氣相色譜分析嚴格來講是一種定量分析方法,如果不配置質譜儀等專用定性的儀器聯勝,其本身並不能真正定性,因為氣相色譜、液相色譜等色譜法本身的原理只是通過色譜柱將待測物質組份進行分離後再通過檢測器進行檢測,而且常用的fid,tcd,ecd,fpd等檢測器本身並不能定性,只能進行相對定量檢測計算;
之所以說氣相色譜可以定性,那是是一種對照判斷式定性,就是將通過在相同的色譜分析條件下在相同時間段內出現的峰認定為同一種物質。這種認定一般對已經物質的定性是准確的,但對未知物質和同分異構體是無法分別的;
氣相色譜儀分析根據定量對照計算方法的不同分為:歸一法,校正歸一法,內標法,外標法等常用方法。
歸一法:就是將所有峰數據的總數歸一,根據各組份的峰面積在總面積中所佔比例計算各組份的百分比,由於事實上檢測器對不同的物質的響應因子並不相同,導致峰面積比在事實上並不能代表真實組份含量比,因此這是一種粗略的相對測控法,並不準確。常被用於工廠對已知組份生產過程的控制粗測,此時並不需要准確知道具體含量值,只需要知道比例范圍是否發生變化。
『貳』 定量檢測與半定量檢測的區別
方法的檢出限和定量限是有區別的
3倍信噪比是檢出限
10倍信噪比是定量限
可以簡單的這樣來理解,
檢出限是方法能測出該物質時的最低濃度。
定量限是方法能准確定量出該物質時最低的濃度。
『叄』 蛋白質定量測定的方法有哪些
定氮法,雙縮尿法(Biuret法)、Folin-酚試劑法(Lowry法)和紫外吸收法。考馬斯亮藍法(Bradford法)。
凱氏定氮 靈敏度低,適用於0.2~ 1.0mg氮,誤差為 ±2% 費時
8~10小時 將蛋白氮轉化為氨,用酸吸收後滴定 非蛋白氮(可用三氯乙酸沉澱蛋白質而分離) 用於標准蛋白質含量的准確測定;干擾少;費時太長
雙縮脲法(Biuret法) 靈敏度低 1~20mg 中速 20~30分鍾 多肽鍵+鹼性Cu2+®紫色絡合物 硫酸銨;Tris緩沖液;某些氨基酸 用於快速測定,但不太靈敏;不同蛋白質顯色相似
紫外吸收法 較為靈敏 50~100mg 快速 5~10分鍾 蛋白質中的酪氨酸和色氨酸殘基在280nm處的光吸收 各種嘌吟和嘧啶;
Folin-酚試劑法(Lowry法) 靈敏度高 ~5mg 慢速 40~60分鍾 雙縮脲反應;磷鉬酸-磷鎢酸試劑被Tyr和Phe還原 硫酸銨;Tris緩沖液;甘氨酸;
各種硫醇 耗費時間長;操作要嚴格計時;顏色深淺隨不同蛋白質變化
考馬斯亮藍法(Bradford法) 靈敏度最高 1~5mg 快速5~15分鍾 考馬斯亮藍染料與蛋白質結合時,其lmax由465nm變為595nm 強鹼性緩沖液;
SDS 最好的方法;干擾物質少;顏色穩定; 顏色深淺隨不同蛋白質變化
『肆』 ELISA法是定性還是定量檢測方法如果是定量,那怎麼定量呢
對你想要的已知蛋白進行定量測定。簡單的說,就是把蛋白量轉換成你能看到的顏色信號,顏色的深淺就代表蛋白的多少,通過酶標儀進行顏色深淺的量化,最後得到數值,根據標准曲線來測定蛋白濃度。
『伍』 HBV-DNA定量檢測是什麼
針對此問題,專家解答:HBV-DNA定量檢測是判斷乙肝病毒復制和傳染的常用手段,檢測方法主要有熒光定量PCR技術、競爭PCR技術、PCR酶聯免疫吸附法、熒游標記引物法和PCR酶聯化學發光法,其中臨床上最先進的HBV-DNA檢測方法是實時熒光定量PCR方法,但由於此技術要求較高,臨床尚未普遍應用。
小貼士:HBV-DNA定量檢測結果的正常值應<10的3次方或
『陸』 怎麼區別限度檢測和定量檢測
沒有明確的界限。隨著科學水平的進步,很多原來只能做限度測試的現在都要求做定量了。比如重金屬,雜質等等。
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限度檢查
限度檢查葯物在不影響療效和不發生毒性的原則下,可以允許有一定限童的雜質存在,這樣既可以保證葯物質量,又便於生產和貯藏。
限度檢查(Limit Test)亦稱限量檢查,葯物在不影響療效和不發生毒性的原則下,可以允許有一定限童的雜質存在,這樣既可以保證葯物質量,又便於生產和貯藏。雜質限量是 指葯物中所含雜質的最大容許量,通常用百分之幾或百萬分之幾來表示。進行限度檢查時,一般是將一定量與被檢雜質相同的純品或對照品配成標准溶液,與一定量 葯物供試溶液在相同條件下進行[1] 試驗,比較試驗結果,從而確定雜質含量是否超過規定。葯物中所含雜質按其來源可分為一般雜質和特殊雜質,一般雜質是指多數葯物在其生產或貯藏過程中容易引 人的雜質。如酸、鹼、水分、氯化物、硫酸鹽、鐵鹽、重金屬和砷鹽等,其檢查方法均在葯典附錄中規定。特殊雜質是指在該葯物的生產和貯藏過程中,根據其性質 在一定的生產方法和工藝條件下有可能引入的雜質,特殊雜質的檢查方法隨葯物品種不同而異。
