北京市河源市食品維生素檢測方法

1. 怎麼檢查食品中是否含維生素c

碘能澱粉溶液變藍，在檢測食品中是否含維生素C時，我們向樣品中滴加加碘的澱粉溶液，如果藍色褪去，說明食品中含有維生素C，如果沒有褪色，說明食品中不含維生素C．
故答案為：藍．

2. 食品中維生素d 測定

簡要描述： 高效液相色譜法 1. 原理 樣品中脂溶性維生素在皂化過程中與脂肪分離，以石油醚萃取後，用正相色譜柱提取富集，用反相色譜柱，紫外檢測器定量測定。 2. 適用范圍 ...高效液相色譜法
1. 原理
樣品中脂溶性維生素在皂化過程中與脂肪分離，以石油醚萃取後，用正相色譜柱提取富集，用反相色譜柱，紫外檢測器定量測定。
2. 適用范圍
本方法來源於GB/T 5413.9-1997。適用於嬰幼兒配方食品和乳粉維生素A、維生素D、維生素E的測定；也適用於食品或強經食品及飼料中的維生素D含量的測定。
3. 主要儀器
1) 高壓液相色譜儀，具有可變波長的紫外檢測器，數據處理系統或記錄儀。
2) 旋轉蒸發器。
3) 平底燒瓶：250mL。
4) 分液漏斗：500mL。
4. 試劑
所有試劑，如未註明規格，均指分析純，所實驗用水均指蒸餾水。
1) 異丙醇：色譜純。
2) 2％焦性沒食子酸乙醇溶液：取2g焦性沒食子酸溶液於100mL無水乙醇中。
3) 75％氫氧化鉀溶液：取75g氫氧化鉀溶於100mL水中。
4) 石油醚：沸程30～60℃。
5) 甲醇：色譜純。
6) 正己烷：色譜純。
7) 環己烷:色譜醇。
8) 維生素D標准溶液
A. 維生素D2標准貯備液：含維生素D2100mg/ml的甲醇溶液。稱取10mg的維生素D2，用甲醇定容於100mL容量瓶中。
B. 維生素D3的標准貯備液：含維生素D3100mg/ml的甲醇溶液。稱取10mg的維生素D3，用甲醇定容於100mL容量瓶中。
5. 操作步驟
5.1樣品處理：准確稱取10g樣品，於250mL平底燒瓶中，加30mL蒸餾水。
5.2測定液的制備：
1) 於上述樣品溶液中加入100mL的20％沒食子酸乙醇溶液，充分混勻後加50mL75％氫氧化鉀溶液，在蒸汽浴上邊續迴流30min後，立刻冷卻到室溫。
2) 將皂化液轉入一500mL分液漏斗中，用100mL水分幾次沖平底燒瓶。洗滌液並入分液漏斗中。
3) 於上述分液漏斗中，加入100mL石油醚，蓋好瓶塞，倒置分液漏斗並劇烈振搖1 min.在振搖過程中，注意釋放瓶內壓力。靜置分層，將水相放入另一500mL分液漏斗中，重復上棕萃取過程2次，合並醚液到第一個分液漏斗中。用蒸餾水洗該醚液至中性，通過無水硫酸鈉過濾乾燥，在40℃和氮氣流下，於旋轉蒸發器上蒸至近於（絕不允許蒸干）後，用石油醚轉移至10mL容量瓶中，定容。
4) 從上述容量瓶中取7mL放入一試管中，用氮氣將石油醚吹乾，於試管中加1mL正己烷。
5.3測定：
1) 測定液的制備：
A) 儀器條件：
色譜柱：30cm×40cm，硅膠柱。
流動相：正己烷與環己烷按體積比1：1混合，並按體積分數0.8％加入異丙醇。
流速：1mL/min。
波長：265nm。
柱溫：20℃。
靈敏度：0.005AU/MV。
注射體積：200mL。
B) 注射50mL維生素D標樣和200mL樣品溶液，根據維生素D標樣保留時間收集維生素D於試管中，將試管用氮氣吹乾，准確加入0.2mL甲醇溶解。
2) 測定步驟：
A) 儀器條件：
色譜柱：4.6mm×25cm，C18或具同等性能的色譜柱。
流動相：甲醇。
流速：1mL/min。
波長：265nm。
柱溫：20℃。
靈敏度：0.005AU/MV。
注射體積：50mL。
B) 注射50mL維生素D標准溶液，注射50mL樣品溶液，得到標樣和樣品溶液中維生素D峰面積或峰高。
6. 計算
ρs×10∕7×40×100
X =
m
As
ρs= ---×ρsd
Asd
式中： X--樣品維生素D的量，mg/100g；
m--稱樣量，含量，IU∕100g；
ρs --進樣液中維生素D有濃度，mg/mL；
A s --進樣液中維生素D有峰高（或峰面積）；
A s d --標樣液中維生素D有峰高（或峰面積）；
ρsd --標樣中維生素D的濃度；
計算結果精確至小數點後一位。
7. 注意事項
1) 允許誤差及最小檢出量：同一樣品的2次測定值之差不得超過2次測定平均值的10％；最小檢出量為0.1國標單位。
2) 試劑焦性沒食子酸容易變性，應購習近期生產的試劑。
3) 如果皂化不完全，可適當增加氫氧化鉀的加入量。

