c浓度检测方法

A. 测定维生素C注射液的含量还有哪些方法

维生素C注射液—维生素C测定—中和滴定法
应用范围：
本方法采用滴定法测定维生素C注射液中维生素C的含量。
本方法适用于维生素C注射液。
方法原理：
供试品加新沸过的冷水与稀醋酸使溶解，加淀粉指示液，立即用碘滴定液（0.05mol/L）滴定，至溶液显蓝色并在30秒内不褪，读出碘滴定液使用量，计算维生素C的含量。

B. 维生素c含量的直接碘量法测定，维生素c含量怎么计算

一、测量试剂

1、I2溶液（0.05mol/L）：3.3g I2和5g KI，置于研钵中加少量水，在通风橱中研磨。待I2全部溶解后，将溶液转入棕色试剂瓶，加水稀释至250L，摇匀，放置暗处保存。

2、Na2S2O3标准溶液(0.01mol/L)，淀粉溶液（5%）。

3、HAc(1+1) 固体Vc样品（维生素片剂） 重铬酸钾(A.R)。

二、测量步骤：

1、I2的标定 用移液管移取25.00 ml Na2S2O3标准溶液于250ml锥形瓶中，加50ml蒸馏水，5ml 0.5%淀粉溶液，然后用I2溶液滴定至溶液呈浅蓝色，30s内不褪色即为终点。平行三次，计算I2溶液的浓度。

2、维生素C的测定 准确称取约0.2g研成粉末的维生素C药片，置于250ml锥形瓶中，加入100ml新煮沸过并冷却的蒸馏水，立即用I2标准溶液滴定至出现稳定的浅蓝色，30s 内不褪色即为终点，记下I2溶液体积。平行三次，计算式样中维生素C的百分量。

(2)c浓度检测方法扩展阅读：

维生素C又称抗坏血酸Vc，分子式C6H8O6。Vc具有还原性，可被I2定量氧化，因而可用I2标准溶液直接测定。其滴定反应式：C6H8O6＋I2= C6H6O6＋2HI

用直接碘量法可测定药片，注射液，饮料，蔬菜，水果等的V含量。

I2微溶于水而易溶于KI溶液，但在稀的KI溶液中溶解得很慢，所以配制I2溶液时不能过早加水稀释，应先将I2和KI混合，用少量水充分研磨，溶解完全后再加水稀释。

I与KI间存在如下平衡：I2＋I－ =I3－

游离I2容易挥发损失，这是影响碘溶液稳定性的原因之一。因此溶液中应维持适当过量的I－离子 ，以减少I2的挥发。空气能氧化I－离子，引起I2浓度增加：4 I－＋O2＋4H＋ =2I2＋2H2O

此氧化作用缓慢，但能为光，热，及酸的作用而加速，因此I2溶液应处于棕色瓶中置冷暗处保存。I2能缓慢腐蚀橡胶和其他有机物，所以I应避免与这类物质接触。

I2 溶液的标定用Na2S2O3标定。而Na2S2O3一般含有少量杂质，在PH=9-10间稳定，所以在Na2S2O3溶液中加入少量的Na2CO3，Na2S2O3见光易分解可用棕色瓶储于暗处，经8-14天，用K2C2O7做基准物间接碘量法标定Na2S2O3溶液的浓度。其过程为：K2C2O7与KI先反应析出I2：析出的I2再用标准的Na2S2O3溶液滴定：从而求得Na2S2O3的浓度。这个标定Na2S2O3的方法为间接碘量法。

1、碘量法的基本反应式：

2S2O32－＋I2=S4O62－＋2I－

2、标定Na2S2O3溶液时有：

6I－＋Cr2O72－＋14H＋=2Cr3＋＋3I2＋7H2O 2S2O32－＋I2=S4O62－＋2I－

3、Na2S2O3标定时有:

n(K2C2O7): 6n(Na2S2O3)=1:6

由于Vc的还原性很强，较容易被溶液和空气中的氧氧化，在碱性介质中这种氧化作用更强，因此滴定宜在酸性介质中进行，以减少副反应的发生。考虑到I2在强酸性中也易被氧化，故一般选在PH为3-4的弱酸性溶液中进行滴定。

