① 如何用氣相色譜外標法測定白酒中甲醇含量跪求，急求
1 范圍 2 f. a9 ~. b3 ]2 a! W7 \0 U本方法採用填充柱氣相色譜法測定白酒中醇酯醛的含量，本方法適用於各種香型白酒中醇酯醛含量的測定，其種類包括屬於醇類的正丙醇、異丁醇、仲丁醇、正丁醇、異戊醇，屬於酯類的乙酸乙酯、丁酸乙酯、戊酸乙酯。
② 香精如何使用
香精香料
一．香精香料的定義
色，香，味，形是衡量食品質量的四個重要指標。
香僅居其次，好的香味能強烈的控制人的食慾。使人一聞到就想吃。
香料—一些來自自然界動，植物的或經人工單離，合成而得到的發香物質叫香料。香精——以香料為原料，經調香，有時加入適當的稀釋劑配成的多成分的混合體叫香精。
二．香料的分類
1．天然香料：動物性香料，植物性香料
（1）動物性香料：品種少，到目前為止，僅發現麋鹿，靈貓，海狸三種動物及抹香鯨胃內分泌的一種龍誕香。
這類香料在濃烈時帶有不適的臭氣，但是稀釋後則發出優美的香氣，且留香力較強，高級
香精中常作為定香劑。
（2）植物性香料：如橙油，來自於甜橙果皮，用水蒸氣蒸餾法，壓榨法或用磨桔機軋制提取。檸檬油，從檸檬果皮中通過壓榨或蒸餾而得。
2．人工香料：單離香料，合成香料
（1）單離香料：以天然香料為原料，通過物理和化學方法分離出來的較單一的成分。
（2）合成香料：以單離香料及煤焦油系成分為原料，經復雜的化學變化而製得的產品。
五．香精在食品中的作用
1．輔助作用：原來具有香氣的產品，香氣濃度不足，所以選用與其香氣相適應的香精，來輔助香氣。
2．穩定作用：天然產品香氣受季節，地區，氣候，土壤，加工條件影響，導致香氣不穩定，加香後可保持每批產品基本穩定。
3．補充作用：補充加工過程中損失的一部分香氣。
4．矯味作用：葯味
5．賦香作用：一些產品本身沒有香味，可選擇一定香型的香精，使產品有一定的香味。
6．替代作用：直接用天然品作為香味源有困難，採用香精替代或部分替代。
七．香精使用是應注意的問題
1．用量：量多量少都不好，通過反復的實驗調節，最終決定於當地消費者的口感。
1．均勻性：分散均勻，才能使香味一致哦。
2．其他原料的用量：其他原料的質量影響香味效果。水處理不好，劣質糖等本身具有較強的氣味，使香精香味受影響而降低了質量。
3．碳酸比的配合：糖酸比配合恰當，香味效果較好。如檸檬飲料中酸低，再多的香精也其不到應有的效果。
5．溫度：溫度高，香精揮發。
八．香精的檢測方法
1．色澤：試樣與標樣置於同體積的比色皿至同刻度，評比色澤。
2．香氣：聞香紙，蘸取試樣與標樣約1~2厘米，品香，辨別其在揮發過程中全部香氣是否與標樣相符，有無異雜氣，除頭香外，還應評定體香和尾香。
3．香味：糖酸水，8~12克蔗糖，0。1~0。16克檸檬酸，試樣0。1克，定容100毫升。
鹽水，0。5克鹽，0。1克試樣，定容至100毫升。
4．相對密度：各種物質都有一定的比重，當物質純度變化時，比重也隨之改變。故測定比重是檢測物質純度與否或溶液濃度大小的一種方法。
5．折射率：折射率的大小取決於物質的性質，不同物質有不同的折射率，對同一種物質而言，折射率的大小取決於該物質的濃度大小，故測定折射率的大小可反映其均一程度和純度。
6．澄清度：試樣與標樣分別置於相同大小的比色皿中，無色背景下，目測觀察是否澄清透明，有無雜質。
食用香精
北方水果香精
杏仁香精
杏仁肉呈白色，焙炒後能產生特殊的香味。杏仁香氣以苯甲醛、甲基苯甲醛為主香，輔以
豆香等香氣，而如
果能適量使用三甲基吡嗪、2-乙醯基吡咯等烘烤香，則香氣更加逼真。
配方1
組分用量/g組分用量/g
苯甲醛40.0桃醛0.2
香蘭素1.0植物油57.8
洋茉莉醛1.0
配方2
組分用量/g組分用量/g
苯甲醛7.695%乙醇52.0
洋茉莉醛0.2蒸餾水40.0
香蘭素0.2
桃子香精
配方1
組分用量/g組分用量/g
?-十一內酯500庚酸乙酯50
乙酸戊酯150丁酸乙酯50
甲酸戊酯50戊酸乙酯50
苯甲醛10香蘭素100
肉桂酸苄酯40
配方2
組分用量/g組分用量/g
苯甲醛3?-癸內酯120
香蘭素42-甲基丁酸126
苯甲醇13內酯香基40
芳樟醇17酯香基182
桃醛66乙醇429
葡萄香精
葡萄的香氣是以鄰氨基苯甲酸甲酯和N-甲基鄰氨基苯甲酸甲酯為特徵香氣，輔以酒香、果
青香、玫瑰樣花
香、糖甜香，再配合以酯類果香組成。
配方1
組分用量/g組分用量/g
庚酸乙酯1.05桂酸乙酯0.004
鄰氨基苯甲酸甲酯0.11香葉油0.003
水楊酸甲酯0.02紫羅蘭酮0.003
楊梅醛0.10乙酸乙酯15.17
香檸檬油0.63老姆醚2.56
肉豆蔻油0.0695%乙醇58.35
香紫蘇油0.04蒸餾水20.85
甜橙油萜1.05
配方2
組分用量/g組分用量/g
乙酸乙酯25甜橙萜3
乙酸異戊酯2.5草莓醛0.2
丁酸乙酯3乙基香蘭素0.3
丁酸異戊酯5.5麥芽酚0.1
苯甲酸乙酯3香葉油0.7
水楊酸甲酯3橙葉油3
桂酸乙酯1.5丁香油0.7
鄰氨基苯甲酸甲酯22.5植物油25.7
甲基紫羅蘭酮0.3
蘋果香精
蘋果香精是一種青甜香韻的果香型香精。傳統的蘋果香精以玫瑰香韻來擬其甜香韻，以乙
酸苄酯、芳樟醇等
襯托其青香，以異戊酸異戊酯、異戊酸乙酯作為蘋果特徵果香，並再輔以乙酸乙酯、丁酸
異戊酯、乙酸異戊
酯、丁酸乙酯和檸檬醛來豐滿果香。
配方
組分用量/g組分用量/g
異戊酸異戊酯110異戊酸苯乙酯0.2
檸檬醛（97%）1十九醛0.2
苯甲醛1冷榨橘子油1
甲酸香葉酯0.5BHA0.1
丁酸異戊酯15甲酸戊酯1
香蘭素1甘油20
乙醯醋酸乙酯11醋酸乙酯22
異戊酸乙酯22蒸餾水120
說明本品為無色透明液體，溶於水，具成熟的蘋果香味，主要用於汽水、冰棒、雪糕等
的加香，加香量一般為0.05%～0.15%。
櫻桃香精
櫻桃的香氣是由特徵果香為主，輔以甜、辛香，再用果香以豐滿整體香氣，一些天然精油
類原料起圓潤與修飾作用。特徵果香常用的是苯甲醛、甲基苯甲醛和它們的甘油縮醛、苦杏仁油等，輔以香蘭素、丁香油、大茴香醛等甜、辛香氣，常用甜橙油、檸檬油、橙花油、玫瑰油、康釀克油等修飾、圓潤整體而得到櫻桃香精。
配方
組分用量/g組分用量/g
乙酸乙酯2.118橙葉油0.06
丁酸乙酯0.48甜橙油0.30
丁酸戊酯0.84桃醛0.012
甲酸戊酯0.30苯甲醛0.48
乙酸戊酯0.30洋茉莉醛0.30
大茴香醛0.06庚酸乙酯0.12
香蘭素0.18苯甲酸乙酯0.24
桂醛0.0395%乙醇70.00
丁香油0.18蒸餾水14.00
配方2
組分用量/g組分用量/g
丁二酮0.50異戊酸桂酯0.2
異戊酸乙酯2.50丁酸0.5
乳酸乙酯20.0
甲基苯甲醛（三個異構體
混合物）
8.0
苯甲醛32.5水楊酸甲酯0.1
乙酸對甲苯酯7.0草莓醛4.0
庚炔羧酸甲酯0.2桃醛（純）0.3
肉桂油3.5香蘭素10.0
大茴香醛3.0乙基香蘭素0.5
丁香酚0.710%鳶尾浸膏0.5
乙酸大茴香醇酯2.5丙二醇3.5
制備上述混合物以10%比例混入丙二醇。
草莓香精
配製草莓香精常以清香韻、甜香韻和酸香韻組成。草莓香精一般都以草霉醛（3-甲基-3-
苯基縮水甘油酸乙酯）和3-苯基縮水甘油酸乙酯為主香。清香常用庚炔羧酸甲酯、辛炔羧酸甲酯、乙醯乙酸乙酯、乙酸苄酯、
茉莉凈油、橙花油、紫羅蘭葉凈油等；甜香則常用玫瑰花油、玫瑰醇、香葉醇、苯乙醇、
橙花醇、桂酸酯類、紫羅蘭酮、麥芽酚、乙基麥芽酚、橙花醇、香蘭素、乙基香蘭素以及2,5-二甲基-4-羥基-3（2H）呋喃酮等；再用乙酸、丁酸、草莓酸、漿果酸和2-甲基戊酸等作為酸香韻，然後，加入酯類等果香來豐滿果香韻。
配方
組分用量/g組分用量/g
壬酸乙酯5.0香蘭素5.0
月桂酸乙酯20.0乙基香蘭素2.0
異丁酸桂酯10.0異丁酸乙酯100.0
丁二酮0.5異戊酸乙酯50.0
乙酸枯名酯10.0庚酸乙酯10.0
桃醛50.0草莓醛10.0
覆盆子酮3.0草莓酸3.0
乙酸乙酯2.095%乙醇207.5
ß-紫羅蘭酮10.0丙二醇500.0
麥芽酚2.0
山楂香精
山楂香氣是由酸香、甜香和青香組成。酸香是由2-甲基丁酸、2-甲基戊酸、草莓酸、漿果
酸、乙酸、已酸等組成；甜香由玫瑰油、香葉油、玫瑰醇、香葉醇、β-突厥烯酮、丁香油、秘魯浸膏、鳶尾浸膏等組成；再修飾以青香，用葉醇、乙酸葉醇酯、反-2-已烯醇、乙酸反-2-已烯酯、芳樟醇氧化物等。最後整體圓和以天然的山楂提取物，這樣就組成了山楂香精。
