A. 培養基滅菌的方法
1、高壓蒸汽滅菌納空陪:高壓蒸汽滅菌適用於耐高溫培養基、接種器具和蒸餾水的滅菌。培養基在配製過程中混入各種雜菌，分裝後應立即滅菌，滅菌工作至少應在24小時內完成。一般可虧模在0.105MPa壓力、121℃溫度下滅菌15 ~ 30分鍾。消毒時間不能太長，也不能超過規定的壓力范圍，否則有機物，特別是維生素，在高溫下會分解，失去營養功能，使培養基變質、變色，甚至難以凝固。將蒸餾水或自來水放入三角瓶中，含水量一般不超過瓶子的2/3，用牛皮紙或硫酸紙包好密封，然後放入高壓鍋中滅菌，得到無菌水。滅菌後的培養基可以在培養室中預培養3天。如果沒有污染，證明滅菌完成，可以使用。暫時不用的培養基最好保存在10℃下。含IAA或GA3的培養基應在一周內用完，其他培養基最多不超過一個月。2、過濾滅菌:一些植物生長調節劑和有機物質，如IAA、GA3、ZT、CM等。，加熱時易分解，不能用培養基高溫滅菌，所以要用細菌過濾器把洞蠢雜菌過濾掉。細菌過濾器和濾膜(孔徑0.45微米)在使用前應高壓滅菌。過濾後的溶液應立即加入培養基中。如果是液體培養基，可以在培養基冷卻到30℃時添加。如果是固體培養基，必須在培養基凝固前(50-60℃)加入，溶液必須搖勻，與其他成分混合均勻。