参考资料来源：网络--碘量法

C. 维生素C的滴定方法

维生素C测定就是对维生素C的测定。在测定维生素C的国标方法中，荧光法为测定食物中维生素C含量的第一标准方法，2、4－二硝基苯肼法作为第二法。
1 适用范围
本标准适用于果品、蔬菜及其加工制品中还原型抗坏血酸的测定(不含二价铁、二价
锡、一价铜、二氧化硫、亚硫酸盐或硫代硫酸盐),不适用于深色样品。
2 测定原理
染料2,6－二氯靛酚的颜色反应表现两种特性,一是取决于其氧化还原状态,氧化态
为深蓝色,还原态变为无色;二是受其介质的酸度影响,在碱性溶液中呈深蓝色,在酸性介
质中呈浅红色。
用蓝色的碱性染料标准溶液,对含维生素 C的酸性浸出液进行氧化还原滴定,染料被
还原为无色,当到达滴定终点时,多余的染料在酸性介质中则表现为浅红色,由染料用量
计算样品中还原型抗坏血酸的含量。
3 仪器设备
a. 高速组织捣碎机:8000～12000r/min。
b. 分析天平。
c. 滴定管:25ml、10ml。
d. 容量瓶:100ml。
e. 锥形瓶:100ml、50ml。
f. 吸管:10ml、5ml、2ml、1ml。
g. 烧杯:250ml、50ml。
h. 漏斗。
4 试剂(凡未加说明者均为分析纯)
4.1 浸提剂
4.1.1 偏磷酸:2%溶液(W/V)* ,
4.1.2 草酸:2%溶液(W/V)。
4.2 抗坏血酸标准溶液(1mg/ml):称取 100mg(准确至 0.1mg)抗坏血酸**,溶于浸提剂
中并稀至100ml。现配现用。
——————————
* 偏磷酸不稳定,切勿加热。
** 一般抗坏血酸纯度为99.5%以上,可不标定。如试剂发黄,则弃去不用。若要检查其
纯度,可按附录B方法标定。
4.3 2,6－二氯靛酚(2,6－二氯靛酚吲哚酚钠盐)溶液:称取碳酸氢钠 52mg溶解在200ml
热蒸馏水中,然后称取 2,6－二氯靛酚 50mg溶解在上述碳酸氢钠溶液中。冷却定容至
250ml,过滤至棕色瓶内,保存在冰箱中。每次使用前,用标准抗坏血酸标定其滴定度。即
吸取1ml抗坏血酸标准溶液于50ml锥形瓶中,加入10ml浸提剂,摇匀,用2 ,6－二氯靛酚溶
液滴定至溶液呈粉红色15s不褪色为止。同时,另取 10ml浸提剂做空白试验。
滴定度按式(1)计算:
C·V
滴定度 T(mg/ml)＝—————………………………… (1)
V1－V2
式中: T——每毫升2,6－二氯靛酚溶液相当于抗坏血酸的毫克数;
C——抗坏血酸的浓度,mg/ml;
V——吸取抗坏血酸的体积, ml;
V1——滴定抗坏血酸溶液所用 2,6－二氯靛酚溶液的体积,ml;
V2——滴定空白所用2,6－二氯靛酚溶液的体积,ml。
4.4 白陶土(或称高岭土),对维生素C无吸附性。
5 测定步骤
5.1 样液制备:称取具有代表性样品的可食部分100g,放入组织捣碎机中,加 100ml浸
提剂,迅速捣成匀浆。称 10～40g浆状样品,用浸提剂将样品移入 100ml容量瓶,并稀释
至刻度,摇匀过滤。若滤液有色,可按每克样品加 0.4g白陶土脱色后再过滤。
5.2 滴定:吸取10ml滤液放入50ml锥形瓶中,用已标定过的 2,6－二氯靛酚溶液滴定,
直至溶液呈粉红色 15s不褪色为止。同时做空白试验。
6 结果计算
6.1 计算公式:
维生素 C按式(2)计算:
(V－V0)·T·A
维生素C(mg/100g)＝————————-×100 …………………(2)
W
式中: V——滴定样液时消耗染料溶液的体积,ml;
V0——滴定空白时消耗染料溶液的体积,ml;
T——2,6－二氯靛酚染料滴定度,mg/ml;
A——稀释倍数;
W——样品重量,g。
6.2 平行测定的结果,用算术平均值表示,取三位有效数字,含量低的保留小数点后两
位数字。
6.3 平行测定结果的相对相差,在维生素C含量大于 20mg/100g时,不得超过 2%,小于
20mg/100g时,不得超过 5%。
附 录 A
二甲苯－二氯靛酚比色法
(补充法)
A.1 适用范围
测定深色样品中还原型抗坏血酸。
A.2 测定原理
用定量的 2,6－二氯靛酚染料与试样中的维生素 C进行氧化还原反应,多余的染料
在酸性环境中呈红色,用二甲苯萃取后比色,在一定范围内,吸光度与染料浓度呈线性相
关,收剩余染料浓度用差减法计算维生素 C含量。
A.3 仪器设备
A.3.1 分光光度计或比色计。
A.3.2 具塞试管:50ml。
A.4 试剂(皆为分析纯)
A.4.1 偏磷酸:2%溶液(W/V)。
A.4.2 乙酸钠缓冲溶液(pH4.0):500ml50%(W/V)的乙酸钠溶液与 500ml冰乙酸混合。
A.4.3 2,6－二氯靛酚溶液:参照 4.3条。
A.4.4 二甲苯。
A.5 测定步骤
A.5.1 标准曲线的绘制:用6只50ml具塞试管加入5ml2%偏磷酸和5mlpH4.0的乙酸钠缓
冲液,然后依次加入0.0 ,0.1,0.3,0.6,0.9,1.2及 1.5ml 2,6－二氯靛酚溶液,用
力摇动5s,再向各试管中加入10ml二甲苯,再激烈摇动20s,静置分层后与试样管同时比色
(无染料的试液作空白),以吸光度为纵坐标,2,6－二氯靛酚的毫升数为横坐标绘制标
准曲线。
A.5.2 吸取5ml2%偏磷酸样品浸出液(参照5.1条)于50ml具塞试管中,加5mlpH4.0的
乙酸钠缓冲液和2ml染料溶液,激烈摇动5s,立即加入10ml二甲苯,再激烈摇动20s,待静
置分层后,从二甲苯层中小心吸取一份,放入1cm比色杯中于500nm波长下进行比色。记
录吸光度A,在标准曲线上查出二甲苯层中 2,6－二氯靛酚的毫升数。整个操作应在30
min内完成。
A.6 计算公式
(2－V)·T·A
维生素 C(mg/100g)＝——————×100
W
式中: 2——所用 2,6－二氯靛酚染料的体积,ml ;
V——查得 2,6－二氯靛酚溶液的体积,ml;
A——稀释倍数;
T——染料滴定度,mg/ml;
W——样品重量,g。
附 录 B
抗坏血酸纯度检验法
(补充件)
B.1 称取100mg(准确至0.1mg)抗坏血酸待测样品,用 2%偏磷酸或 2%草酸溶液溶解稀
释至 100ml。
B.2 吸取抗坏血酸溶液1ml于盛 10ml 2%偏磷酸或2%草酸溶液的锥形瓶中,加入6%碘
化钾溶液 0.5ml和1%淀粉溶液五滴,摇匀。用 1.67×10**－4M碘酸钾标准溶液滴定,
终点为极淡蓝色。
B.3 计算公式
B.3.1 抗坏血酸浓度按式(B1)计算:
V1×0.088
抗坏血酸浓度＝—————— ……………………………… (B1)
V2
式中: V1——滴定时消耗1.67×10**－4 M碘酸钾标准溶液的体积,ml;
V2——所取抗坏血酸溶液的体积,ml;
0.088——1 ml 1.67×10**－4 M碘酸钾溶液相当于抗坏血酸的重量,mg;
B.3.2 抗坏血酸纯度(%)按式(B2)计算:
C·V
抗坏血酸纯度(%)＝———×100 ……………………………(B2)
W
式中: C——所标定抗坏血酸的浓度,mg/ml;
V——抗坏血酸溶液总体积,ml;
W——抗坏血酸重量,mg。