配方
組分用量/g組分用量/g
香葉醇0.2芳樟醇氧化物0.2
玫瑰醇0.5丁酸乙酯2.5
玫瑰花油0.52-甲基丁酸乙酯4.0
2-甲基丁酸1.5檸檬油1.0
草莓酸0.3乙酸乙酯2.0
乙酸0.2山楂酊70.0
鳶尾凝脂0.895%乙醇12.0
丁香油1.2蒸餾水3.0
葉醇0.1
杏子香精
杏子香精常以橙花油、茉莉油、玫瑰油、苦橙葉、紫羅蘭等或相應的合成香料來體現其花
香。再以苦杏仁油、苯甲醛、甜橙油、檸檬油、乙酸乙酯、丁酸乙酯、戊酸乙酯、乙酸戊酯、丁酸戊酯、戊酸戊酯、已酸烯丙酯、庚酸烯丙酯、環已基已酸烯丙酯、桂酸乙酯、桂酸丙酯、γ-壬內酯、γ-十一內酯等合成香料組合成果香。而脂蠟氣可用較高級的脂肪醇（庚醇、辛醇、壬醇、癸醇等）及其酯類以及較高級的脂肪酸的酯類獲得。同時適量添加天然康釀克油、已酸乙酯、庚酸乙酯、辛酸乙酯等可增加圓熟感。
配方
組分用量/g組分用量/g
環已基已酸烯丙酯0.2香葉油0.5
苦杏仁油（苯甲醛）11.5茉莉油9.5
乙酸戊酯7.5橙花油18.5
丁酸戊酯7.5玫瑰油3.0
甲酸戊酯10.0檸檬油5.0
戊酸戊酯15.0甜橙油10.5
桂皮油（斯里蘭卡）0.5苯乙酸異戊酯0.1
乙酸乙酯14.5桂酸丙酯0.2
丁酸乙酯4.5?-十一內酯200.0
戊酸乙酯50.0香蘭素85
已酸乙酯10.0溶劑527
a-紫羅蘭酮9.5
生梨香精
生梨的香氣很淡，只有一些著名品種如洋梨、香梨、碭山梨等香氣相對稍濃些。配製生梨
香精常以香檸檬油、乙酸異戊酯等作為其特徵果香，再配合以玫瑰、丁香、鳶尾和香蘭素等甜香，乙酸苄酯、芳樟醇等清香，輔以丁酸乙酯、乙酸乙酯、甜橙油、壬酸乙酯等果實、酒香香韻，這樣就組成了生梨香精。
配方
組分用量/g組分用量/g
丁香酚0.08庚酸乙酯0.04
橙葉油0.30丁酸乙酯2.00
香檸檬油0.80乙酸乙酯3.43
乙基香半素0.30乙酸戊酯2.00
甜橙油1.0095%乙醇75.00
桃醛0.04蒸餾水15.00
丁二酮（10%乙醇）0.01
甜橙油1
甜瓜香精
甜瓜的香氣以青香韻、甜香韻和果香韻組成。果香常用甲酸乙酯、乙酸乙酯、乙酸丁酯、
丁酸乙酯、丁酸戊酯、戊酸乙酯、戊酸戊酯、苯甲醛、十六醛、檸檬油等組成；甜香常以香蘭素、麥芽酚、桂酸甲酯、桂酸苄酯、紫羅蘭酮、丁香油等擬制；而清香常用庚炔羧酸甲酯、辛炔羧酸甲酯、乙酸苄酯、甲酸苄酯、苯乙醛等組合而成。
配方
組分用量/g組分用量/g
桂酸甲酯1香蘭素5
桂酸苄酯1苯乙醛2
大茴香醛1苯甲醛苄酯10
鄰氨基苯甲酸甲酯2壬酸乙酯15
十六醛2檸檬油10
甲酸乙酯20戊酸乙酯40
戊酸戊酯30丙二醇531
丁酸戊酯30蒸餾水300
南方水果香精
椰子香精
椰子香精常以γ-壬內酯（也稱椰子醛）作為主體香料，再以香蘭素、乙基香蘭素增加香
草甜香，又以庚酸乙酯、已酸、辛醇賦以油脂氣和酒香。
配方
組分用量/g組分用量/g
椰子醛2.50丁香油0.25
?-壬內酯0.50苯甲醛0.25
香蘭素1.00植物油95.5
香蕉香精
香蕉香精常以乙酸異戊酯、丁酸異戊酯、乙酸乙酯等擬香蕉的特徵香氣，以甜橙、檸檬等
柑橘類精油增強其天然新鮮感，以丁香油、香蘭素等作為其留香的甜香，同時適量使用丁酸乙酯、乙酸丁酯等以豐滿果香韻。
配方1
組分用量/g組分用量/g
苯乙醛2.0檸檬醛0.5
老姆醚2.0肉桂油0.5
丁酸乙酯2.0丁香酚0.2
乙酸丁酯3.0異丁酸桂酯0.8
2,3-異已二酮1.0草莓醛4.0
乙酸異戊酯1.0乙基香蘭素1.0
丁酸異戊酯33.0玫瑰香精①0.5
庚酸乙酯10.0丙二醇38.5
①玫瑰香精的組成。
配方2
組分用量/g組分用量/g
乙酸乙酯0.375乙酸丁酯1.5
甜橙油0.75丁香油0.225
乙酸戊酯8.25橙葉油0.075
丁酸乙酯1.5香蘭素0.075
丁酸戊酯2.25丙三醇5
蒸餾水15酒精75
檸檬香精
配製檸檬香精用檸檬油，它主要有：寧烯、月桂烯、松油烯、α-蒎烯、β-蒎烯、α-松
油醇、芳樟醇、橙花
醇、正辛醇、辛醛、壬醛、癸醛、十一醛、香茅醛、檸檬醛、乙酸辛酯、乙酸癸酯、乙酸
香茅酯、乙酸香葉
酯、乙酸橙花酯、乙酸芳樟酯等。其中寧烯等萜烯類化合物約佔到90%以上，它們的水溶
性很差，所以在水
溶性的檸檬香精中必須除去它們。
配方
組分用量/g組分用量/g
檸檬油15.0檸檬醛8
95%乙醇68.4乙酸芳樟酯1
水31.6乙酸香茅酯0.5
辛醛0.570%乙醇90
制備將檸檬油與95%乙醇混合，再將水加在乙醇和檸檬油的混合物中，攪拌均勻，靜置
48h，分去上層的檸
檬油萜（可用作油質檸檬香精）。在留下的水層中加入其餘組分。
甜橙香精
甜橙中的揮發性香味成分主要有：寧烯、α-蒎烯、β-月桂烯、凡倫西亞桔烯、正丁醇、
正辛醇、順-3-已烯
醇、香茅醇、香葉醇、橙花醇、芳樟醇、α-松油醇、4-松油烯醇、已醛、辛醛、壬醛、
癸醛、檸檬醛、乙
酸、已酸、乙酸乙酯、丁酸乙酯、丁酸丁酯、已酸乙酯、3-羥基已酸乙酯、3-羥基辛酯乙
酯、乙酸香茅酯、
乙酸香葉酯、乙酸橙花酯、乙酸芳樟酯、芳樟醇氧化物等。
調配甜橙香精就是以冷壓甜橙油或橙汁精油為主原料，採用低濃度乙醇萃取除萜工藝制
得。
配方1
組分用量/g組分用量/g
10倍甜橙油5BHA適量
5倍甜橙油3.5變性澱粉12
甜橙醛0.5苯甲酸鈉1
瓦倫烯0.05檸檬酸適量
癸醛0.05色素適量
酯膠6蒸餾水80
說明本品為橙紅色不透明濁液，溶於水，具新鮮的天然甜橙香味，主要用於汽水的加香，
加香量一般為
0.1%左右。
配方2
組分用量/g組分用量/g
95%乙醇40.095%乙醇29.0
甜橙油20.0癸醛0.01
蒸餾水30.0檸檬醛0.05
菠蘿香精
菠蘿香精主要由菠蘿的特徵果香、香草香、焦糖香、酒香等組成。
配方1
組分用量/g組分用量/g
丁酸乙酯3.02-甲基丁酸乙酯4.0
乙酸乙酯3.03-甲硫基丙酸乙酯0.5
已酸乙酯2.0環已基丙酸烯丙酯1.9
丁酸甲酯3.015%菠蘿呋喃酮15.0
乙酸戊酯0.595%乙醇53.0
已酸烯丙酯1.0蒸餾水19.0
檸檬醛0.1
荔枝香精
荔枝香精常以甜香韻、青香韻、果香韻和修飾香氣組成。其甜香韻以玫瑰甜和焦糖甜香為
主，常可用香葉
油、玫瑰醇、香葉醇、苯乙醇、橙花醇、異丁酸苯乙酯、異丁酸橙花酯、玫瑰花油和玫瑰
甜香和麥芽醇、乙
基麥芽醇等焦糖香，再配合以紫羅蘭酮、桂酸甲酯、桂酸乙酯等組成荔枝甜香。青香常用
甲酸苄酯、乙酸苄
酯、芳樟醇、乙酸芳樟醇、茉莉凈油等茉莉清香。果香常用檸檬油、檸檬醛、丁酸乙酯、
丁酸丁酯、異丁酸
乙酯來擬制。再修飾以薄荷酮、乙酸葛縷酯、乙酸二氫葛縷酯等涼木香，乙醯基噻唑、乙
醯基吡嗪等炸玉米
香氣以及二甲基硫醚、二甲基二硫醚等特徵頭香。
配方
組分用量/g組分用量/g
香葉油0.2乙酸芳樟酯0.5
玫瑰醇2.0乙酸二氯葛縷酯1.2
香葉醇0.5薄荷酮0.4
乙酸玫瑰酯0.8異丁酸桂酯0.6
異丁酸香葉酯0.3乙醯基吡嗪0.05
異丁酸苯乙酯0.2乙醯基噻唑0.05
異丁酸橙花酯0.5香蘭素0.05
玫瑰醚1.2苯甲醇63.4
麥芽醇5.0檸檬油1.5
乙基麥芽醇15.0檸檬醛0.1
乙酸苄酯4.0丁酸乙酯0.05
芳樟醇1.5二甲基硫醚0.4
無花果
無花果為桑科中的落葉灌木或小喬木，夏季開花，秋季果熟，在全國各地均有栽培。花托
可生食，味美可
口。香氣特殊。精油的主要成分有異戊酸異丁酯、3-羥基-α-丁酮等。
配方
組分用量/g組分用量/g
乙酸乙酯510%丁香酚5
檸檬油2510%乙基香蘭素5
異戊酸香葉酯15巧克力豆酊劑8
蘇合香膏510%葫蘆巴豆酊劑10
康釀克油2槭樹香精①30
10%角豆(Ceratonia
siliqua)酊劑
300菠蘿原汁②250
丁酸乙酯1050%檸檬酸
異戊酸苯乙酯5
①槭樹香精組成
組分用量/g組分用量/g
角豆(Ceratoniasiliqua)酊
劑
300香紫蘇酊劑30
圓葉當歸酊劑1210%苯乙酸乙酯1
胡蘆巴香樹脂6
Ethone(10%a-甲基大茴香
烯基丙酮，奇華頓產)
2
10%香豆素(Substitute)15香蘭素4
轉化糖100焦糖色30
蒸餾水500
②菠蘿原汁製作如下：將300kg菠蘿在壓榨機上榨出汁液，加入0.45kg果膠酶並靜置
