㈠ 尿微量白蛋白试剂的检测原理
本产品是采用胶体金免疫层析技术,利用样本尿液中的白蛋白与试剂条上包被的白蛋白竞争有限的抗体位点,以免疫竞争抑制法来半定量检测人尿液中白蛋白的存在水平。试剂条的硝酸纤维膜检测线(T线)包被有人白蛋白,膜条下端有一块含抗人白蛋白单克隆抗体-胶体金复合物的垫片。检测时,尿液溶解并混合抗人白蛋白单克隆抗体-胶体金复合物,一起在膜上移行至T线,如果尿液中无白蛋白存在,抗体-胶体金混合物将被预先固定在T线的人白蛋白捕获而呈现出一肉眼可见的红色线条。如果尿液中含有白蛋白,它们将和预先固定在T线的人白蛋白竞争结合抗人白蛋白单克隆抗体-胶体金复合物上的有限抗体结合位点,因此,T线颜色强度随着尿液中白蛋白浓度的增加而越来越浅,甚至不显示。
试剂盒上的质控线(C线)为另一抗原/抗体反应线,在检测时总会出现,而不依赖于尿液中是否存在白蛋白。C线的可作为试剂盒的一个内部的质控参照指标,C线的出现表明检测操作正确,试剂盒反应系统工作正常。
【主要组成成份】
MAU检测试剂条:每人份试剂条系由胶体金标记的抗人白蛋白单克隆抗体包被的玻璃纤维纸片和分别包被有羊抗鼠IgG及人白蛋白的硝酸纤维素膜组成,铝箔袋单人份包装;
加样吸管;
使用说明书:1份。
【自备物品】
样品收集容器:洁净无污染的塑料容器,也可以是一次性容器,用于收集尿液样品。
计时器:用于检测时计时。
【储存条件及有效期】4~30℃避光储存,不得冻存。有效期24个月。
【样本要求】
尿样必须收集在清洁、干燥的塑料或玻璃容器内,尿液最好用晨尿,尿液收集后24小时或12小时或隔夜尿亦可用于检测,且尿液不需任何特殊处理或前处理。尿液在2-8℃储存可保存3天。冷冻后的尿液在测试前必须恢复至室温并搅拌均匀。
【检验方法】
使用前仔细阅读说明书。
将试剂盒、尿样标本以及质控品等应在测试前恢复至室温。
从密封袋中取出试剂盒,在试剂盒上注明样品编号。
按照说明书操作,在加样孔上滴加2-3滴尿样。
等待结果的出现,判读结果,在加样后5分钟判读结果。不要在10分钟以后读结果。
【参考范围】
本产品对MAU最低检出量为15~20mg/L,检测结果>20mg/L为阳性,<15mg/L为阴性。
【检测结果的解释】
结果判断是通过比较C、T线的颜色强度来判断。结果被分为三级:阴性(<15mg/L),阈值范围(15~20mg/L),阳性(>20mg/L)。
阴 性:在检测线(T线)和质控线(C线)位置各出现一条红色线条,且T线比C线颜色深。表示样品中白蛋白浓度在正常人参考范围内,浓度<15mg/L。
阈值范围:在结果观察窗的检测线(T线)和质控线(C线)位置各出现一条红色线条,且T线和C线颜色强度类似。表示样品中白蛋白浓度在15~20mg/L。
阳 性:①在结果观察窗的检测线(T线)和质控线(C线)位置各出现一条红色线条,且T线比C线颜色浅。表示样品中白蛋白浓度>20mg/L。②只在质控线(C线)位置出现一条红色线条,表示样品中白蛋白浓度>200mg/L。
无 效:质控线位置无红线出现,表示结果无效,应重试。
㈡ 怎样分辨人血白蛋白的真假
这个东西的确有人造假的,我朋友在康爱多药房网买过一瓶,是深圳市卫武光明生物有限公司的,用下面的方法检查过,是正品。
人血白蛋白的真假分辨方法:
1、振摇法:正品泡沫明显、消失较慢。微呈粘稠状。假药一般泡沫较少(含量低、低规格、或中药液体代替);无泡沫(用大输液替代)。
