液相色谱检测方法第三版电子版

❶ 液相色谱仪的使用方法以及注意事项有哪些!

高效液相色使用方法：
1)．过滤流动相，根据需要选择不同的滤膜。
2)．对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。
3)．打开HPLC工作站（包括计算机软件和色谱仪），连接好流动相管道，连接检测系统。
4)．进入HPLC控制界面主菜单，点击manual，进入手动菜单。
5)．有一段时间没用，或者换了新的流动相，需要先冲洗泵和进样阀。冲洗泵，直接在泵的出水口，用针头抽取。冲洗进样阀，需要在manual菜单下，先点击purge，再点击
start，冲洗时速度不要超过10 ml/min.
6)．调节流量，初次使用新的流动相，可以先试一下压力，流速越大，压力越大，一般不要超过2000。点击injure，选用合适的流速，点击on，走基线，观察基线的情况。
7)．设计走样方法。点击file，选取select users and methods，可以选取现有的各种走样方法。若需建立一个新的方法，点击new method。选取需要的配件，
包括进样阀，泵，检测器等，根据需要而不同。选完后，点击protocol。一个完整的走样方法需要包括：
a.进样前的稳流，一般2-5分钟；
b.基线归零；
c.进样阀的loading-inject转换；
d.走样时间，随不同的样品而不同。
8)进样和进样后操作。选定走样方法，点击start。进样，所有的样品均需过滤。方法走完后，点击postrun，可记录数据和做标记等。全部样品走完后，再用上面的方法走一段基线，洗掉剩余物。
9)．关机时，先关计算机，再关液相色谱。

❷ 高效液相色谱比例阀堵了，工程师让用异丙醇冲，想问是冲有问题的通道还是怎么做，求具体操作步骤

首先说一下原理：异丙醇的粘度比较高。如果是不溶性微粒，或者气泡之类的东西堵住了管路，异丙醇可以把他们粘下来。
第二，如果是比例阀堵了。建议四个管路都冲，每个管路25%。如果是某一个管路堵了，那就单独冲洗这一个通道就可以。
第三，冲洗方法：先把色谱柱卸下来，换上两通。异丙醇对色谱柱有伤害。最好不要过柱子。如果系统中有流动相，先用10%的甲醇水冲洗掉，免得无机盐遇到异丙醇之后盐析。然后排气，慢慢地升高流速。有可能柱压会很高，要冲一会儿才能提高流速。我不知道工程师是怎么说的，要多少的流速，冲多久，记得注意压力变化。如果压力下降了，那么可能就是冲开了。

❸ 液相色谱仪的使用步骤

目的：制定规范的高效液相色谱仪操作、维护保养和清洁规程。
范围：适用于Agilent 1260 HPLC。
责任：色谱检验工程师负责本规程执行。
内容：
1 开机
1.1 打开电脑。
1.2 打开液相色谱各个模块的电源。
1.3 双击桌面“仪器—联机”，进入联机界面。
1.4 排气：
1.4.1 手动旋开泵处冲洗阀（逆时针旋转约1圈）。
1.4.2 右键单击“泵”图标区域，选择“方法…”选项，进入泵编辑画面，设流速：5ml/min（一般为3－5ml/min），点击“确定”。
1.4.3 右键单击“泵” 图标，点击“控制…”选项，选中“ON”，点击“确定”，则系统开始冲洗，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止，（一般为5分钟），切换通道继续冲洗，直到所有要用通道无气泡为止。
1.4.4 右键单击“泵” 图标，点击“方法…”选项，设流速：0ml/min，手动旋紧冲洗阀。
1.4.5 右键单击“泵”图标，点击“方法…”选项，按照方法要求选择合适比例的流动相，设流速：1.0ml/min。
1.4.6 同理右键单击“柱温箱”，“检测器”图标，点击“方法…”选项，按照方法的要求设置温度，波长，点击“控制” 选项，“ON”打开柱温箱和检测器。

