无水葡萄糖的检测方法

A. 口服葡萄糖耐量试验的方法

1. OGTT应在无摄入任何热量8小时后，清晨空腹进行，口服溶于250~300ml水内的无水葡萄糖粉75g或标准馒头2两，如用1分子水葡萄糖则为82.5g。儿童则予每公斤体重1.75g，总量不超过75g。糖水在5分钟之内服完。
2. 从服糖第一口开始计时，于服糖前和服糖后半小时、1小时、2小时、3小时分别在前臂采血测血糖。
3. 试验过程中，受试者不喝茶及咖啡，不吸烟，不做剧烈运动，但也无须绝对卧床。
4. 血标本应尽早送检。
5. 试验前3天内，每日碳水化合物摄入量不少于150g。

B. 怎样鉴定葡萄糖

1 如果检测的是食物中是否有还原糖，如葡萄糖
用菲林试剂！由0.1g/ml的NaoH 和0.05g/ml的CuSO4 混合制成
通过水域加热！
如果有葡萄糖
就会出现砖红色沉淀！
2 如果是检测尿液中是否有葡萄糖
则一般用班氏糖鉴定试剂
也要通过水域加热，如果有葡萄糖
同样会出现砖红色沉淀！
3 浙江版本的生物书中一般用的是本尼迪特试剂来鉴定还原糖！包括葡萄糖