過夜，在室溫下在離心機上分離去果膠，在真空下將此汗液濃縮至76L。用80%～100%
的異丙醇洗滌已榨過的果肉，回收異丙醇後並真空濃縮至8L，與上述的處理的汁液混合，
並加16L95%的食用酒精即可。
楊梅香精
楊梅為楊梅科楊梅的果實，成熟時香氣以酸甜為主。配製楊梅香精可以草莓樣的酸甜香氣
為主體，輔以奶
香、酒香和特殊的水果香氣。
配方
組分用量/g組分用量/g
乙酸乙酯3楊梅醛5
乙酸異戊酯2桃醛0.2
乙酸苄酯0.5十九醛0.3
丁酸乙酯4紫羅蘭酮0.5
丁酸戊酯1.5麥芽酚0.03
桂酸甲酯0.1戊酸乙酯0.5
鄰氨基苯甲酸甲酯0.02植物油82.5
水楊酸甲酯0.3
覆盆子香精
覆盆子香氣具有似紫羅蘭、茉莉和玫瑰韻調的柔和青甜果香。調配覆盆子香精通常都以紫
羅蘭酮和草莓醛為
基礎，飾以茉莉、玫瑰等花香，同時適當添加已醇、葉醇及其酯類，可增強果實的青鮮香
感。加入覆盆子酮
可賦予香精真實的覆盆子果香，結合使用鳶尾凝脂更可以增強天然感。
配方1
組分用量/g組分用量/g
乙酸乙酯30.0檸檬油6.5
乙酸戊酯250.0麥芽酚1.5
丁酸乙酯37.0二甲基硫醚0.5
丁酸戊酯7.5鳶尾凝脂30.25
鄰氨基苯甲酸二甲酯0.5玫瑰醇5.0
甲基苯基甘油酸乙酯10.0?-十一內酯5.0
香葉醇6.5香蘭素43.0
覆盆子酮8.0溶劑450.0
a-紫羅蘭酮10.0大茴香腦0.25
10%茉莉凈油3.5
橘子香精
配方1
組分用量/g組分用量/g
橘子香精（油相）10環糊精（穩定劑，水相）15
乙酸異丁酸蔗糖酯(油相)10蒸餾水50
阿拉伯樹膠（水相）15
配方2
組分用量/g組分用量/g
檸檬醛0.1廣柑油（除萜）10
癸醛0.01甜橙油5
黑香豆酊0.5丙三醇5
蒸餾水35酒精（95%）60
西方風味香精
咖啡香精
咖啡香精是以咖啡酊或咖啡浸膏為基礎，再配以少量能增強其香氣的香料，如2-糠基硫醇、
甲基環戊烯醇酮、麥芽酚、丁二酮等等。
配方
組分用量/g組分用量/g
咖啡酊577.5丁二酮1.0
戊二酮4.0異丁香酚1.0
甲基乙基乙醛4.0愈創木酚0.4
乙酸3.0甲基硫醇0.6
吡啶3.0糠硫醇0.3
戊酸2.0辛醇0.2
甲基糠醛2.0丙二醇400.0
糠醛1.0
可樂香精
常見的可樂型香精以果香和辛香所組成。果香常用蒸餾白檸檬油、冷榨檸檬油、甜橙油為
主；另外，辛香則
常用肉桂油、斯里蘭卡桂皮油、桂葉油、丁香油、大茴香油、肉豆蔻衣油、肉豆蔻油、小
豆蔻油，還常用些
橙花油、白蘭花油、玳玳花油、玫瑰花油等花香進行修飾。
配方1
蒸餾白檸檬油210a-松油醇10
白檸檬油（5倍）201%龍腦2
甜橙油20薄荷腦10
檸檬油20異戊醇5
肉桂油1095%乙醇60
斯里蘭卡桂皮油5三醋酸甘油酯626
姜油2
可可香精
可可香精常為可可粉、可可種皮（可可殼）萃取物為主香，再和合以香草香組成的。
配方
組分用量/g組分用量/g
可可殼酊45.0香蘭素4.5
可可粉酊45.095%乙醇5.5
巧克力香精
巧克力是以從可可豆中分離出的可可脂為主，加上牛奶、奶油、糖等調配而成的。巧克力
香精大都採用可可
浸出物，另外再加入香蘭素和奶油香來配製。
配方
組分用量/g組分用量/g
二甲基硫醚1.0香蘭素15.0
乙酸異丁酯1.0?-丁內酯5.0
乙酸苯乙酯0.5苯乙酮0.5
10%丁二酮0.5苯甲醛1.0
50%糠醛0.5苯乙酸2.0
異戊醇1.0麥芽酚3.0
異丁醛8.0乙醛2.0
異戊醛15.0可卡醛（Cocal,IFF）5.0
苯乙醇8.0丙二醇31.0
非瓜果香精
蜂蜜香精
一般蜂蜜香精常以苯乙酸和苯乙酸乙酯、苯乙酸異丁酯、苯乙酸苯乙酯等苯乙酸酯類作為
其特徵的密甜香
韻，適量配合以洋茉莉醛、香蘭素、乙基香蘭素、大茴香醛等豆甜香韻，有時頭香上適量
使用壬酸乙酯等釀
甜香，以及果甜香氣組成。
配方
組分用量/g組分用量/g
甲基苯乙酮0.375壬酸乙酯31.250
香葉油0.375乙酸戊酯187.000
芹菜籽油0.375乙酸乙酯100.000
乙基香蘭素6.000戊酸戊酯250.000
苯乙酸12.00095%乙醇400.000
苯乙酸甲酯12.625
奶油香精
傳統的奶油香精習慣上均以香蘭素的奶香為主料，輔以少量丁二酮、丁酸等香料而成。這
種配方使用中總感
到偏香草香氣，作為奶香則感到單調。隨著從天然奶油中找到的揮發性香味成分越來越多，
奶油香精的配製
也有很大變化，現在的奶油香精重視的酸、醇、酯、內酯、醛類的香味平衡。酸類可常用
乙酸、丁酸、已
酸、辛酸、癸酸、十二酸、十四酸等；醇類常用已醇、辛醇、壬醇、癸醇等；酯類常用乙
酸乙酯、丁酸乙
酯、已酸乙酯、辛酸乙酯和癸酸乙酯等；內酯常用γ-壬內酯、γ-癸內酯、δ-癸內酯、
δ-十二內酯等；醛類
常用庚醛、辛醛、壬醛、癸醛等。再與香蘭素、麥芽酚等協調並加上丁醯基乳酸丁酯、丁
二酮配製而成奶油
香精。
配方1
組分用量/g組分用量/g
丁酸3.5洋茉莉醛0.3
丁二酮1.0丁酸丁酯0.5
甲基香豆素0.5?-十一內酯0.1
香蘭素1.5乙醇35.0
丁酸乙酯1.6甘油55.0
丁酸戊酯1.0
配方2
組分用量/g組分用量/g
香蘭素0.15丁酸乙酯2.25
丁二酮0.75丁酸戊酯0.30
甲基香豆素1.80植物油85.00
丁酸9.75
色拉香精
拉（Salad）即涼拌雜菜（萵苣、蘿卜、洋蔥、捲心菜、洋山芋等），因此色拉風味料
以辛香料為主（丁
辛、姜辛、桂辛、茴辛等）。
配方
組分用量/g組分用量/g
甜橙油30
甘牛至油（Origanum
marjorana）
30
檸檬油3010%芹菜籽油90
芹菜籽油樹脂45肉豆蔻油15
鼠尾草油（南斯拉夫產）35時蘿油150
龍蒿油35百里香油20
芫荽油25姜油5
姜油樹脂10月桂油10
桂葉油（斯里蘭卡）20茴香15
眾香子油10玉米油325
丁香油100
制備將上述混合物再以10%的比例稀釋於玉米油中。
生薑香精
生薑香精常以生薑油為主，再加上丁香油等辛香以改善和諧調生薑的口味，有時也用少量
的酯類香料增強果香。
配方
組分用量/g組分用量/g
生薑油樹脂52.2甜橙油13.0
冷榨白檸檬油13.095%乙醇354.6
蒸餾白檸檬油13.0蒸餾水541.2
檸檬油13.0
酒用香精
白酒香精
清香型白酒香精
清香型酒的風格是清香純正，諸味協調，醇甜和順，餘量爽凈。其代表酒的品種是汾酒。
它的主體香成分是
乙酸乙酯和乳酸乙酯。從總酯來說，它比濃香型、醬香型都低，並且突出乙酸乙酯。而已
酸乙酯含量很低。
另外還含有較多的多元醇、丁二酮、2,3-丁二醇等芳香物質。下面是一種清香型仿汾酒的
酒用香精配方：
配方
組分用量/g組分用量/g
乙酸乙酯35.0乙酸3.5
丙酸乙酯0.2已酸0.02
丁酸乙酯0.5乳酸1.5
已酸乙酯1.0丙醇1.0
乳酸乙酯14.0異丁醇0.12
正丁醇0.0670%山梨醇2.0
異戊醇0.5甘油10.0
正已醇0.0195%乙醇22.46
丁二酮0.005蒸餾水8.0
2,3-丁二醇0.125
③ 測定白酒中總醛的方法有哪些
1 范圍
2 f. a9 ~. b3 ]2 a! W7 \0 U本方法採用填充柱氣相色譜法測定白酒中醇酯醛的含量，本方法適用於各種香型白酒中醇酯醛含量的測定，其種類包括屬於醇類的正丙醇、異丁醇、仲丁醇、正丁醇、異戊醇，屬於酯類的乙酸乙酯、丁酸乙酯、戊酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯及屬於醛類的乙醛、異戊醛，此外還有乙縮醛，總計13 種白酒主要香味組分，結果表示為mg/100mL 保留一位小數。
) R! h( q$ s. a4 ~2 原理" p% J6 ]' T7 p