2 编辑方法
2.1 点击“方法”－“编辑完整方法”开始编辑完整方法。
2.2 选中除“数据分析 ”外的三项，进入下一选项卡。
2.3 方法信息：在“方法注释”中加入方法的信息（如：This is for test!）。进入下一选项卡。
2.4 泵参数设定：在“流速”处输入流量, 如1.0ml/min，停止时间：如10 min（该停止时间仅为做一个样品需要的时间），按照要求选择合适比例的流动相配比，如乙腈：水＝75：25，A为水，B为乙腈，则设置B：75％即可。进入下一选项卡。
2.5 自动进样器参数设定: 选择“洗针进样”----可以输入进样体积和洗瓶位置，进入下一选项卡。
2.6 柱温箱参数设定: 在“温度”下面的空白方框内输入所需温度,如：40度。进入下一选项卡。
2.7 UV检测器参数设定: 在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm。点击确定。
2.8 在“ 运行时选项表 ”中，选中“ 数据采集”，点击“确定”。
2.9 从“方法”菜单，选中“方法另存为…”，输入一方法名，如“测试”，点击“确定。

3 单次采集
3.1 从“运行控制”菜单中，选择“样品信息”选项，选择合适的路径，在“数据文件”中选择 “前缀/计数器”，输入样品瓶的位置，点击“确定”。
3.2 基线平稳后约10分钟，从“运行控制”菜单中选择“运行方法”。

4 多次数据采集
4.1 按照步骤2 编辑完整方法。
4.2 点击“序列”－“序列表”，输入“样品瓶”“样品名称”，“进样次数”，选择合适的“做样方法”
4.3 点击“序列”－“序列参数”，选择序列数据的保存路径（序列会自动生成以“序列名称－时间”为名称的文件夹保存数据），数据建议以选择 “前缀/计数器”保存。
4.4 从“序列”菜单，选中“序列另存为…”，输入一序列名，如“测试”，点击“确定。
4.5 从“运行控制”菜单中选择“运行序列”。

5 数据分析（脱机状态使用）
5.1 双击“仪器 —脱机”图标 进入的脱机画面。
5.2 从“视图”菜单中，点击“数据分析”进入数据分析画面。
5.3 从“文件”菜单选择“调用信号”，选中您的数据文件名。点击“ 确定”，则数据被调出。（如预建立标准曲线，应先打开浓度较低的标样图谱。）
5.4 做谱图优化：从“图形”菜单中选择“信号选项”。从“范围” 中选择“满量程” 或“自动量程” 及合适的时间范围或选择“自定义量程” 调整。反复进行，直到图的比例合适为止。点击“ 确定”。

6 积分:
6.1 从“积分”菜单中选择“积分事件”选项，选择合适的“斜率灵敏度”，“峰宽”，“最小峰面积”，“最小峰高”。点击 ，自动加载积分参数。
6.2 点击左边“√”图标，将积分参数存入方法并退出“积分事件”。
6.3 如积分结果不理想，则修改相应的积分参数，直到满意为止。

7 标准曲线
7.1 点击“校正”－“校正设置”，输入“含量单位”。
7.2 点击“校正”－“新建校正表”，点击确定。输入“化合物名称”和“含量”，点击“确定”，按照提示删除其他组分。
7.3 至此完成单级校正，如要增加校正级别，应从“文件”菜单选择“调用信号”，选中您的数据文件名（第二个标样），点击“校正”－“添加级别”，点击确定，输入“含量”，依次增加校正级别。

8 打印报告
8.1 从“报告”菜单中选择“设定报告”选项，点击“定量结果”框中“定量”右侧的黑三角，选中“外标法”，其它选项不变，点击“ 确定”。
8.2 从“报告”菜单中选择“打印报告”，则报告结果将打印到屏幕上，如想输出到打印机上，则点击“报告” 底部的“打印”钮。
8.3 点击“文件”－“另存为”－“方法”，把数据分析方法保存，下次分析可直接在“文件”－“调用”－“方法”下，将该方法调出使用。（调用的方法中含有积分方法，标准曲线方法和打印报告方法）

9 关机
9.1 关机前，先关紫外灯，用相应的溶剂（甲醇或乙腈）充分冲洗系统大约30分钟。（色谱柱最终应保存在甲醇或乙腈中）
9.2 退出化学工作站，依提示关泵，及其它窗口，关闭计算机。
9.3 关闭Agilent 1260各模块电源开关。

