㈠ 细菌常见的几种染色方法
常用的是革兰氏染色法,这个方法复杂一点,还有一个简单染色法是用石炭酸复红等等染色,还有一个特殊结构染色法和负染色法荧光染色法。
㈡ 微生物鉴别染色方法有哪些
检验常用染色法包括 1)革兰氏染色法 2)抗酸染色法 3)美兰染色法 4)异染颗粒染色法 5)细菌鞭毛染色法 6)荚膜染色法芽孢染色法 7)布氏杆菌科兹洛夫斯基染色法 8)结核杆菌荧光染色法等主要染色法 革兰氏染色法染液配制 1。结晶紫染液:称取结晶紫(龙胆紫)14g,溶于95%酒精100ml中,配成饱和液,再取饱和液20ml与1%草酸铵溶液(1g草酸铵溶于100ml蒸馏水溶解即成)80ml混匀即成2。卢戈氏碘液:碘化钾2g于10ml蒸馏水中,再加碘1g,待碘全部溶解后(时间较长)加蒸馏水200ml即成3。95%酒精4。(1)石碳酸复红液:称取碱性复红(碱性品红)4g溶于95%酒精100ml中成饱和液,再取饱和液10ml与5%石碳酸溶液(5ml石碳酸溶于100ml蒸馏水)90ml混匀即成,(2)稀释石碳酸复红液:取石碳酸复红液10ml加入蒸馏水90ml即成染色方法:1。涂片 将菌液直接涂在载玻片上,经培养的菌落要加生理盐水混匀涂片,等待干燥(固定)2。将结晶紫染液滴加在已固定的涂片上,染色1分钟后用水冲去剩余燃料3。滴加卢戈氏碘液1分钟后水洗,在滴加95%酒精脱色,摇动玻片至紫色不在脱色为止(约需1分钟),水洗4。用稀释石碳酸复红液复染30秒至1分钟5。水洗待干,镜检6。革兰氏阳性菌染成紫色,革兰氏阴性菌染成红色
㈢ 观察细菌形态时为何要用染色法常用的染色法有几类
观察细菌形态时为何要用染色法?因为细菌细胞微小,透明,不易观察,需染上颜色.利用单一染料对细菌进行染色,使经染色后的菌体与背景形成明显的色差,从而能更清楚地观察到其形态和结构.
常用的染色法有:
1.简单染色法:简单染色法是利用单一染料对细菌进行染色的一种方法, 一般用于观察个体形态与细菌排列。
由于细菌在中性、碱性或弱酸性环境中带负电荷,所以通常采用一种碱性染料如美蓝、碱性复红、 结晶紫对细菌进行染色。美蓝是美蓝的盐酸盐,可解离为带正电荷的美蓝,很容易与细菌结合使菌体着色。染色后的细菌细胞与背景形成鲜明的对比,在显微镜下更易于识别。
简单染色过程:涂片→固定→染色→水洗→干燥→镜检
涂片→ 固定→ 干燥→ 水洗、吸干→镜检→染色 1mim
2.革兰氏染色法:
革兰氏染色法是由丹麦医生 Hans Christian Gram于 1884 年创立。它是细菌学中很重要的鉴 别染色法,因为通过此法染色,可将细菌鉴别为革兰氏阳性菌(G + )和革兰氏阴性菌(G - )两大 类。
革兰氏染色过程:涂片→固定→结晶紫初染(1min)→碘液媒染(1min)→乙醇脱色(95% 酒精,30s)→番红复染(30 秒)→干燥→镜检
阳性菌:紫色; 阴性菌:红色
㈣ 什么是革兰氏染色法这种染色法在细菌的鉴定上有何重要意义
说的简单一点,革兰氏染色法就是一种辨别细菌类型的方法,通过革兰氏染色法可细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌,大多数革兰氏阳性菌对青霉素敏感,大多数革兰氏阴性菌对链霉素、氯霉素敏感。
首先区分病原菌是革兰氏阳性菌还是阴性菌,在选择抗生素方面意义重大。
㈤ 实验室常用的染色方法有哪几种
印染行业的化验室一般的都是浸染法,就是拿染液通过染色工艺把布浸染到上色,还有扎染,卷染,
㈥ 细菌的形态鉴别染色法最常用的是什么
细菌的形态鉴别染色法最常用的方法如下:
㈦ 革兰氏染色的步骤和原理