C. 请给一些测定葡萄糖含量办法，越多越好！

1.向葡萄糖溶液中加入过量新制氢氧化铜加热，使之充分反应，过滤后加入过量稀硫酸，洗涤干燥后，称量剩余固体（铜）计算出葡萄糖，再除以总体积，就算出葡萄糖的含量。方程式如下：
1）CH2OH（CHOH）4CHO+2Cu(OH)2---加热→CH2OH（CHOH）4COOH+Cu2O↓+2H2O
2) Cu2O+H2SO4=CuSO4+Cu+H2O
2.把新制氢氧化铜换成银氨溶液步骤如上，方程式如下：
1）CH2OH-（CHOH）4-CHO+2[Ag（NH3)2]++2OH-==CH2OH-（CHOH）4-COONH4+2Ag↓+H2O+3NH3
不过，这里的固体是银
3.条件好可以用专业仪器直接帮你测定葡萄糖含量
4.右旋糖酐40葡萄糖注射液—葡萄糖的测定—氧化还原滴定法
方法原理： 供试品精密加碘滴定液后，边振摇边滴加氢氧化钠滴定液，在暗处放置30分钟，加稀硫酸，用硫代硫酸钠滴定液滴定，至近终点时，加淀粉指示液继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用右旋糖酐40作空白试验校正，根据滴定液使用量，计算葡萄糖的含量。 试剂： 1. 碘化钾 2. 碘滴定液（0.05mol/L） 3. 盐酸 4. 氢氧化钠滴定液（0.1mol/L） 5. 甲基橙指示液 6. 硫酸滴定液（0.5mol/L） 7. 硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L） 8. 稀硫酸 9. 碳酸氢钠 10. 淀粉指示液 11. 酚酞指示液 12. 甲基红-溴甲酚绿混合指示液 13. 基准三氧化二砷 14. 基准邻苯二甲酸氢钾 15. 基准无水碳酸钠 1.6 基准重铬酸钾 试样制备： 1.）碘滴定液（0.05mol/L） 配制：取碘13.0g，加碘化钾36g与水50mL溶解后，加盐酸3滴与水适量使成1000mL，摇匀，用垂熔玻璃滤器滤过。 标定：取在105℃干燥至恒重的基准三氧化二砷约0.15g，精密称定，加氢氧化钠滴定液（1mol/L）10mL，微热使溶解，加水20mL与甲基橙指示液1滴，加硫酸滴定液（0.5mol/L）适量使黄色转变为粉红色，再加碳酸氢钠2g、水50mL与淀粉指示液2mL，用本液滴定至溶液显浅蓝紫色。每1mL碘滴定液（0.05mol/L）相当于4.946mg的三氧化二砷。根据本液的消耗量与三氧化二砷的取用量，算出本液的浓度。 2.）氢氧化钠滴定液（0.1mol/L） 配制：取氢氧化钠适量，加水振摇使溶解成饱和溶液，冷却后，置聚乙烯塑料瓶中，静置数日，澄清后备用。取澄清的氢氧化钠饱和溶液5.6mL，加新沸过的冷水使成1000mL，摇匀。 标定：取在105℃干燥至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾约0.6g，精密称定，加新沸过的冷水50mL，振摇，使其尽量溶解，加酚酞指示液2滴，用本液滴定，在接近终点时，应使邻苯二甲酸氢钾完全溶解，滴定至溶液显粉红色。每1mL氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）相当于20.42mg的邻苯二甲酸氢钾。根据本液的消耗量与邻苯二甲酸氢钾的取用量，算出本液的浓度。 贮藏：置聚乙烯塑料瓶中，密封保存；塞中有2孔，孔内各插入玻璃管1支，1管与钠石灰管相连，1管供吸出本液使用。 3）. 甲基橙指示液 取甲基橙0.1g，加水100mL使溶解。 4.） 硫酸滴定液（0.5mol/L） 配制：取硫酸30mL，缓缓注入适量水中，冷却至室温，加水稀释至1000mL，摇匀。 标定：取在270~300℃干燥至恒重的基准无水碳酸钠约1.5g，精密称定，加水50mL使溶解，加甲基红-溴甲酚绿混合指示液10滴，用本液滴定至溶液由绿色转变为紫红色时，煮沸2分钟，冷却至室温，继续滴定至溶液由绿色变为暗紫色。每1mL硫酸滴定液（0.5mol/L）相当于53.00mg的无水碳酸钠。根据本液的消耗量与无水碳酸钠的取用量，算出本液的浓度。 5）. 硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L） 配制：取硫代硫酸钠26g与无水碳酸钠0.20g，加新沸过的冷水适量使溶解成1000mL，摇匀，放置1个月后滤过。 标定：取在120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾0.15g，精密称定，置碘瓶中，加水50mL使溶解，加碘化钾2.0g，轻轻振摇使溶解，加稀硫酸40mL，摇匀，密塞，在暗处放置10分钟后，加水250mL稀释，用本液滴定至近终点时，加淀粉指示液3mL，继续滴定至蓝色消失而显亮绿色，并将滴定结果用空白试验校正。每1mL硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）相当于4.903mg的重铬酸钾。根据本液的消耗量与重铬酸钾的取用量，算出本液的浓度。 室温在25℃以上时，应将反应液及稀释用水降温至约20℃。 6）.稀硫酸 取硫酸57mL，加水稀释至1000mL。 7. ）淀粉指示液 取可溶性淀粉0.5g，加水5mL搅匀后，缓缓倾入100mL沸水中，随加随搅拌，继续煮沸2分钟，放冷，倾取上层清液，即得，本液应临用新制。 8.） 酚酞指示液 取酚酞1g，加乙醇100mL使溶解。 9.）甲基红-溴甲酚绿混合指示液 取0.1%甲基红的乙醇溶液20mL，加0.2%溴甲酚绿的乙醇溶液30mL，摇匀。 操作步骤： 精密量取供试品2mL，置具塞锥形瓶中，精密加碘滴定液（0.05mol/L）25mL，边振摇边滴加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）50mL，在暗处放置30分钟，加稀硫酸5mL，用硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定，至近终点时，加淀粉指示液2mL，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用0.12g（6%规格）或0.20g（10%规格）的右旋糖酐40作用白试验校正。每1mL碘滴定液（0.05mol/L）相当于9.909mg的C6H12O6·H2O。

D. BOD5的检测方法和步骤

将预先选好量程并按量程范围量好体积的水样倒入培养瓶中，在主机搅拌器上连续搅拌。并将主机和培养瓶放入培养箱中。

调节培养箱内温度为20C±1°，待样品恒温后进行五日培养。培养瓶中的水样在连续搅拌的情况下保证了足够的溶解氧供微生物进行生化反应。水样中的有机物经过生物氧化作用，转变成氮、碳和硫的氧化物。在这一过程中，从水样中溢出的气体二氧化碳被氢氧化钠(或氢氧化钾)吸收。