10 其它注意事项
10.1 当样品运行时，切勿打开自动进样器前遮盖，否则进样过程停止。
10.2 系统发生漏液时，机器会检测到并停止进样，状态指示灯为红色。检查擦干并安置好漏液处，擦干漏液传感器，单击ON按钮，系统重新初始化。
10.3 注意紫外灯使用寿命，切勿来回开关紫外灯。

❹ 求安捷伦1260液相色谱 工作站的详细操作方法

一、开机：

1、打开电脑；

2、打开液相色谱各个模块的电源；

3、双击桌面“LC1260(Online)”，进入联机界面；

二、排气：

1、手动旋开泵处冲洗阀（逆时针旋转约1圈）

2、右键单击“Pump”图标区域，选择“Method”选项，进入泵编辑画面，设流速：5ml/min，点击“确定”；

3、右键单击“Pump” 图标区域，点击“Control”选项，选中“ON”，点击“确定”，则系统开始冲洗，直到

管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止（一般为5分钟），切换通道继续冲洗，直到所有要用通道

无气泡为止；

4、右键单击“Pump” 图标，点击“Method”选项，设流速：0ml/min，手动旋紧冲洗阀；

5、右键单击“Pump”图标，点击“Method”选项，按照方法要求选择合适比例的流动相，设流速：1.0ml/min；（不一定是1）；

6、同理右键单击“Column Comp”，“DAD”图标，点击“Method”选项，按照；

7、方法的要求设置温度，波长，点击“控制” 选项，“ON”打开柱温箱和检测器；

三、编辑方法：

1、点击“Method”—— “Edit EntireMethod”开始编辑完整方法；

2、选中除“Data Analysis ”外的三项，进入下一选项卡，选择“Als”（自动进样），点击“OK”，进入下一选项；

3、选择“Method”菜单下“Method Information”选项，在“Method Comments”中加入方法的信息（如：

This is for test!），选择“OK”，进入下一选项；

4、泵参数设定：右键单击“Pump”图标，点击“Method…”选项，设置“Flow”：如1.0ml/min；“Stop

Time”：如10 min（该停止时间仅为做一个样品需要的时间），按照要求选择合适比例的流动相配

比，选择“OK”，进入下一选项；

5、自动进样器参数设定：右键单击“Sampler”图标，点击“Method”选项，选择“Injection volume”，输

入进样体积，选择“OK”，进入下一选项；

6、柱温箱参数设定：右键单击“Column Comp”，点击“Method”选项，设置“Left”温度（可设置温度范

围：低于室温10℃-80℃），一般“Left”和“Right”温度一致，选择“Combined”绑定即可，“Stop

Time”选择“As Pump /Injector”，选择“OK”，进入下一选项；

7、UV检测器参数设定: 右击“DAD” ，点击“Method…”选项，下方的空白处输入所需的检测波长（可

根据需要选择多个波长，最多可选8个波长）；“Stop Time”选择“As Pump /Injector”；“Spectrum”