原理:革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌(G+)和革兰氏阴性菌(G-)两大类,是细菌学上最常用的鉴别染色法。该染色法之所以能将细菌分为G+菌和G-菌,是因为一般认为革兰氏染色是基于细菌细胞壁特殊化学组分进行染色的。
步骤:
(一)涂片固定
在干净的载玻片中央滴加一滴蒸馏水,用接种环进行无菌操作,挑取培养物少许,置载玻片的水滴中,与水混合做成菌悬液并涂布成直径约1cm的薄层。
(二)染色
在固定过的涂片菌膜上滴加草酸铵结晶紫染液,染色液应完全覆盖整个菌膜,染色1min。
(三)水洗
染色到一定的时间,拿住玻片使之成450角,用细小的水流把多余的染料冲洗掉,被菌体吸附的染料则保留。
(四)媒染
加碘液覆盖涂面染1 min。在媒染处理时,媒染剂与染料形成不溶性的化合物,可增加染料和细菌的亲和力。
(五)水洗,用吸水纸吸去水分
用细小的水流缓慢冲洗涂片上的染色液,用吸水纸吸干。
(六)脱色
加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色, 20 s~30 s后再进行水洗,吸去水分。
(七)复染
蕃红染色液染色10 s后, 自来水冲洗。
(八)干燥,镜检
染色的结果,革兰氏正反应菌体都呈紫色,负反应菌体都呈红色。
(7)鉴别细菌常用染色方法扩展阅读
标本干燥后即进行固定,固定的目的有三个:
(1)杀死微生物,固定细胞结构。
(2)保证菌体能更牢固的粘附在载玻片上,防止标本水洗时被水冲洗掉。
(3)改变染料对细胞的通透性,因为死的原生质比活的原生质易于染色。
㈧ 细菌学中最常用的染色方法
细菌形态学检查方法:常用染色方法 1.美蓝染色法 在已干燥、固定好的抹片上,滴加适量的美蓝染色液,经1一2分钟,水洗,干后镜检,结果是细菌呈蓝色。 2.稀释石炭酸复红染色法 染色方法同美蓝染色法,结果是细菌呈红色。 3.革兰(Gram)氏染色法 (1)在已干燥、固定好的抹片上,滴加草酸按结晶紫染色液,染色2一3分钟,水洗。 (2)加革兰氏碘液于抹片上媒染1一2分钟,水洗。 (3)加95%酒精于抹片上脱色,约30秒至1分钟,水洗。 (4)加稀释石炭酸复红(或沙黄水溶液)复染50一60秒钟,水洗。干后镜检。结果是细菌染成蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌,染成红色的称为革兰氏阴性细菌。
㈨ 微生物染色的染色方法
微生物染色方法一般分为单染色法和复染色法两种。前者用一种染料使微生物染色,但不能鉴别微生物。复染色法是用两种或两种以上染料,有协助鉴别微生物的作用。故亦称鉴别染色法。常用的复染色法有革兰氏染色法和抗酸性染色法,此外还有鉴别细胞各部分结构的(如芽胞、鞭毛、细胞核等)特殊染色法。食品微生物检验中常用的是单染色法和革兰氏染色法。 用一种染色剂对涂片进行染色,简便易行,适于进行微生物的形态观察。在一般情况下,细菌菌体多带负电荷,易于和带正电荷的碱性染料结合而被染色。因此,常用碱性染料进行单染色,如美兰、孔雀绿、碱性复红、结晶紫和中性红等。若使用酸性染料,多用刚果红、伊红、藻红和酸性品红等。使用酸性染料时,必须降低染液的PH值,使其呈现强酸性(低于细菌菌体等电点),让菌体带正电荷,才易于被酸性染料染色。
单染色一般要经过涂片、固定、染色、水洗和干燥五个步骤。
染色结果依染料不同而不同:
石碳酸复红染色液:着色快,时间短,菌体呈红色。
美兰染色液:着色慢,时间长,效果清晰,菌体呈蓝色。
草酸铵结晶染色液:染色迅速,着色深,菌体呈紫色。 革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师Gram创立。
