负压或正压-0.5～2公斤的气体。 4、显示实时浓度、报警、时间、温度、湿度、存储、通信、打印、电量、充电状态等信息，菜单界面采用高清仿真图标显示各个菜单的功能名称。 5、大容量数据存储功能，标配10万条数据存储容量，更大容量可订制。支持实时存储、定时存储，或只存报警浓度数据和时间、支持本机查看数据，也可通过USB或RS232接口将数据上传到电脑，用上位机软件分析数据和存储、打印。 6、红外通信接口（选配）、USB接口、RS232接口，可选配外置微型无线红外打印机，打印：公司名称、气体名称、日期时间、环境温湿度、浓度数据、检测结果（是否合格）。 7、USB充电接口，可用电脑或充电宝充电，兼容手机充电器，过充、过放、过压、短路、过热保护，支持USB热插拔，检测仪在充电时可正常工作。采用5500mA大容量可充电高分子聚合物电池，可长时间连续工作。 8、声光报警、振动报警、视觉报警、欠压报警、故障报警，报警时多方位立体显示报警状态。报警值可设，报警方式可选低报警、高报警、区间报警、加权平均值报警。 9、高精度温湿度测量（选配），同时对传感器进行温度补偿，仪器使用温度范围-40～70度，可检测800度的气体，更高温度的气体检测可订制（选配高温采样降温过滤手柄或高温高湿预处理系统）可以同时检测1～5种气体，单位自由切换，常规气体不需要输入分子量，特殊气体需要输入分子量就自动计算并切换，单位可选：PPM、mg/m3、Vol%、LEL%、PPHM、ppb、mg/L。 10、三种显示模式可切换：同时显示四种气体浓度、大字体循环显示单通道气体的浓度、实时曲线，各通道之间自动循环或手动循环可切换，可设置是否显示最大值、最小值、气体名称，可查看历史记录曲线图。 11、数据恢复功能，可以选择性恢复或全部恢复，免去误操作引起的后顾之忧 12、零点自动跟踪，长期使用不受零点漂移影响。目标点多级校准，保证测量的线性度和精度，能同时符合国家标准和地方计量局标准。浓度校准误操作自动识别并阻止，能避免人为因素造成的不良。 13、可以实时检测或定时检测（针对被测气体的量比较小的情况），不检测时可以把泵关闭以延长开机时间。 14、可记录校准日志、维修日志、故障解决对策，传感器寿命到期提醒，下次浓度校准时间提醒功能。 三、手持甲醛检测仪怎么用 1、开箱检验 在初次收到该测验仪器的时分，请依照如下所述的进程进行检验查看。从包装箱中取出仪器，查看装运期间是不是有损害。打开包装箱后，查看包装箱和包装材料。假如全部完好，保存原包装材料，以便将来使用；假如包装材料损坏，说明仪器在装运进程中受到了外力的冲击，维持原状并告诉货运公司，以便货运公司查看。然后依照说明书的操作规程进行操作查看，依据仪器损害的状况向货运公司或承运人提出赔偿要求。 2、功用说明 手持甲醛检测仪的用法很简单，仪器的前面板分为定时操作区、甲醛流量调节区、甲醛测定区三个部分，通过定时操作能够设定各个检查项目所需要的的检查时间，检查甲醛时能够通过向左向右调节流量计下方的圆形旋扭来调整检查甲醛时每分钟的空气通过量，甲醛测定区通过操作能够进行甲醛测定、传感器校零、数据打印等作业。机器的后面板有电源开关和电源插线接口及玻璃气泡吸收管的挂板支架螺丝，检查项目接口从右向左依次为：甲醛、苯、氨、甲苯、二甲苯、TVOC。机器的左边是内置式热敏打印机，在此能够打印定制的甲醛测验报告。 3、报警功用 手持甲醛检查仪中首要的是作业电极，它是用一个具有催化活性的金属，将其涂覆在一张透气但憎水的膜上做成。甲醛气体经分散过多孔的膜在其上进行氧化还原反应，作业电极作业信号经扩大变成仪器的输出信号，使作业电极与参考电极间维持稳定的电位差。电压信号经集成电路处理器对比后生成甲醛气体浓度值，并用数字显现在仪器面板上。 4、注意事项 检查前检查环境密闭1小时，待甲醛充分均匀的散布在环境中；检查过程中不要进行影响测验成果的活动，如吸烟和用燃气灶等；检查现场需整理洁净，不能堆积剩余的涂料、油漆、板材等；检查过程中不要运用化工产品，如空气新鲜剂，香水，酒精等等。甲醛规范为：0.1mg/m3以下合格。

8. simco fmx 004静电测试仪的使用方法说明书

杉本贸易产品使用说明单按归零重置。
功能：有效检测ESD工作场所设备，工作台面，工具的带静电电荷。
特性：液晶/电平显示检测数据，测试数据保持，数字清零显示，高/低档量程。
输出：红色LCD显示正电荷、蓝色LCD显示负电荷
精度:低范围精度为：正负0.1kv 高范围精度为：正负1kv
声响报警:开机/闲置自动关机/超出可测范围
自动关机:闲置约5分钟