採用專用於白酒主要香味組分分析的填充柱DNP ，混合柱根據白酒香味組分在氣液兩相中具有不同的分配系數，在流經DNP 混合柱時經氣液兩相作用先後從色譜柱中流出，在氫火焰中電離檢測而獲得相應色譜峰信號，以標樣保留時間定性內標法定量。3 F: Z V+ N* y7 p% h& S! {9 j<br/>3 試劑* Q# h2 E2 R% x" S<br/>3.1 擔體Chromosorb W (AW-DMCS) 60/80 目或80/100 目<br/>- m/ v& d$ k$ k; f+ ]3.2 鄰苯二甲酸二壬酯簡稱DNP<br/>* t7 t; z1 L/ p) d3 m3.6 醇、酯、醛標准溶液<br/>( q2 Q& C7 L( |0 `2 f8 _. {6 u以色譜純試劑正丙醇、異丁醇、仲丁醇、正丁醇、異戊醇、乙酸乙酯、丁酸乙酯、戊酸、乙酯己酸、乙酯、乳酸乙酯、異戊醛、乙縮醛等12 種標樣分別用60% 乙醇溶液配成體積比為2 %的標准樣品溶液其確切濃度決定於各標准樣品試劑的比重。<br/>& j( e! |/ X' B3.7 乙酸正丁酯內標溶液17.6g/L<br/> j' f; |8 Y% ^: I% d' \以分析純試劑乙酸正丁酯含量不低於99.0% 用60 %乙醇溶液配成體積比為2%的內標溶液濃度為17.6g/L。<br/>. e" {: W8 n* Z9 L8 A! E4 儀器1 G7 R/ T+ t/ E/ ?<br/>4.1 氣相色譜儀配有氫火焰離子化檢測器2 E$ C6 ~8 N5 q. U( u* e- I4 t- l<br/>4.2 微量注樣器10mL<br/>3 T8 _' D3 U& s! Z$ r7 }5 操作步驟! N6 U9 Q- j1 N3 C! n, i* q
5.1 色譜柱的制備
Z) U. b) S) W# S! y8 u稱取15.0g 擔體，（Chromosorb W ）另稱取3.00gDNP 准確至1mg ，其量相當於擔體重量的20 %及1.05g 吐溫-80 准確至1mg 其量相當於擔體重量的7%，於另一小燒杯中，量取和擔體等體積的無水甲醇，先用少量甲醇依次將DNP 與吐溫-80 溶解並轉移至蒸發皿中，隨後將剩餘溶劑倒入攪勻，然後邊攪拌邊將擔體慢慢倒入混勻，將蒸發皿置於50 水浴上不時翻動將溶劑蒸發待蒸發至干時移至90～95℃烘箱中烘乾1h ，取出冷至室溫後，將此填料裝入內徑2mm×2m 已洗凈的色譜柱中通載氣於115℃老化16h。0 k0 R. h* V% \7 i
5.2 色譜條件) c$ T7 k t$ a* \具體可以去斗酒網的酒客島頻道提問一下，都是酒友專業人士希望對你有幫助
④ 氣相色譜法如何測定白酒里的成分含量
摘要 使用氣相色譜儀，備有氯火焰離子化檢測器和毛細管柱PEG-20M,以程序升溫的方式採用內標法定量計 算，測定白酒中的主要成分與其它氣相色譜法相比較，本實驗方法簡便、快捷、准確度高
⑤ 國標水分的檢測方法
水分測定方法有許多種，我們在選擇時要根據食品的性質來選擇。常採用的水份測定方法如下：
1、熱乾燥法：
① 常壓乾燥法（此法用的廣泛）；
② 真空乾燥法（有的樣品加熱分解時用）；
③ 紅外線乾燥法（此法用的廣泛）；
④ 真空器乾燥法（乾燥劑法）；
2、蒸餾法
3、卡爾費休法
4、水分活度AW的測定
下面我們分別講述測定水分的方法。
一、常壓乾燥法
1、特點與原理
⑴特點：此法應用zui廣泛，操作以及設備都簡單，而且有相當高的度。
⑵原理：食品中水分一般指在大氣壓下，100℃左右加熱所失去的物質。但實際上在此溫度下所失去的是揮發性物質的總量，而不完全是水。
2、乾燥法必須符合下列條件（對食品而言）：
⑴水分是*揮發成分
這就是說在加熱時只有水分揮發。例如，樣品中含酒精、香精油、芳香脂都不能用乾燥法，這些都有揮發成分。
⑵水分揮發要完全
對於一些糖和果膠、明膠所形成凍膠中的結合水。它們結合的很牢固，不宜排除，有時樣品被烘焦以後，樣品中結合水都不能除掉。因此，採用常壓乾燥的水分，並不是食品中總的水分含量。
⑶食品中其它成分由於受熱而引起的化學變化可以忽略不計。
例：還原糖+氨基化合物△→ 變色（美拉德反應）+H2O↑
還有H2C4H4O6（酒石酸）+ 2NaHCO3 → NaC4H4O6（酒石酸鈉）+2H2O+2CO2
發酵糖（NaHCO3+KHC4H4O6）△ →H2O+CO2+ NaKC4H4O6
高糖高脂肪食品不適應
只看符合上面三點就可採用烘箱乾燥法。烘箱乾燥法一般是在100～105℃下進行乾燥。
我們講的上面三點，應該是具體的具體分析，對於一個分析工作人員，或者是一個技術員，雖然乾燥法必須符合三點要求，那麼我們在只有烘箱的情況下，而且蓑紅樣品不見得符合以上講的三點，難道就不測水分嗎？
例如，啤酒廠要經常測啤酒花的水分，啤酒花中含有一部分易揮發的芳香油。這一點不符合我們的*點要求，如果用烘箱法烘，揮發物與水分同時失去，造成分析誤差。此外，啤酒花中的α—酸在烘乾過程中，部分發生氧化等化學反應，這又造成分析上的誤差，但是一般工廠還是用烘乾法測定，他們一般採取低溫長時間（80～85℃烘4小時），或者高溫短時（105℃烘1小時）
所以應根據我們所在的環境和條件選擇合適的操作條件，當然我們應該首先明白有沒有揮發物和化學反應等所造成的誤差。
3、烘箱乾燥法的測定要點
⑴取樣（稱樣）
在采樣時要特別注意防止水分的變化，對有些食品例如奶粉、咖啡等很容易吸水，在稱量時要迅速，否則越稱越重。
⑵乾燥條件的選擇
三個因素：①溫度；②壓力（常壓、真空）乾燥；③時間。
一般是溫度對熱不穩定的食品可採用70～105℃；溫度對熱穩定的食品採用120～135℃。
4、操作方法
清洗稱量皿→烘至恆重→稱取樣品→放入調好溫度的烘箱（100～105℃）→烘1.5小時→於乾燥器冷卻→稱重→再烘0.5小時→稱至恆重（兩次重量差不超過0.002g即為恆重）
＊油脂或高脂肪樣品，由於脂肪氧化，而後面一次重量反而增加，應以前一次重量計算。
＊對於易焦化和容易分解的食品，可以選用比較低的溫度或縮短乾燥時間。
＊對於液體與半固體樣品，要在稱量皿中加入海砂，使樣品疏鬆，擴大蒸發的接觸面，並且用一個玻璃棒作為容器。先放到沸水浴中烘，烘的差不多，再放到烘箱烘，否則不加海砂樣品容易使表面形成一層膜，造成水分不易出來，另外易沸騰的液體飛沫使重量損失。
計算：水分= G2－ G1 / W
固形物（%）=100 －水分%
G1 —— 恆重後稱量皿重量（g）
G2 —— 恆重後稱量皿和樣品重量（g）
W —— 樣品重量（g）
固形物 —— 指食品內將水分排除以後的全部殘留物。其組分有蛋白質、脂肪、粗纖維、無氮抽出物和灰分等。
5、烘箱乾燥法產生誤差的原因
⑴樣品中含有非水分易揮發性物質（酒精、醋酸、香精油、磷脂等）；
⑵樣品中的某些成分和水分的結合，使測的結果偏低（如蔗糖水解為二分子單糖），主要是限制水分揮發；
⑶食品中的脂肪與空氣中的氧發生氧化，使樣品重量增重；
⑷在高溫條件下物質的分解（果糖對熱敏感）；
果糖C6H12O6大於70℃△→C6H6O3+ 3H2O
⑸被測樣品表面產生硬殼，妨礙水分的擴散；尤其是對於富含糖分和澱粉的樣品；
⑹烘乾到結束樣品重新吸水。
二、真空乾燥法
1、原理：利用較低溫度，在減壓下進行乾燥以排除水分，樣品中被減少的量為樣品的水分含量。
本法適用於在100℃以上加熱容易變質及含有不易除去結合水的食品。其測定結果比較接近真正水分。
2、操作方法
准確稱2.00～5.00g樣品→於烘至恆重的稱量皿→至真空烘箱→70℃、真空度93.3～98.6KPa（700～740mmHg）→烘5小時→於乾燥皿冷卻→稱至恆重
計算：水分= G / W
G —— 樣品中乾燥後的失重（g）
W —— 樣品重量（g）
真空乾燥法測水分，一般用於100℃以上容易變質、破壞或不易除去結合水的樣品，如糖漿、味精、砂糖、糖果、蜂蜜、果醬和脫水蔬菜等樣品都可採用真空乾燥法測定水分。
三、蒸餾法測定水分（迪安—斯達克）
蒸餾發出現在二十世紀初，當時它採用沸騰的有機液體，將樣品中水分分離出來，此法直到如今仍在適用。
1、原理：把不溶於水的有機溶劑和樣品放入蒸餾式水分測定裝置中加熱，試樣中的水分與溶劑蒸汽一起蒸發，把這樣的蒸汽在冷凝管中冷凝，由水分的容量而得到樣品的水分含量。
2、步驟
准確稱2.00～5.00g樣品→於250ml水分測定蒸餾瓶中→加入約50～75ml有機溶劑→接蒸餾裝置→徐徐加熱蒸餾→至水分大部分蒸出後→在加快蒸餾速度→至刻度管水量不在增加→讀數
計算：
水分=V/W
V —— 刻度管中水層的容量ml
W —— 樣品的重量（g）
3、常用的有機溶劑及選擇依據
常用的有機溶劑有比水清的，也有比水重的。
苯甲苯二甲苯 CCl4
密度 0.88 0.86 0.86 1.59
沸點 80℃ 80℃ 140℃ 76.8℃
選擇依據：對熱不穩定的食品，一般不採用二甲苯，因為它的沸點高，常選用低沸點的有機溶劑，如苯。對於一些含有糖分，可分解釋放出水分的樣品，如脫水洋蔥和脫水大蒜可採用苯，要根據樣品的性質來選擇有機溶劑。