3. 食品中維生素d檢測方法

食品中的維生素D的檢測方法很簡單的，只要用一些測量儀和試試劑就可以檢測出胃酸分泌的。

4. 維生素與蛋白質食物怎麼用實驗檢驗

實驗3 食品中維生素C含量的測定（2，6-二氯酚靛酚滴定法）
一、實驗原理
維生素C又稱抗壞血酸，還原型抗壞血酸能還原染料2，6-二氯酚靛酚鈉鹽，本身則
氧化成脫氫抗壞血酸。
2，6-二氯酚靛酚的鈉鹽水溶液呈藍色，在酸性溶液中呈玫瑰紅色，當其被還原時就
變為無色，因此，可用2，6-二氯酚靛酚滴定樣品中的還原型抗壞血酸。當抗壞血酸完全被氧化後，稍多加一點染料，使滴定液呈淡紅色，即為終點。如無其他雜質干擾，樣品提取液所還原的標准染料量與樣品中所含的還原型抗壞血酸量成正比。 二、試劑和器材
偏磷酸醋酸溶液：取15g（用時研細）溶於40mL醋酸及20mL水的混合液中，然後
用水稀釋至500mL，過濾後儲入試劑瓶中。
標准2，6-二氯酚靛酚溶液：取0.25g2，6-二氯酚靛酚溶於700mL蒸餾水中（用力攪
動），加入300mL磷酸緩沖液（預先配製9.078g/L KH2PO4-11.867g/L Na2HPO4·2H2O水溶液，用時以KH2PO4：Na2HPO4·2H2O=4：6的比率將其混合，pH值為6.9-7.0），翌日過濾，濾液儲於棕色瓶中，臨用時，以抗壞血酸溶液標定。
標准維生素C溶液：以少量偏磷酸醋酸溶液溶解0.1g維生素C於100mL容量瓶中，
再以該液稀釋至刻度。
2，6-二氯酚靛酚液的標定：在3個100mL錐形瓶中，各置5mL偏磷酸醋酸液，再
各加2mL標准維生素C溶液，搖勻。用上面所制的標准2，6-二氯酚靛酚液滴定，呈玫瑰紅色保持30s不褪色為止。記下所用2，6-二氯酚靛酚溶液體積平均值，再以同樣方法做一空白實驗，取7mL偏磷酸醋酸液加水若干毫升（相當於以上所用的2，6-二氯酚靛酚溶液的低定量），仍用2，6-二氯酚靛酚溶液滴定。將第一次滴定的量減去空白實驗的量，即為標准維生素的反應量，求出1mL 2，6-二氯酚靛酚對應於維生素C的質量（mg）。 研缽、容量瓶、剪刀、錐形瓶、微量滴定管 三、實驗步驟
1、用自來水沖洗果蔬樣品，再以蒸餾水清洗，用紗布或吸水紙吸干表面水分，然後

var script = document.createElement('script'); script.src = 'http://static.pay..com/resource/chuan/ns.js'; document.body.appendChild(script);

稱取25g，剪碎，在研缽中研呈漿狀。加入20mL 3%偏磷酸醋酸液，攪動，抽提。過濾液經漏斗流入100mL容量瓶中，殘渣再以30mL偏磷酸醋酸液提取3次，濾液及洗滌液皆流入該容量瓶中，以蒸餾水稀釋至刻度，加塞搖勻。如濾液顏色較深，可用白陶土脫色。
2、吸取10mL提取液於錐形瓶中，加5mL偏磷酸醋酸液，混合均勻，以2，6-二氯
酚靛酚溶液滴定，並不斷搖動，至溶液呈玫瑰紅色保持30s不褪色為止。 3、吸取15mL偏磷酸醋酸液，加水若干毫升（相當於以上樣品實驗滴定所用2，6-二氯酚靛酚溶液的量）做一空白實驗，用同樣方法，以2，6-二氯酚靛酚溶液滴定。 4、結果計算
維生素C的含量（mg/100g）按下式計算：
mcvv*100
10
100
**C21）（的含量維生素

式中 v1——樣品用2，6-二氯酚靛酚溶液的滴定體積，mL V2——空白用2，6-二氯酚靛酚溶液的滴定體積，mL C——1 mL 2，6-二氯酚靛酚相當於維生素C的含量，mg/mL m——樣品質量。 四、注意事項
1、樣品中某些雜質也能還原2，6-二氯酚靛酚，但速率均較抗壞血酸慢，故終點以
淡色存在30s為准。
2、維生素C還可以用2%草酸溶液來提取，2%草酸和偏磷酸同樣具有抑制抗壞血酸
氧化酶的功效。
3、若樣品中含有大量Fe2+,可以還原2，6-二氯酚靛酚，用草酸為提取液，則Fe2+不
會很快與染料起作用。

5. 測定vc有哪幾種方法,每種方法的使用范圍

維生素C不同的測定方法

目前研究維生素C測定方法的報道較多,有關維生素C的測定方法如熒光法、2，6-二氯靛酚滴定法、2，4-二硝基苯肼法、光度分析法、化學發光法、電化學分析法及色譜法等,各種方法對實際樣品的測定均有滿意的效果.

為了解國內VC含量測定方法及其應用方面的現狀及發展態勢.方法以"維生素C或抗壞血酸和測定"為檢索詞對1994～2002年中國期刊網全文資料庫(CNKI)中的理工A、B和醫葯衛生專輯進行篇名檢索,對所得有關維生素C含量測定的文獻數據分別以年代、作者區域、載刊等級、樣品類型、測定方法等進行計量分析.結果核心期刊載刊文獻占文獻總量的45.06％,其中光度法佔65.69％,電化法佔18.63％,色譜法佔12.75％;復雜被測樣品文獻占文獻總量的45.06％,其中光度法佔60.92％,色譜法佔19.54％,電化法佔10.34％.結論目前國內維生素C含量測定仍以光度法為主流,但近年來色譜法,特別是HPLC法上升趨勢尤為明顯.

