蔓延菌檢測方法

㈠ 有誰知道現在化妝品中銅綠假單胞菌的檢測方法，有什麼簡便的方法

銅綠假單胞菌在化妝品中指綠膿桿菌，該菌對人有致病力，可使傷處化膿，引起敗血症等。檢測方法是《化妝品衛生規范》下面是詳細的檢測方法：
1.增菌培養：取1:10樣品稀釋液10mL加到90mL SCDLP液體培養基中，置37℃培養18h～24h。如有綠膿桿菌生長，培養液表面多有一層薄菌膜，培養液常呈黃綠色或藍綠色。
2. 分離培養：從培養液的薄膜處挑取培養物，劃線接種在十六烷基三甲基溴化銨瓊脂平板上，置37℃培養18h～24h。凡綠膿桿菌在此培養基上，其菌落扁平無定型，向周邊擴散或略有蔓延，表面濕潤，菌落呈灰白色，菌落周圍培養基常擴散有水溶性色素，此培養基選擇性強，大腸艾希氏菌不能生長，革蘭氏陽性菌生長較差。
在缺乏十六烷基三甲基溴化銨培養基時也可用乙醯胺培養基進行分離，將菌液劃線接種於平板上，放37℃培養24h，綠膿桿菌在此培養基上生長良好，菌落扁平，邊緣不整，菌落周圍培養基略帶粉紅色，其它菌不生長。
3. 染色鏡檢：挑取可疑的菌落，塗片，革蘭氏染色，鏡檢為革蘭氏陰性者應進行氧化酶試驗。
4. 氧化酶試驗：取一小塊潔凈的白色濾紙片放在滅菌平皿內，用無菌玻璃棒挑取綠膿桿菌可疑菌落塗在濾紙片上，然後在其上滴加一滴新配製的1%二甲基對苯二胺試液，在15s～30s之內，出現粉紅色或紫紅色時，為氧化酶試驗陽性；若培養物不變色，為氧化酶試驗陰性。
5. 綠膿菌素試驗：取可疑菌落2～3個，分別接種在綠膿菌素測定培養基上，置37℃培養24h，加入氯仿3mL～5mL，充分振盪使培養物中的綠膿菌素溶解於氯仿液內，待氯仿提取液呈藍色時，用吸管將氯仿移到另一試管中並加入1mol/L的鹽酸1mL左右，振盪後，靜置片刻。如上層鹽酸液內出現粉紅色到紫紅色時為陽性，表示被檢物中有綠膿菌素存在。
6.硝酸鹽還原產氣試驗：挑取可疑的綠膿桿菌純培養物，接種在硝酸鹽蛋白腖水培養基中，置37℃培養24h，觀察結果。凡在硝酸鹽蛋白腖水培養基內的小倒管中有氣體者，即為陽性，表明該菌能還原硝酸鹽，並將亞硝酸鹽分解產生氮氣。
7. 明膠液化試驗，取綠膿桿菌可疑菌落的純培養物，穿刺接種在明膠培養基內，置37℃培養24h，取出放冰箱10min～30min，如仍呈溶解狀時即為明膠液化試驗陽性；如凝固不溶者為陰性。
8. 42℃生長試驗：挑取可疑的綠膿桿菌純培養物，接種在普通瓊脂斜面培養基上，放在41～42℃培養箱中，培養24h～48h，綠膿桿菌能生長，為陽性，而近似的熒光假單胞菌則不能生長。

檢驗結果報告
被檢樣品經增菌分離培養後，在分離平板上有典型或可疑菌落生長，經證實為革蘭氏陰性桿菌，氧化酶及綠膿菌素試驗皆為陽性者，即可報告被檢樣品中檢出綠膿桿菌；如綠膿菌素試驗陰性而液化明膠、硝酸鹽還原產氣和42℃生長試驗三者皆為陽性時，仍可報告被檢樣品中檢出綠膿桿菌。

㈡ 最近做微生物實驗經常碰到菌落蔓延現象無法讀數，怎樣

菌落在微生物實驗培養中可以起判斷菌種類型的作用。 解釋：我們可以通過觀察菌落的大小、性狀、菌落的邊緣情況和表面情況等特徵來判斷這中菌屬於哪種微生物。例如酵母菌的菌落表面光滑、濕潤、粘稠,容易挑起,菌落質地均勻，正反面和邊緣、中央部位的顏色都很均一

