生物常用滅菌方法的過程

A. 微生物實驗室常用的滅菌方法有哪些

常用的滅菌方法主要包括以下三種：乾熱滅菌；濕熱滅菌；紫外滅菌
1.乾熱滅菌法
1.1灼燒與火焰滅菌：灼燒主要用於接種工具滅菌,在火焰上灼燒即可達滅菌目的,火焰滅菌通常用於無菌操作中試管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等實驗物品的滅菌,防止管口污染。
1.2干烤滅菌：利用熱輻射及乾熱空氣進行滅菌.將待檢滅菌的物品如金屬、玻璃、陶瓷製品包裝後,在烤箱內加熱至160℃,保溫2h可完全滅菌.但不宜超過170℃.此外降溫過速,驟冷易引起玻璃器皿炸裂.乾熱滅菌時裝入干烤箱內的物品切勿緊密,應有空隙,利於熱空氣流動,過密,致使溫度不均,部分物品滅菌不徹底.
2.濕熱滅菌法
通過加壓提高蒸汽溫度,用高壓蒸汽滅菌,溫度高,滅菌效果最好.
注意事項：1.完全排除高壓滅菌器內的冷空氣.有冷空氣存在時,在同一表壓下所達到的溫度值要低,而冷空氣排出越少,溫度就低得越多.在高壓蒸汽滅菌時,為保證達到規定的溫度,必須將冷空氣完全排除.否則,雖然壓力達到,而溫度達不到規定的要求,滅菌就不徹底.
3.紫外線
殺菌譜廣,但穿透力弱,影響因素多,殺菌效能受到一定限制.
紫外線消毒效果與紫外線強度、照射時間、溫度與濕度等因素有關.紫外燈殺菌的溫度以20~40℃,相對濕度40%~60%為宜.

B. 微生物學實驗常用的滅菌方法有哪些

一般分為濕熱滅菌法和乾熱滅菌法兩種。

一、濕熱滅菌法是指用飽和水蒸氣、沸水或流通蒸汽進行滅菌的方法，由於蒸汽潛熱大，穿透力強，容易使蛋白質變性或凝固，所以該法的滅菌效率比乾熱滅菌法高，是最常用的滅菌方法。濕熱滅菌法可分為：煮沸滅菌法、巴氏消毒法、高壓蒸汽滅菌法、流通蒸汽滅菌法、和間歇蒸汽滅菌法。

（1）煮沸滅菌法：將水煮沸至100攝氏度，保持5-10分鍾可殺死細菌繁殖體，保持1-3小時可殺死芽胞。在水中加入百分之一至百分之二的碳酸氫鈉時沸點可達105攝氏度，能增強殺菌作用，還可去污防銹。此法適用於食具、刀箭、載玻片及注射器等。

（2）巴氏消毒法：一種低溫消毒法，因巴斯德首創而得名。有兩種具體方法，一是低溫維持法：62攝氏度維持30分鍾；二是高溫瞬時法：75攝氏度作用15-30秒。該法適用於食品的消毒。

（3）流通蒸氣滅菌法：利用常壓下的流通蒸汽進行滅菌。

（4）間歇蒸汽滅菌法

（5）高壓蒸汽滅菌法：103.4千帕蒸汽壓溫度達121.3攝氏度，維持15-20分鍾。

二、乾熱滅菌法是指在乾燥環境（如火焰或乾熱空氣）進行滅菌的技術。一般有火焰滅菌法和乾熱空氣滅菌法。

（1）火焰滅菌法：是指用火焰直接燒灼的滅菌方法。該方法滅菌迅速、可靠、簡便，適合於耐火焰材料（如金屬、玻璃及瓷器等）物品與用具的滅菌，不適合葯品的滅菌。

（2）乾熱空氣滅菌法：是指用高溫乾熱空氣滅菌的方法。該法適用於耐高溫的玻璃和金屬製品以及不允許濕熱氣體穿透的油脂（如油性軟膏機制、注射用油等）和耐高溫的粉末化學葯品的滅菌，不適合橡膠、塑料及大部分葯品的滅菌。

C. 微生物的幾種滅菌方法

不過由於中國的原奶質量差，所以許多企業的巴氏滅菌法都採用85-90度，甚至更高，以殺滅原奶中的大量微生物群落。這兩年還出現了所謂的「超巴」滅菌的工藝

D. 滅菌的方法有哪些

在瞬息萬變的生活環境里，我們無時無刻不受到數以億計的病菌的侵襲。人類為了保衛自身的健康，在體內和體外一直與病菌進行著無聲激戰。在保衛人體的外圍戰中，人們根據不同需要採用了不同的方法來擊退病菌的侵犯，滅菌、消毒和防腐，就是三種常用而程度不同的斗爭方法。