D. 测定维生素c的含量的方法还有哪些

雨滴计算通过网络搜索的

维生素C不同的测定方法

目前研究维生素C测定方法的报道较多,有关维生素C的测定方法如荧光法、2，6-二氯靛酚滴定法、2，4-二硝基苯肼法、光度分析法、化学发光法、电化学分析法及色谱法等,各种方法对实际样品的测定均有满意的效果.

E. 怎样用化学试剂检测维生素C的浓度

一般都可以用：配置Vc溶液（1片/L) 用KMnO4/H+滴定 溶液显浅红色 滴定完成 计算浓度 含量
KMnO4/H+先标定

F. 测定vc有哪几种方法,每种方法的使用范围

维生素C不同的测定方法

目前研究维生素C测定方法的报道较多,有关维生素C的测定方法如荧光法、2，6-二氯靛酚滴定法、2，4-二硝基苯肼法、光度分析法、化学发光法、电化学分析法及色谱法等,各种方法对实际样品的测定均有满意的效果.

为了解国内VC含量测定方法及其应用方面的现状及发展态势.方法以"维生素C或抗坏血酸和测定"为检索词对1994～2002年中国期刊网全文数据库(CNKI)中的理工A、B和医药卫生专辑进行篇名检索,对所得有关维生素C含量测定的文献数据分别以年代、作者区域、载刊等级、样品类型、测定方法等进行计量分析.结果核心期刊载刊文献占文献总量的45.06％,其中光度法占65.69％,电化法占18.63％,色谱法占12.75％;复杂被测样品文献占文献总量的45.06％,其中光度法占60.92％,色谱法占19.54％,电化法占10.34％.结论目前国内维生素C含量测定仍以光度法为主流,但近年来色谱法,特别是HPLC法上升趋势尤为明显.

一．荧光法

1．原理

样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后，与邻苯二胺（OPDA）反应生成具有荧光的喹喔啉（quinoxaline）,其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。

脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与OPDA反应，以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰。本方法的最小检出限为0.022 g/ml。

2．适用范围

本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定

3. 注意事项

3.1 大多数植物组织内含有一种能破坏抗坏血酸的氧化酶，因此，抗坏血酸的测定应采用新鲜样品并尽快用偏磷酸-醋酸提取液将样品制成匀浆以保存维生C。

3.2 某些果胶含量高的样品不易过滤，可采用抽滤的方法，也可先离心，再取上清液过滤。

3.3活性炭可将抗坏血酸氧化为脱氢抗坏血酸，但它也有吸附抗坏血酸的作用，故活性炭用量应适当与准确，所以，应用天平称量。我们的实验结果证明，用2g活性炭能使测定样品中还原型抗坏血酸完全氧化为脱氢型，其吸附影响不明显。

二、2，6-二氯靛酚滴定法（还原型VC）

1、原理：

还原型抗坏血酸还原染料2，6-二氯靛酚，该染料在酸性中呈红色，被还原后红色消失。还原型抗坏血酸还原2，6-二氯靛酚后，本身被氧化成脱氢抗坏血酸。在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准2，6-二氯靛酚的量与样品中所含维生素C的量成正比。本法用于测定还原型抗坏血酸，总抗坏血酸的量常用2，4-二硝基苯肼法和荧光分光光度法测定。

2、注意事项

⑴ 所有试剂的配制最好都用重蒸馏水；

⑵ 滴定时，可同时吸二个样品。一个滴定，另一个作为观察颜色变化的参考；

⑶ 样品进入实验室后，应浸泡在已知量的2%草酸液中，以防氧化，损失维生素C；

⑷ 贮存过久的罐头食品，可能含有大量的低铁离子（Fe2+），要用8%的醋酸代替2%草酸。这时如用草酸，低铁离子可以还原2，6-二氯靛酚，使测定数字增高，使用醋酸可以避免这种情况的发生；

⑸ 整个操作过程中要迅速，避免还原型抗坏血酸被氧化；

⑹ 在处理各种样品时，如遇有泡沫产生，可加入数滴辛醇消除；

⑺ 测定样液时，需做空白对照，样液滴定体积扣除空白体积。

3优点：它具有简便、快速、比较准确等优点，适用于许多不同类型样品的分析。缺点是不能直接测定样品中的脱氢抗坏血酸及结合抗坏血酸的含量，易受其他还原物质的干扰。如果样品中含有色素类物质，将给滴定终点的观察造成困难。在酸性环境中，抗坏血酸（还原型）能将染料2,6—DCIP还原成无色的还原型2,6—DCIP，而抗坏血酸则被氧化成脱氢抗坏血酸。氧化型2,6—DCIP在中性或碱性溶液中呈蓝色，但在酸性溶液中则呈粉红色。因此，当用2,6—DICP滴定含有抗坏血酸的酸性溶液时，在抗坏血酸未被全部氧化前，滴下的2,6—DCIP 立即被还原成无色，一旦溶液中的抗坏血酸全部被氧化时，则滴下微量过剩的2,6—DCIP 便立即使溶液显示淡粉红色或微红色，此时即为滴定终点，表示溶液中的抗坏血酸刚刚全部被氧化。依据滴定时2,6—DCIP 标准溶液的消耗量 (ml)，可以计算出被测样品中抗坏血酸的含量。氧化型2,6—DCIP与还原型抗坏血酸常在稀草酸或偏磷酸溶液中进行反应。即先将样品溶于一定浓度的酸性溶液中或经抽提后，再用2,6—DCIP标准溶液滴定至终点。