2、颜色比对法:正品一般颜色微黄,或无色透明;假药一般颜色较浓;无色(用大输液替代)、有时也有微黄色无但泡沫(高温灭菌的葡萄糖注射液替代)。
3、蒸发灼烧法:正品一般气味与假药区别明显,蒸发残渣褐色较浓,假药残渣颜色较淡或呈黑色、或黄色,也有的呈无色结晶颗粒状(生理盐水或其他化学成分替代)。
4、假药包装鉴别勘验法:与正品区别较大:主要表现:因为凡制造假白蛋白的假药,一般造假印刷数量有限,包装标识制作的质量与正品差别较大。一般盒的规格与正品不一、无折痕压线或压线较细、颜色色调龟纹明显。批号数码呆板、清晰或直接印刷在盒上。
㈢ 国家标准检测蛋白质含量测定方法
蛋白质含量测定方法就是检测N元素的含量,像三聚氰胺的问题,就是通过增加N的含量使“蛋白质”含量提高的。
国家标准检测蛋白质含量的方法叫做凯氏定氮法,食物中的蛋白质在催化加热条件下分解,导致氨和硫酸结合产生硫酸铵。 碱蒸馏采用无硫,硼酸吸收,用硫酸或盐酸标准滴定溶液滴定,根据酸耗计算氮含量,再乘以转化系数,即蛋白质含量。
具体操作步骤如下:
1.样品处理
精确称量0.2-2.0g固体样品或2-5g半固体样品或吸收10-20ml液体样品(约30-40mg氮当量)。将其转移至干燥的100毫升或500毫升氮气固定瓶中,加入0.2克硫酸铜,6克硫酸钾和20毫升硫酸,轻轻摇动,在瓶口放置一个小漏斗,将瓶子倾斜石棉网上有45度角,有小孔。
加热小火后,内容物碳化,泡沫完全停止,加强火力,保持瓶内液体稍微沸腾,直至液体呈蓝绿色澄清透明,然后继续加热0.5小时。取出并冷却,小心加入20毫升水,冷却,移入100毫升容量瓶中,用少量水洗净氮气瓶,洗净液放入容量瓶中,然后用水冲洗至刻度,混匀备用。
取相同量的硫酸铜,硫酸钾和浓硫酸作为试剂进行空白试验。然而,这种方法很危险,很难在实验室中证明。大多数实验室都有一个消化器,可以一次处理16个以上的样品和一个可以自行设定温度的呼吸机。它更安全,更可操作。
(3)f616白蛋白的检测方法扩展阅读
除了凯氏定氮法以外,标准的测量方法还有:
分光光度法
食品中的蛋白质在催化加热条件下被分解,分解产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵,在pH4.8的乙酸钠-乙酸缓冲溶液中与乙酰丙酮和甲醛反应生成黄色的3,5-二乙酰-2,6-二甲基-1,4-二氢化吡啶化合物。在波长400nm 下测定吸光度值,与标准系列比较定量,结果乘以换算系数,即为蛋白质含量。
燃烧法
样品在900~1200℃下燃烧。在燃烧过程中,产生混合气体。 诸如碳,硫和盐的干扰气体被吸收管吸收,氮氧化物被还原成氮。 形成的氮气流由热导检测器(TCD)检测。
㈣ 血清白蛋白的测定方法
血清清蛋白测定一般采用溴甲酚绿比色法,目前首选推荐的清蛋白定量方法
㈤ 尿微量白蛋白到底该怎么测
尿微量白蛋白,有随机尿的,也有24小时尿量的。这个要看临床的需要来决定。
接尿的时候,要注意,接中段尿,避免尿样被污染,影响检测值。
尿白蛋白+1,出现的时候 建议复查(排除尿样污染),理论上讲尿出现蛋白的时候,证明肾病已出现正常尿样不会有尿蛋白。
隐血的意义:主要有泌尿系的感染、外伤、肿瘤、结石等(女性月经除外),都可以出现的。
㈥ 如何分辨人血白蛋白
一般检测方法:人血白蛋白为健康人血浆提纯的蛋白制剂,根据蛋白质在酸性条件下加入沉淀剂-10%钨酸钠溶液,使蛋白质沉淀的原理,快速鉴别方法只需样品1ml与10%钨酸钠溶液5ml和0.33mol/L硫酸溶液5ml置于试管中,观察试管中的絮状物(沉淀)即可,假冒的白蛋白一般无絮状物产生,说明其中根本没有蛋白质。按药典收载的免疫扩散试验,假冒产品均不与抗人的血清产生沉淀线,其鉴别结果不呈正结果。两者具有完全的一致性。