滅菌，是在一定范圍內消滅物體上所有微生物的方法。醫院里對手術器械通常採用間歇滅菌法，即把器械煮沸30分鍾，在20—37℃的恆溫環境中放置一天，這樣，某些沒有殺死的微生物芽孢會誤以為危險期已過，「放心大膽」地進行繁殖，這時再蒸煮殺菌，連續反復幾次，手術器械便可以達到完全沒有微生物的要求。高壓蒸汽和乾熱空氣兩種方法都可以用於滅菌，不過由於多數微生物的耐乾熱性較強，所以高壓蒸汽滅菌一般僅需在121℃溫度、30分鍾的條件下即可達目的，而乾熱空氣滅菌的條件則為140℃、4小時。除此之外，太陽光中的紅外線可以使微生物細胞中的水分大量蒸發，紫外線又能使微生物細胞中的核酸分子發生變化，所以常曬衣服和被褥是一種廉價的滅菌方法。

消毒，是不徹底的滅菌方法。因為在許多場合下不需要把微生物全部殺死，只要消毒就可以了。例如手上碰破了一塊皮，可以擦些紫葯水或紅葯水；打針的時候，大夫先用碘酒、後用酒精給皮膚消毒，這些都是為了達到局部滅菌的目的。在使用消毒葯水時，千萬不要把紅葯水和碘酒同時擦到皮膚上，以免引起中毒。巴斯德經過多次實驗確認：把鮮牛奶加熱到71℃，持續15分鍾，即可以消滅其中的結核桿菌和傷寒桿菌，又不致於損壞牛奶的營養價值和風味。在這之後，人們普遍地使用這種方法保存牛奶。這就是有名的巴氏消毒法。

依靠各種手段抑制某些微生物生長繁殖的過程，叫做防腐。人們經常把多餘的魚肉、蔬菜和水果或曬干，或鹽腌，或製成蜜餞，這是因為微生物的繁殖需要一定的水分，而經過處理的食物不含或只含極少量的水分，從而鏟除了滋生微生物的「溫床」，起到了保存食物的作用。微生物的生長還受溫度的影響，一般細菌在30—37℃、黴菌在25—28℃生長最旺盛，如果降低溫度便可以減弱微生物的生命活動，或者使它們處於休眠狀態，因此人們利用冰箱、冰庫來貯藏肉、蛋。但是冷藏僅僅是為了防腐，達不到滅菌和消毒的作用，所以冷藏食物需要有時間限制，一旦超過了冷藏期，微生物適應了低溫環境，會從休眠中「醒來」，導致食物變質。肉類一般在低溫下可以保存一年左右，蛋類的保存期更長一些。

時至今日，人們找到了並且還在繼續尋找戰勝有害微生物的有利武器。

E. 請闡述常用的滅菌方法

加熱滅菌法

加熱可破壞微生物中酶、蛋白質和核酸，導致微生物死亡。加熱滅菌又分乾熱滅菌法和濕熱滅菌法。在同一溫度下，濕熱滅菌的效果比乾熱滅菌好。主要是因濕熱滅菌時，有水分存在，蛋白質容易變性。水分又易使微生物膜壁潤濕，濕熱的穿透力比乾熱大。

乾熱滅菌法 常用的有火焰滅菌法與乾熱空氣滅菌法兩種。

紫外線滅菌法

是指用紫外線照射殺滅微生物的方法。一般用於滅菌的紫外線波長是200~300nm，滅菌力最強的波長是253.7nm。紫外線作用於核酸蛋白促使其變性，同時空氣受紫外線照射後產生微量臭氧，從而起共同殺菌作用。紫外線進行直線傳播，可被不同的表面反射，穿透力微弱，但較易穿透清潔空氣及純凈的水。因此本法適用於照射物體表面之滅菌、無菌室的空氣及水的滅菌；不適用於葯液的滅菌、固體物質深部的滅菌；普通玻璃可吸收紫外線，因此裝於玻璃容器中的葯物不能用此法滅菌。紫外線對人體照射過久，會發生結膜炎，紅斑及皮膚燒灼等現象，故一般在人入室前開啟紫外線燈1~2小時，關閉後人才進入潔凈室。如果必須在人進去後仍要開紫外線滅菌，則人的皮膚及眼睛應有有效的防護措施。一般在6~15m3的空間可裝置30瓦紫外線燈一盞，離地面2.5~3m為宜。