4、蒸餾法的優缺點
優點：
⑴熱交換充分
⑵受熱後發生化學反應比重量法少
⑶設備簡單，管理方便
缺點：
⑴水與有機溶劑易發生乳化現象
⑵樣品中水分可能完全沒有揮發出來
⑶水分有時附在冷凝管壁上，造成讀數誤差
對分層不理想，造成讀數誤差，可加少量戊醇或異丁醇防止出現乳濁液。
這種方法用於測定樣品中除水分外，還有大量揮發性物質，例如，醚類、芳香油、揮發酸、CO2等。目前AOAC規定蒸餾法用於飼料、啤酒花、調味品的水分測定，特別是香料，蒸餾法是*的、公認的水分檢驗分析方法。
四、卡爾—費休法
眾所周知，卡爾費休法是測定各種物質中微量水分的一種方法，這種方法自從1935年由卡爾費休提出後，一直採用I2、SO2、吡啶、無水CH3OH（含水量在0.05%以下）配製而成，並且國際標准化組織把這個方法定為國際標准測微量水分，我們國家也把這個方法定為國家標准測微量水分。
1、原理：在水存在時，即樣品中的水與卡爾費休試劑中的SO2與I2產生氧化還原反應。
I2 + SO2 + 2H2O → 2HI + H2SO4
但這個反應是個可逆反應，當硫酸濃度達到0.05%以上時，即能發生逆反應。如果我們讓反應按照一個正方向進行，需要加入適當的鹼性物質以中和反應過程中生成的酸。經實驗證明，在體系中加入吡啶，這樣就可使反應向右進行。
3 C5H5N+H2O+I2+SO2 → 2氫碘酸吡啶+硫酸酐吡啶
生成硫酸酐吡啶不穩定，能與水發生反應，消耗一部分水而干擾測定，為了使它穩定，我們可加無水甲醇。
硫酸酐吡啶 + CH3OH（無水）→ 甲基硫酸吡啶
我們把這上面三步反應寫成總反應式為：
I2+SO2+H2O+3吡啶+CH3OH2氫碘酸吡啶+甲基硫酸吡啶
從反應式可以看出1mol水需要1mol碘，1mol二氧化硫和3mol吡啶及1mol甲醇而產生2mol氫碘酸吡啶、1mol甲基硫酸吡啶。這是理論上的數據，但實際上，SO2、吡啶、CH3OH的用量都是過量的，反應完畢後多餘的游離碘呈現紅棕色，即可確定為到達終點。
I2︰SO2︰C5H5N = 1︰3︰10
2、卡爾費休試劑的配製與標定
若以甲醇作溶劑，則試劑中I2、SO2、C5H5N（含水量在0.05%以下）三者的克分子數比例為
I2︰SO2︰C5H5N = 1︰3︰10
這種試劑有效濃度取決於碘的濃度。新配製的試劑其有效濃度不斷降低，其原因是由於試劑中各組分本身也含有一些水分，但試劑濃度降低的主要原因是由一些副反應引起的，較高消耗了一部分碘。
這也說明了配製這種試劑要單獨配，分甲乙兩種試劑並且分別貯存，臨用時再混合，而且要標定。
甲液 I2的CH3OH溶液
乙液 SO2的CH3OH吡啶溶液
這種方法對試劑要求嚴格，要求甲醇、吡啶都是無水的，並且要求有KF水分測定儀（上海化工研究所制）
配製：
稱85gI2→於乾燥的有塞棕色燒瓶中→加670ml無水CH3OH→塞上瓶塞→振搖使I2全部溶解→加270ml吡啶→混勻→於冰水浴冷卻→通乾燥的SO2氣體60g→塞上瓶塞→於暗處24小時後標定使用
標定：
先加50ml無水甲醇→於反應器中→接通電源→啟動電磁攪拌器→用KF試劑滴入甲醇中使甲醇中尚殘留的痕量水分與試劑達到終點（即指針到達一定刻度，不記錄KF試劑用量）→保持一分鍾→用10μl注射器從反應器加料口注入10μl蒸餾水（相當於0.01g水）→電流表指針接近零點→用KF試劑滴定到原定終點→記錄
F =G*10
⑥ 白酒中甲醛的測定
上一篇我們介紹了白酒中乙酸乙酯、丁酸乙酯、戊酸乙酯、乳酸乙酯、己酸乙酯的檢測，今天我們介紹白酒中甲醇、雜醇油的檢測。
甲醇雜醇油含量是白酒的重要衛生指標，過量的甲醇會引起失明甚至死亡，雜醇油的含量影響了白酒的風味。因此，甲醇、雜醇油等組分是白酒分析中的重要指標，分析項目主要包括：正丙醇、異丁醇、異戊醇等。
參考標准
GB/T 10345-2007 白酒分析方法
DBS52/ 021-2016 食品安全地方標准 白酒中甲醇、高級醇類和酯類的同時測定 氣相色譜法
GB10343-2002 食用酒精
GB/T 394.2-2008 酒精通用分析方法
分析原理
白酒經高溫氣化後，隨同載氣進入色譜柱，利用被測定的各組分在氣液兩相中具有不同的分配系數的差異而得的分離。分離後的組分先後流出色譜柱，進入 FID 檢測器，根據色譜圖上各組分峰的保留值與標樣相對照進行定性，利用峰面積，以外標（或內標）法定量。
⑦ 戊醇標准如何測試
5.1 正戊醇和異戊醇含量的測定
按GB/T 9722—1988規定測定，其中：
5.1.1 測定條件
檢測器：熱導檢測器；
載氣及流量：氫氣，45mL/min；
柱長（玻璃柱或不銹鋼柱）：3m；
柱內徑：3mm;
固定相：10%聚乙二醇20M塗於101白色硅烷化載體[0.18mm～0.25mm(60目～80目)]，於180℃老化4h以上；
柱溫度：80℃；
汽化室溫度：180℃；
檢測室溫度：180℃；
進樣量: 4??L;
色譜柱有效板高：Heff≤4.8mm;
不對稱因子：f≤1.2;
難分離物質對的分離度：R≥1.5（正戊醇和異戊醇）；
組分相對主體的相對保留值：r異丁醇，異戊醇=0.45；r正丁醇，異戊醇=0.64；r正戊醇，異戊醇=1.29。
5.1.2 定量方法
按GB/T 9722—1988中8.2規定測定。
⑧ IL-2活性測定問題
實驗前應明確的問題
1.選擇適當的細胞接種濃度。一般情況下，96孔培養板的一內貼壁細胞長滿時約有105個細胞。但由於不同細胞貼壁後面積差異很大，因此，在進行MTT試驗前，要進行預實驗檢測其貼壁率、倍增時間以及不同接種細胞數條件下的生長曲線，確定試驗中每孔的接種細胞數和培養時間，以保證培養終止致細胞過滿。這樣，才能保證MTT結晶形成酌量與細胞數呈的線性關系。否則細胞數太多敏感性降低，太少觀察不到差異。
2.葯物濃度的設定。一定要多看文獻，參考別人的結果再定個比較大的范圍先初篩。根據自己初篩的結果縮小濃度和時間范圍再細篩。切記！否則，可能你用的時間和濃度根本不是葯物的有效濃度和時間。
3. 時間點的設定。在不同時間點的測定OD值，輸入excel表，最後得到不同時間點的抑制率變化情況，畫出變化的曲線，曲線什麼時候變得平坦了（到了平台期）那個時間點應該就是最好的時間點（因為這個時候的細胞增殖抑製表現的最明顯）。
4.培養時間。200ul的培養液對於10的4～5次方的增殖期細胞來說，很難維持68h，如果營養不夠的話，細胞會由增殖期漸漸趨向G0期而趨於靜止，影響結果，我們是在48h換液的。
5.MTT法只能測定細胞相對數和相對活力，不能測定細胞絕對數。做MTT時，盡量無菌操作，因為細菌也可以導致MTT比色OD值的升高。
6.理論未必都是對的。要根據自己的實際情況調整。
7.實驗時應設置調零孔，對照孔，加葯孔。調零孔加培養基、MTT、二甲基亞碸。對照孔和加葯孔都要加細胞、培養液、MTT、二甲基亞碸，不同的是對照孔加溶解葯物的介質，而加葯組加入不同濃度的葯物。
8.避免血清干擾。用含15％胎牛血清培養液培養細胞時，高的血清物質會影響試驗孔的光吸收值。由於試驗本底增加，會試驗敏感性。因此，一般選小於10％胎牛血清的培養液進行。在呈色後，盡量吸凈培養孔內殘余培養液。
實驗步驟
貼壁細胞：
1.收集對數期細胞，調整細胞懸液濃度，每孔加入100ul,鋪板使待測細胞調密度至1000-10000孔，（邊緣孔用無菌PBS填充）。
2.5%CO2，37℃孵育，至細胞單層鋪滿孔底（96孔平底板）,加入濃度梯度的葯物,原則上，細胞貼壁後即可加葯，或兩小時，或半天時間，但我們常在前一天下午鋪板，次日上午加葯.一般5-7個梯度,每孔100ul,設3-5個復孔.建議設5個，否則難以反應真實情況
3.5%CO2，37℃孵育16-48小時，倒置顯微鏡下觀察。
4.每孔加入20ulMTT溶液（5mg/ml，即0.5%MTT），繼續培養4h。若葯物與MTT能夠反應，可先離心後棄去培養液，小心用PBS沖2-3遍後，再加入含MTT的培養液。
5.終止培養，小心吸去孔內培養液。
6.每孔加入150ul二甲基亞碸，置搖床上低速振盪10min，使結晶物充分溶解。在酶聯免疫檢測儀OD490nm處測量各孔的吸光值。
7.同時設置調零孔（培養基、MTT、二甲基亞碸），對照孔（細胞、相同濃度的葯物溶解介質、培養液、MTT、二甲基亞碸）
