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核酸的檢測方法

發布時間:2022-09-25 14:31:45

『壹』 核酸檢驗方法

核酸檢測具體流程如下:
1. 核酸提取
使用硅膠柱離心、磁性硅膠顆粒分離方法以及自動化儀器等商品化試劑或設備並按說明書操作。提取RNA時應注意防止RNA降解。DNA應置於-20℃保存,RNA和需長期保存的DNA應置於-80℃保存。
2. 逆轉錄合成cDNA
逆轉錄cDNA合成反應需使用逆轉錄引物、dNTPs、逆轉錄酶、RNA酶抑制劑、DTT、緩沖液和適量無RNA/DNA酶的超純水以及RNA模板。在擴增儀或水浴箱中,在規定的溫度和時間下進行逆轉錄反應。建議使用商品化RT-PCR一步法試劑進行第一輪擴增反應。逆轉錄cDNA合成反應需使用逆轉錄引物、dNTPs、逆轉錄酶、RNA酶抑制劑、DTT、緩沖液和適量無RNA/DNA酶的超純水以及RNA模板。在擴增儀或水浴箱中,在規定的溫度和時間下進行逆轉錄反應。使用商品化RT-PCR一步法試劑進行第一輪擴增反應。
3. PCR擴增反應(使用二次擴增的套式PCR擴增方法)
PCR反應需使用引物、dNTPs、DNA聚合酶(如Taq酶等)、緩沖液、和適量無RNA/DNA酶超純水、以及模板(DNA或cDNA)。在擴增儀中,按照設定的程序進行擴增。使用二次擴增的套式PCR擴增方法。
4. 擴增產物定性分析
擴增產物常用分析方法是瓊脂糖凝膠電泳法,與分子量標准比較,判斷擴增片段是否在預期的分子量范圍內。其它擴增產物分析方法還有限制性內切酶酶切分析、特異性探針雜交分析以及DNA序列分析等。自動化核酸擴增儀使用酶聯比色分析或熒光探針雜交等原理測定。
5.結果判定和完成報告單
(1)實驗成立的條件:每一次檢測需同時做兩個陽性對照、兩個陰性對照,只有陽性對照擴增出預期的片段、陰性對照沒有擴增出任何片段、雙份平行樣品結果一致的情況下實驗才成立,可以作出核酸陽性或陰性反應結果的判定。
(2)HIV核酸檢測陽性:發現核酸陽性反應,應該重復採集樣品進行復測,復測結果呈核酸陽性反應則判定為核酸陽性,復測結果為核酸陰性反應則判為不確定結果,需進一步隨訪檢測。
(3)HIV核酸檢測陰性:只可報告本次實驗結果陰性。
(4)應在完成檢測後5個工作日內發出檢測報告。

『貳』 核酸檢測方法哪些

核酸的檢測,每個病例必須採集急性期呼吸道標本,包括上呼吸道標本或下呼吸道標本,重症病例優先採集下呼吸道標本,如支氣管或肺泡灌洗液等。出現眼部症狀的病例,需採集眼結膜拭子標本,出現腹瀉症狀的病例需留取便標本,可根據臨床表現與採集時間間隔進行採集。標本的類別有上呼吸道標本,包括咽拭子,鼻拭子,鼻咽抽取物等。下呼吸道標本,包括深咳痰液,呼吸道抽取物,支氣管肺泡灌洗,肺泡灌洗液,肺組織活檢標本。血液標本需要採取發病後7天內的急性期抗凝血,血清標本應盡量採集急性期、恢復期雙份血清,第1份血清應盡早在發病後7天內採集,第2份血清應在發病後3~4周採集。

『叄』 核酸的檢測

核酸的檢測其實可以檢測出部分病毒,比如艾滋病和新型冠狀病毒之類的,不過核酸的檢測在檢測前是有注意事項的,比如能不能吃東西,能不能抽煙喝酒等等,這都可能影響檢測結果,接下來我們來具體了解一下核酸的檢測知識吧。

核酸的檢測試劑及顏色變化

核酸的檢測有試劑的檢測,那麼核酸的檢測試劑及顏色變化是什麼樣的呢?