用紫外線照射滅菌時要注意下列問題：

1、紫外線的殺菌力，隨使用時間增加而減退，一般使用時間達到額定時間70%時應更換紫外線燈管，以保證殺菌效果。國產紫外線燈平均壽命一般為2000h。
2、紫外線的殺菌作用隨菌種不同而不同，殺黴菌的照射量要比殺桿菌大40~50倍。

3、紫外線照射通常按相對濕度為60%的基礎設計，室內濕度增加時，照射量應相應增加。

4、紫外線滅菌效果與照射的時間長短有關，這需要通過驗證來確定照射時間。
5、紫外照射燈的安裝形式及高度，應根據實際情況,參考使用說明決定。滅菌方法的驗證採用生物指示劑挑戰試驗，生物指示劑多用枯草芽孢桿菌。

微波滅菌法

微波是指頻率在30~3000MHz之間的電磁波。水可強烈地吸收微波，使其極性分子轉動，分子間的磨擦而生熱，且升溫迅速，靠熱力而滅菌。在數十秒至幾分鍾之內可達100～150℃，並全部殺死液體中的微生物，適於水溶性注射液的滅菌。另外，固體葯材飲片及固體制劑（丸劑、散劑、膠囊粉等）也含少量水分，微波能穿透到固體內部，由表至里被均勻加熱，而起乾燥、滅菌的作用。多用於口服液體制劑的滅菌，有望用於注射液的滅菌。但可能對某些葯品的PH值、含量、顏色有影響。

輻射滅菌法

輻射滅菌是應用γ射線、β射線殺滅細菌的方法，又稱電離輻射，前者由鈷-60或銫-137發出，穿透力強；後者由電子加速器產生，帶電荷，穿透力弱，滅菌效果差。

化學滅菌法

化學滅菌法系指用化學葯品來殺滅微生物的方法。同一種化學葯品的低濃度時呈現抑菌作用，而在高濃度時則能起殺菌作用。其殺菌機理可能是：能使微生物蛋白質變性死亡，或與酶系統結合影響代謝，或改變膜壁通透性使微生物死亡等。常用的方法有消毒劑消毒法和化學氣體滅菌法等。

消毒劑消毒法

消毒是指殺死病原微生物的方法。但化學消毒劑大多僅能殺死微生物的繁殖體而不能殺死芽孢，能控制一定范圍的無菌狀態。可將消毒劑配成適宜濃度，採用噴淋、塗擦或浸泡等方法對物料、環境、器具等進行消毒。常用的化學消毒劑有0.1%～0.2%苯扎溴銨溶液、3%～5%的酚或煤酚皂溶液、75%乙醇等。常用於物體表面滅菌。但要注意其濃度不要過高，以防止化學腐蝕作用。潔凈室的牆面、天花板、門窗、機器設備、儀器、操作台、車、桌、椅等表面以及人體雙手（手套）在環境驗證及日常生產時，應定期清潔並用消毒劑噴灑，無菌室用的消毒劑必須在層流工作台中，用0.22μm的濾膜過濾後方能使用。

化學氣體滅菌法

系指利用化學葯品的氣體或產生的蒸汽進行殺滅微生物的方法。

1.環氧乙烷滅菌法

環氧乙烷滅菌法是利用環氧乙烷氣體進行殺菌的方法。它是一種傳統的滅菌方法，可應用於工衣滅菌、不耐加熱滅菌的葯品、醫用器具、設施、設備等的滅菌。

環氧乙烷滅菌系統，主要有下列四項互相制約的重要因素影響滅菌效果：
1、溫度；2、濕度；3、氣體濃度；4、滅菌時間。因為環氧乙烷是易燃易爆物質，明火可以引起燃燒，同時由於氣體分解還可能引起爆炸，環氧乙烷滅菌中應十分注意安全問題。

2.甲醛等蒸汽熏蒸法

採用甲醛、丙二醇或過氧醋酸等化學品，通過加熱產生蒸汽進行空氣環境滅菌。
(1)、計算房間體積，按10g/m3的比例稱出甲醛。
(2)、將甲醛倒入甲醛發生器或加熱盤或燒杯中，並放好加濕用水，必要時還需加入高錳酸鉀（2~3g/m3），然後加熱（甲醛發生器用蒸汽加熱，加熱盤或燒杯用熱水盛入其中加熱）使其蒸發成氣體。
(3)、滅菌流程：空調器停止運轉→啟動甲醛氣體發生器或在加熱盤中加熱甲醛 →讓甲醛氣體擴散約30分鍾→啟動空調器讓甲醛氣體循環約30分鍾→停止空調器，房間熏蒸消毒，時間不少於8小時→ 房間排氣，用新鮮空氣置換約2小時→ 恢復正常運行。當相對濕度在65%以上，溫度在24~40℃時，甲醛氣體的消毒效果最好。