由于好气微生物的反应，将消耗水中的氧气，呼出二氧化碳，如果及时地用NaOH吸收生成的二氧化碳，培养瓶内上部空间的氧气不断地供给试样中微生物的需氧量，这就造成了气体氧分压的下降，用差压计测出氧分压的下降量就可以测出水样的B0D值。

(4)无水葡萄糖的检测方法扩展阅读：

一般水质检验所测BOD5只包括含碳物质的耗氧量和无机还原性物质的耗氧量。有时需要分别测定含碳物质耗氧量和硝化作用的耗氧量。常用的区别含碳和氮的硝化耗氧的方法是向培养瓶中投加硝化抑制剂，加入适量硝化抑制剂后，所测出的耗氧量既为含碳物质的耗氧量。

在5天培养时间内，硝化作用的耗氧量取决于是否存在足够数量的能进行此种氧化作用的微生物，原污水或初级处理的出水中这种微生物的数量不足，不能氧化显着量的还原性氮。

而许多二级生化处理的出水和受污染较久的水体中，往往含有大量硝化微生物，因此测定这种水样时应抑制其硝化反应。在测定BOD5的同时，需要葡萄糖和谷氨酸标准溶液完成验证试验。

E. 有几种方法测定葡萄糖含量各自的原理是什么

有两种方法来测定。

第一种用菲林试剂来测定，原理为：

CH2OH（CHOH）4CHO+2[Ag(NH3）2OH]（水浴加热）→CH2OH（CHOH）4COONH4+2Ag↓+3NH3+H2O

注意事项：⑴ 试管内壁必须洁净

⑵ 银氨溶液随用随配不可久置；

⑶ 水浴加热，不可用酒精灯直接加热；

⑷ 可加入氢氧化钠，以促进反应进行；

⑸ 银镜可用稀HNO3浸泡洗涤除去。

加热还原生成的银附着在试管壁上，形成银镜，所以，这个反应也叫银镜反应。

第二种用新制的氢氧化铜溶液来测定，原理为：

葡萄糖溶液与新制氢氧化铜悬浊液反应生成砖红色沉淀。（浓度高时生成黄色沉淀）

CH2OH（CHOH）4CHO+2Cu(OH)2---加热→CH2OH（CHOH）4COOH+Cu2O↓+2H2O

注意事项：⑴ 新制2Cu(OH)2悬浊液要随用随配、不可久置。

⑵ 配制新制Cu(OH)2悬浊液时，所用NaOH溶液必须过量。

⑶ 反应液必须直接加热至沸腾。

⑷ 葡萄糖分子中虽然含有醛基，但是d-葡萄糖中不含有醛基。

葡萄糖是自然界分布最广且最为重要的一种单糖，它是一种多羟基醛。

纯净的葡萄糖为无色晶体，有甜味但甜味不如蔗糖（一般人无法尝到甜味），易溶于水，微溶于乙醇，不溶于乙醚。天然葡萄糖水溶液旋光向右，故属于“右旋糖”。

葡萄糖在生物学领域具有重要地位，是活细胞的能量来源和新陈代谢中间产物，即生物的主要供能物质。植物可通过光合作用产生葡萄糖。在糖果制造业和医药领域有着广泛应用。

化学性质

它是自然界分布最广泛的单糖。葡萄糖含五个羟基，一个醛基，具有多元醇和醛的性质。

用途：

生物培养基。金属还原剂。滴定硼酸的络合物形成剂。微量分析。测定全血葡萄糖。可直接被人体吸收。

正常人体每分钟利用葡萄糖的能力为每公斤体重6毫克。是一种能直接吸收利用，补充热能的碳水化合物，是人体所需能量的主要来源，在体内被氧化成二氧化碳和水，并同时供给热量，或以糖原形式贮存。能促进肝脏的解毒功能，对肝脏有保护作用。是生物体内最为常见的能源物资。