懸浮細胞：
1）收集對數期細胞，調節細胞懸液濃度1×106/ml，按次序將①補足的1640（無血清）培養基40ul ；②加Actinomycin D（有毒性）10ul用培養液稀釋 lg/ml，需預試尋找最佳稀釋度，1:10-1:20)；③需檢測物10ul；④細胞懸液50ul（即5×104cell/孔），共100ul加入到96孔板（邊緣孔用無菌水填充）。每板設對照（加100(儲存液100 1640）。
2）置37℃，5%CO2孵育16-48小時，倒置顯微鏡下觀察。
3）每孔加入10 ul MTT溶液（5 mg/ml，即0.5%MTT），繼續培養4 h。（懸浮細胞推薦使用WST-1，培養4 h後可跳過步驟4），直接酶聯免疫檢測儀OD570nm（630nm校準）測量各孔的吸光值）
4）離心（1000轉x10min），小心吸掉上清，每孔加入100 ul二甲基亞碸，置搖床上低速振盪10 min，使結晶物充分溶解。在酶聯免疫檢測儀OD570nm（630nm校準）測量各孔的吸光值。
5）同時設置調零孔（培養基、MTT、二甲基亞碸），對照孔（細胞、相同濃度的葯物溶解介質、培養液、MTT、二甲基亞碸），每組設定3復孔。
MTT的配製
MTT一般最好現用現配，過濾後4ºC避光保存兩周內有效，或配製成5mg/ml保存在-20度長期保存，避免反復凍融，最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光以免分解。我一般都把MTT粉分裝在EP管里，用的時候現配，直接往培養板中加，沒必要一下子配那麼多,尤其當MTT變為灰綠色時就絕對不能再用了。
MTT有致癌性，用的時候小心,有條件最好帶那種透明的簿膜手套.配成的MTT需要無菌，MTT對菌很敏感；往96孔板加時不避光也沒有關系，畢竟時間較短，或者你不放心的時候可以把操作台上的照明燈關掉.
配製MTT時用用PBS<ph=7.4>溶解,也有人用生理鹽水配，60℃水浴助溶。
PBS配方:
Nacl 8g
Kcl 0.2g
Na2HPO4 1.44g
KH2PO4 0.24g
調ph 7.4
定容1L
關於細胞的接種(鋪板)
細胞過了30代以後就不要用了,因為狀態不好了;培養板要用好的（最好進口板），不好的板或重復利用的板只可做預實驗。
接種時最好按照預實驗摸索出的密度接種, 因為細胞密度在10000/ml左右時，所測得的OD值的區間即細胞抑制率（或者增值率）的所呈現的線性關系最好，結果最可信。如果鋪的太稀細胞的殺傷不會很明顯，太密細胞可能都會凋亡，因為細胞長的太快營養會不夠，最後導致死亡。且而細胞過密或者過少，增殖都會過快或者過慢，其增值率線性關系不佳。故而MTT細胞密度多採用10000/ml，100ul/孔。
細胞密度要根據不同細胞的特點來定.如果你做的葯品對細胞具有刺激作用那麼取小點的細胞濃度，如果你做的葯品對細胞具有抑製作用那麼取大點的細胞濃度，這樣與對照的區別更明顯，數據更好。懸浮細胞每孔的細胞數可達到105,貼壁細胞可為103-104.
其它的聲音：
1.首先細胞的接種密度一定不能過大，一般每孔1000個左右就夠了，我認為寧少勿多。尤其是對於腫瘤細胞。10000/孔是太高了，這樣即使葯物有作用，MTT方法也是表現不出的，最佳點板濃度在4000-5000/孔，太少的話SD值會很大。
2.MTT本身就是比較粗的實驗，增殖率10%左右的波動都不算奇怪。特別是新手，20％的波動也是常見的，所以很可能是技術原因引起的，特別是種板技術一定要過關。
3.我做的是腫瘤細胞的MTT實驗,這種細胞長的很快一開始我是用100000/ML的濃度來接種的,結果細胞長的太滿結果是沒有梯度也沒有線性關系.後來調整濃度,用過40000~80000/ML的濃度都做過MTT實驗,結果發現做的結果比較好點的是60000~70000/ML的濃度組的.用40000/M的濃度的組,由於細胞少,葯物作用的梯度還是有,只是沒有很好的線性關系.還有根據細胞生長速度以及葯物的特性(有時間依賴性和濃度依賴性的葯物)來確定培養時間是48小時還是72小時.
注意細胞懸液一定要混勻，已避免細胞沉澱下來，導致每孔中的細胞數量不等，可以每接幾個就要再混勻一下。加樣器操作要熟練，盡量避免人為誤差。雖然移液器比移液管精確得多，但是如果操作不熟，CV會在8%左右。另外，吹散次數過多也會影響細胞活力。所以要熟練鞋、快些上板。
首先說說我的一點經驗：
1.吹打時懸液總量不能太多，達到吸管吸液量的3到4倍，可能比較容易混勻。10ml的離心管裡面最好裝3~4ml的懸液：懸液太少容易吹起很多氣泡，懸液太多又不容易吹成單細胞懸液。。。
2.吸管的吸液量最好在1ml左右：吸液量過多的話，一下吸起很多液體，管中所剩就很少，這樣吹打容易起泡，吸液量過少，吹打的力度就不夠，吹打就會不均勻。如果是吸液量1ml多的吸管，總液量在5ml左右為益
3.吸的時候要在懸液底部，然後提起來一點，但是吹下去的時候不要離開液面，否則容易吹打出氣泡。
4.吹打次數100左右，就可以吹打均勻了（有人認為加細胞前吹打30－50次基本就差不多均勻了。加細胞的時候每接種2孔反復吹打3次，每吹打3次後槍頭垂懸與細胞懸液中5秒鍾，然後再以一定的速度吸取懸液。）
5.向每孔中用槍頭加入細胞時不要太快，否則你會發現細胞在加入的瞬間會由於槍頭的沖力在孔底聚集一堆，一般都在孔的底部中央，而周邊很少，這種不均勻的分散會產生接觸抑制，影響細胞的生長。所以速度不能太快也不能太慢。我習慣每塊板加完後平握手中，向左3下，向右3下，在往返回復3下移動，目的是使得細胞能分散的均勻些。（鋪板技術是MTT實驗的關鍵，也是基礎，一定要練好。曾經有同學用漩渦振盪器混勻細胞，最後細胞全死了，建議不要採用這種方法混勻細胞。
加入MTT
個人認為MTT最關鍵的是你的細胞數目和你加入真正起作用的的MTT的適當比例，具體細胞數目和真正起作用的的MTT之間的關系確實不好確定，我認為MTT多加一些比少加好一些
MTT的量各家報道不同，一般是過量的，所以10ul即夠了。如果不使用96孔板，培養基超過100ul，MTT按照10%的比例加入.加入MTT以後振盪一下讓MTT與培養基混勻，不過這個應該關系不大。
如加入MTT後都有個別孔立即變為藍黑色，則污染的可能性極大,另外MTT稀釋後加入細胞前還是需要以過濾的方式滅菌為宜.且在加MTT前可以先在鏡下觀察，看看是否有孔染菌，染菌的孔常常是臨近的
因為血清中白蛋白對大部分的葯物都有結合效應，所以可以單獨將葯物和MTT加在一起，看會不會起反應。如果不起反應，就不用去除含葯物的培液，直接加MTT即可。
如何清除上清
百家爭鳴：
1.加DMSO前要把液體吸掉，但培養液里的紫色結晶可能會吸去，可在這之前先用平板離心機離心96孔板，2000r，5分鍾，然後吸掉上清(如果是懸浮細胞，則推薦此法,懸浮細胞要離心2500rpm×10min.且其做MTT最好用圓底型96孔板,清除上清時注意不要把下面的結晶顆粒吸掉,建議各孔吸棄150-160ul即可)。
2.我每次將MTT加入後，再孵育四個小時，然後用離心機離心1000G,5min。但是用槍小心地吸上清，還是會將一小部分藍色結晶吸出。所以還是建議翻轉倒扣的方法吧！
3.另外，可以直接將板翻轉倒扣（墊幾層濾紙）2－3次，比用「吸」的辦法更不容易使細胞脫離出來。可以輕拍，或者傾斜一點幫助吸液，發現紫色結晶幾乎沒有肉眼可見的掉脫，但前提是你本身細胞貼壁要比較牢，半貼壁生長的細胞容易脫離。假如葯物作用時間長的話，陰性對照組可能由於細胞過多而使加入MTT後形成的結晶漂起來，這樣就不能直接倒掉上清。
4.做MTT時，這一步驟一定要小心，不要採用倒的方式。因為貼壁不牢的細胞會被倒掉，從而影響OD值。懸浮細胞，不要翻板，離心後也不要翻板，這個方法害死人。
5.加完MTT反應3－4h後，從培養箱取出96孔板的動作要輕柔，避免振盪結晶,使其滑落.你可以試著將96孔板傾斜30度角，然後用槍尖慢慢吸，有的細胞可以用排槍一起吸，有的則要耐心的一個個用槍頭吸，槍尖的力度和方向要保證每個孔都一致。不要讓槍頭接觸到孔底，且一旦傾斜孔板後就不要反復傾斜放平，這樣也會使結晶脫落。
6.用醫用的注射器加上針頭吸取液體的，吸取時要把板子斜放，沿著壁吸取就好了！這次MTT我用1ml針頭仔細吸培養液,覺得比其它方法可靠,一般不會吸走紫色結晶.