食物和生物材料中常含有其他还原物质，其中有些还原物质可使2,6—DCIP还原脱色。为了消除这些还原物质对定量测定的干扰，可用抗坏血酸氧化酶处理，破坏样品中还原型抗坏血酸后，再用2,6—DCIP 滴定样品中其他还原物质。然后从滴定未经酶处理样品时2,6—DCIP标准溶液的总消耗量中，减去滴定非抗坏血酸还原物质2,6—DCIP 标准溶液的消耗量，即为滴定抗坏血酸实际所消耗的2,6—DCIP标准溶液的体积，由此可以计算出样品中抗坏血酸的含量。另外，还可利用抗坏血酸和其他还原物质与2,6—DCIP反应速度的差别，并通过控制样品溶液在pH1 — 3 范围内，进行快速滴定，可以消除或减少其他还原物质的作用，一般在这样的条件下，干扰物质与2,6—DCIP的反应是很慢的或受到抑制。生物体液（如血液、尿等）中的抗坏血酸的测定比较困难，因为这些样品中抗坏血酸的含量很低，并且存在许多还原物质的干扰，同时还必须预先进行脱蛋白处理。在生物体液中含有巯其、亚硫酸盐及硫代硫酸盐等物质，它们都能与DCIP反应，但反应速度比抗坏血酸慢得多。样品中巯基物质对定量测定的干扰，通常可以藉加入对—氯汞苯甲酸(简称PCMB)而得到消除。

三、2，4-二硝基苯肼法

1．原理

总抗坏血酸包括还原型、脱氢型和二酮古乐糖酸。样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化为脱氢抗坏血酸，再与2，4-二硝基苯肼作用生成红色脎，脎的含量与总抗坏血酸含量成正比，进行比色测定。

2．适用范围

本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定。

这是脎比色法，单独评价是因为目前它作为Vc测定的国标法之一，是一种全量测定法，它跟以前的苯肼法原理相近。首先将样品中的还原型V氧化为脱氢型V，然后与2，4—二硝基苯肼作用，生成红色的脎，将脎溶于硫酸后进行比色。最近国标中该法强调空白，每个样品及标准系列均需作对应空白，这样消除色泽、背景不一的误差。在实际杨梅汁Vc测定中，操作时间长，操作要求较严格，试剂较多，就一般实验室而言是目前可以采用的方法。

四 碘量法

1、维生素C的原理

维生素C包括氧化型、还原型和二酮古乐糖酸三种。当用碘滴定维生素C时，所滴定的碘被维生素C还原为碘离子。随着滴定过程中维生素C全被氧化，所滴入的碘将以碘分子形式出现。碘分子可以使含指示剂（淀粉）的溶液产生蓝色，即为滴定终点。

2、注意事项

（1）看到红棕色出现时要放慢滴定的速度。

（2）以显蓝色在30s内不褪色为滴定终点。

五L-抗坏血酸(维生素C)测定试剂盒（酶学方法）

1.应用于食品，饮料及生物制品检测

2.比色方法

此方法用于检测水果和蔬菜（如马铃薯），水果和蔬菜产品（如西红柿酱、泡菜、果酱、果汁），婴儿食品，啤酒，饮料，流食，粉状和烘烤剂，肉产品，奶制品，葡萄酒，还有动物饲料，医药品（如维生素配制、阵痛药、退烧药）和生物样品中的L-抗坏血酸(维生素C)，

3.分析物

L-抗坏血酸不定量的分布于动物和植物中。人类不能自身生产L-抗坏血酸，因此必须由外源(vitamin C)提供。一般情况下来源于水果和蔬菜中，出于技术原因，L-抗坏血酸曾被用于食品工业中的抗氧化剂。它是一种相对敏感的物质，L-抗坏血酸的检测非常适用于从原始水果和蔬菜中加工食品的质量评定。

L-抗坏血酸用于医药品生产中的组成部分，如维生素产品和阵痛药，另外，它还用于动物饲料添加剂中。

4.原理

L-抗坏血酸 (x-H2) + MTT+ PMS—> dehydroascorbate (x) + MTT-formazan + H+X

L-抗坏血酸 + ½ O2 AAO——> dehydroascorbate + H2OX

5.特异性

在给定的条件下，此方法特别针对于L-抗坏血酸。合成的D-阿拉伯抗坏血酸/阿拉伯糖型抗坏血酸能作为抗氧化剂，也能反应，但反应速度较慢。

6.灵敏度

测定灵敏度为0.005个吸光度单位，样品体积为1.600ml，此相当于0.1mg/l样品溶液中的L-抗坏血酸浓度。0.015个吸光度单位的差异能造成0.3 mg/l检测限，样品最大体积为1.600 ml.。

7.线性

测定的线性范围为0.5 ugL-抗坏血酸（0.3mgL-抗坏血酸/l样品溶液体积为1.600ml）到20 ugL-抗坏血酸（0.2gL-抗坏血酸/l样品溶液体积为0.100ml）

