STM微生物檢測方法

㈠ 測定微生物的生長有哪些方法各有何優缺點

常用測定微生物生長的方法有：
1)稱乾重法.可用離心法或過濾法測定.
優點：可適用於一切微生物,
缺點：無法區別死菌和活菌.
2)比濁法.
原理：由於微生物在液體培養時,原生質的增加導致混濁度的增加,可用分光光度計測定.
優點：比較准確.
3)測含氮量,
大多數微生物的含氮量占乾重的比例較一致,根據含氮量再乘以6.25即可測得其粗蛋白的含量.
4)血球計數板法.
優點：簡便、快速、直觀.
缺點：結果包括死菌和活菌.
5)液體稀釋法.
對未知菌樣作連續的10倍系列稀釋,經培養後,記錄每個稀釋度出現生長的試管數,然後查MPN表,再根據樣品的稀釋倍數就可計算其中的活菌含量.
優點：可計算活菌數,較准確.
缺點：比較繁瑣.
6)平板菌落計數法.
取一定體積的稀釋菌液塗布在合適的固體培養基,經培養後計算原菌液的含菌數.
優點,可以獲得活菌的信息.
缺點：操作繁瑣,需要培養一定時間才能獲得,測定結果受多種因素的影響.

㈡ 微生物的傳統檢測方法有哪些

傳統檢測有三種方法

1、直接顯微鏡觀察，正常情況，在一定的培養條件下（相同的培養基、溫度以及培養時間），同種微生物表現出穩定的菌落特徵。可以通過顯微鏡觀察菌落特徵對微生物種類進行判斷。

2、選擇培養基培養微生物或人為提供有利於目的菌株生長的條件，選擇培養基，其作用是允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他微生物生長。選擇培養一般是通過觀察微生物的同化作用類型或某一特徵進行間接判斷，得到的微生物往往並不只有一種，但是能夠大致確定這些微生物存在的共有特徵從而對其分類。

3、鑒別培養基，根據微生物的代謝特點，在培養基中加入某種指示劑或化學葯品。與選擇培養相比，鑒別培養基的鑒別所得結果的范圍比較小，一般可直接測定某微生物的種類。

㈢ 微生物菌體濃度的測定方法有哪些

微生物菌體濃度的測定方法：

1. 活菌計數法

   此法能准確地判斷菌液濃度,但有明顯的滯後性,無法在第一時間內2確定其實際濃度,待結果出來後,再開始檢測,菌的活性將有所下降,給實驗室操作帶來諸多不便;

2. 比濁法

   此法能快速地判斷菌液濃度,但為粗略的估計值,受限於各人肉眼的觀察,誤差較大,准確性不高。

微生物菌體濃度的測定（纖維製品的抗菌性試驗方法為例）

一、菌種：

大腸桿菌(EscherichiacoliATCC8099)

二、試劑與儀器

蛋白腖

牛肉膏

氯化鈉

Cary100紫外——可見光分光光度計

三、培養基

營養細菌培養基NB。

蛋白腖5g,牛肉膏粉3g,蒸餾水1000mL,pH6.8±0.2。

營養瓊脂培養基NA。

蛋白腖5g,牛肉膏粉3g,瓊脂粉15g,蒸餾水1000mL,pH6.8±0.2。

1、對數生長期菌液的制備

取在規定保存代數之內的供試菌種,在火焰旁,挑取一鉑金環,在營養瓊脂培養基上劃線,於37℃±1℃培養24h後,在平板上挑取飽滿的單菌落,置於20mL營養細菌培養基中,振盪(110r/min,振幅3cm)培養24h。

2、穩定期菌液的制備

取培養好的對數生長期菌液0.4mL,於20mL營養細菌培養基中,再振盪培養4h,即為穩定期菌液。

四、吸光度(ABS值)的測定

取培養好的穩定期菌液,按不同的設定稀釋倍數(5、10、20、40倍),依次進行稀釋,(稀釋液為1/20NB),在660nm標准波長下,測得一組不同菌液濃度的吸光度。(用空白1/20NB進行測試前調零)。