F. 测定葡萄糖含量的方法

 
 
 
 葡萄糖注射液中葡萄糖含量的测定 
摘要  运用氧化还原滴定的原理设计葡萄糖注射液中葡萄糖含量的测定方案并具体实施。从而进一步掌握Na2S2O3及I2标准溶液的配制和标定方法，巩固氧化还原滴定的操作技能。学会间接碘量法测定葡萄糖含量的方法和原理，进一步掌握返滴定法技能。其中，葡萄糖分子中含有醛基，能被IO-定量地氧化为羧基。故可将一定量过量的I2在碱性条件下加入葡萄糖溶液中，使醛基完全转化为羧基。再将其酸化，用Na2S2O3标准溶液滴定析出的I2。所用指示剂为淀粉。根据所加I2标准溶液的量及滴定所耗Na2S2O3标准溶液的量结合反应式中各物质之间的计量关系，便可计算葡萄糖的含量。该方法简便易行且准确度高，基本符合实验要求。 
关键词  葡萄糖注射液  间接碘量法  返滴定法 
1引言 
葡萄糖注射液中葡萄糖含量的测定目前有以下几种方法 方案一：旋光测定法 
根据葡萄糖分子结构中的五个碳都是手性碳原子，具有旋光性，可采用旋光法测定含量。取出旋光计的测定管，先用蒸馏水为空白对仪器进行校正。用供试液体（5％葡萄糖注射液）冲洗数次，缓缓注入供试液体适量（注意勿使发生气泡）。置于旋光计内，读取旋光度，连续测定3次，取平均值。 方案二：间接碘量法。 
碘与NaOH作用能生成NaIO，而C6H12O6能定量地被NaIO氧化。在酸性条件下，未与C6H12O6作用的NaIO可转变为I2析出，只要用标准Na2S2O3溶液滴定析出的I2，便可计算C6H12O6的含量。 
本实验采用第二种方案进行葡萄糖注射液中葡萄糖含量的测定。 
2实验原理 
    在碱性溶液中，碘与氢氧化钠作用可生成次碘酸钠（NaIO),葡萄糖能定量的被次碘酸钠氧化成葡萄糖酸（C6H12O7）。过量的NaIO可以转化为NaIO3和NaI。在酸性条件下，NaIO3和NaI作用析出I2，然后用Na2S2O3标准溶液滴定析出的I2，便可计算出葡萄糖的含量。其反应如下： 
1、I2与NaOH作用：      I2+2NaOH=NaIO+NaI+H2O 
2、C6H12O6和NaIO定量作用：  C6H12O6+ NaIO=C6H12O7+NaI     3、总反应式：       I2+C6H12O6+2NaOH=C6H12O7+2NaI+H2O 

 
4、C6H12O6作用完后，过量的NaIO发生歧化反应：   3NaIO=NaIO3+2NaI 5、在酸性条件下NaIO3和NaI作用：   NaIO3+5NaI+6HCl=3I2+6NaCl+3H2O 6、析出过量的碘用Na2S2O3标准溶液滴定：  I2+2Na2S2O3=Na2S4O6+2NaI 实验还涉及到Na2S2O3和 I2溶液的标定 
1、Na2S2O3的标定    Cr2O72-+6I-+14H+=2Cr3++3I2+7H2O                          I2+2S2O32-=S4O62-+2I
-      
                                     
Cr2O72-~3I2~6S2O32-    
             3
223
227
223
2200.256)(6OSNaOSNaOCrKOSNa
VcVcVc

   
      