——“Store”选项下，根据需要选择 “None”或“All（全波长扫描）”等选项，选择“OK”，进入下一选

项；

8、编辑方法完毕，从“Method”菜单中，选中“Save Method As”，输入一方法名，选择“OK”，保存方

法成功。

9、单针进样

10、从“Run Control”菜单中，选择“Sample Information”选项，输入“Operator Name”；在“Data File”中

选择“Path”和 “Prefix/Counter（文件命名）”设置“Prefix（一般设置为年月日）”和“Counter”；输

入“Location（样品位置）”和“Sample Name”，选择“OK”，进入下一选项；

11、基线平稳后选择“Run Control”中的“Run Method”选项，开始进样。

四、序列进样：

1、选择“Sequence”菜单下“ Sequence Table”选项，在“Confiqure Table”中选择需要选项，一般

为“Vial(样品瓶)”，“Sample Name(样品名称)”，“Method Name(方法名称)”，“Inj/Vial（进样次

数）”，“Sample Type（样品类型）”，“Datafile（文件名）”和“Inj Volume（进样体积）”；

2、点击“Inset”生成一行，设置上述参数，选中该行，点击“Copy”和“Paste”复制后修改相应参数，即

生成序列表，选择“OK”，进入下一选项；

3、点击“Sequence”菜单下“ Sequence Parameters”选项，选择序列数据的“Path”（序列会自动生成

以“序列名称－时间”为名称的文件夹保存数据），数据建议选择 “Prefix/Counter”保存；

在“Shutdown”选项下选中“Post-Sequence Command/Macro”，根据需要选择“PUMPALL OFF（序列

结束后关闭泵）”” “LAMPALL OFF（序列结束后关闭紫外灯）”” “STANDBY（序列结束后关闭紫外灯

和泵）”，选择“OK”，进入下一选项；（注：若“Path”中默认保存于C盘，则可点击“View”，选

择“Preferences”，根据需要添加相应的“SequenceTemplates”“Data”“Master Methods”保存路径）

4、从“Sequence”菜单，选中“Save Sequence Template As”，输入一序列名，选择“OK”，即可；

5、基线平稳后选择“Run Control”中的“Run Sequence”选项，开始序列进样。

（注：若中途停止运行，则选择“Run Control”中的“Stop Run/Inject/ Sequence”可保留图谱信息，若选

择Abort，则所有图谱信息都丢失）

五、数据分析（脱机状态使用）：

1、双击“LC1260（Offline）”图标进入的脱机画面

2、从“View”菜单中，点击“Data Analysis”进入数据分析画面

3、从“File”菜单选择“Load Signal”，选中所需的数据文件名，点击“OK”，则数据被调出。

4、谱图优化：从“Graphics”菜单中选择“Signal Options”。从“范围” 中选择“Full”或“Use Ranges” 选择

所需“Time Range”和“Response Range”，选择“OK”；从“Integration”中选择“Integration Events”，调

整“Area Reject”和“Height Reject”删除杂峰；点击“Set Integration”图标，可选择性消除不需要的积

分，若想消除该操作，则选择“Method Manual Events”上排左起第5个图标进行移除操作即可，点击

左边“√”图标，将积分参数存入方法并退出“Integration Events”。

（注：“Set Integration”图标为）

六、标准曲线绘制：

1、选择“Calibration”菜单下“New Calibration Table”，选择“Automatic Setup”中“Level（即标曲中对应

的点，第一个点即为1）”和“Defanlt Amount（标准品对应点的浓度）”，选择“OK”；

2、通过选择“Calibration”菜单下的“Add Level”选项依次添加各点参数，若为外标法，在“ISTD”项下

选“NO”，若为内标法则选“Yes”；“#”项下对应标准品和内标无的数字的应统一；若想更改标准曲线中