8.精密度

在用一个样品做重复实验时，可能会产生0.005-0.010个吸光度单位的差异。标准的相对偏差（变异系数）大约为1-3%。当分析检测数据时，要考虑到L-抗坏血酸的水溶液稳定性较差，尤其是重金属离子或氧存在时。

9.干扰及错误来源

粮食的成分不经常干扰实验。高浓度的酒精和D-山梨酸醇能降低反应速度，大量的亚硫酸盐必须通过添加甲醛来去除。醋酸抑制酶AAO。金属和 亚硫酸盐离子可以导致L-抗坏血酸的自发分解。

10.试剂盒包括内容

1.磷酸盐/柠檬酸缓冲液 ———— pH值大约3.5；MTT

2.AAO（坑坏血酸-氧化酶）—— 每板约17 U AAO

3. PMS 溶液

六．磷钼蓝分光光度法测定维生素C

基于在一定的反应条件下，维生素C可以定量地将磷钼酸锭还原成磷钼蓝，提出了一种新的测定维生素C的分光光度法。该方法很方便、快速地测定生物、药物等试样中的维生素C，准确度和重复性均达到令人满意的程度。

1 适用范围

本标准适用于果品、蔬菜及其加工制品中还原型抗坏血酸的测定(不含二价铁、二价锡、一价铜、二氧化硫、亚硫酸盐或硫代硫酸盐),不适用于深色样品。

2 测定原理

染料2,6－二氯靛酚的颜色反应表现两种特性,一是取决于其氧化还原状态,氧化态为深蓝色,还原态变为无色;二是受其介质的酸度影响,在碱性溶液中呈深蓝色,在酸性介质中呈浅红色。

用蓝色的碱性染料标准溶液,对含维生素 C的酸性浸出液进行氧化还原滴定,染料被还原为无色,当到达滴定终点时,多余的染料在酸性介质中则表现为浅红色,由染料用量计算样品中还原型抗坏血酸的含量。

七.二甲苯－二氯靛酚比色法

1 适用范围

测定深色样品中还原型抗坏血酸。

2 测定原理

用定量的 2,6－二氯靛酚染料与试样中的维生素 C进行氧化还原反应,多余的染料在酸性环境中呈红色,用二甲苯萃取后比色,在一定范围内,吸光度与染料浓度呈线性相关,收剩余染料浓度用差减法计算维生素 C含量。

八.近红外漫反射光谱分析法(NIRDRSA)

自1965年首次应用于复杂农业样品分析后，因其具 有样品处理简单、分析速度快等优点，逐渐受到分析界的重视。此法已广泛应用于石油、纺 织、农业、食品、药物分析等领域[1，2]。在药物分析中，NIRDRSA可以进行定性 鉴别、定量分析等工作。

维生素C是一种不稳定的二烯醇化合物，其药典[3]含量测定方法为碘量法。我 们采用近红外漫反射光谱技术直接测定维生素C含量，样品无需预处理，方法简便，结果可 靠。

这是因为，近红外谱区光的频率与有机分子中C-H，O-H，N-H等振动的合频与各级倍频的 频率一致，因此通过有机物的近红外光谱可以取得分子中C-H，O-H，N-H的特征振动信息 。由于近红外光谱的谱带较宽，谱图重叠严重，不能用特征峰等简单方法分析，需要运用计 算机技术与化学计量学方法。本实验应用的是偏最小二乘法(PLS)[4]，首先利用 定标集建立预测模型，然后将预测集作为未知样本，根据预测模型进行预测。

对所选择的谱区范围，采用对反射吸光度的MSC(散射校正)预处理，对25个样品进行交叉 验证，即选择一个样品，从校正集中除去该样品对应的光谱和浓度数据，并设光谱主成分数 为1，循环迭代样品数和主成分数，计算预测残差平方和,确定所需主成分数。若主成分选择 过小，会丢失样品信息，过大会造成过度拟合。当主因子为2时，预测残差平方和值最小， 为2.029，故选择主因子数为2，建立最佳PLS校正数学模型。

九 电位滴定法

1.原理：根据滴定过程中电池电动势的变化来确定反应终点.

Pt为指示电极，甘汞作参比电极

E池＝E+-E-+E液接电位＝EI2/I-+k(常数)

2.原理(具体来说:)

随着滴定剂的加入，由于发生化学反应，待测离子浓度将不断变化；从而指示电极电位发生相应变化；导致电池电动势发生相应变化；计量点附近离子浓度发生突变；引起电位的突变，因此由测量工作电池电动势的变化就能确定终点。

3.计算式：(与碘量法相同) Wvc=C(I2)V(I2)M(vc)/m(vc ) *100%

4.优点：

解决了滴定分析中遇到有色或浑浊溶液时无法指示终点的问题

用线性电位滴定法分析抗坏血酸,抗坏血酸回收率为99.80％～101.5％,相对标准偏差为0.61％;分析维生素C片中的抗坏血酸,相当标示量为98.90％～100.5％,相对标准偏差不大于0.48％,说明线性电位滴定法分析维生素C片中的抗坏血酸含量是可行的.