3、臭氧消毒法

臭氧（O3）的消毒原理是：臭氧在常溫、常壓下分子結構不穩定，很快自行分解成氧（O2）和單個氧原子（O），後者具有很強的活性，對細菌有極強的氧化作用，臭氧氧化分解了細菌內部氧化葡萄糖所必須的酶，從而破壞其細胞膜，將其殺死。多餘的氧原子則會自行重新結合成為普遍氧分子（O2），不存在任何有害殘留物，故稱為無污染消毒劑。它不但對種種細菌（包括肝炎病毒、大腸桿菌、綠膿桿菌及雜菌等）有極強的殺滅能力，而且對黴菌也很有效。

F. 微生物學實驗室常用的滅菌方法有哪些

主要包括以下三種：乾熱滅菌；濕熱滅菌；紫外滅菌
1.乾熱滅菌法
1.1灼燒與火焰滅菌：灼燒主要用於接種工具滅菌,在火焰上灼燒即可達滅菌目的,火焰滅菌通常用於無菌操作中試管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等實驗物品的滅菌,防止管口污染。
1.2干烤滅菌：利用熱輻射及乾熱空氣進行滅菌.將待檢滅菌的物品如金屬、玻璃、陶瓷製品包裝後,在烤箱內加熱至160℃,保溫2h可完全滅菌.但不宜超過170℃.此外降溫過速,驟冷易引起玻璃器皿炸裂.乾熱滅菌時裝入干烤箱內的物品切勿緊密,應有空隙,利於熱空氣流動,過密,致使溫度不均,部分物品滅菌不徹底.
2.濕熱滅菌法
通過加壓提高蒸汽溫度,用高壓蒸汽滅菌,溫度高,滅菌效果最好.
注意事項：1.完全排除高壓滅菌器內的冷空氣.有冷空氣存在時,在同一表壓下所達到的溫度值要低,而冷空氣排出越少,溫度就低得越多.在高壓蒸汽滅菌時,為保證達到規定的溫度,必須將冷空氣完全排除.否則,雖然壓力達到,而溫度達不到規定的要求,滅菌就不徹底.
3.紫外線
殺菌譜廣,但穿透力弱,影響因素多,殺菌效能受到一定限制.
紫外線消毒效果與紫外線強度、照射時間、溫度與濕度等因素有關.紫外燈殺菌的溫度以20~40℃,相對濕度40%~60%為宜.

G. 常見的滅菌方法

常用的滅菌法：

1.高壓蒸氣法：應用最普遍，效果亦很可靠。高壓蒸氣滅菌法用於能耐高溫的物品，如金屬器械、玻璃、搪瓷、敷料、橡膠製品等;

2.煮沸法：適用於金屬器械、玻璃製品及橡膠類等物品;3.火燒法：適用於金屬器械;

3.葯液浸泡法：適用於銳利器械、內鏡和腹腔鏡等不適於熱力滅菌的器械;

4.甲醛蒸氣熏蒸法：適用於金屬器械、玻璃、搪瓷及各種導管。

H. 什麼叫滅菌滅菌方法有哪幾種

滅菌是指採用強烈的理化因素使任何物體內外部的一切微生物永遠喪失其生長繁殖能力的措施。

滅菌常用的方法有化學試劑滅菌、射線滅菌、乾熱滅菌、濕熱滅菌和過濾除菌等。滅菌的徹底程度受滅菌時間與滅菌劑強度的制約。微生物對滅菌劑的抵抗力取決於原始存在的群體密度、菌種或環境賦予菌種的抵抗力。滅菌是獲得純培養的必要條件，也是食品工業和醫葯領域中必需的技術。

方法的選擇

根據物品污染後導致感染的風險高低選擇相應的消毒或滅菌方法：

1）高危險度物品，應採用滅菌的方法處理；

2）中危險度物品，應採用達到中水平消毒以上效果的消毒方法；

3）低危險度物品，宜採用低水平消毒方法，或做清潔處理；遇有病原微生物污染時，針對所污染的病原微生物種類選擇有效的消毒方法

根據物品上污染微生物的種類、數量選擇消毒或滅菌的方法：

1) 對收到致病菌芽孢、真菌孢子、分枝桿菌和經學傳播病原體污染的物品，應採用高水平消毒或滅菌；

2）對受到真菌、親水病毒、螺旋體、支原體、衣原體等病原微生物污染的物品，應採取中水平以上的消毒方法；

3）對受到一般細菌和親脂病毒等污染的物品，應採用達到中水平或低水平的消毒方法。