PS:送药监局,这个基本没有可行性。不信你就给当地的打个电话试试。不是法院送的,药监局或者其他有资质的医疗鉴定机构,都不会给个人做人血白蛋白鉴定检测的。
㈦ 尿蛋白高通过什么方法检查
一般来说健康成人尿总蛋白上限为150到200毫克每天,白蛋白尿上限为30毫克每天,尿蛋白检测方法有以下一些方法,第一试纸法,可测最低限为10到20毫克每分升,如果患者的尿ph大于8.0,血液污染可呈假阳性,稀释尿可以呈假阴性,如果试纸法仅显示为少量蛋白,而酸沉淀法有大量蛋白,应当警惕有无球蛋白或者是其他经验蛋白。
二,尿蛋白定量,近年来发现随机一次尿的尿蛋白肌酐比值或者是白蛋白肌酐比值水平与尿蛋白定量有很好的相关性。
三,尿白蛋白,需要通过放射免疫分析法或者是竞争酶联免疫吸附法进行检测,微量白蛋白尿指的是尿白蛋白排泄率在20到200微克每分钟,或者尿白蛋白定量30到300毫克每天。
㈧ 尿微量白蛋白的尿微量检测
尿微量白蛋白指高于正常,但常规方法无法检出的白蛋白尿,他的检测作为早期肾损害诊断的重要指标已受到广泛重视,测定方法包括放射免疫法、ELASA法等。应用较多的是免疫透射比浊法,但报告方式不一,有的以每升尿中白蛋白量表示,有的以24小时排泄量表示,常用的报告方式是以白蛋白/肌酐比值报告。我们以不同表示方法对正常人尿白蛋白的正常值进行了统计分析,并对部分高血压、糖尿病患者进行测定,现报告如下。 1.仪器与方法:尿微量白蛋白测定试剂盒,肌酐测定试剂盒均购于凯创公司。仪器应用瑞士产Cobas MIRA plus全自动生化分析仪。尿白蛋白测定,取标本10 ml,1 500×g离心10分钟,取上清10 μl,加缓冲液250 μl,抗血清50 μl,测定波长340 nm,反应温度37℃,测定时限300秒,5点定标,范围5~200 mg/L。肌酐采用Jaffe′s法,尿标本预先用生理盐水30倍稀释测定。
2.对象:对照组,健康人70例(男43例,女27例),平均年龄41.2岁(21~54岁),均排除高血压、糖尿病及其他和肾病有关病史。糖尿病组,42例(男28例,女14例),平均年龄51.2岁(34~72岁),病程2~20年。高血压组,62例(男39例,女23例),平均年龄44.5岁(31~71岁),血压范围160~190/95~120 mmHg,病程2~27年。临床诊断Ⅰ期21例,Ⅱ期41例,其中Ⅱ期患者以眼底动脉硬化或心脏改变为诊断依据,尿常规分析蛋白定性均为阴性。
3.标本:对照组均分别留取24小时尿和随机尿,测定24小时白蛋白和每升白蛋白及白蛋白/肌酐比值,并以不同方法计算正常值,患者组均取随机尿测定白蛋白及肌酐,以白蛋白/肌酐比值报告,以上标本均当日测定。 1.不同计算方法尿白蛋白正常值:以mg/L计算,范围2.2~41.7,均值12.7;以mg/gCr计算,范围2.7~26.1,均值8.1;以mg/24 h计算,范围2.4~34.3,均值11.4。因尿白蛋白值呈非正态分布,低值无临床意义,在建立参考范围时以百分位数法按单侧值95%上限确定。从以上结果可见,不同计算方法的结果正常值范围有明显差异,尤以每升结果报告时,由于受尿量影响较大,正常范围较宽,这样易使部分异常标本落入正常范围而延误诊断。