十 .分光光度法

1. 原理：

维生素C在空气中尤其在碱性介质中极易被氧化成脱氢抗坏血酸，pH>5,脱氢抗坏血酸内环开裂，形成二酮古洛糖酸。脱氢抗坏血酸，二酮古洛糖酸均能和2，4－二硝基苯肼生成可溶于硫酸的脎

脎在500nm波长有最大吸收

根据样品溶液吸光度，由工作曲线查出VC的浓度，即可求出VC的含量

十一 库仑滴定法

1.原理：库仑滴定法属于恒电流库仑分析。

是在特定的电解液中，以电极反应产物为滴定剂（电生滴定剂，相当于化学滴定中的标准浓液）与待测物质定量作用，借助指示剂或电位法确定滴定终点。

2.基本依据－－法拉第电解定律：电解时，电极上发身化学反应的物质质量与通过电解池的电量Q成正比

即： m=MQ/zF = MI t /zF

3..化学反应：阴极反应： 2H+2e-=H2 阳极反应： 2I-=I2+2e-

4.终点指示：多种方法

(1)化学指示剂－－I2

(2)电位法

(3)双铂极电流指示法

5.计算式：Wvc=MvcQ/zFm样式中： F--- 法拉第常数（96487C）

Z---电极反应中转移的电子数注意：使电解效率100％

6.优点：

1）无需标准化的试剂溶液，免去了大量的标准物质的准备工作（配制，标定）

2）只需要一个高质量的供电器，计时器，小铂丝电极，且易于实现自动化控制

3）若电流维持一个定值，可大大缩短了电解时间

4）电量容易控制及准确测量；方法灵敏度，准确度较高

5）滴定剂来自电解时的电极产物，可实现容量分析中不易实现的滴定过程，如Cu＋,Br2,Cl2产生后立即与待测物反应。

7.缺点(难点)：

要求电解过程没有副反应和漏电现象，即使电解电极上只进行生成滴定剂的反应，且电流的效率是100％

8.注：电流效率＝i样÷i总＝ i样÷（ i样＋ i容＋i杂）

因为：实际电解过程中存在影响电流效率的因素，如，杂质，溶剂，电极自身在电极上的反应等

十二 紫外快速测定法

原理

维生素C的2，6—二氯酚靛酚容量法，操作步骤较繁琐，而且受其它还原性物质、样品色素颜色和测定时间的影响。紫外快速测定法，是根据维生素C具有对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性，于243nm处测定样品液与碱处理样品液两者消光值之差，通过查标准曲线，即可计算样品中维生素C的含量。

十三 光电比浊法的原理

原理

在酸性介质中,抗坏铁酸与亚硒酸(H2SeO3)能定量地进行氧化还原反应.1mol的抗铁酸能将2mol的亚硒酸还原成硒.在一定条件下,生成的元素硒在溶液中形成稳定的悬浊液.当抗铁酸的浓度在0-4mg/25-50ml的范围内,该溶液生成的浊度与抗坏铁酸的含量成正比.将试液置分光光度计上测其浊度可以定量地测定抗坏铁酸.

十四荧光分析法的原理

原理

用酸洗活性炭将抗坏铁酸氧化为顺式脱氢抗坏铁酸,然后与邻苯二胺缩合成一种荧光性化合物.样品中其它荧光杂质的干扰可以通过向氧化后的样品中加入硼酸,使脱氢抗坏铁酸形成 硼酸脱氢抗坏铁酸的络合物,它不与邻二苯胺生成荧光化合物.这样可以测定其它荧光杂质的空白荧光强度而加以校正

十五 原子吸收间接测定法

原理

这是最近报导的一种Vc测定法，其原理是在酸性介质中还原型Vc可将Cu2+定量地还原为Cu+并与SCN—反应生成CuSCN沉淀，在高速离心机下有效地分离出沉淀，小心洗涤后再经浓硝酸溶解，用原子吸收法测定铜含量，即可推知样品中维生素C的含量。该法实验仪器较昂贵，主要问题是操作过程中反应完全与否，沉淀物洗涤、离心反复多次，极容易带来误差。该法优点是能不受果蔬自身颜色的干扰，有一定的发展前景。根据试验，发现此法结果偏低，还有待于进一步优化改善。

十六．金纳米微粒分光光度法测定维生素C的方法

本发明公开了一种用金纳米微粒分光光度法测定维生素C的方法。于5mL比色管中，依次加入0．1－2．0mL浓度为95．64μg／mL的HAuCl↓［4］溶液，0．02－0．50mL浓度为1％的柠檬酸三钠溶液，再加入0．001－2．0mL浓度为0．38mg／mL的维生素C溶液，混匀，加二次蒸馏水定容至刻度，再充分混匀，在分光光度计上，于520nm处测定吸收值，同时作空白试验。本发明测定方法简单、快捷，所用仪器价廉，试剂易得

十七 L-半胱氨酸修饰电极测定维生素C的方法

研究了L-半胱氨酸修饰电极的制备方法和其电化学行为，并用于维生素C的测定，发现该电极对VC有明显的电催化作用，在pH=10.0的NH4Cl-NH3·H2O缓冲溶液中，VC在L-半胱氨酸修饰电极上产生一灵敏的氧化峰，峰电流与VC的浓度在1.0×10-3~1.0×10-6mol/L的范围内呈良好的线形关系，相关系数为0.9962，其最低检测限可达1.0×10-6mol/L，与紫外光谱法测定的结果一致。

测定维生素C有多种方法，包括采用I2或二氯靛酚（DPI）进行氧化还原滴定。一般来说，滴定法是一种快速、简便、准确的技术，它通过滴定剂和被滴定物质的等当量反应，精确测定被测物质的含量。DPI对于维生素C具有良好的选择性，是一种理想的氧化剂。

十八 梅特勒-托利多仪器法

传统的滴定法是手工滴定，根据指示剂颜色的变化确定终点，通过测量滴定剂的消耗量，计算被测物质的含量。手工滴定有很多不足：手工控制误差较大，计算复杂，针对不同的反应需要特殊指示剂。梅特勒-托利多的自动电位滴定仪解决了这一问题，通过测量滴定反应中电位的变化确定终点，全自动操作、计算，测量快速，结果准确。梅特勒-托利多的滴定仪配有记忆卡软件包，存储有成熟滴定方法，可方便快速解决实际应用问题，并且稍作改动就能作为新的测定的实验方法。

