去除血樣中的蛋白可採用哪些方法

Ⅰ 生物樣品中蛋白質的處理方法有哪些

① 鹽析法
一般來說，所有固體溶質都可以在溶液中加入中性鹽而沉澱析出，這一過程叫鹽析。在生化制備中,許多物質都可以用鹽析法進行沉澱分離，如蛋白質、多肽、多糖、核酸等，其中以蛋白質沉澱最為常見，特別是在粗提階段。
鹽析法分為兩類，第一類叫Ks分段鹽析法，在一定PH和溫度下通過改變離子強度實現，用於早期的粗提液；第二種叫b分段鹽析法，在一定離子強度下通過改變PH和溫度來實現，用於後期進一步分離純化和結晶。

② 有機溶劑沉澱法
有機溶劑的沉澱機理是降低水的介電常數，導致具有表面水層的生物大分子脫水，相互聚集，最後析出。該法優點在於：1）分辨能力比鹽析法高，即蛋白質或其它溶劑只在一個比較窄的有機溶劑濃度下沉澱；2）沉澱不用脫鹽，過濾較為容易；3）在生化制備中應用比鹽析法廣泛。其缺點是對具有生物活性的大分子容易引起變性失活，操作要求在低溫下進行。總體來說，蛋白質和酶的有機溶劑沉澱法不如鹽析法普遍。
有機溶劑的選擇首先是能和水混溶，使用較多的有機溶劑是乙醇、甲醇、丙酮，還有二甲基甲醯胺、二甲基亞碸、乙腈和2-甲基-2,4戊二醇等。
③ 其他沉澱法
一．等電點沉澱法
兩性電解質分子上的凈電荷為零時溶解度最低，不同的兩性電解質具有不同的等電點，以此為基礎可進行分離。如工業上生產胰島素時，在粗提液中先調PH8.0去除鹼性蛋白質，再調PH3.0去除酸性蛋白質。
利用等電點除雜蛋白時必須了解制備物對酸鹼的穩定性，不然盲目使用十分危險。 不少蛋白質與金屬離子結合後，等電點會發生偏移，故溶液中含有金屬離子時，必須注意調整PH值。 等電點法常與鹽析法、有機溶劑沉澱法或其他沉澱方法聯合使用，以提高其沉澱能力。
二．生成鹽復合物沉澱法
1．金屬復合鹽法
許多有機物質包括蛋白在內，在鹼性溶液中帶負電荷，能與金屬離子形成沉澱。根據有機物與它們之間的作用機制，可分為羧酸、胺及雜環等含氮化合物類，如銅鋅鎘；親羧酸疏含氮化合物類，如概鎂鉛；親硫氫基化合物類，如汞銀鉛。 蛋白質-金屬離子復合物的重要性質是它們的溶解度對溶液的介電常數非常敏感，調整水溶液的介電常數（如加入有機溶劑），即可沉澱多種蛋白。
2． 有機鹽法
含氮有機酸如苦味酸、苦酮酸、鞣酸等能與有機分子的鹼性功能團形成復合物而沉澱析出。但此法常發生不可逆的沉澱反應，故用於制備蛋白質時，需採用較溫和的條件，有時還需加入一定的穩定劑。
3．無機復合鹽法
如磷鎢酸鹽、磷鉬酸鹽等。
以上鹽類復合物都具有很低的溶解度，極易沉澱析出。若沉澱為金屬復合鹽，可通以H2S使金屬變成 硫化物而除去，若為有機酸鹽或磷鎢酸鹽，則加入無機酸並用乙醚萃取，把有機酸和磷鎢酸等移入乙醚中除去，或用離子交換法除去。值得注意的是此類方法常使蛋白質發生不可逆沉澱，應用時必須謹慎。
三． 選擇性變性沉澱
其原理是利用蛋白質、酶和核酸等生物大分子對某些物理或化學因素敏感性不同，有選擇地使之變性沉澱，以達到分離提純的目的。
此方法可分為：1）利用表面活性劑(三氯乙酸)或有機溶劑引起變性；2）利用對熱的不穩定性,加熱破壞某些組分，而保存另一些組分；3）酸鹼變性。
四．非離子多聚物沉澱法
非離子多聚物是六十年代發展起來的一類重要沉澱劑，最早用於提純免疫球蛋白、沉澱一些細菌和病毒，近年來逐漸廣泛應用於核酸和酶的分離提純。這類非離子多聚物包括不同分子量的聚乙二醇、NPEO、葡聚糖、右旋糖酐硫酸鈉等，其中應用最多的是聚乙二醇。
用非離子多聚物沉澱生物大分子和微粒，一般有兩種方法：1）選用兩種水溶性非離子多聚物組成液液兩相體系，不等量分配，而造成分離。此方法基於不同生物分子表面結構不同，有不同分配系數。並外加離子強度、PH值和溫度等影響，從而擴大分離效果。2）選用一種水溶性非離子多聚物，使生物大分子在同一液相中，由於被排斥相互凝聚而沉澱析出。該方法操作時先離心除去大懸浮顆粒，調整溶液PH值和溫度至適度，然後加入中性鹽和多聚物至一定濃度，冷貯一段時間，即形成沉澱。