核酸的檢測試劑及顏色變化為:紅色是陽性,綠色是陰性。最常用的病毒快速檢測方法主要有兩大類:核酸檢測,核酸(DNA 或 RNA)是病毒的遺傳物質,篩選其中獨一無二的特徵核酸序列進行檢測可准確確定病原體。

還有抗原抗體免疫檢測,病毒作為抗原可激發人體免疫反應產生抗體,可以通過抗原抗體特異性相互結合的特性進行檢測。當然,不論是哪種檢測技術,只有操作簡單,設備要求低,速度快,效率高才是王道。例如:針對新冠病毒的檢測,主要是通過基於實時熒光PCR技術原理研發的核酸檢測試劑進行快速確診,基於抗體檢測技術原理研發的核酸檢測試劑進行補充檢測。

核酸的檢測方法有哪幾種

核酸的檢測方法並不只是有一種的,具體核酸的檢測方法有哪幾種呢?

核酸檢測採用咽拭子檢測,有口咽拭子采樣和鼻咽拭子采樣兩種方式。口咽拭子采樣就是在咽喉部位用棉簽塗擦,取咽喉部上皮細胞的檢測,檢測方法一般是受檢測者張口發出「啊——」的聲音,檢測人員用棉簽採取樣本,檢測過程並沒有創傷風險,是非常安全的檢測。還有是鼻咽拭子採集,一般是將一根細棉簽深入鼻孔,從下鼻道深入抵達鼻咽後壁,然後捻轉棉簽取樣,一般檢測很有可能會有嘔吐的感覺,所以需要忍耐一下。

陽性(+)和陰性(-)是實驗結果的判別方式之一,被稱為定性檢查。核酸檢測陽性代表感染了病毒。核酸檢測的操作要求較高,若因采樣不當導致樣本病毒含量低,或運輸儲存條件不當等情況,都有可能導致核酸檢測可能出現假陰性結果。

核酸檢測前注意事項

核酸檢測前是有一些准備事項的,具體核酸檢測前注意事項有哪些呢?

核酸在檢測前,應當注意的是不要過度地吃東西,另外要少喝水,如果是在鼻子有症狀或者是有咽喉症狀的話,盡量不要去檢測核酸。首先我們要知道這個核酸的檢測,它是確定新型冠狀病毒肺炎的一個很重要的方法。

其實通過核酸檢測的結果,可以確診或者是排除患者的新冠病毒的診斷,或者是確診或者是排除。在檢測的時候,醫護人員會拿一個非常長的棉簽,我們叫咽拭子,在咽後壁進行旋轉、取樣,如果我們吃太多的食物,很可能會引起惡心反射、咳嗽反射,從而導致誤吸,一定要空腹。但是如果我們有咽喉部或者鼻部的炎症,也不適合去采樣,容易出現大出血,所以還是等情況穩定的時候去做核酸。

核酸的檢測時間怎麼

核酸的檢測結果不會馬上出來,那麼對於核酸的檢測時間怎麼算呢?

核酸的檢測一般是從做完核酸采樣之後開始算時間。對於發熱門診患者的核酸檢測,應在6小時內報告結果,並努力將報告時間縮短至4小時。對於普通門急診患者、住院患者和護理人員的核酸檢測,原則上應在12小時內報告結果。對於願意接受檢測的人的核酸檢測,結果通常在24小時內報告。

目前,核酸的檢測採用實時定量PCR方法被廣泛應用於檢測COVID-19特異性核酸片段。測試時,醫生會用類似拭子的拭子擦拭扁桃體和咽凹附近的分泌物,或通過鼻腔清除鼻咽後部的分泌物,然後將其放入試管中,然後送到檢驗部門做相應的病毒核酸檢測。核酸檢測通過五個步驟完成:取樣、樣品保留、保存、核酸提取和計算機檢測。