避免清除上清而改進的方法
由於一般可離心96孔板的離心機不好找。既使是貼壁細胞做MTT時，用DMSO溶解得到結果也不好，不是得不到預期結果就是可重復性差。
解決方法1:用以下文獻方法：周建軍等，評價抗癌物質活性的改良MTT方法，中國醫葯工業雜志，1993，24（10）：455-457
具體方法：
配三聯溶解液：10%SDS，5%異丁醇，0.012mol/LHCL，蒸餾水溶解。
三聯溶解液：SDS10g，異丁醇5ml，10M HCl 0.1ml用雙蒸水溶解配成100ml溶液
操作：在培養板上加一定密度的細胞懸液，90ul／孔；如需給葯，則再於同時(懸浮細胞)或4h後(貼壁細胞)加入不同濃度的葯物10ul／孔，均設三復孔。另外，每塊板上另沒一個調零孔(只加培養液，不含細胞和葯物)。培養2d後，加入MTT溶液20ul／孔，繼續培養4h，然後加入上述三聯液100ul／孔，於37度放置過夜後，用酶標儀測各孔A570值。
優點：簡化操作，提高了可靠性。
解決方法2：日本同仁有一種新試劑CCK-8試劑， CCK-8試劑可用於簡便而准確的細胞增殖和毒性分析。其基本原理為：該試劑中含有WST–8[其化學名稱為：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽]，它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪 硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的作用下被細胞線粒體中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲 染料（Formazan dye）。生成的甲 物的數量與活細胞的數量成正比，因此可利用這一特性直接進行細胞增殖和毒性分析。CCK-8試劑中已預先配入了進行細胞增殖和毒性分析所需的成分，無需再用緩沖液或培養基進行稀釋；同時，CCK-8試劑無需任何放射性同位素和有機溶劑。因此，無需特別的技巧，就可使每一位使用者准確、快速地得到重現性好的實驗結果。
★優 點
1、簡 便 只需一步即可得到結果
2、省 時 毋需預制，即開即用
3、安 全 毋需放射性同位素和有機溶劑
4、快 速 省去了溶解除沉操作
5、靈敏度高 靈敏度高於MTT
6、重現性好 步驟少；無損失；結果准確
就是比較貴，如果經費充足，用這個是不錯的。
★進行細胞增殖分析的使用方法:
1、接種細胞懸液100μl於96孔板內，預先置於37℃，5% CO 2飽和濕度培養箱內培養。
2、在每個孔內加入10μl的CCK-8試劑。
3、把培養板放在培養箱內培養1-4小時*。
4、在450nm波長處測定吸光度，參比波長為600nm或600nm以上。
解決方法3：使用MTS
解決方法4：
加入DMSO
在同一批實驗中最好不要更換DMSO。加DMSO前把孔中液體盡量棄干凈，沒有去掉上清直接加DMSO，一是沉澱會很難溶解.二培養液的顏色在檢測時也能被測到,會對最後結果造成影響。但前提是不能把細胞也一起吸掉，因為這樣帶來的誤差要遠遠大於培養液沒棄干凈帶來的誤差,所以要在保證細胞不被吸掉的前提下，盡量把培養液吸掉。如果培養液沒棄干凈，空白孔也要留有等量的培養液，這樣在檢測時可以盡量去除培養液的影響，DMSO的量也可為100ul或150ul.
1.加了DMSO後用振盪器輕輕振盪5－10min, 時間控制盡量嚴格一點,放置時間長了會影響結果,值會偏大,且結果不可信.
2.加入DMSO後可用排槍反復抽吸助溶，溶解後盡快檢測。如果實驗孔不多，建議用此法，因其比振盪溶解效果好。
3.或放入37度放孵箱15分鍾溶解結晶。
振盪是為了讓甲臢溶解，這樣才能更好的測量吸光度，振盪96孔板有專的振盪器，目的:扎破氣泡.有氣泡存在時,由於其對光的反射與折射作用(酶標儀的原理是通過測定特定波長透過樣品的吸光度推測樣品內特定物質的濃度),會導致結果偏移.
OD值的測定
至於測定波長的選擇是因顯色溶液而異的，對於DMSO，溶解後呈紫（紅）色，490nm有最大吸收值,而ATCC公司的MTT試劑盒用的不是DMSO，它的測定波長是570。(就如ELISA實驗選用OPD作底物測定波長是492，選用TMB顯色液則用450);而對於SDS和酸化異丙醇，則選用570nm，並且建議以655nm作為參考波長。
DMSO溶後10分鍾內測，越放顏色越深，而SDS做為溶解液測吸收光值，其值可在三天內保持不變.
細胞密度偏大測出的吸光度也會偏大，細胞密度小吸光度也會偏小；另外跟細胞狀態也有關系，細胞狀態不好的話，吸光度值也會低的；細胞數目少，或者是培養的時間短，OD值也會偏低。如果各個孔的孔間差異性特別明顯的話說明有可能存在污染,空白孔的OD值太高，很可能是細菌污染。
復孔直接的OD值差別一般應在0.1－0.15，差別太大考慮：1.接種細胞數不均勻，或是接種太多，應保證每孔一致，一般是每孔1000－10000個。可以細胞細胞計數後，加入細胞懸液，再補培養基到預定體積，並輕輕吹打幾次，使細胞均勻分布，這樣比直接加入預定體積的細胞懸液要好，接種時應加含血清培養基。2.貼壁時間：18－24h，如果不夠，未懸浮的細胞會被吸掉。
一般為了實驗的准確，每個濃度可以設5－6個復孔，可以最後統計時，可以除去一個最高值和一個最低值，或者除去其中數據離譜的值，這些離譜數字的出現與細胞是否污染，細胞是否在培養期間死去，是否培養液蒸發過多，加MTT液是否准確，在37℃，5％二氧化碳培養箱中孵育時間是否一定（1－4小時）等有密切的關系，當然測定OD值的儀器工作狀態是否正常也非常重要！(一般開機預熱20min)。
MTT方法的吸收度在0.2～0.8之間誤差較小。這和分析化學中的lambert-beer定律有關， 對朗伯-比爾定律的偏離在吸光光度分析中，經常出現標准曲線不呈直線的情況，特別是當吸光物質濃度較高時，明顯地看到通過原點向濃度軸彎曲的現象（吸光度軸彎曲)。這種情況稱為偏離朗伯-比爾定律。若在曲線彎曲部分進行定量，將會引起較大的誤差。在吸光光度分析中，儀器測量不準確也是誤差的主要來源。任何光度計都有一定的測量誤差。這些誤差可能來源於光源不穩定，實驗條件偶然變動，讀數不準確等。
在光度計中，透射比的標尺刻度均勻。吸光度標尺刻度不均勻。對於同一儀器，讀數的波動對透射比為一定值；而對吸光度讀數波動則不再為定值。吸光度越大，讀數波動所引起的吸光度誤差也越大透射比很小或很大時，濃度測量誤差都較大，即光度測量最好選吸光度讀數在刻度尺的中間而不落兩端。待測溶液的透射比T在15%~65%之間，或使吸光度A在0.2~0.8之間，才能保證測量的相對誤差較小。當A=0.434(或透射比T=36.8%)時，測量的相對誤差最小。
其它的聲音：
1.最好用570nm波長的濾光片，因為MTT在這個波長的吸光度是峰值，換句話說靈敏度高。用其它波長的也有，一般是490nm，但我的經驗靈敏度降低一半。
2.我們用的BIO-TEK公司的ELx800,一般值在2以下都是可靠的,如果復孔之間值相差太大就要考慮是否是實驗過程中的誤差. 我曾經看到園子的有些帖子報道說OD值大概在0.2-1.2范圍內與活細胞數有較好的線性關系，但OD值在0.3-0.9范圍內可能更佳，若你的OD值不在這個范圍內則你實驗的細胞數可能不太合適，應調整你的細胞數。
邊緣效應
96孔板四周一圈的孔一般只做空白，不養細胞，否則這四行的數據會偏高或偏低,96孔板在培養箱中，由於濕度不夠，而培養箱由於具有一定的溫度，由於溫度梯度使得邊緣的孔水分蒸發較快，導致培養基中各種成分濃度變化增大，導致細胞狀態不同。對於這種現象，要保證培養箱中的濕度，減少開關培養箱的次數和時間。解決方法:將孔板周圍的一圈孔全部不用，影響非常大，而且最外一圈一定要加水、PBS或者培養液，只要能防止蒸發就可以.