Ⅱ 核酸提取中除去蛋白質的方法主要有哪幾種

可以用氯仿抽提之後離心，離心後分三層，下層有機層中有一些脂溶性的雜質，中間層白色絮狀沉澱是蛋白，上清液中即含有核酸。也有很多試劑盒，是可以把核酸掛在柱子上，把蛋白質等雜質離心掉，這個方法即快捷又方便。

凝膠過濾，這是很容易去除小分子雜質物質的方法。

如果蛋白樣本和核酸的分子大小差別比較大，可以考慮用超濾的方法。

超濾是以壓力為推動力的膜分離技術之一，以大分子與小分子分離為目的 。

加入核酸酶消化三個小時。

比如加一定量的DNAase 和RNAse酶消化。

(2)去除血樣中的蛋白可採用哪些方法擴展閱讀：

核酸模板在核酸聚合酶、引物、四種單脫氧核苷酸存在條件下復制或轉錄時，如果在四管反應系統中分別按比例引入四種雙脫氧核苷酸，只要雙脫氧核苷酸摻入鏈端，該鏈就停止延長，鏈端摻入單脫氧核苷酸的片段可繼續延長。

如此每管反應體系中便合成以共同引物為5』端，以雙脫氧核苷酸為3』端的一系列長度不等的核酸片段。反應終止後，分四個泳道進行電泳。以分離長短不一的核酸片段（長度相鄰者僅差一個核苷酸），根據片段3』端的雙脫氧核苷酸，便可依次閱讀合成片段的核苷酸排列順序。

Ⅲ 在測定血樣時，首先應去除蛋白質，去除蛋白有哪

去除蛋白質可使蛋白結合型的葯物釋放出來，以便測定葯物的總濃度；也可減免後續溶劑萃取過程中乳化現象的出現；同時可以保護儀器性能，延長使用期限。去除蛋白質常用的方法有： ①加入與水混溶的有機溶劑，如乙脂、甲醇、丙酮、四氫呋喃等。 ②加入中性鹽，如飽和硫酸銨、硫酸鈉、枸櫞酸鹽等。 ③加入強酸，如10％三氯醋酸、65％高氯酸等。 ④加入含鋅鹽及鋼鹽的沉澱劑，如CuSO4-、Na2WO4、ZnSO4―NaOH等。

Ⅳ 如何從血液中分離純化清蛋白請舉出兩種分離純化的方法

一.血清ǐ-球蛋白的初步提取
1. 血細胞與血清分離：
取人血液 1000ml,放置10min, 1000rpm離心20min .棄沉澱,留上清備用(沉澱為血細胞,上部為血清).
2. 乳糜粒分離：4000rpm 10°C離心10分鍾,採用密度梯度離心
梯度液配置：離心管下部3/4容積加血漿,上部1/4容積加0.5MnaCl+0.3MEDTA,PH7.4 乳糜粒上浮,將乳糜粒吸出,留其餘液體備用.
3. 血清蛋白分離：除去球蛋白,白蛋白及其它蛋白質.