定量檢測分析:quantitative analysis測定物質中有關組分的含量或檢測原料和成品的純度。要具體量值。
半定量檢測分析:semi-quantitative analysis 對某些分析准確度要求不高,但要求簡便快速而有一定數量級的結果的試樣,以及在定性分析中,除需要給出試樣中存在哪些元素外,還需要指出其大致含量,就採用半定量分析法。分析結果可以某元素是主要、大量、中量、少量、微量和痕量來報告。不用具體的量值。
重復性:repeatability在同一實驗室由同一分析人員、用同一分析儀器與方法,對同一量相繼進行兩次重復測定時,所得值按指定概率的容許差。
批間重復性:不同批次檢驗結果的重復性。
批內重復性:同一批次檢驗結果的重復性。
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這個問題我專門咨詢過審評中心,樓主問的屬於限度檢查。但在研發階段,因為你要研究雜質的變化趨勢,所以要有準確的數據,在做方法學的時候要按照定量檢測的要求去做。但是在獲得文號後,QC的驗證時是按照限度檢查去做驗證。
HPLC主成分自身對照法檢查有關物質比較適用於對微量雜質總量的控制,也可用於單個雜質的限度(一般不超過0.5%)控制。對於具有明確歸屬的已知雜質,建議採用雜質對照品法進行檢查。對於有毒有害雜質,更應採用雜質對照品法單獨測定,並制定嚴格的限度。
『柒』 常用蛋白質氮定量測定方法它有哪些
測定蛋白質最基本的方法是定氮法,即先測定樣品中的總氮量,再由總氮量計算出樣品中蛋白質的含量.蛋白質含量測定最常用的方法是凱氏定氮法,它是測定總有機氮的最准確和操作較簡便的方法之一,在國內外應用普遍.此外,雙縮脈法、染料結合法、酚試劑法等也常用於蛋白質含量測定,由於方法簡便快速,故多用於生產單位質量控制分析. 蛋白質及氨基酸的測定 蛋白質是生命的物質基礎,是構成生物體細胞組織的重要成分,一切有生命的活體都含有不同類型的蛋白質.人體內的酸鹼平衡、水平衡的維持;遺傳信息的傳遞;物質的代謝及轉運都與蛋白質有關.人及動物只能從食品得到蛋白質及其分解產物,來構成自身的蛋白質,故蛋白質是人體重要的營養物質,也是食品中重要的營養指標. 蛋白質是復雜的含氮有機化合物,分子量很大,它們由20種氨基酸通過醯胺鍵以一定的方式結合起來,並具有一定的空間結構.不同的蛋白質其氨基酸構成比例及方式不同,故各種不同的蛋白質其含氮量也不同.蛋白質可以被酶、酸或鹼水解,最終產物為氨基酸.氨基酸是構成蛋白質的最基本物質,在構成蛋白質的氨基酸中,亮氨酸、異亮氨酸、賴氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸、色氨酸和纈氨酸等8種氨基酸在人體中不能合成,必須依靠食品供給,故被稱為必需氨基酸,它們對人體有著極其重要的生理功能,常會因其在體內缺乏而導致患病,或通過補充而增強了新陳代謝作用.所以食品及其原料中蛋白質和氨基酸的分離、鑒定和定量具有極其重要的意義.
『捌』 在分光光度法中,定量的方法有哪些
1、標准管法
將待測溶液與已知濃度的標准溶液在相同條件下分別測定A值,然後按下式求得待測溶液中物質的含量。
CT=(AT/AS)*CS
2、標准曲線法
先配製一系列濃度由小到大的標准溶液,分別測定出它們的A值,以A值為橫坐標,濃度為縱坐標,作標准曲線(A~c工作曲線),可以求出標准曲線的回歸方程。在測定待測溶液時,操作條件應與製作標准曲線時相同,以待測液的A值從標准曲線上查出(得到)該樣品的相應濃度。
3、吸光系數法
當某物質溶液的濃度為1mol/L,厚度為1cm時,溶液對某波長的吸光度稱為該物質的摩爾吸光系數,以ε表示。ε值可通過實驗測得,也可由手冊中查出。
(8)檢測方法中屬於定量檢測的是擴展閱讀
分光光度法中標准曲線的影響因素
1、分析法自身的精密度:如顯色反應靈敏度不高時,被測物質低於某一濃度就不能顯色,當顯色溶液中的掩蔽劑或緩沖液能夠絡和少量被測離子,就會使標准曲線線性關系不好。
2、測定用儀器(包括量具)的精密度:在分光光度法中要求在最大吸收峰處測定吸光度,分光光度計有效譜帶寬度越窄越好,有利於獲得純度高的單色光,當單色光的純度不夠時,測定的吸光度就會偏低。
3、易揮發溶劑所引起的測定溶液濃度改變:如用亞甲藍分光光度法測定陰離子合成洗滌劑時用四氯化碳、氯仿溶劑,因溶劑揮發性及實驗時間的延長,會使測定的溶液濃度增大,導致吸光度重現性較差。
4、污染:製作標准曲線的操作步驟中,當存在損失或沾污時,會造成相關系數達不到實驗要求。
5、空白值:空白值影響測定方法的檢出限,也影響測定結果重現性,特別是對低濃度樣品的測定,因此應引起足夠重視,影響空白值主要因素有:純水的純度、操作過程中的沾污、實驗條件的異常變化等。