一．熒光法

1．原理

樣品中還原型抗壞血酸經活性炭氧化成脫氫型抗壞血酸後，與鄰苯二胺（OPDA）反應生成具有熒光的喹喔啉（quinoxaline）,其熒光強度與脫氫抗壞血酸的濃度在一定條件下成正比，以此測定食物中抗壞血酸和脫氫抗壞血酸的總量。

脫氫抗壞血酸與硼酸可形成復合物而不與OPDA反應，以此排除樣品中熒光雜質所產生的干擾。本方法的最小檢出限為0.022 g/ml。

2．適用范圍

本方法適用於蔬菜、水果及其製品中總抗壞血酸的測定

3. 注意事項

3.1 大多數植物組織內含有一種能破壞抗壞血酸的氧化酶，因此，抗壞血酸的測定應採用新鮮樣品並盡快用偏磷酸-醋酸提取液將樣品製成勻漿以保存維生C。

3.2 某些果膠含量高的樣品不易過濾，可採用抽濾的方法，也可先離心，再取上清液過濾。

3.3活性炭可將抗壞血酸氧化為脫氫抗壞血酸，但它也有吸附抗壞血酸的作用，故活性炭用量應適當與准確，所以，應用天平稱量。我們的實驗結果證明，用2g活性炭能使測定樣品中還原型抗壞血酸完全氧化為脫氫型，其吸附影響不明顯。

二、2，6-二氯靛酚滴定法（還原型VC）

1、原理：

還原型抗壞血酸還原染料2，6-二氯靛酚，該染料在酸性中呈紅色，被還原後紅色消失。還原型抗壞血酸還原2，6-二氯靛酚後，本身被氧化成脫氫抗壞血酸。在沒有雜質干擾時，一定量的樣品提取液還原標准2，6-二氯靛酚的量與樣品中所含維生素C的量成正比。本法用於測定還原型抗壞血酸，總抗壞血酸的量常用2，4-二硝基苯肼法和熒光分光光度法測定。

2、注意事項

⑴ 所有試劑的配製最好都用重蒸餾水；

⑵ 滴定時，可同時吸二個樣品。一個滴定，另一個作為觀察顏色變化的參考；

⑶ 樣品進入實驗室後，應浸泡在已知量的2%草酸液中，以防氧化，損失維生素C；

⑷ 貯存過久的罐頭食品，可能含有大量的低鐵離子（Fe2+），要用8%的醋酸代替2%草酸。這時如用草酸，低鐵離子可以還原2，6-二氯靛酚，使測定數字增高，使用醋酸可以避免這種情況的發生；

⑸ 整個操作過程中要迅速，避免還原型抗壞血酸被氧化；

⑹ 在處理各種樣品時，如遇有泡沫產生，可加入數滴辛醇消除；

⑺ 測定樣液時，需做空白對照，樣液滴定體積扣除空白體積。

3優點：它具有簡便、快速、比較准確等優點，適用於許多不同類型樣品的分析。缺點是不能直接測定樣品中的脫氫抗壞血酸及結合抗壞血酸的含量，易受其他還原物質的干擾。如果樣品中含有色素類物質，將給滴定終點的觀察造成困難。在酸性環境中，抗壞血酸（還原型）能將染料2,6—DCIP還原成無色的還原型2,6—DCIP，而抗壞血酸則被氧化成脫氫抗壞血酸。氧化型2,6—DCIP在中性或鹼性溶液中呈藍色，但在酸性溶液中則呈粉紅色。因此，當用2,6—DICP滴定含有抗壞血酸的酸性溶液時，在抗壞血酸未被全部氧化前，滴下的2,6—DCIP 立即被還原成無色，一旦溶液中的抗壞血酸全部被氧化時，則滴下微量過剩的2,6—DCIP 便立即使溶液顯示淡粉紅色或微紅色，此時即為滴定終點，表示溶液中的抗壞血酸剛剛全部被氧化。依據滴定時2,6—DCIP 標准溶液的消耗量 (ml)，可以計算出被測樣品中抗壞血酸的含量。氧化型2,6—DCIP與還原型抗壞血酸常在稀草酸或偏磷酸溶液中進行反應。即先將樣品溶於一定濃度的酸性溶液中或經抽提後，再用2,6—DCIP標准溶液滴定至終點。

食物和生物材料中常含有其他還原物質，其中有些還原物質可使2,6—DCIP還原脫色。為了消除這些還原物質對定量測定的干擾，可用抗壞血酸氧化酶處理，破壞樣品中還原型抗壞血酸後，再用2,6—DCIP 滴定樣品中其他還原物質。然後從滴定未經酶處理樣品時2,6—DCIP標准溶液的總消耗量中，減去滴定非抗壞血酸還原物質2,6—DCIP 標准溶液的消耗量，即為滴定抗壞血酸實際所消耗的2,6—DCIP標准溶液的體積，由此可以計算出樣品中抗壞血酸的含量。另外，還可利用抗壞血酸和其他還原物質與2,6—DCIP反應速度的差別，並通過控制樣品溶液在pH1 — 3 范圍內，進行快速滴定，可以消除或減少其他還原物質的作用，一般在這樣的條件下，干擾物質與2,6—DCIP的反應是很慢的或受到抑制。生物體液（如血液、尿等）中的抗壞血酸的測定比較困難，因為這些樣品中抗壞血酸的含量很低，並且存在許多還原物質的干擾，同時還必須預先進行脫蛋白處理。在生物體液中含有巰其、亞硫酸鹽及硫代硫酸鹽等物質，它們都能與DCIP反應，但反應速度比抗壞血酸慢得多。樣品中巰基物質對定量測定的干擾，通常可以藉加入對—氯汞苯甲酸(簡稱PCMB)而得到消除。

三、2，4-二硝基苯肼法

1．原理

總抗壞血酸包括還原型、脫氫型和二酮古樂糖酸。樣品中還原型抗壞血酸經活性炭氧化為脫氫抗壞血酸，再與2，4-二硝基苯肼作用生成紅色脎，脎的含量與總抗壞血酸含量成正比，進行比色測定。

2．適用范圍

本方法適用於蔬菜、水果及其製品中總抗壞血酸的測定。

這是脎比色法，單獨評價是因為目前它作為Vc測定的國標法之一，是一種全量測定法，它跟以前的苯肼法原理相近。首先將樣品中的還原型V氧化為脫氫型V，然後與2，4—二硝基苯肼作用，生成紅色的脎，將脎溶於硫酸後進行比色。最近國標中該法強調空白，每個樣品及標准系列均需作對應空白，這樣消除色澤、背景不一的誤差。在實際楊梅汁Vc測定中，操作時間長，操作要求較嚴格，試劑較多，就一般實驗室而言是目前可以採用的方法。

四 碘量法

1、維生素C的原理

維生素C包括氧化型、還原型和二酮古樂糖酸三種。當用碘滴定維生素C時，所滴定的碘被維生素C還原為碘離子。隨著滴定過程中維生素C全被氧化，所滴入的碘將以碘分子形式出現。碘分子可以使含指示劑（澱粉）的溶液產生藍色，即為滴定終點。