Ⅳ 去除蛋白質常採用的方法有哪些

去除蛋白質常採用的方法就是透析法，因為蛋白質是大分子物質，他不能透過半透膜，所以利用半透膜就可以把蛋白質除掉。

Ⅵ 除蛋白都有哪些方法

目前已有很多去蛋白方法可供使用，但使用各種方法之前應了解該方法是否會導致生物樣品中的葯物發生分解或影響葯物的提取等。
通常除蛋白的方法是在含蛋白樣品中加入適當的沉澱劑或變性劑，使蛋白質脫水而沉澱(如有機溶劑、中性鹽)，有的是由於蛋白質形成不溶性鹽而析出(如高氯酸)，離心後取上清液用於分析。甲醇、乙腈、丙酮和乙醇是沉澱蛋白常用的有機溶劑，中性鹽可用氯化銨等。無機鹽沉澱蛋白是可逆的，即將蛋白稀釋後仍具有生理活性，而有機溶劑和酸類沉澱的蛋白是不可逆的。也可用透析法與超濾法除去樣品中蛋白。
當然還可以熱沉澱，強酸強鹼變性沉澱，或者蛋白酶處理

Ⅶ 怎麼降低血液中的白蛋白含量

補充白蛋白就是補充營養，有許多人會有如此的誤解，要知道白蛋白與營養針是否可以畫上等號，首先要先了解白蛋白的功能。白蛋白在肝臟合成，分布於血漿中，及皮膚、肌肉、其他各種組織的細胞外液中。白蛋白是血漿蛋白之中含量最多的蛋白質(其他主要還有球蛋白、纖維蛋白等)，他最主要的功能在維持血液的膠體滲透壓，也就是說白蛋白在血管中可以拉住水分，幫助血液在血管中維持一定的容量，若是體內白蛋白的量過低，血液中的水分就可能保持不住而流失。除了維持血液的膠體滲透壓外，白蛋白另一個主要的功能就是負責物質的運送，這其中包括內生性物質，如脂肪酸、膽紅素、各種激素等，及外生性物質如葯物，也因此有些葯物的濃度會受到白蛋白含量的左右。

白蛋白顧名思義是蛋白質的一種，在體內佔有一定的含量，若是營養狀況不好，蛋白質的生合成自然會降低，因此，在臨床上血漿中白蛋白的含量，也常用來當作評估病患營養狀態的指標之一；而雖然如此，直接注射白蛋白並無法直接補充營養，因為人體營養的來源，除了蛋白質外，主要還有糖類及脂肪。而在一些急性的發炎或感染、肝、腎疾病、大出血、燒傷時，白蛋白會明顯的流失。一般成人血漿中白蛋白的含量為35-38克/公升，孕婦以及老人的含量較低。若是含量小於15克/公升，就會有生命危險，當白蛋白含量介於20到25克/公升之間，就有可能出現水腫的症狀，而過低的白蛋白可能會延長病患的住院日。在臨床上，白蛋白適用於休克、燒傷、手術前、期間或手術後白蛋白缺乏症狀、以及白蛋白含量低於25克/公升的病人。但是補充時，並不是一昧的補充，須注意白蛋白過多或濃度過濃時，會使血量過多造成心血管過度負荷、肺水種、體內蓄積會過多的水分、凝血時間延長、甚至是急性腎衰竭等。而且白蛋白得制劑是由人體混合血漿所製成，雖然經過嚴格篩選及病毒去活化，但仍無法完全避免被感染原感染而產生感染性疾病。因此，使用時應特別小心，避免不必要的濫用。