的对应点；

3、选择“Calibration”菜单下的“Recalibrate”项的“Mode”选项，选择“Average”则表示取当前点与标曲

中对应点的平均值替代标曲中原对应点，若选择“Replace”则表示将当前点取代标曲中对应点；

（注：修改“Defanlt Amount”中浓度单位的方法：选择“Calibration”项下“Calibration Setting”，修

改“Amount Units”，设置浓度单位；选择“Calibration”项下“Calibration Setting”，修改“Default

CalibrationCurve”，选择合适的曲线类型-Type，是否过原点-Origin和各点对于标准曲线的比重-

Weight，通常选Equal）

4、调出样品谱图，点击需要计算浓度的色谱峰，选择“Report” 菜单中的“Specify Report”，选

择“Report style”为“Detail”，点击“OK”后选择“打印预览”图标，在报告中即可体现计算结果。

七、 图谱重叠设置：

1、选择“File”菜单下“Overlay Signal”选项，选择任意需要重叠的图谱；

2、在“Signal”选项下，选择“3D Signal Overlay”图标（紧邻图谱上方左起第四个图标），在弹出

的“Adjust Signal OverlayOptions”对话框中调节交错时间和高度；若想移除重叠谱图，点击第六个图

标。

八、信噪比等参数计算：

1、选择“Report”菜单中的“System Suitability”项下的“Edit Noise Range”选项，设置时间范围（超过

1min）；

2、选择“Report” 菜单中的“Specify Report”，选择“Report style”为“Perfomance+Noise”，点

击“OK”后，即可预览信噪比参数；

3、选择“Report” 菜单中的“Specify Report”，选择“Report style”为“Extended Perfomance”，点

击“OK”后，即可预览对称性、拖尾因子等所有参数。

九、程序运行时检测出峰情况：

选择“File”菜单下的“Snapshot”选项即可。

十、打印报告：

1、从“Report”菜单中选择“Report Mode”，选择“Use Classic Reporting”；

2、从“Report”菜单中选择“打印报告”，则报告结果将被打印。

十一、关机：

1、冲洗色谱柱和系统后，退出化学工作站及其它窗口，关闭计算机；

2、关闭Agilent 1260各模块电源开关。

(4)液相色谱检测方法第三版电子版扩展阅读

定义：液相色谱是一类分离与分析技术，其特点是以液体作为流动相，固定相可以有多种形式，如

纸、薄板和填充床等。在色谱技术发展的过程中．为了区分各种方法，根据固定相的形式产生

了各自的命名，如纸色谱、薄层色谱和柱液相色谱。

基本原理：使用高效液相色谱时，液体待检测物被注入色谱柱，通过压力在固定相中移动，由

于被测物种不同物质与固定相的相互作用不同，不同的物质顺序离开色谱柱，通过检测器得到

不同的峰信号，最后通过分析比对这些信号来判断待测物所含有的物质。高效液相色谱作为一

种重要的分析方法，广泛地应用于化学和生化分析中。高效液相色谱从原理上与经典的液相色

谱没有本质的差别，它的特点是采用了高压输液泵、高灵敏度检测器和高效微粒固定相，适于

分析高沸点不易挥发、分子量大、不同极性的有机化合物。

高效液相色谱系统主要由流动相储液瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录仪组成，其整体

组成类似于气相色谱，但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。高效液相色谱的输液泵要求

输液量恒定平稳，进样系统要求进样便利、切换严密。同时，由于液体流动相黏度远远高于气体，

为了减低柱压，高效液相色谱的色谱柱一般比较粗，长度也远小于气相色谱柱。

❺ 高效液相色谱分析法的原理是什么

它是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入待测样品，由流动相带入柱内，在柱内各成分被分离后，依次进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。