2、注意事項

（1）看到紅棕色出現時要放慢滴定的速度。

（2）以顯藍色在30s內不褪色為滴定終點。

五L-抗壞血酸(維生素C)測定試劑盒（酶學方法）

1.應用於食品，飲料及生物製品檢測

2.比色方法

此方法用於檢測水果和蔬菜（如馬鈴薯），水果和蔬菜產品（如西紅柿醬、泡菜、果醬、果汁），嬰兒食品，啤酒，飲料，流食，粉狀和烘烤劑，肉產品，奶製品，葡萄酒，還有動物飼料，醫葯品（如維生素配製、陣痛葯、退燒葯）和生物樣品中的L-抗壞血酸(維生素C)，

3.分析物

L-抗壞血酸不定量的分布於動物和植物中。人類不能自身生產L-抗壞血酸，因此必須由外源(vitamin C)提供。一般情況下來源於水果和蔬菜中，出於技術原因，L-抗壞血酸曾被用於食品工業中的抗氧化劑。它是一種相對敏感的物質，L-抗壞血酸的檢測非常適用於從原始水果和蔬菜中加工食品的質量評定。

L-抗壞血酸用於醫葯品生產中的組成部分，如維生素產品和陣痛葯，另外，它還用於動物飼料添加劑中。

4.原理

L-抗壞血酸 (x-H2) + MTT+ PMS—> dehydroascorbate (x) + MTT-formazan + H+X

L-抗壞血酸 + ½ O2 AAO——> dehydroascorbate + H2OX

5.特異性

在給定的條件下，此方法特別針對於L-抗壞血酸。合成的D-阿拉伯抗壞血酸/阿拉伯糖型抗壞血酸能作為抗氧化劑，也能反應，但反應速度較慢。

6.靈敏度

測定靈敏度為0.005個吸光度單位，樣品體積為1.600ml，此相當於0.1mg/l樣品溶液中的L-抗壞血酸濃度。0.015個吸光度單位的差異能造成0.3 mg/l檢測限，樣品最大體積為1.600 ml.。

7.線性

測定的線性范圍為0.5 ugL-抗壞血酸（0.3mgL-抗壞血酸/l樣品溶液體積為1.600ml）到20 ugL-抗壞血酸（0.2gL-抗壞血酸/l樣品溶液體積為0.100ml）

8.精密度

在用一個樣品做重復實驗時，可能會產生0.005-0.010個吸光度單位的差異。標準的相對偏差（變異系數）大約為1-3%。當分析檢測數據時，要考慮到L-抗壞血酸的水溶液穩定性較差，尤其是重金屬離子或氧存在時。

9.干擾及錯誤來源

糧食的成分不經常干擾實驗。高濃度的酒精和D-山梨酸醇能降低反應速度，大量的亞硫酸鹽必須通過添加甲醛來去除。醋酸抑制酶AAO。金屬和 亞硫酸鹽離子可以導致L-抗壞血酸的自發分解。

10.試劑盒包括內容

1.磷酸鹽/檸檬酸緩沖液 ———— pH值大約3.5；MTT

2.AAO（坑壞血酸-氧化酶）—— 每板約17 U AAO

3. PMS 溶液

六．磷鉬藍分光光度法測定維生素C

基於在一定的反應條件下，維生素C可以定量地將磷鉬酸錠還原成磷鉬藍，提出了一種新的測定維生素C的分光光度法。該方法很方便、快速地測定生物、葯物等試樣中的維生素C，准確度和重復性均達到令人滿意的程度。

1 適用范圍

本標准適用於果品、蔬菜及其加工製品中還原型抗壞血酸的測定(不含二價鐵、二價錫、一價銅、二氧化硫、亞硫酸鹽或硫代硫酸鹽),不適用於深色樣品。

2 測定原理

染料2,6－二氯靛酚的顏色反應表現兩種特性,一是取決於其氧化還原狀態,氧化態為深藍色,還原態變為無色;二是受其介質的酸度影響,在鹼性溶液中呈深藍色,在酸性介質中呈淺紅色。

用藍色的鹼性染料標准溶液,對含維生素 C的酸性浸出液進行氧化還原滴定,染料被還原為無色,當到達滴定終點時,多餘的染料在酸性介質中則表現為淺紅色,由染料用量計算樣品中還原型抗壞血酸的含量。

七.二甲苯－二氯靛酚比色法

1 適用范圍

測定深色樣品中還原型抗壞血酸。

2 測定原理

用定量的 2,6－二氯靛酚染料與試樣中的維生素 C進行氧化還原反應,多餘的染料在酸性環境中呈紅色,用二甲苯萃取後比色,在一定范圍內,吸光度與染料濃度呈線性相關,收剩餘染料濃度用差減法計算維生素 C含量。

八.近紅外漫反射光譜分析法(NIRDRSA)

自1965年首次應用於復雜農業樣品分析後，因其具 有樣品處理簡單、分析速度快等優點，逐漸受到分析界的重視。此法已廣泛應用於石油、紡 織、農業、食品、葯物分析等領域[1，2]。在葯物分析中，NIRDRSA可以進行定性 鑒別、定量分析等工作。

維生素C是一種不穩定的二烯醇化合物，其葯典[3]含量測定方法為碘量法。我 們採用近紅外漫反射光譜技術直接測定維生素C含量，樣品無需預處理，方法簡便，結果可 靠。

這是因為，近紅外譜區光的頻率與有機分子中C-H，O-H，N-H等振動的合頻與各級倍頻的 頻率一致，因此通過有機物的近紅外光譜可以取得分子中C-H，O-H，N-H的特徵振動信息 。由於近紅外光譜的譜帶較寬，譜圖重疊嚴重，不能用特徵峰等簡單方法分析，需要運用計 算機技術與化學計量學方法。本實驗應用的是偏最小二乘法(PLS)[4]，首先利用 定標集建立預測模型，然後將預測集作為未知樣本，根據預測模型進行預測。

對所選擇的譜區范圍，採用對反射吸光度的MSC(散射校正)預處理，對25個樣品進行交叉 驗證，即選擇一個樣品，從校正集中除去該樣品對應的光譜和濃度數據，並設光譜主成分數 為1，循環迭代樣品數和主成分數，計算預測殘差平方和,確定所需主成分數。若主成分選擇 過小，會丟失樣品信息，過大會造成過度擬合。當主因子為2時，預測殘差平方和值最小， 為2.029，故選擇主因子數為2，建立最佳PLS校正數學模型。

九 電位滴定法

1.原理：根據滴定過程中電池電動勢的變化來確定反應終點.