除此之外，还有双光束剩余染料差减比色法，2_6_二氯靛酚钠动力学分光光度法、聚中性红修饰电极方法、示波溴量法、流动注射化学发光抑制法、磷钼钨杂多酸作显色剂快速检测方法、溶氧测定装置测定水果蔬菜中抗坏血酸含量的方法等。在此不做介绍。

G. 维生素c含量的测定的方法有哪些各有什么优缺点

测定维生素c有多种方法，包括采用i2或二氯靛酚
（dpi）进行氧化还原滴定。一般来说，滴定法是一种快速、
简便、准确的技术，它通过滴定剂和被滴定物质的等当量反
应，精确测定被测物质的含量。dpi对于维生素c具有良好的
选择性，是一种理想的氧化剂。
传统的滴定法是手工滴定，根据指示剂颜色的变化确定
终点，通过测量滴定剂的消耗量，计算被测物质的含量。手
工滴定有很多不足：手工控制误差较大，计算复杂，针对不
同的反应需要特殊指示剂。梅特勒-托利多的自动电位滴定仪
解决了这一问题，通过测量滴定反应中电位的变化确定终
点，全自动操作、计算，测量快速，结果准确。梅特勒-托利
多的滴定仪配有记忆卡软件包，存储有成熟滴定方法，可方
便快速解决实际应用问题，并且稍作改动就能作为新的测定
的实验方法。

H. 急需维生素C片含量测定方法,以及测定各步骤解析,为什么,原理

1.维生素C片中维生素C含量的测定方法有：碘量法、紫外分光光度法、比色法、薄层扫描法、差示旋光法和HPLC法2.一简单方法：间接碘量法测定维生素C的含量：（1）测定原理：在弱酸性条件下，维生素C与碘发生氧化还原反应，过量的碘用硫代硫酸钠标准液滴定。有关反应方程式：（2）仪器和试剂：
电子天平:感量0.0001g、0.04mol·L-1(16K2Cr2O7)标准溶液、0.04mol·L-1(12I2)标准溶液;0.04mol·
L-1Na2S2O3标准溶液。
（3）测定步骤：
准确称取0.2g左右样品于碘量瓶中，加新煮沸并冷却的蒸馏水50mL、冰醋酸5mL溶解。准确移取50.00mL碘标准液于碘量瓶中，充分摇匀。然后用Na2S2O3标准液滴定剩余的碘，滴定至溶液呈浅黄色后，加入2mL0.5%淀粉溶液，继续滴定至蓝色刚好消失。记录滴定消耗的体积为根据滴定所消耗体积按以下公式计算： 用间接碘量法测定维生素C药片的含量，不需对样品进行前处理，具有操作简便、精密度好、准确度高等优点。
希望有所帮助，谢谢

