艱難棱菌檢測方法選擇

① xpert檢測是什麼pcr方法

xpert檢測是GeneXpert實時熒光定量PCR快速檢測。

目的對GeneXpert實時熒光定量聚合酶鏈反應(PCR)在快速檢測臨床糞便標本中艱難梭菌的應用進行評估。

方法採用雙拭子蘸取臨床未成形糞便標本,一支拭子用於GeneXpert實時熒光定量PCR檢測艱難梭菌毒素基因tcdB,另一支用於常規厭氧菌培養檢測;

對GeneXpert實時熒光定量PCR檢測結果與常規厭氧菌培養結果的一致性進行統計學分析,並計算GeneXpert實時熒光定量PCR的敏感性、特異性、陽性預測值和陰性預測值等參數。

結果臨床收集到141例未成形糞便標本,GeneXpert實時熒光定量PCR檢出艱難梭菌毒素基因tcdB陽性42例，其中常規厭氧菌培養陽性34例，兩者一致性較好(Kappa=0.775 0,P0.01)。

GeneXpert實時熒光定量PCR的敏感性、特異性、陽性預測值和陰性預測值分別為87.2%、92.2%、81.0%和94.9%。

結論 GeneXpert實時熒光定量PCR直接檢測糞便標本中的艱難梭菌具有檢測快速、操作簡便等優點,有重要的臨床應用價值。

(1)艱難棱菌檢測方法選擇擴展閱讀

PCR的每個循環過程包括高溫變性、低溫退火、中溫延伸三個不同的事件：

1、變性：加熱使模板DNA在高溫下（94℃左右）雙鏈間的氫鍵斷裂而形成兩條單鏈；

2、退火；使溶液溫度降至50~60℃，模板DNA與引物按鹼基配對原則互補結合；

3、延伸：溶液反應溫度升至72℃，耐熱DNA聚合酶以單鏈DNA為模板，在引物的引導下，利用反應混合物中的4種脫氧核苷三磷酸（dNTP），按5'一3』方向復制出互補DNA。