Pt為指示電極，甘汞作參比電極

E池＝E+-E-+E液接電位＝EI2/I-+k(常數)

2.原理(具體來說:)

隨著滴定劑的加入，由於發生化學反應，待測離子濃度將不斷變化；從而指示電極電位發生相應變化；導致電池電動勢發生相應變化；計量點附近離子濃度發生突變；引起電位的突變，因此由測量工作電池電動勢的變化就能確定終點。

3.計算式：(與碘量法相同) Wvc=C(I2)V(I2)M(vc)/m(vc ) *100%

4.優點：

解決了滴定分析中遇到有色或渾濁溶液時無法指示終點的問題

用線性電位滴定法分析抗壞血酸,抗壞血酸回收率為99.80％～101.5％,相對標准偏差為0.61％;分析維生素C片中的抗壞血酸,相當標示量為98.90％～100.5％,相對標准偏差不大於0.48％,說明線性電位滴定法分析維生素C片中的抗壞血酸含量是可行的.

十 .分光光度法

1. 原理：

維生素C在空氣中尤其在鹼性介質中極易被氧化成脫氫抗壞血酸，pH>5,脫氫抗壞血酸內環開裂，形成二酮古洛糖酸。脫氫抗壞血酸，二酮古洛糖酸均能和2，4－二硝基苯肼生成可溶於硫酸的脎

脎在500nm波長有最大吸收

根據樣品溶液吸光度，由工作曲線查出VC的濃度，即可求出VC的含量

十一 庫侖滴定法

1.原理：庫侖滴定法屬於恆電流庫侖分析。

是在特定的電解液中，以電極反應產物為滴定劑（電生滴定劑，相當於化學滴定中的標准濃液）與待測物質定量作用，藉助指示劑或電位法確定滴定終點。

2.基本依據－－法拉第電解定律：電解時，電極上發身化學反應的物質質量與通過電解池的電量Q成正比

即： m=MQ/zF = MI t /zF

3..化學反應：陰極反應： 2H+2e-=H2 陽極反應： 2I-=I2+2e-

4.終點指示：多種方法

(1)化學指示劑－－I2

(2)電位法

(3)雙鉑極電流指示法

5.計算式：Wvc=MvcQ/zFm樣式中： F--- 法拉第常數（96487C）

Z---電極反應中轉移的電子數注意：使電解效率100％

6.優點：

1）無需標准化的試劑溶液，免去了大量的標准物質的准備工作（配製，標定）

2）只需要一個高質量的供電器，計時器，小鉑絲電極，且易於實現自動化控制

3）若電流維持一個定值，可大大縮短了電解時間

4）電量容易控制及准確測量；方法靈敏度，准確度較高

5）滴定劑來自電解時的電極產物，可實現容量分析中不易實現的滴定過程，如Cu＋,Br2,Cl2產生後立即與待測物反應。

7.缺點(難點)：

要求電解過程沒有副反應和漏電現象，即使電解電極上只進行生成滴定劑的反應，且電流的效率是100％

8.註：電流效率＝i樣÷i總＝ i樣÷（ i樣＋ i容＋i雜）

因為：實際電解過程中存在影響電流效率的因素，如，雜質，溶劑，電極自身在電極上的反應等

十二 紫外快速測定法

原理

維生素C的2，6—二氯酚靛酚容量法，操作步驟較繁瑣，而且受其它還原性物質、樣品色素顏色和測定時間的影響。紫外快速測定法，是根據維生素C具有對紫外產生吸收和對鹼不穩定的特性，於243nm處測定樣品液與鹼處理樣品液兩者消光值之差，通過查標准曲線，即可計算樣品中維生素C的含量。

十三 光電比濁法的原理

原理

在酸性介質中,抗壞鐵酸與亞硒酸(H2SeO3)能定量地進行氧化還原反應.1mol的抗鐵酸能將2mol的亞硒酸還原成硒.在一定條件下,生成的元素硒在溶液中形成穩定的懸濁液.當抗鐵酸的濃度在0-4mg/25-50ml的范圍內,該溶液生成的濁度與抗壞鐵酸的含量成正比.將試液置分光光度計上測其濁度可以定量地測定抗壞鐵酸.

十四熒光分析法的原理

原理

用酸洗活性炭將抗壞鐵酸氧化為順式脫氫抗壞鐵酸,然後與鄰苯二胺縮合成一種熒光性化合物.樣品中其它熒光雜質的干擾可以通過向氧化後的樣品中加入硼酸,使脫氫抗壞鐵酸形成 硼酸脫氫抗壞鐵酸的絡合物,它不與鄰二苯胺生成熒光化合物.這樣可以測定其它熒光雜質的空白熒光強度而加以校正

十五 原子吸收間接測定法

原理

這是最近報導的一種Vc測定法，其原理是在酸性介質中還原型Vc可將Cu2+定量地還原為Cu+並與SCN—反應生成CuSCN沉澱，在高速離心機下有效地分離出沉澱，小心洗滌後再經濃硝酸溶解，用原子吸收法測定銅含量，即可推知樣品中維生素C的含量。該法實驗儀器較昂貴，主要問題是操作過程中反應完全與否，沉澱物洗滌、離心反復多次，極容易帶來誤差。該法優點是能不受果蔬自身顏色的干擾，有一定的發展前景。根據試驗，發現此法結果偏低，還有待於進一步優化改善。

