各类病原微生物检测方法

㈠ 病原微生物基因检测和其他检测有什么不同

病原微生物检测方法包括：

传统金标准：特殊染色镜检，培养药敏试验等确定病原菌和耐药基因

免疫学方法：酶联免疫技术通过已知的抗体或抗原来检测病原体的抗原或抗体

PCR检测：用已知引物引导未知片段中微量待测基因片段扩增

基因芯片：通过微加工将百万计的基因探针与核酸杂交检测技术

核酸杂交：探针和核酸按碱基互补配对原则缔成异质双链检测

宏基因组：从样品中提取总核酸，构建宏基因组文库测序分析检测

病原微生物宏基因检测法相比于其它方法：其利用宏基因组检测样本总核酸鉴定微生物的种类，检测范围更广，一次性可分析10635种微生物，包括RNA病毒，速度快48小时能完成交付，检测样本灵活，

重点：

1、可检出新发病原，解决想不到，

2、可检也罕见病原，解决没想到，

3、可检出低频率突变，解决做不到，

达瑞基因

㈡ 食品病原微生物的检测方法有几种生化检测方法分别有什么试验

食品病原微生物的检测方法有几种？生化检测方法分别有什么试验？

正确答案：答：分别有生化检测方法核兄乎和分子生物学检测方法。生化检测方法有：糖酵解试验，淀粉尘慧水解试验，V-P试验，靛基质实改悉验，硝酸盐还原试验，明胶液化试验，尿素酶试验，氧化酶试验，硫化氢试验和三糖铁琼脂试验。

㈢ 试述确诊伤寒的微生物学检查方法有哪些

病料采集对于诊断微生物学检查至关重要。通常，我们会选择病畜禽的组织，如肝、肺、脾等，以及体液、分泌物和局部病灶的渗出液作为样本。这些样本可以提供病原体存在的直接证据。

镜检是病料检查中的重要环节。首先，对原始病料进行涂片，然后使用革兰氏染色法进行染色。革兰氏阴性菌的特征应该清晰可见。为了观察细菌的荚膜，可以使用印度墨汁等染料进行染色，这样荚膜会更加明显。

培养是微生物学检查的另一关键步骤。我们需要将病料同时接种到鲜血琼脂和麦康凯琼脂培养基上，然后在37℃的条件下培养24小时。通过观察细菌的生长情况、菌落特征以及溶血性，我们可以初步判断病原体的种类。

生化试验能够进一步确认病原体的特性。对于多杀性巴氏杆菌，它在48小时内可分解葡萄糖、果糖、乳糖、蔗糖和甘露糖，但不发酵乳糖、鼠李糖、菊糖、水杨苷和肌醇。它还能产生硫化氢，形成靛基质，且MR和V-P试验均为阴性。接触酶和氧化酶试验均为阳性。而对于溶血性巴氏杆菌，它不产生靛基质，能发酵乳糖产酸，并能发酵葡萄糖、糖元、肌醇、麦芽糖、淀粉，但不发酵侧金盏花醇、菊糖和赤藓醇。

动物试验也是诊断的重要手段之一。常用的试验动物有小鼠和家兔。实验动物死亡后，立即进行剖检，并取心血和实质脏器分离和涂片染色镜检。若见大量两极浓染的细菌，则可确诊。

血清型或生物型鉴定则可以通过被动血凝试验、凝集试验鉴定多杀性巴氏杆菌荚膜血清群和血清型。间接血凝试验可用于测定溶血性巴氏杆菌的血清型，而根据生化反应则可以鉴定该菌的生物型。

㈣ 病原微生物中细菌常见检测方法有哪些

1、快速测试片技术法

快速测试片是指以纸片、纸膜、胶片等作为培养基载体，将特定的培养基和显色物质附着在上面，通过微生物在上面的生长、显色来测定食品中微生物的方法。

细菌总数检测纸片的研制始于 20 世纪 80 年代，其主要优点是简便、实用、经济、操作性强。近年来以滤纸和美国某公司的 Petrifilm 为载体的测试片已开始被广泛应用。

2、生物电化学方法

生物电化学方法是指通过电极测定微生物产生或消耗的电荷，从而提供分析信号的方法。微生物在滋生代谢过程中，培养基的电化学性质如电流、电位、电阻和电导等会发生变化，所以可以通过检测分析这些电化学参量的变化来实现对微生物的快速测定。

常见的有：阻抗分析法、电位分析法、电流分析法等。生物电化学方法具有测量快速、直观、操作简单、测量设备成本低和信号的可控性等特点。

3、微菌落技术

微菌落是指细菌生长繁殖早期在固相载体上所形成的只能借助于显微镜观察的微小菌落。微菌落技术具有快速、经济、实用的特点，其研究始于 20 世纪50年代，定量测定技术从 20 世纪 70 年代开始，国外已有报道将该法应用于水、食品中细菌总数的快速检测。

4、气相色谱法

气相色谱应用到微生物的检测中，主要是依据不同微生物的化学组成或其产生的代谢产物各异，利用上述色谱检测可直接分析各种体液中的细菌代谢产物、细胞中的脂肪酸、蛋白质、氨基酸、多肽、多糖等，以确定病原微生物的特异性化学标志成分，协助病原诊断和检测。

5、高效液相色谱法

利用高效液相色谱检测可分析各种体液中的细菌代谢产物、病原微生物等，以确定病原微生物的特异性化学标志成分，协助病原诊断和检测。