2、碘的标定        I2+2S2O32-
=S4O62-+2I
- 
              
        V
Vc3
22322OSNaOSNac2/1
 
3、葡萄糖注射液中葡萄糖的含量  
   
计算式：
%10050
6
126
L
gOHCW标示量
葡萄糖含量 
3实验仪器及材料 
3.1 仪器 
    称量瓶、电子台秤、分析天平、容量瓶（250ml）、移液管（25ml）、量筒（10ml）、锥形瓶（25ml，3个）、酸式滴定管（50ml）、烧杯（50ml）、玻璃棒、碘量瓶 3.2 药品 
    K2Cr2O7（S）、盐酸（6mol/L）、KI溶液（100g/L)、淀粉（5g/L)、Na2S2O3溶液（0.1mol/L）、I2溶液（0.05mol/L）、NaOH溶液（1mol/L）、葡萄糖注射液（5%） 
4 实验方法 
4.1 0.1mol/L Na2S2O3标准溶液的标定 4.1.1 K2Cr2O7标准溶液的配制 
    准确称取1.2~1.3g分析纯K2Cr2O7固体于小烧杯中，加少量的水溶解并转入到250mL的容量瓶中，用水稀释到刻线，摇匀。并计算其准确浓度 

)
(100000
.25100021101612632232222

LgOHCMOSNavOSNacIvIc葡萄糖含量＝

 
4.1.2  Na2S2O3溶液的标定 
    准确移取25mlK2Cr2O7标准溶液于碘量瓶中，加5mL 6mol/L HCl溶液和10mL 100g/LKI，立即密塞摇匀，置暗处5min，然后冲洗瓶盖并用蒸馏水稀释至100 mL左右，用待标定Na2S2O3溶液滴定至K2Cr2O7标准溶液呈浅黄绿色时，加2mL 5g/L淀粉，继续滴定至蓝色刚好褪去，记录所需体积，平行测定3次，计算Na2S2O3溶液的准确浓度。 4.2  0.05mol/L I2溶液的标定 
    准确移取25mLI2标准溶液于锥形瓶中，加50ml蒸馏水，用Na2S2O3标准溶液滴定至溶液呈浅黄绿色，加2ml 5g/L淀粉，继续滴定至蓝色刚好褪去，溶液呈无色即为终点。 4.3  葡萄糖含量的测定 
    用移液管移取5%葡萄糖注射液25.00ml于250ml容量瓶中，加水稀释至刻线，摇匀。然后移取25.00ml上述溶液于碘量瓶中，准确加入I2标准溶液25ml，慢慢滴加NaOH边加边摇，直至溶液呈浅黄色，将碘量瓶加塞摇匀，于暗处放置10~15min，加2ml 6mol/L HCl酸化，立即用Na2S2O3标准溶液滴定，至溶液呈浅黄色，加2ml 5g/L淀粉，继续滴定至蓝色消失即达到滴定终点，记录数据，平行滴定3次，计算其含量。

G. OGTT是什么意思

OGTT就是葡萄糖耐量试验，是一种糖负荷试验。它具体做法是，先空腹抽血，查静脉血糖，然后口服75g无水葡萄糖，分别于半小时、1小时、2小时、3小时抽血查静脉血糖。

OGTT是糖尿病的确诊试验，在正常情况下，空腹血糖在3.9-6.1mmol/L，0.5-1小时达到最高峰，之后血糖逐渐下降，3小时恢复正常值。可以了解胰岛β细胞的功能，以及机体对葡萄糖的调节能力。应该注意在试验期间要安静休息，不能剧烈运动，更不能进食其他东西。

在做之前需要注意：

1、身体如果处于疾病状态，发烧、感冒或者是腹痛、腹泻，就需要等恢复以后再做。

2、在做这个试验之前应该保持正常吃饭，不要刻意控制，这样的话有可能会影响结果的可靠性。

3、检查的时候要空腹来。医院的医生给开好葡萄糖粉，需要的是75g无水葡萄糖粉，在家里面从医院开完以后，就给它用白开水或矿泉水，大概量是200-300mL，用温水这样更容易把葡萄糖粉沏开。