2.高血压组:诊断Ⅰ期、Ⅱ期高血压的标准是以是否累及血管、脏器为依据,我们测定的41例Ⅱ期患者中,常规尿蛋白定性均未发现肾脏损害,诊断是以眼底改变和心电图改变为主。我们将测定结果依据高血压病期、病程、舒张压水平分组进行统计,结果。Ⅰ期21例,范围4.6~38.2 mg/gCr,均值17.8 mg/gCr;Ⅱ期41例,范围5.1~62 mg/gCr,均值29.7 mg/gCr;舒张压95~105 mmHg 34例,范围4.6~43.4 mg/gCr,均值16.4 mg/gCr;舒张压106~120 mmHg 28例,范围5.0~62 mg/gCr,均值31.2 mg/gCr;病程2~10年19例,4.6~40.2 mg/gCr,均值13.1 mg/gCr;病程11~15年,28例,范围4.6~54.2 mg/gCr,均值19.3 mg/gCr;病程16~27年,15例,范围5.1~62 mg/gCr,均值37.2 mg/gCr。上述结果中以正常值? mg/gCr为界,Ⅰ期高血压中有4例超过正常值,Ⅱ期高血压中有14例超过正常值,说明这些患者已有轻度肾损害。尤其1期高血压中有五分之一患者出现尿白蛋白异常,尿白蛋白的值与病程及血压水平相关。
3.糖尿病组:42例糖尿病患者按病程分组,2~10年28例,尿白蛋白为5.2~39.6 mg/gCr,均值21.2 mg/gCr,大于25 mg/gCr 13例;11年以上组14例,结果为10.4~68.
1 mg/gCr,均值29.4 mg/gCr,大于25 mg/gCr 8例。通过了解病史并分析结果,坚持长期口服药物或注射胰岛素治疗者与不经常治疗两者结果间有明显差异(P?.01)。
测定尿微量白蛋白最理想的方法是留取24小时标本,但因留取困难,在实际应用上受到限制。随机尿测定是目前最常用,最易行的方法。但应同时测定肌酐,因每日肌酐排除量相对恒定,可避免尿量变化对结果的影响。
尿微量白蛋白测定是一种灵敏、简便、快速的测定方法,易于在常规实验室中广泛应用,对早期肾损害的诊断远远优于常规定性或半定量试验。
㈨ 目前蛋白质的精确定量检测方法都有哪些
蛋白质鉴定是指对复配类蛋白品通过前处理提纯并通过生物质谱鉴定蛋白种类及含量(包括具体的分子量、定性、定量结果)或对纯蛋白品通过生物质谱鉴定具体的蛋白类型(包括具体的分子量、定性、定量结果)。
蛋白质种类鉴定业务范围:
水溶性蛋白、水解酶、蛋白酶、脂肪酶; 血清蛋白(白蛋白和球蛋白)、牛血清(白)蛋白、血清球蛋白; 乳清蛋白、复合蛋白质、乳清蛋白粉、β-乳球蛋白,α-乳白蛋白,免疫球蛋白,乳铁蛋白; 大豆分离蛋白、小麦蛋白(谷朊粉)、酪蛋白、纤维素酶、β-葡聚糖酶、内切β-葡聚糖酶、β-葡萄糖苷酶、淀粉酶、葡萄糖氧化酶、木聚糖酶、糖化酶; 碱性蛋白酶、果胶酶、聚半乳糖醛酸水解酶、脂肪酶、过氧化氢酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、胰蛋白酶、超氧化物歧化酶、弹性蛋白酶。 动物饲料,大米,油料种子、谷类食品、谷类,大豆、玉米、鱼肉、果汁等各种食物中蛋白种类及含量。
㈩ 请教:关于尿微量白蛋白测定谢谢了,大神帮忙啊
取尿方法普通检测可用早晨起来第一次小便的中段,也可在容器里混匀取样;如果要进一步检测可测24h尿微量蛋白,收集一天24h的小便,混匀取样送检,但天气凉爽可这样,夏天炎热应保存在冰箱内。
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