五、活菌計數

在無菌室內火焰旁進行操作。分別依次測定四個不同稀釋倍數的菌落數。每個稀釋倍數依次制定幾個濃度梯度,用滅菌吸管各吸取1mL注入平皿。注入約15mL,45～50℃的營養瓊脂培養基,隨即轉動平皿,使樣品與培養基充分混合均勻,待培養基凝固後,翻轉平皿,置37℃±1℃培養箱內培養24h後,進行菌落計數。用肉眼觀察,點出菌落數,記下各平皿的菌落數後,

求出同一稀釋度各平皿生長的平均菌落數。

六、標准曲線的製作

運用生物統計ORG數據分析軟體,以吸光度ABS值為橫坐標,穩定期的菌液濃度為縱坐標繪制標准曲線。

㈣ 微生物的快速檢測方法有哪些

目前主要普通培養（簡稱標）般報告要用儀器、核酸檢測（PCR）、目前快速檢測（主要包括：免疫磁珠、酶聯免疫試劑盒、金標檢測卡等根據自需求選擇

㈤ 微生物檢測包括哪些啊

食品中微生物指標的常見檢驗項目如下：菌落總數、大腸菌群計數、大腸桿菌計數、腸道致病菌（沙門氏菌、志賀氏菌、金黃色葡萄球菌）、副溶血性弧菌、單核細胞增生李斯特氏菌、雙岐桿菌、空腸彎麴菌、黴菌計數和酵母計數。

一般食品中活菌數達到108cfu.g⁻¹時，則可認為食品處於初期腐敗階段。

(5)STM微生物檢測方法擴展閱讀

微生物檢驗方法包括顯微鏡檢、染色技術、培養基制備技術、接種、分離純化和培養技術等。

接種，將微生物接到適於它生長繁殖的人工培養基上或活的生物體內的過程。

分離純化，在進行菌種鑒定時，所用的微生物一般均要求為純的培養物。得到純培養的過程。

培養，根據培養時是否需要氧氣，可分為好氧培養和厭氧培養。根據培養基的物理狀態，可分為固體培養和液體培養兩大類。

㈥ 測定微生物的生物量有哪些主要方法

測定微生物的生物量有哪些主要方法
測定的方法主要有四種：

1.直接計數測定：根據微生物種類，有血球計數板和細菌計數板；

2.比濁法：根據菌懸液的濃度在一定范圍內與光密度成正比，可以用分光光度計測OD值，用OD值表示樣品菌液濃度；

3.核酸計數法：熒光定量PCR技術；

4.活菌計數法：MPN和平板計數法由於測定方法的限制。新鮮土樣經氯仿熏蒸後（24h），土壤微生物死亡細胞發生裂解，釋放出微生物生物量碳，用一定體積的LK2SO4溶液提取土壤，借用有機碳自動分析儀測定微生物生物量碳含量。根據熏蒸土壤與未熏蒸土壤測定有機碳的差值及轉換系數（KEC），從而計算土壤微生物生物量碳。

㈦ 檢測微生物有哪幾種方法

1.觀察法：用顯微鏡尋找，醫院常用。
2.分析儀法：已經有專用的分析儀。
3.失氧法：將檢測物質密閉，檢測其中氣體成分的變化（氧氣、氮氣、二氧化碳等）。

㈧ 微生物檢測有哪些

1、體積測量法：又稱測菌絲濃度法。原理：通過測定一定體積培養液中所含菌絲的量來反映微生物的生長狀況。

菌絲濃度測定法是大規模工業發酵生產上微生物生長的一個重要監測指標。這種方法比較粗放，簡便，快速，但需要設定一致的處理條件，否則偏差很大，由於離心沉澱物中夾雜有一些固體營養物，結果會有一定偏差。

2、稱乾重法。原理：利用離心或過濾法測定。一般乾重為濕重的10-20%。稱乾重發法較為煩瑣，通常獲取的微生物產品為菌體時，常採用這種方法，如活性乾酵母（activity dry yeast, ADY）,一些以微生物菌體為活性物質的飼料和肥料。