❻ 液相色谱工作原理

系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来高效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统，下面将分别叙述其各自的组成与特点。
1．进样系统
液相色谱仪
一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作，进样量是恒定的。这对提高分析样品的重复性是有益的。
2．输液系统
该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。高压泵的一般压强为l．47～4．4X10Pa，流速可调且稳定，当高压流动相通过层析柱时，可降低样品在柱中的扩散效应，可加快其在柱中的移动速度，这对提高分辨率、回收样品、保持样品的生物活性等都是有利的。流动相贮存器和梯度仪，可使流动相随固定相和样品的性质而改变，包括改变洗脱液的极性、离子强度、PH值，或改用竞争性抑制剂或变性剂等。这就可使各种物质（即使仅有一个基团的差别或是同分异构体）都能获得有效分离。
3.分离系统
该系统包括色谱柱、连接管和恒温器等。色谱柱一般长度为10～50cm（需要两根连用时，可在二者之间加一连接管），内径为2～5mm，由"优质不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金等材料制成，住内装有直径为5～10μm粒度的固定相（由基质和固定液构成）．固定相中的基质是由机械强度高的树脂或硅胶构成，它们都有惰性（如硅胶表面的硅酸基因基本已除去）、多孔性（孔径可达1000?）和比表面积大的特点，加之其表面经过机械涂渍（与气相色谱中固定相的制备一样），或者用化学法偶联各种基因（如磷酸基、季胺基、羟甲基、苯基、氨基或各种长度碳链的烷基等）或配体的有机化合物。因此，这类固定相对结构不同的物质有良好的选择性。例如，在多孔性硅胶表面偶联豌豆凝集素（PSA）后，就可以把成纤维细胞中的一种糖蛋白分离出来。 另外，固定相基质粒小，柱床极易达到均匀、致密状态，极易降低涡流扩散效应。基质粒度小，微孔浅，样品在微孔区内传质短。这些对缩小谱带宽度、提高分辨率是有益的。根据柱效理论分析，基质粒度小，塔板理论数N就越大。这也进一步证明基质粒度小，会提高分辨率的道理。 再者，高效液相色谱的恒温器可使温度从室温调到60C，通过改善传质速度，缩短分析时间，就可增加层析柱的效率。
液相色谱仪常见故障处理
1、气泡溢出
流动相内有气泡,关闭泵,打开泄压阀,打开purg键,清洗脱气,气泡不断从过滤器冒出,进入流动相,无论打开purge键几次,都无法清除不断产生的气泡。原因过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内,过滤器内部由于霉菌的生长繁殖,形成菌团,阻塞了过滤器,缓冲液难以流畅地通过过滤器,空气在泵的压力作用下经过滤器进入流动相。处理过滤器浸泡于5%硝酸溶液中,超声清洗几分钟即可;亦可将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中12～36小时,轻轻震荡几次,再将过滤器用纯水清洗几次,打开泄压阀,打开purge键清洗脱气,如仍有气泡不断从过滤器冒出,继续将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中,如没有气泡不断从过滤器中冒出,说明过滤器内部的霉菌菌团已被硝酸破坏,流动相可以流畅地通过过滤器。打开泄压阀,打开泵,流速调至1.0～3.0ml/min,纯水冲洗过滤器1小时左右。即可将过滤器清洗干净。关闭泄压阀,纯甲醇冲洗半小时即可。
2、柱压高原因
(1)缓冲液盐分如(乙酸铵等)沉积于柱内; (2)样品污染沉积。处理对于第一种情况先用40～50℃的纯水,低速正向冲洗柱子,待柱压逐渐下降后,相应提高流速冲洗,柱压大幅度下降后,用常温纯水冲洗,之后用纯甲醇冲洗柱子30分钟;对于第二种情况,由样品的沉积引起污染的C18柱,和纯水反向冲洗柱子,然后换成甲醇冲洗,接着用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定),再用换成甲醇冲洗,然后用纯水冲洗,最后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。
3、既无压力指示,又无液体流过
(1)泵密封垫圈磨损; (2)大量气泡进入泵体。处理对于第一种情况,更换密封垫圈;对于第二种情况,在泵作用的同时,用一个50ml的玻璃针筒在泵的出口处帮助抽出空气。
4、压力波动大,流量不稳定
原因系统中有空气或者单向阀的宝石球和阀座之间夹有异物,使得两者不能密封。处理工作中注意观察流动相的量,保证不锈钢滤器沉入储液器瓶底,避免吸入空气,流动相要充分脱气。如为单向阀和阀座之间夹有异物,拆下单向阀,放入盛有丙酮的烧杯用超声波清洗。
5、出峰不佳,峰分叉
(1)色谱柱被污染; (2)柱头填料塌陷。处理对于第一种情况,先用纯水反向冲洗柱子,然后换成甲醇冲洗,接着用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定),再换成甲醇冲洗,然后用纯水冲洗,最后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。如冲洗后依然出峰不佳,则考虑第二种情况。对于第二种情况,拧开柱头,检查柱填料是否硬结或塌陷。去除硬结部分(污染的填料),装入新填料,滴一滴甲醇,填料下陷,再填,用与柱内径相同的顶端平滑的不锈钢杆压紧,再填平,滴甲醇,再压紧反复几次,直至装满填平。柱头用甲醇冲洗干净,擦净柱外壁的填料,拧紧柱头,用纯甲醇冲洗30分钟以上。
6、峰面积重复性不佳
(1)进样阀漏液; (2)加样针不到位。 (3)液量不足. 处理对于第一种情况更换进样阀垫圈;对于第二种情况保证加样针插到底,注射样品溶液后须快速、平稳地从LOAD状态转换到INJECT状态,以保证进样量的准确。日常工作中,液相色谱仪的保养非常重要,如要注意不要让空气进入输液系统和高压泵中,储液器内的溶液如长时间未用应清洗储液器并更换溶液,每次用完色谱仪后缓冲液要用纯水冲洗干净,防止无机盐析出或沉积;样品的前处理也很重要,任何样品都要尽可能地去除杂质,完全溶解,尽量减少对色谱柱的污染,以延长色谱柱的使用寿命,同时避免注射过浓的样品溶液,以免残留液在进样阀内析出固体引起堵塞;色谱柱作好标记,用于不同分析目的的色谱柱不要混用等。