细菌先经碱性染料结晶染色,而经碘液媒染后,用酒精脱色,在一定条件下有的细菌此色不被脱去,有的可被脱去,因此可把细菌分为两大类,前者叫做革兰氏阳性菌(G+),后者为革兰氏阴性菌(G—)。为观察方便,脱色后再用一种红色染料如碱性蕃红等进行复染。阳性菌仍带紫色,阴性菌则被染上红色。有芽胞的杆菌和绝大多数和球菌,以及所有的放线菌和真菌都呈革兰氏正反应;弧菌,螺旋体和大多数致病性的无芽胞杆菌都呈现负反应。
革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌在化学组成和生理性质上有很多差别,染色反应不一样。现在一般认为革兰氏阳性菌体内含有特殊的核蛋白质镁盐与多糖的复合物,它与碘和结晶紫的复合物结合很牢,不易脱色,阴性菌复合物结合程度底,吸附染料差,易脱色,这是染色反应的主要依据。
另外,阳性菌菌体等电点较阴性菌为低,在相同PH条件下进行染色,阳性菌吸附碱性染料很多,因此不易脱去,阴性菌则相反。所以染色时的条件要严格控制。例如,在强碱的条件下进行染色,两类菌吸附碱性染料都多,都可呈正反应;PH很低时,则可都呈负反应。此外,两类菌的细胞壁等对结晶紫—碘复合物的通透性也不一致,阳性菌透性小,故不易被脱色,阴性菌透性大,易脱色。所以脱色时间,脱色方法也应严格控制。
㈩ 细菌有哪些染色方法
1
革兰氏染色法
是最常用的鉴别染色法之一。此法起始1881年,染色步骤是先用结晶紫或龙胆紫染液加于已固定好的标本上使之着色,其后加碘液作媒染剂,再用酒精脱色,最后用复红或沙黄复染。革兰氏染色的结果与培养基成分、培养条件及操作技术等有密切关系。如涂片太厚影响酒精脱色,革兰氏阴性菌则可染成革兰氏阳性菌。脱色时若酒精作用时间太长,
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,革兰氏阳性菌又会染成革兰氏阴性菌。在缺乏镁盐的培养基中,革兰氏阳性菌可变成革兰氏阴性菌。菌龄也能影响染色的结果,这与生长过程中核酸含量的改变有关。革兰氏染色法的原理还不十分清楚,有化学学说、等电点学说、渗透性学法,目前最通常的解释是革兰氏阳性菌在95%酒精中因含粘肽多而导致细胞壁脱水,通透性减低,使在细菌细胞内着色的染料─碘复合物不易透出细胞壁,所以保留了紫色;革兰氏阴性菌含粘肽少,其细胞壁在95%酒精作用下通透性变化不大,酒精容易进入菌体内溶解染料─碘复合物而透出,失去紫色后被复染成为红色。
2
抗酸染色法
有些细菌,如结核杆菌,不般不易着色,一旦染上色后又不易被盐酸酒精脱色,称为抗酸菌。主要步骤是将细菌涂片、干燥、固定后,以石炭酸复红染液加温进行染色,然后用含酸的酒精脱色,最后用美蓝复染。一般细菌以及标本中的物质都被脱色,抗酸菌则不能,仍为红色。在蓝色背景上呈红色的细菌即为抗酸菌。
3
细菌特殊结构的染色法
细菌的特殊结构,如鞭毛、荚膜、细胞壁、芽孢及异染颗粒等,用普通染色法不易着色,故需用特殊染色法。
4
负染色法
是指背景着色而细菌本身不着色。常用墨汁负染色法配合单染色法(如美蓝)检查细菌的荚膜,背景呈黑色,菌体染成蓝色,
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,荚膜不着色,包绕在菌体周围,成为一层透明的空圈。
5
荧光染色法
用荧光染料,如金胺、吖啶橙等进行染色。细菌用荧光染料着色后在荧光显微镜下检查,可在黑的背景中观察到细菌发出明亮的荧光。用荧光染色法检查细菌,有加快检查速度和提高阳性率等优点。
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