十六．金納米微粒分光光度法測定維生素C的方法

本發明公開了一種用金納米微粒分光光度法測定維生素C的方法。於5mL比色管中，依次加入0．1－2．0mL濃度為95．64μg／mL的HAuCl↓［4］溶液，0．02－0．50mL濃度為1％的檸檬酸三鈉溶液，再加入0．001－2．0mL濃度為0．38mg／mL的維生素C溶液，混勻，加二次蒸餾水定容至刻度，再充分混勻，在分光光度計上，於520nm處測定吸收值，同時作空白試驗。本發明測定方法簡單、快捷，所用儀器價廉，試劑易得

十七 L-半胱氨酸修飾電極測定維生素C的方法

研究了L-半胱氨酸修飾電極的制備方法和其電化學行為，並用於維生素C的測定，發現該電極對VC有明顯的電催化作用，在pH=10.0的NH4Cl-NH3·H2O緩沖溶液中，VC在L-半胱氨酸修飾電極上產生一靈敏的氧化峰，峰電流與VC的濃度在1.0×10-3~1.0×10-6mol/L的范圍內呈良好的線形關系，相關系數為0.9962，其最低檢測限可達1.0×10-6mol/L，與紫外光譜法測定的結果一致。

測定維生素C有多種方法，包括採用I2或二氯靛酚（DPI）進行氧化還原滴定。一般來說，滴定法是一種快速、簡便、准確的技術，它通過滴定劑和被滴定物質的等當量反應，精確測定被測物質的含量。DPI對於維生素C具有良好的選擇性，是一種理想的氧化劑。

十八 梅特勒-托利多儀器法

傳統的滴定法是手工滴定，根據指示劑顏色的變化確定終點，通過測量滴定劑的消耗量，計算被測物質的含量。手工滴定有很多不足：手工控制誤差較大，計算復雜，針對不同的反應需要特殊指示劑。梅特勒-托利多的自動電位滴定儀解決了這一問題，通過測量滴定反應中電位的變化確定終點，全自動操作、計算，測量快速，結果准確。梅特勒-托利多的滴定儀配有記憶卡軟體包，存儲有成熟滴定方法，可方便快速解決實際應用問題，並且稍作改動就能作為新的測定的實驗方法。

除此之外，還有雙光束剩餘染料差減比色法，2_6_二氯靛酚鈉動力學分光光度法、聚中性紅修飾電極方法、示波溴量法、流動注射化學發光抑製法、磷鉬鎢雜多酸作顯色劑快速檢測方法、溶氧測定裝置測定水果蔬菜中抗壞血酸含量的方法等。在此不做介紹。

6. 測定食品中維生素C含量時往往會受哪些因素影響有什麼解決措施

幾種常見的檢測方法進行簡要的敘述。 
維生素C的測定方法 1. 滴定分析法 
採用滴定法測定維生素C的原理主要是利用維生素C的氧化還原性質，通過化學反應，選擇合適的指示劑，根據樣品溶液顏色的變化判定終點。常見的方法有 2,6-二氯吲哚酚滴定法(又稱染料法)和碘量法等。其中 2,6-二氯吲哚酚滴定法的基本原理是：在酸性環境中，紅色的2,6-二氯吲哚酚與維生素C反應被還原為無色的酚亞胺，以2,6-二氯吲哚酚染料為滴定劑，用滴定劑自身的顏色變化指示終點，當溶液中的維生素 C剛好被全部氧化時,溶液呈淺紅色, 30s內不褪色,即為滴定終點,其反應式如圖2所示。滴定分析法快速、准確、方便，可用於測定水果中少
量的維生素C。但當樣品中含有 Fe(II)、Sn(II)、Cu(I)、SO2、S2O32−
等離子和富含丹寧酸、甜菜苷時，由於這些物質本身也有還原性，也會與氧化劑發生氧化還原反應，而使測定結果不準確。因此滴定分析法往往只適用於測定不含 L-脫氫抗壞血酸( DHA)、花青素含量較低及不含還原性離子的樣品。 
2. 光度計法 
光度法測定樣品中維生素C含量的原理大多利用顯色劑與維生素C發生的氧化還原反應，通過測定溶液的吸光度建立標准曲線來測定樣品維生素C的含量。然而，由於總抗壞血酸的局限性，例如GB/T12392-1990隻能測定脫氫抗壞血酸。而對於還原型抗壞血酸測定，GB5009.159-2003則採用抗壞血酸與固藍鹽B( Fast blue salt  B)反應生成黃色的草醯肼-2-羥基丁醯內酯衍生物，在最大吸收波長420nm測定吸光度來檢測。採用亞甲藍褪色光度法也能夠方便的測定維生素C，具有良好的選擇性。利用抗壞血酸對於Cu(II)具有專一的還原作用，在Cu(II)的存在下，抗壞血酸將 Cu(II)迅速還原成 Cu(I)，Cu(I)與新亞銅靈(2,9-二甲苯-1,10菲繞啉)絡合生成黃色水溶性物質，並在分光光度計下測定。此類方法結果可靠，重現性好，能准確測定維生素 C的含量，但如果待測液本身有顏色時，吸光度會受到影響，進而影響測定結果的准確性，且耗時較長。 
3. 電化學法 
電化學分析法是利用維生素C在電極上發生氧化反應而進行測定的。維生素 C在電極上失去  2個電子和 2個氫離子被氧化形成脫氫抗壞血酸，經過不可逆的水合作用形成脫氫古落糖酸。常用的工作電極有金屬電極、石墨電極等，但維生素 C在此類電極氧化需要較高的氧化電位，在檢測過程中易受到其它物質的干擾。近年來，採用修飾電極來降低氧化電位受到研究者的廣泛重視，如納米粒子金修飾的氧化鈦膜電極(Au/Ti O2/Ti)，聚吡咯修飾的分子印跡(MIP)石墨電極等，大大提高了檢測方法的靈敏度和選擇性。電化學分析法具有分析速度快，操作簡便、成本低、試劑用量少等優點，還可以與液相色譜、毛細管電泳生物感測器等聯用來提高測定方法的靈敏度。其缺點是對樣品前處理要求較高，操作較為繁瑣。4. 化學發光法(CL) 化學發光法(CL)是利用維生素C與高錳酸鉀、K2Cr2O7、Fe或鐵氰化合物等發生氧化反應，並與魯原子吸收光譜法(AAS)間接測定維生素 C的含量米諾(Luminol)或光澤精(Lucigenin)化學發光體系進行反應偶合來測定體系的發光強度進行維生素C的測定。Kato等利用在維生素  C中加入  Fe-葉綠酸發光體系發生淬滅來測定微量的維生素C, 化學發光法具有易操作、線性范圍寬和靈敏度高的優點，是一種有效的痕量分析方法。5.流動注射分析法(FIA) 流動注射分析法(FIA)是將有色(或無色但有紫外吸收)溶液作為載流，當被測樣品注入載流時，發生化學反應，使載流溶液顏色變淡(或紫外吸收降低)。若載流吸光度的變化與被測物質量具有一定的函數關系，即可以此對被測樣品進行定量。流動注射法具有試劑用量少，重現性好，樣品自動注射，佔用空間少等優點, 特別適用於在大量樣品中測定某一種目標分析物。近年來，FIA技術用於維生素  C測定受到很多研究者的關注，實現了快速、自動分析測定維生素C。流動注射系統可以與光譜法、電化學分析、色譜法、熒光法結合，與傳統方法相比，大大提高了靈敏度和准確度。6. 液相色譜法(HPLC) 液相色譜法(HPLC)由於其具有靈敏度高、重現性好、操作簡便和能實現多種維生素的同時測定等優點已成為近年來應用最廣的分離和測定維生素C的方法。基於樣品前處理方法、測定色譜條件和檢測器的不同採用HPLC測定維生素C含量的方法也不盡相同。常用於測定維生素 C的色譜柱以反相柱為主，檢測器包括的紫外(UV)或二極體陣列(PDA)檢測器和電化學(EC)檢測器等。例如：Maia等採用0.2%的偏磷酸–甲醇–乙腈  (90:8:2)為流動相，C18柱為色譜柱，在254nm波長下對葯品中的維生素C含量進行測定。Quiros等，以0.1%(V/V) 的甲酸溶液為流動相，Mediterranea sea 18為色譜柱，在254 nm波長下測定果汁和飲料中維生素 C含量。由於流動相常常要使用含有一定的離子強度的緩沖溶液，故基本無法使用液相色譜–質譜聯用技術來測定維生素C的含量。7. 原子吸收光譜法(AAS) 已有一些報道大致分為兩類：沉澱法和陽離子樹脂交換法。沉澱法的原理是：在酸性介質中維生素C與  Cu及    SCN反應生成一價銅鹽  CuCNS (沉澱)，分離後用原子吸收法測銅含量而間接測定維生素C含量]。陽離子樹脂交換法是通過維生素C換柱表面將高氧化態金屬離子或氧化物 (Fe3+,  MnO2)還原為低氧化金屬離子(Fe2+, Mn  )，通過流動注射在陽離子交