3、比濁法。原理：微生物的生長引起培養物混濁度的增高。通過紫外分光光度計測定一定波長下的吸光值，判斷微生物的生長狀況。該法主要用於發酵工業菌體生長監測。

4、菌絲長度測量法。方法：對於絲狀真菌和一些放線菌，可以在培養基上測定一定時間內菌絲生長的長度。

㈨ 微生物測定法的方法分類

液體稀釋法
在一組試管中分別加入一定的培養基，然後加入不等量的被測物質，再將已培養好的、用於測定的微生物接種進去,在規定的條件下培養一定時間,觀察其消長情況並與標准曲線對比，計算出被測物質的含量。
固體平板擴散法
將溶化的固體培養基與被測定微生物混合做成平板，把含不等量被測物質的液體滴入置於平板上(直接滴樣法)；或注入平板上的牛津杯內（管碟法）；或吸入圓形濾紙片後，再置於平板上(紙片法)；也可以在平板上挖一定大小的圓孔，然後把被測物滴入孔內（打孔法）；經培養後在物質擴散所及的范圍內出現抑菌法（或生長圈）,測量圈的直徑,並與標准曲線對比,計算出被測物質的含量（見圖[固體平板擴散法 1、3、7 打孔法2、8紙片法4、6管碟法5直接滴樣法][]）。
1932年，A.弗萊明在研究溶菌酶和青黴素時，開始使用微生物法測定抗生素的活性。1940年，E.B.錢恩等根據平板上抑菌圈的大小測定青黴素的活性含量。後又經E.P.亞伯拉罕等進一步將上述測定方法予以完善。測定抗生素時常用的微生物有大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、啤酒酵母、黑麴黴等。1935年，W.H.肖普費最先用微生物測定維生素B。1939年,E.E.斯內爾和F.M.斯特朗用乳桿菌測定維生素的含量。1934年，K.A.凱肯等用阿拉伯聚糖乳桿菌測定9種氨基酸。此後,乳桿菌屬、鏈球菌屬、明串珠菌屬的成員及某些微生物的變異株，逐漸成為最常使用的對象。

㈩ 微生物學的檢查方法是有哪些

微生物學檢查法

標本

因鼠疫傳染性極強，採集標本時必須嚴格無菌操作。根據病型採取淋巴結穿刺液、腫脹部位組織液、膿汁，血液和痰等。人和動物屍體可取肝、脾、肺、病變淋巴結以及心血等。陳舊屍體取骨髓。將採集標本送至有嚴密防護措施的專門實驗室進行檢查，禁止在一般實驗室進行操作。

直接塗片鏡檢

除血液標本外，一般均需塗片或印片，乾燥後用甲醇固定，革蘭染色或呂氏美蘭染色，鏡檢。在不同材料中，菌體大小、形態有很大差異，除典型形態外，往往可見菌體呈多形態性，需加以注意。

分離培養與鑒定

血液標本需先置肉湯中進行增菌培養。分離培養一般選用血瓊脂平板，28攝氏度24小時後，可見較小的露滴狀菌落，繼續培養則菌落增大至1～2毫米，中央厚而緻密，周邊逐漸變薄。取可疑菌落進行塗片染色鏡檢，噬菌體裂解試驗，血清凝集試驗，特異熒光抗體染色等作出鑒訂。

血清學試驗

可用於檢查鼠疫耶爾森菌抗原或特異性抗體。敏感而特異的試驗方法有ELISA、固相放射免疫分析，SPA協同凝集試驗等。

檢測核酸

用DNA探針雜交方法或PCR技術檢測鼠疫耶爾森菌核酸，有助於鼠疫的診斷。PCR敏感性極高，蚤體內有10個鼠疫耶爾森菌感染即可用PCR技術檢出。

診斷檢查

診斷：取決於病人有接觸史及肺部受累表現，病因診斷取決於痰、血或淋巴結吸出物革蘭染色、培養，有條件的單位可作直接熒光素標記抗體染色，可提供快速的病因診斷。