『肆』 核酸檢測方法有哪些

核酸檢測主要是鼻拭子或咽拭子法,經由鼻孔或口腔插入取得上呼吸道分泌物標本後送實驗室檢測。核酸檢測主要是指目前對於新型冠狀病毒肺炎的一種確診的實驗手段,核酸檢測一般分為鼻拭子、咽拭子或者肺泡灌洗液以及痰液,通過呼吸道的標本,我們在實驗室里可以檢測2019新型冠狀病毒的核酸,從而作為臨床診斷的重要的依據。那臨床上目前最常採用的檢測方法是鼻拭子或者是咽拭子,操作的時候由醫護人員採用特製的長柄取樣的棉簽,經由鼻孔或者經由口腔插入到鼻腔及咽腔中,在咽喉壁或者鼻腔的粘膜上進行塗抹,取得上呼吸道分泌物標本,這個標本取出之後再送到實驗室進行相關的核酸檢測。在做的過程中患者不用緊張,可能會有輕微的不適例如惡心,相信配合好醫護人員的話,能夠很快完成這個檢查,不會給您帶來很大的影響。

『伍』 核酸幾種方法

1.定磷法。簡單快捷,靈敏度高,但易受蛋白質和核苷酸影響。
2.定糖法。靈敏度高,但特異性差,戊糖也會產生反應,容易產生干擾。
3.紫外線吸收法。適用於濃度大的核酸溶液,而人體感染新冠病毒後,咽部所含的病毒量極少,無法通過此種方法被檢測。
4.熒光法。目前廣泛被使用的是熒光定量RT-PCR檢測法,通過對標本進行逆轉錄擴增、使病毒片段達到一定數量,可以被檢測到,但是由於受采樣標本、運輸等多種因素影響,也有假陰性的可能。

『陸』 核酸檢測方法

核酸檢測採用咽拭子檢測,有口咽拭子采樣和鼻咽拭子采樣兩種方式。

口咽拭子采樣就是在咽喉部位用棉簽塗擦,刷取咽喉部位上皮細胞的檢測。受檢測者只要放鬆心情,張口發出「啊——」的聲音就可以了,檢測過程並沒有創傷風險,是非常安全的檢測。

檢測時可能會有惡心、想要嘔吐的不適感覺,不過這些不適症狀通常只需要半分鍾到兩分鍾左右就可以完全緩解了。鼻咽拭子采樣是將一根細棉簽深入鼻孔,從下鼻道深入抵達鼻咽後壁,然後捻轉棉簽取樣。棉簽進入鼻腔的深度約為鼻尖到耳垂的距離。

(6)核酸的檢測方法擴展閱讀:

核酸檢測相關知識:

核酸檢測是檢測病毒的方法,它可以更早發現感染。現在臨床中對乙肝、丙肝、艾滋病都開展了核酸檢測,可以在抗體產生前檢測到血液中是否存在病毒。而一些呼吸道疾病可以通過咽拭子或者呼吸道分泌物的核酸檢測來判斷是否感染,以及推測是否具有傳染性。

季節性流感、禽流感、冠狀病毒感染等通過咽拭子檢測可以方便地判斷出上呼吸道是否存在病毒成份,從而判斷被檢測者是否屬於感染者。

新冠病毒的核酸檢測已經是比較成熟的檢測方法了,只要在咽喉部位擦拭幾秒鍾就可以採集到標本。通過分析判斷是否有新冠病毒的核酸成分,可以盡早發現感染者,甚至在感染者出現症狀前就可以檢測到陽性。