7. 如何進行維生素C片劑質量檢驗取樣

飛秒檢測常常使用以下簡單的辦法進行滴定測定：
維生素C測定—氧化還原滴定法
應用范圍
該方法採用滴定法測定維生素C的含量。
該方法適用於維生素C。
方法原理
供試品加新沸過的冷水與稀醋酸使溶解，加澱粉指示液，以直接碘法滴定，計算維生素C的含量。
試劑
1、水（新沸放置至室溫）
2．碘滴定液（0.05
mol/L）
3．澱粉指示液
4．冰醋酸溶液
儀器設備：
1、碘滴定液（0.05
mol/L）
配製：取碘13.0g，加碘化鉀36g與水50mL溶解後，加鹽酸3滴與水適量使成1000mL，搖勻，用垂熔玻璃濾器濾過。
標定：取在105℃乾燥恆重的基準三氧化二砷約0.15g，精密稱定，加氫氧化鈉滴定液(1
mol/L）10mL，微熱使溶解，加水20mL與甲基橙指示液1滴，加硫酸滴定液50mL與澱粉指示液2mL，用本液滴定至溶液顯淺藍紫色。每1mL碘（0.1mol/L）相當於4.946g的五氧化二砷。根據本液的消耗量與三氧化二砷的取用量，算出本液的濃度，即得。
貯藏：置玻璃塞的棕色玻璃瓶中，密閉，在涼處保存。
2．澱粉指示液
取可溶性澱粉0.5g，加水5mL攪勻後，緩緩傾入100mL沸水中，隨加隨攪拌，繼續煮沸2分鍾，放冷，傾出上清液，即得。本液應臨用新制。
操作步驟
取該品0.2g，精密稱定，加新沸過的冷水100mL與稀醋酸溶液10mL使溶解，加澱粉指示液1mL，立即用碘滴定液（0.05mol/L）滴定，至溶液顯藍色並在30秒內不褪，並將滴定結果用空白試驗校正。記錄消耗碘滴定液的體積數（mL），每1mL碘滴定液（0.05mol/L）相當於8.806mg的C6H8O6。

8. 水果中維生素c含量的測定方法有幾種

水果中維生素c含量的測定方法有三種，分別為原子吸收分光光度法、紫外可見分光光度法、高效液相色譜法。

1、原子吸收分光光度法
利用原子吸收分光光度法問接測定維生素C的含量，是利用維生素C可以與一些金屬離子發生氧化還原反應，通過測定反應掉的金屬離子的量，進而間接計算出維生素c的含量。

2、紫外-可見分光光度法

利用紫外-可見分光光度法測定維生素C的含量是基於維生素c在紫外光區有特徵吸收，但是因為維生素C結構中具有不飽和鍵，具有還原性，不易穩定存在，直接測定誤差較大。所以在利用紫外分光光度法測定時，維生素標准溶液和待測樣的配製條件非常重要。