H. 怎样检测果酒的总糖

1．原理

利用费林溶液与还原糖煮沸，生成氧化亚铜沉淀的反应，以次甲基蓝为指示液，以样品或经水解后的样品滴定煮沸的费林溶液，达到终点时，稍微过量的还原糖将蓝色的次甲基蓝还原为无色，以示终点。根据样品消耗量求的总糖或还原糖。改进后在碱性酒石酸铜乙液中加入少量亚铁氰化钾，可反应生成氧化亚铜沉淀与亚铁氰化钾发生络合反应，形成可溶性络合物，消除红色沉淀对滴定终点观察的干扰，使终点变色明显。

2．试样和材料

2.1盐酸溶液(1+1)。

2.2氢氧化钠溶液：200g。

2.3标准葡萄糖溶2.5g/L：精确称取2.5g（称准至0.0001g）在105℃～110℃烘箱内烘干3h，并在干燥箱中冷却的葡萄糖用水溶解并定容至1000ml。

2.4 次甲基蓝指示液10g/L：称取1.0g次甲基蓝溶解于水中，稀释至100ml。

2.5 费林氏溶液

a)配制：按GB/T603-2002配制。同改进后在费林氏碱性酒石酸铜乙液时，每升加入铁氰化钾4g。

b)标定预备试验：吸取费林溶液甲乙液各5.00mL于250mL瓶中，加50mL，摇匀，在电炉上加热至沸腾，在沸腾状态下用制备好葡萄糖标准溶液滴定，当溶液蓝色将消失呈红色时，加2滴次甲基蓝指示液，继续滴定至蓝色消失，呈无色或淡黄色。记录消耗葡萄糖标准溶液体积。

c) 正式试验：吸取费林溶液甲乙液5.00mL于250瓶中，加50mL和比预备试验少1mL葡萄糖标准溶液，加热至沸腾，并保持2min，加2滴次甲基蓝指示液，一定在沸腾状态中1min内用葡萄糖标准溶液滴至终点，记录消耗葡萄糖标准溶液总体积（V）。

d)计算

式中：F—相当于萄萄糖的克数g；m—称取无水葡萄糖质量g；V—消耗萄萄糖标准溶液的总体积ml。

3．样品的制备

3.1 测定总糖用试样：准确吸取一定量的样品（V1）于100ml容量瓶中，含总糖量为0.2 g～0.4g，加5mL酸溶液(1+1),加水至20mL摇匀。于68+1℃水浴锅上水解15min，取出冷却。在酸度计上用200g/L氢氧化钠溶液中和至中性，调温至20℃，加水定容至刻度（V2）。

3.2 测还原糖用试样：准确吸取一定量的样品（V1）于100ml容量瓶中，含还原糖量为0.2 g～0.4g，加水定容刻度。

4．分析步骤

试样代替葡萄糖标准溶液，按2.5b同样操作，记录消耗试样的体积（V3），结果按照公式（4）计算。

测定干葡萄酒样品2.5b操作时，正式滴定需要用葡萄糖标准溶液滴定至终点。结果按照公式(5)计算。

式中X—还原糖的含量g/L；

F—费林氏液甲乙各5mL相当于葡萄糖克数g；

V1—样品的体积mL；

V2—释后或水解定容样品的体积mL；

V3—样品的体积 mL；

G—葡萄糖标准溶液的准确浓度g/ mL；

V—葡萄糖标准溶液的体积mL；

所得结果应表示至一位小数。

5．精密度

在重复性条件下获得的两次测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的2%。

结论讨论：加入亚铁氰化钾目的是使费林溶液与试样中还原糖生成氧化亚铜沉淀与亚铁氰化钾发生络合反应，形成可溶性络合物，消除红色沉淀，使终点变色明显。试验原理未变，终点判定未改变，不影响检测结果。改进后终点易于观察，结果准确可靠。

I. 葡萄糖的鉴定

葡萄糖是还原糖，最常用斐林试剂检测：将0.1g/ml的NaoH 2ml和0.05g/ml的CuSO4 4-5滴混合制成斐林试剂，加入葡萄糖混匀后水浴加热，出现砖红色沉淀。斐林试剂要现配现用。班氏试剂、本尼迪特试剂也可鉴定葡萄糖，试剂成分和反应后颜色有区别，如有需要，可以追问。