Ⅷ 去除核酸中的蛋白質的方法有哪些

想要在已經抽提的蛋白標本中去除核酸，可以考慮以下幾種方法：

1. 凝膠過濾，這是很容易去除小分子雜質物質的方法。
   

2. 如果蛋白樣本和核酸的分子大小差別比較大，可以考慮用超濾的方法。

   超濾是以壓力為推動力的膜分離技術之一，以大分子與小分子分離為目的。

3. 加入核酸酶消化三個小時。

   比如加一定量的DNAase 和RNAse酶消化。

4. 核酸用AIEX也可以除去，不過要選擇合適的pH值。

5. 使用超聲把核酸降解。

6. 用氯仿抽提之後離心。
   

Ⅸ 去除血漿中蛋白質可釆用的方法

加水混溶的有機溶劑脫水比如甲醇
加中性鹽析比如硫酸鈉
加強酸生成不溶性鹽
加重金屬鹽類沉澱
加熱使蛋白質變性
還有酶解法

Ⅹ 生物樣品中蛋白質的處理方法有哪些

一。蛋白質沉澱方法
1.中性鹽鹽析法
⑴在一定的
ph值及溫度條件下，改變鹽的濃度（即離子強度）達到沉澱的目的，稱為「ks」分級鹽析法。
（ks鹽析：固定ph,
溫度，改變鹽濃度）
⑵在一定的離子強度下，改變溶液的ph值及溫度，達到沉澱的目的，稱為「β」分級鹽析法。
（β鹽析：固定離子強度，改變ph及溫度。）
2.等電點沉澱法
蛋白質等電點沉澱法是基於不同蛋白質離子具有不同等電點這一特性，依次改變溶液ph值的辦法，將雜蛋白沉澱除去，最後獲得目標產物。
3.有機溶劑沉澱法
許多能與水互溶的有機溶劑如乙醇、丙酮、甲醇和乙腈，常用於低鹽濃度下沉澱蛋白質。
4.非離子型聚合物沉澱法
20世紀60年代非離子型聚合物開始用於分離血纖維蛋白原和免疫球蛋白，從此高相對分子質量非離子聚合物沉澱蛋白質的方法被廣泛使用，如：聚乙二醇（peg）、聚乙烯吡咯烷酮（pvp）、葡聚糖等。
5.金屬沉澱法
能與羧基、胺基等含氮化合物以及含氮雜環化合物強烈結合的金屬離子，如：mn2+、fe2+、co2+、ni2+、cu2+、zn2+、cd2+；
能與羧酸結合而不與含氮化合物結合的金屬離子，如：ca2+、ba2+、mg2+、pb2+；
與巰基化合物強烈結合的金屬離子，如：hg2+、ag+、pb2+。
實際使用時，金屬離子的濃度常為0.02
mol/l。
6.親和沉澱
初始階段：將一個目標蛋白質與鍵合在可溶性載體上的親和配體絡合成沉澱；
所得沉澱物用一生中適當的緩沖溶液進行洗滌，洗去可能存在的雜質；
用一種適當的試劑將目標蛋白質從配體中離解出來。
7.選擇性變性沉澱法
（1）例如對於α-澱粉酶等熱穩定性好的酶，可以通過加熱進行熱處理，使大多數雜蛋白受熱變性沉澱而被除去。
（2）根據欲分離物質所含雜質的特性，通過改變ph值或加進某些金屬離子等使雜蛋白變性沉澱而被除去。
8.反膠束萃取蛋白質
菌體細胞提取
固液分離是生物產品生產中的重要單元操作。培養基、發酵液、某些中間產品和半成品等都需進行固液分離。發酵液由於種類多、粘度大及成分復雜，其固液分離最為困難。
固液分離的方法很多，生物工業中常規的方法有分離篩、重力沉降、浮選分離、離心分離和過濾等，其中用於發酵液固液分離的方法主要是離心分離和過濾。
二。超濾膜濾去。