3、高效液相色譜法

高效液相色譜法是以液體為流動相，採用高壓輸液系統，將維生素C的溶劑裝有固定相的色譜柱，在柱內各成分被分離後，進入檢測器進行檢測，從而測量出維生素c的含量。

(8)北京市河源市食品維生素檢測方法擴展閱讀

維生素c含量的測定方法對比：

由於維生素C自身的不穩定，導致了很多方法測定結果誤差較大，所以對維生素C穩定存在條件的探索非常重要。高效液相色譜法因為測定較准確、靈敏度高、選擇性好，有較好的發展前景，是目前發展較快的一種方法。

9. 用什麼檢測方法檢測食品中維生素b12

1. 維生素B12又叫鈷胺素，是唯一含金屬元素的維生素。自然界中的維生素B12都是微生物合成的，高等動植物不能製造維生素B12。維生素B12是惟一的一種需要一種腸道分泌物（內源因子）幫助才能被吸收的維生素。

2. 體內維生素B12的通常含量為2-5mg，大部分貯存於肝臟，約為體內總貯存量的80%，其餘存在於肌肉、皮膚和骨組織，少量存在於肺、腎、脾。維生素B12最重要的功能在於它是骨髓造血所需的重要物質。

3. ELISA用血清來檢測維生素B12，首先血液要經過至少半個小時的凝集，然後取血清。將酶復合物用稀釋液稀釋後，加血清及陰性、陽性對照，還有就是質控品(這是嚴格的要求，它的范圍必須在質控范圍內)。經過一個小時的孵育，然後洗板，加底物，半個小時避光反應後加終止液即完成反應部分，然後就是讀數。由數值來判斷結果的陰性或陽性。

10. 維生素檢測用什麼分析儀器比較好

課程詳情介紹

維生素是消費者關注的營養成分之一，也是食品檢測行業的熱門項目。本課程結合維生素的類別、作用、檢測手段的發展歷史等，對目前國際國內各種維生素的測試方法及常用分析儀器進行講解。

本課程除了理論內容，我們還將安排學員進行實際操作練習，了解維生素測試的前處理過程及相關儀器分析技術。此外，我們還將給學員講解維生素測試的影響因素，並對如何消除這些因素、確保數據的准確性進行深入探討。

維生素檢測通常使用液相色譜儀。本課程根據維生素檢測所使用的液相色譜儀，詳細介紹其工作原理、結構特點和儀器維護要點，使學員掌握儀器的故障排查及日常維護方法。同時，講解液相色譜數據採集和處理方法的編輯過程，並安排練習，確保學員可以獨立操作液相色譜完成維生素日常檢測工作。
品質項目包括：

水分、含鹽量、含糖量、蛋白含量、脂肪含量、纖維含量、維生素含量、酸度等。對於這些項目的檢測，如果經費有限，都可以採用化學法分析，只需配製最簡單的烘箱、水浴、電爐、攪拌器、粉碎機、pH計等設備即可。

如果經費充足或檢驗批次較多，對應的檢測項目都有對應的專用儀器可供選購。此外，也有一些通用的儀器可供選購，如：紫外/可見分光光度計、近紅外分析儀、自動滴定儀等。檢測維生素A、E等有時還需配製熒光光度計。檢測營養元素，如，鈣、鋅、鐵等，可購置原子吸收儀-火焰檢測器。

(2)衛生項目包括：

微生物、添加劑、有害元素、農葯殘留、獸葯殘留、毒素等。對於一般食品企業，微生物檢測實驗室應該建。

（a)微生物：

建微生物實驗室要按照生物實驗室規范標准要求進行布局。必要的設備有潔凈台、培養箱、高壓滅菌鍋、電爐等，其它設備則根據具體檢測項目配置。經費少可以買國產的，經費多可以考慮買進口的，兩者的價錢相差很多。

（b)添加劑和有害元素：

有一部分項目可以用化學法，如，亞硝酸鹽、二氧化硫、重金屬含量、總砷等，但要想滿足現在國標的食品衛生要求，應該購置氣相色譜-氫火焰檢測器、液相色譜-紫外/可見光檢測器，這樣一般的防腐劑(苯甲酸、山梨酸等)、甜味劑(甜蜜素、糖精鈉等)、色素(檸檬黃、胭脂紅等)都可以檢測了。購置原子吸收儀-石墨爐檢測器，可以分別檢測鉛、鉻、鎘、銅、鎳等有害元素，還需要一台原子熒光儀，用來檢測砷和汞等。

（c)殘留農葯：

檢測殘留農葯氣相色譜必不可少，檢測有機氯農葯，需配電子俘獲ECD檢測器;檢測有機磷農葯，需配火焰光度FPD檢測器或氮磷NPD檢測器。現在，農殘檢測的項目越來越多，為提高通用性，建議配置毛細管柱分流/不分流進樣口，安裝毛細管色譜柱。與傳統填充色譜柱相比，毛細管柱分析項目多，分離度好，可以減少頻繁的更換色譜柱，提高分析效率。出口食品加工企業生產的產品在出口時需檢測的農殘項目越來越多，為了把好生產原料和產品質量關，可以配置氣相色譜-質譜儀。一般只需配製電子轟擊EI源，如果有必要可再配一個負化學NCI源，是選擇四級質譜還是離子阱質譜，個人認為都可以，兩種儀器各有優缺點。還是要看具體工作。

（d)殘留獸葯：

若進行殘留獸葯的檢測，項目不多且批次多，可以考慮配製酶聯免疫儀，該儀器一次投入不大，操作簡便，檢測靈敏度高。採用ELISA也有一些缺點，一是試劑盒為長期的消耗品，若檢測的批次少，成本會較高，二是特異性不好，可能會有假陽性，三是如果在相對長的一段時間內檢測項目較多，成本甚至比儀器分析還高。對於有一定規模的出口食品企業，為適應當前歐盟、美國、日本等發達國家檢測限量要求，最好配製一台液相色譜-串聯質譜儀。第一台儀器建議配置三重四級質譜儀，靈敏度高、重現性好。儀器不一定要追求高配置，夠用就行，但靈敏度、穩定性、抗污染等性能要好。最好買用戶較多的型號，有一個與自己檢測項目相近的用戶群，首先說明該型號儀器檢測擬檢的項目沒有問題，其次，也便於今後技術交流。