I. 怎样测定果实中的维生素C（2，6-二氯靛酚滴定法）

答：维生素C又称抗坏血酸，它在动植物的新陈代谢方面起着重要作用，因为它是调节植物体细胞氧化还原过程的重要因子之一，缺乏时有机体的新陈代谢就会遭到破坏。维生素C是果实中特有的，并且有的果实中含量很高。如100克猕猴桃鲜果中高达700～1100毫克，100克鲜枣中约有350～600毫克；而柑橘仅含有55～66毫克，苹果5～48毫克，梨3～17毫克。通常情况下，随着果实的成熟，维生素C的含量达到最高。但是一采收，活性很快降低，贮藏过程中下降更快，不耐贮藏的品种更为明显。冷藏使维生素C的破坏更严重。由于维生素C极易氧化，因此它的测定应在当天进行。
（1）方法原理
抗坏血酸（Vc）结构中有烯二醇结构存在，因此具有还原性，能将蓝色染料2，6-二氯靛酚还原为无色的化合物，Vc则被氧化为脱氢Vc。2，6-二氯靛酚具有酸碱指示及氧化还原指示的两种特性；其在碱性介质中呈深蓝色，而在酸性介质中呈浅红色（变色范围pH4～5），其于氧化态时呈深蓝色（碱性介质中）或浅红色（酸性介质中），还原态时为无色。据此特性，用蓝色染料碱性的标准溶液滴定果实样品酸性浸出液中Vc到刚变浅红色为终点，用染料的用量即可计算Vc的含量。滴定终点的红色是刚过量的未被还原的（氧化型）染料溶液在酸性介质中的颜色。
通常测定Vc的浸提和滴定都是在2%草酸溶液中进行的，目的是保持反应时一定的酸度，避免Vc在pH高时易被氧化。此染料不致氧化待测液中非Vc的还原性物质，所以对Vc测定有较好的选择性。
（2）试剂配制
①2%草酸溶液：称取20克草酸（化学纯）溶于水中，稀释至1000毫升，贮于避光处。
②6%碘化钾（KI）溶液。
③1%淀粉指示剂。
④0.001摩尔/升碘酸钾（KIO3）溶液：称取1.784克在105℃下烘过24小时的碘酸钾（优级纯）溶于水，定容至500毫升，此为0.1000摩尔/升碘酸钾标准溶液。使用时将此贮备标准液用煮沸并冷却的水稀释100倍，即成0.001摩尔/升的KIO3标准液。大约每星期应重新配制一次。
⑤Vc标准溶液：称取20.0毫克Vc（分析纯），溶于2%草酸溶液，并用2%草酸溶液稀释至100毫升，此液约含Vc0.2毫克/毫升，置于冰箱中保存。临用前当天进行标定。
Vc的标定：吸取Vc液5毫升于50毫升三角瓶中，加入2%草酸溶液10毫升，6%KI溶液0.5毫升，1%淀粉溶液5滴，用0.001摩尔/升 KIO3标准液滴定至溶液突变为浅蓝色为止（应耗用0.001摩尔/升 KIO3标准液约为11毫升），计算Vc的准确浓度：
Vc溶液的浓度（毫克/毫升）＝N×V1×88/V2
式中：N——所用KIO3标准溶液的摩尔浓度；
V1——所用KIO3溶液的量（毫升）；
V2——所用Vc 溶液的量（毫升）；
88——Vc的毫摩尔质量（毫克）。
⑥2，6-二氯靛酚溶液：称取50毫克2，6-二氯靛酚钠（分析纯）溶于约200毫升含有52毫升的NaHCO3（分析纯）温水（＜40℃）中冷却后加水至250毫升。贮存于棕色瓶中，置于冰箱中保存。使用前待溶液恢复至室温后，用Vc标液标定其准确浓度，并计算其滴定度。在冰箱中贮存时，每周须标定一次。
标定方法：吸取5毫升已标定的Vc标液（含Vc约1毫克）于50毫升三角瓶中，加入2%草酸溶液10毫升，摇匀，用2，6-二氯靛酚溶液滴定至溶液呈浅红色，约在15秒内不褪色为止（应用染料溶液约10毫升），计算每毫升染料溶液相当于Vc的毫克数，即滴定度T（应约为0.1毫克Vc/毫升）：
T＝（C×V1）/V2
式中：C——所用Vc标准液的浓度（毫克/毫升）；
V1——所用Vc标准液的量（毫升）；
V2——所用2，6-二氯靛酚标准溶液的量（毫升）。
（3）样品的测定
①样品处理：选取新鲜果实样品10～15个，洗净擦干，每个果实取中部纵横剖面各一薄片，用不锈钢刀迅速切碎，称取样品50.0～100.0克鲜样，将样品打成浆状。处理样品的过程应在10分钟内完成，以免还原性Vc在空气中曝露太久而被氧化。用小烧杯称取20～40克匀浆状样品（实际样品重为其重的1/2，应含还原性Vc1～5毫克）洗入100毫升容量瓶中，用2%草酸溶液定容（若有泡沫可在定容前加2滴辛醇除去）。过虑，若滤液色深，影响滴定终点的判定时，可加1～2勺白陶土（须测定其对Vc的回收率）脱色，过滤后再滴定。若样液不易过虑，可用离心机分离。对于色泽较浓的山楂等样品尚无合适的脱色方法，可用2%草酸稀释10倍再进行滴定。
对于多汁果实样品，如葡萄、柑橘等，可以直接压汁后量取10～20毫升汁液（含Vc1～5克），立即用2%草酸溶液定容至100毫升。对于干样品，可直接称取1.0000～4.0000克（含Vc1～5克范围）放入研钵中，加入2%草酸溶液研磨成浆液，洗入100毫升容量瓶中，用2%草酸溶液定容。含有还原性物质的样品如含有较多Fe2+，可用8%醋酸溶液代替2%草酸溶液为浸提剂。
②样品的测定：用吸管吸取以上制取的无色滤液5.00～10.00毫升（使含Vc约0.2～1克范围），放入50毫升三角瓶中，用棕色半微量滴定管中装的2，6-二氯靛酚标准溶液滴定至呈浅红色，约在15秒内不褪色为终点。同时做试剂空白试验，即取与待测液等量的2%草酸代替样品液，用2，6-二氯靛酚标准溶液滴定。此空白值通常不得超过0.08～0.10毫升。
（4）结果计算
维生素C（毫克/100克样品）＝（V-V0）×T×取用量倍数×100/W
式中：V——滴定样品滤液消耗的2，6-二氯靛酚标准溶液的量（毫升）；
V0——空白试验所用2，6-二氯靛酚标准溶液的量（毫升）；
T——2，6-二氯靛酚的滴定度，即1毫升此液所相当于还原型抗坏血酸的毫克数；
W——测定时样液中样品重量（克）；
取用倍数——样品定容体积与测定体积之比。
（5）注意事项
①偏磷酸是Vc最佳稳定剂，且具有沉淀蛋白质的作用，但其价格较贵，而且在室温下放置易转化为正磷酸盐，降低对Vc的稳定性，草酸廉价易得，有与偏磷酸相近的稳定性。而醋酸适于浸提含有Fe2+的样品。
②处理样品时应先加入草酸，可阻止氧化酶氧化Vc，而增加其在提取液中的稳定性。草酸溶液不应置于日光下，以免产生过氧化物。当有催化剂（如有金属离子Cu2+）存在时过氧化物能破坏Vc。
③2，6-二氯靛酚呈氧化型时有色，还原型时无色，固体试剂有时含有分解产物，染料溶液长期贮存后也会生成分解产物，从而使滴定终点不敏锐。因此须在使用前检查。检查方法：取15毫升染料液加入过量的Vc溶液，若还原后的溶液带有颜色，表示此染料溶液已不能使用。

J. 测定维生素C含量有哪些方法各有什么优缺点

测定维生素C有多种方法，包括采用I2或二氯靛酚
（DPI）进行氧化还原滴定。一般来说，滴定法是一种快速、
简便、准确的技术，它通过滴定剂和被滴定物质的等当量反
应，精确测定被测物质的含量。DPI对于维生素C具有良好的
选择性，是一种理想的氧化剂。

传统的滴定法是手工滴定，根据指示剂颜色的变化确定
终点，通过测量滴定剂的消耗量，计算被测物质的含量。手
工滴定有很多不足：手工控制误差较大，计算复杂，针对不
同的反应需要特殊指示剂。梅特勒-托利多的自动电位滴定仪
解决了这一问题，通过测量滴定反应中电位的变化确定终
点，全自动操作、计算，测量快速，结果准确。梅特勒-托利
多的滴定仪配有记忆卡软件包，存储有成熟滴定方法，可方
便快速解决实际应用问题，并且稍作改动就能作为新的测定
的实验方法。