感染者經過隔離治療後咽拭子檢測陰性說明病毒已經清除,不具有傳染性了。目前兩次咽拭子核酸檢測陰性是確診病例和無症狀感染者解除隔離的標准之一。

『柒』 怎麼檢查核酸檢測

檢測核酸目前多是通過取咽拭子的方法。

病毒感染口腔黏膜上皮以後會寄宿在口腔黏膜上皮,通過采咽拭子可以達到取樣的目的,即不需要開刀,也不需要打針,只需要被檢查者張開嘴,用一個像棉簽一樣的試子擦拭扁桃體和咽隱窩附近的分泌物,也可以通過鼻腔取鼻咽後部的分泌物,然後放入專門的試管內,在1小時內送到專門的檢測室進行檢測。

核酸檢測作為病原診斷的一個依據,是目前確診的重要依據,比如對於目前的新冠肺炎檢測、病毒核酸檢測仍是確診的金標准。

『捌』 核酸檢測是怎麼檢測

核酸檢測是通過磁分離技術將病毒核酸分離,可檢查艾滋病、乙肝或丙肝,還可用於新冠病毒的檢查。核酸檢測是採用PCR擴增方法進行檢測血液中是否存在病毒核酸,是利用磁珠上標記特異性吸附特異性核酸,然後在通過磁分離技術將病毒核酸分離出來,適合用來檢查艾滋病、乙肝或者丙肝等疾病的感染。核酸檢查是准確度比較高,靈敏度高的醫學方法,但是核酸檢查的成本高,需要去三甲醫院才可以進行檢查,而且核酸檢查適合於目前的新冠狀病毒感染者,可以及時的區分出患者。

『玖』 核酸檢測的方式都有什麼

核酸檢測主要有酸檢測試劑、抗體檢測兩種方法,第一種方法通常是通過咽拭子進行PCR檢測,基因擴增,然後再進行核酸檢測。 而抗體檢測是選擇抽血,抽血的方法得出結果看,觀察其抗體滴度是否升高,這種情況常常是指在抽血前常出現不能產生抗體的情況。

核酸檢測是一種「進行時」檢測,通過聚合酶鏈反應等方法檢測病毒基因組中特定的核酸序列,從而判斷被檢測者此刻是否感染了病毒。

與核酸檢測不同,新冠病毒抗體檢測顯示的是哪些人曾經被感染。抗體檢測又被稱為血清學檢測,目的是檢測血液樣本中的抗體。人體感染病毒後,會產生IgM或IgG抗體。

被感染初期,人體會迅速產生IgM抗體,以抗感染;相比之下,產生IgG抗體的速度更慢,但IgG抗體保留時間更長。抗體檢測就是檢測血清中是否有這些特異性抗體,以確定被測試者是否曾被感染。

(9)核酸的檢測方法擴展閱讀:

六種人不宜做核酸檢測

一、釆樣前30分鍾,對於有吸煙、喝酒、嚼口香糖等人群不宜做核酸檢測,以免影響檢測的准確度。

二、進食太飽的人不宜做核酸檢測,否則容易發生惡心嘔吐,影響採用結果的准確性。

三、核酸檢測前有口服抗病毒和抗感染的葯物的,應推遲做核酸檢測,避免影響檢測結果。

四、若是進行鼻拭子采樣的話,對於鼻咽部有病症的急性期,如出血、水腫等人群可以暫不予檢測。

五、剛進行核酸檢測時出現惡心嘔吐的人,應暫緩做核酸檢測,需等檢測者緩解後再予以進行。

六、被采樣者用手或其他物品觸及拭子采樣冠、棉簽的前端的不宜進行,否則容易造成污染,影響檢測結果,需更換進行重做。

『拾』 核酸怎麼檢查

新型冠狀病毒的核酸檢測根據采樣方式,大致分為上呼吸道標本和下呼吸道標本,上呼吸道標本主要為鼻咽拭子、鼻咽抽取物,下呼吸道標本主要是支氣管肺泡灌洗液、深部痰液。

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