關於如何計算IC50
(1)改良寇式法:lgIC50=Xm-I(P-(3-Pm-Pn)/4)
Xm:lg 最大劑量
I:lg(最大劑量/相臨劑量)
P:陽性反應率之和
Pm:最大陽性反應率
Pn:最小陽性反應率
舉個例子：各組濃度0.1、0.01、0.001、0.0001、0.00001、0.000001，稀釋倍數為10，最大濃度為0.1，抑制率為0.95、 0.80、0.65、0.43、0.21，0.06。代入
計算公式：
Pm=0.95
Pn=0.06
P=0.95+0.80+0.65+0.43+0.21+0.06=3.1
Xm=lg0.1=-1
lgI=lg0.1/0.01=1
lgIC50=-1-1*(3.1-(3-0.95-0.06)/4)=-3.6025
IC50=0.00025
(2)Bliss法:自己查閱書籍
(3)IC50計算軟體，見下面附件
（4）自己用EXCEL做趨勢線來求IC50，關於LD50的方法與此相似！
（5）在線求IC50或EC50：http://chiryo.phar.nagoya-cu.ac.jp/javastat/JavaStat-j.htm
結果統計學處理
所有數值以x±s表示，應用SPSS軟體進行方差分析，p<0.05時為相差顯著，p<0.01時為相差非常顯著。可以以時間為橫軸，光吸收值為縱軸繪制細胞生線，專門公式求IC50。或計算抑制率。細胞死亡率%=OD對照組-OD實驗組/OD對照組
excel表中可以做兩兩比較的T-test,這個你可以參考一下；你的數據應該用多個樣本均數的T-test，方差分析也可。用的軟體是SPSS或者SAS。
孔板的重復利用:
培養板要用好的（最好進口板），不好的板或重復利用的板只可做預實驗。一般貼壁生長的細胞用重復利用的培養板效果不是很好，因為培養板表層在生產時塗有一層促進細胞貼壁的物質，在清洗後多半會失去。懸浮或是半懸浮生長的細胞還可以。建議不要用太多次，即使是進口的板子使用次數也不要超過3次,底值最好在測得值的1/3一下。
強烈建議培養板不要重復使用:1、泡酸是可以，但是泡完酸的板子很不利於細胞的生長，會出現帖壁不好，細胞生長緩慢等情況.2、這樣的板子消毒滅菌很不徹底，如果有萬一,則因小失大.3、重復用的板子洗不幹凈在培養過程中易出現雜質.
重復利用時
做法1：
洗凈後用2％NaoH浸泡4小時，再用1％稀鹽酸浸泡4小時，沖洗15遍，蒸餾水沖洗3遍，烘乾，UV照射過夜(紫外2小時以上消毒即可)
做法2:
泡酸2－4小時，老師讓我們別超過4小時，（普通的玻璃儀器是過夜）。撈出，沖洗干凈，烘乾後，UV 照射過夜。估計跟其他收集在一起，鈷60照射消毒.
做法3:
1.做完MTT後用大水流盡量將板沖凈，然後用洗衣粉水泡幾個小時（小心最好讓洗衣粉先化開）。2.用自來水沖凈洗衣粉水，倒扣晾乾.3.重鉻酸鉀加濃硫酸配成的酸液中浸泡過夜泡洗液(六小時以上即可)後自來水洗凈（20次左右）每個孔都要處理4.用去離子水沖洗3遍，雙蒸水沖洗3遍，烤乾5.超凈台中紫外線照射2個小時左右，就可以用了，不可以高壓。
做法4:
1、測完值的96孔板甩掉孔內培養液，放入超聲中超10-30分鍾，晾乾(或烘乾)備用。
此步驟可最大程度的洗去污垢及細胞。
2、每孔加入50-100ul的胰酶(0.05%)，我一般加60ul，加完胰酶後水平振盪96孔板以使胰酶均勻覆蓋於細胞表面，室溫下放置至細胞被消化脫落為止。假如你想消化快一點的話可將96孔板放到37度培養箱內(胰酶在37度時的活力最大)。
對於頑固貼附在壁上的細胞，此步驟最為有效。
3、甩掉胰酶，自來水下沖洗，晾乾(或烘乾)備用。
如果不烘乾就泡酸，那麼96孔板殘留的水分將稀釋酸液，長期以往泡酸的效果下降。
4、將晾乾的96孔板泡酸(中強酸)過夜，撈起後自來水下沖洗10遍；雙蒸水沖洗3遍。三蒸水沖洗3遍。烘乾備用。泡酸時特別注意時間不要太長了，否則板子變黃，影響最後的OD值的測定。
5、做實驗前，96孔板至少在紫外燈下照射30分鍾，但不能長期照射。紫外線長期照射可使板變黃，我的兩塊板放在超靜台上忘了拿出來，一直照了兩個星期，等我從超靜台上取出板已經變成黃色。
註：
1、在實驗中若你測得某一個孔的數值偏高，雖然有很多因素會導致數值偏高，但是如果是板底的污點引起的話你可以消除。拿出96孔板擦一擦值偏大孔的板底部，再測值。你會發現孔高的值又會到正常水平。因為咱們做實驗時手不可避免的接觸96孔板板底留下痕跡，這些痕跡就會使吸光度升高。
2、96孔板洗的次數多了，板底自然留下劃痕，這就會導致讀數的不均而影響實驗結果。你不妨在做實驗前測一次96孔板的值(此值為初值)，實驗測得的為後值。後值減去初值就接近實驗的真實值。
⑨ 水分測定有哪幾種主要方法各有什麼特點
經典水分分析方法已逐漸被各種水分分析方法所代替,目前市場上主要存在的水分測定儀
主要有鹵素水分儀、紅外水分儀、露點水分儀、微波水分儀、庫侖水分儀、卡爾•費休水分測定儀，以及一些專用水分儀。這些儀器測定方法操作簡便、靈敏度高、再現性好,並能連續測定，自動顯示數據。
1、紅外水分測定儀操作簡單，耗時少，測量結果准確，故紅外水分儀可廣泛應用於化工、醫葯、食品、煙草、糧食等行業的實驗分析和日常進貨控制及過程檢測。
2、卡爾•費休法屬經典方法，又稱為 微量水分測定儀，其主要應用於水分值含量較低的樣品檢測，經過近年來改進，大大提高了准確度，擴大了測量范圍, 已被列為許多物質中水分測定的標准方法。
3、露點水分測定儀操作簡便，儀器不復雜，所測結果一般令人滿意，常用於永久性氣體中微量水分的測定。但此法干擾較多，一些易冷換氣體特別在濃度較高時會比水蒸氣先結露產生干擾。
4、微波水分測定儀利用微波場乾燥樣品，加速了乾燥過程，具有測量時間短，操作方便，准確度高、適用范圍廣等特點，適用於糧食、造紙、木材、紡織品和化工產品等的顆粒狀、粉末狀及粘稠性固體試樣中的水分測定，還可應用於石油、煤油及其他液體試樣中的水分測定
5、庫侖水分測定儀常用來測定氣體中所含水分。此法操作簡便，應答迅速，特別適用於測定氣體中的痕量水分。如果用一般的化學方法測定，則是非常因難的事情。但電解法不宜用於鹼性物質或共軛雙烯烴的測定。
⑩ 為什麼用氣相色譜法測定製劑中乙醇含量用內標法
酒精的作用在醫學和法醫學上都很有意義。當醫生需要知道酒精是否與病人的病情有關時，對血液或尿液中酒精的含量的估計就會起到相當關健的作用。從法醫學的觀點來看，酒精含量在突然死亡、駕駛事故以及有關以喝醉酒作為防衛性辯解等案件中是至關重要的。決定攝入酒後顯示出最大乙醇濃度及量的時間的因素是：對象的體重、乙醇的量及濃度、攝入乙醇的方式、有無食物存在以及對象的身體狀況。
酒精的影響對不同的人以及在不同時間的同一個體都是各不相同的。其作用主要取決於各人的所處的環境和體質以及所飲酒精的稀釋情況。飲用同等量的酒精對習慣性飲酒者所造成的影響較偶爾飲酒者小得多。葯物有加強酒精效果的作用。
很多案例表明，酒精與巴比土酸鹽類的協同作用是一些看似是自殺的死亡的一個原因，酒精本身可能是最常見的中毒致死的原因。
裝配有火焰離子化檢測器及Porapak Q柱的氣-固色譜技術在葯物制備中一直被用來鑒定和檢測乙醇、異丙醇以及丙酮。此項技術是用稀釋過的樣品的水溶液直接進樣, 方法簡單而直接。
樣品制備 將兩份0.5毫升的異丁醇內標物 (濃度為10mg/ml水，其配製法為：用吸量管吸取12.4ml 異丁醇用水稀釋至1L ), 用吸量管分別吸入兩個不同的2-打蘭(7.4毫升)的殼型小瓶中, 一個標為「已知」, 另一個標為「未知」。取0.5ml乙醇作標准物 (濃度為50mg/100ml血液，其配製法為：吸5ml乙醇貯存液，再從血庫中取100ml血液加以稀釋；所用的乙醇貯存液的配製法為：用水將12.7 ml的無水乙醇稀釋至1升)，並將其轉移至一個標為「已知」的小瓶中。吸量管用內標溶液洗滌三次。用一支10微升的亨氏注射器, 取0.5微升的已知樣和未知樣各兩份進樣, 分別測量乙醇和異丁醇的峰高。
氣相色譜參數 使用一台配有氫火焰檢測器的氣相色譜儀。火焰離子化檢測器可用於檢測含水的樣品。柱子為不銹鋼材料(6英尺×0.25英寸外徑), 用30%聚乙二醇2萬固定相塗布在用酸洗過的60-80目的Chromosorb W 擔體上。柱子用氮氣作載氣於180°C下吹掃過葉。
操作參數如柱溫或載氣流速並不是確定不變的，它們可隨所研究的化合物的類型及所用氣相色譜儀的性質不同而改變。
其它填料也可用於該測定，包括Hallcomid M 180L 塗布在Chromosorb W 80-100 目的擔體上或Porapark Q 80-100 目的填料。Porapak 有不同的特性但它的優點是它是一種無需塗層的填料。
注入系統的血液進入進樣口並在那裡被捕集，而揮發物被載氣帶入柱中。在柱中進樣將會堵塞柱子。所以，如果使用一個長的進樣口，將有利於多次進樣並能延長使用周期。使用六至八個月後，應將進樣口拆開並除去被捕集在此的血液，若有必要，可用水清洗。儀器應在被再次使用前穩定一夜。
根據峰高進行定量測定是令人滿意的，但是，若所獲得的峰太寬或不對稱，也可根據峰面積進行定量。