㈢ 菌落總數國標測定方法需要什麼儀器

腸出血性大腸桿菌O157:H7是一種新出現的食物傳播性疾病的病因.它除了引起腹瀉、出血性腸炎外,還可發生溶血性尿毒綜合症、血栓性血小板減少性紫癜等嚴重的並發症.自1982年美國首次發現因該致病菌引起的食物中毒以來,腸出血性大腸桿菌O157:H7疫情開始逐漸擴散和蔓延,相繼在英國、加拿大、日本等多個國家引起腹瀉爆發和流行.我國已陸續有十餘個省份在市售食品、進口食品、腹瀉病患者、家畜家禽等分離到大腸桿菌O157:H7.大腸桿菌O157測試片（FilmplateTM E.coli O157BO204）採用進口高選擇性顯色培養基作為主要原料,運用專有技術,做成一次性快速檢驗產品,一步培養15～24h就可確認,大大地簡化了檢測程序,非常適合各級檢驗部門和食品企業使用.
大腸桿菌3方元方圓生物的適用於海產品、水產品、各類熟肉製品和冷葷、蛋及蛋製品等的快速檢測.參照標准：食品衛生微生物學檢驗大腸埃希氏菌O157:H7/NM檢驗（GB/T4789.36）.
操作方法:
1、樣品處理：取樣品25mL（g）放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液（或生理鹽水）的取樣罐或均質杯內,製成1:10的樣品勻液.
2、接種：將大腸桿菌O157測試片置於平坦實驗檯面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1mL樣品勻液緩慢均勻地滴加到紙片上,然後再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右使培養基凝固,最後用手輕輕地壓一下,每個稀釋度接種兩片,同時做一片空白陰性對照.
3、培養：將測試片疊在一起放回原自封袋中,並封口,透明面朝上水平置於恆溫培養箱內,堆疊片數不超過12片.培養溫度為36℃±1℃,培養15～24h.

結果判讀:
對測試片進行觀察,呈紫紅色的菌落為；呈藍色的菌落為其他大腸菌群.出現陽性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進行驗證,沒有條件的至少要再取樣重復檢驗一次.

㈣ 化妝品致病菌檢測怎麼做

中科院中科檢測是化妝品備案檢測機構，化妝品致病菌檢測常見的有：耐熱大腸桿菌，銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌

耐熱大腸桿菌檢測方法:

1.取 10mL 1：10 稀釋的檢液，加到 10mL 雙倍乳糖膽鹽（含中和劑）培養基中，置 44.5℃

±0.5℃培養箱中培養 24h，如既不產酸也不產氣，繼續培養至 48h，如仍既不產酸也不產

氣，則報告為耐熱大腸菌群陰性。

2. 如產酸產氣，劃線接種到伊紅美藍瓊脂平板上，置36℃±1℃培養18h—24h。同時取該

培養液 1—2 滴接種到蛋白腖水中，置 44.5℃±0.5℃培養 24h±2h。

經培養後，在上述平板上觀察有無典型菌落生長。耐熱大腸菌群在伊紅美藍瓊脂培養

基上的典型菌落呈深紫黑色，圓形，邊緣整齊，表面光滑濕潤，常具有金屬光澤。也有的

呈紫黑色，不帶或略帶金屬光澤，或粉紫色，中心較深的菌落，亦常為耐熱大腸菌群，應

注意挑選。

3. 挑取上述可疑菌落，塗片作革蘭氏染色鏡檢。

4. 在蛋白腖水培養液中，加入靛基質試劑約 0.5mL，觀察靛基質反應。陽性者液面呈玫

瑰紅色；陰性反應液面呈試劑本色。

銅綠假單胞菌檢測方法：

1.增菌培養：取 1:10 樣品稀釋液 10mL 加到 90mL SCDLP 液體培養基中，置 36℃±1℃培

養 18h—24h。如有銅綠假單胞菌生長，培養液表面多有一層薄菌膜，培養液常呈黃綠色或

藍綠色。

2. 分離培養：從培養液的薄膜處挑取培養物，劃線接種在十六烷三甲基溴化銨瓊脂平板

上，置 36℃±1℃培養 18h—24h。凡銅綠假單胞菌在此培養基上，其菌落扁平無定型，向周

邊擴散或略有蔓延，表面濕潤，菌落呈灰白色，菌落周圍培養基常擴散有水溶性色素。

在缺乏十六烷三甲基溴化銨瓊脂時也可用乙醯胺培養基進行分離，將菌液劃線接種於

平板上，置 36℃±1℃培養 24h±2h，銅綠假單胞菌在此培養基上生長良好，菌落扁平，邊緣

不整，菌落周圍培養基呈紅色，其他菌不生長。

3. 染色鏡檢：挑取可疑的菌落，塗片，革蘭氏染色，鏡檢為革蘭氏陰性者應進行氧化酶

試驗。

4. 氧化酶試驗：取一小塊潔凈的白色濾紙片置於滅菌平皿內，用無菌玻璃棒挑取銅綠假

單胞菌可疑菌落塗在濾紙片上，然後在其上滴加一滴新配製的 1%二甲基對苯二胺試液，在

15s—30s 之內，出現粉紅色或紫紅色時，為氧化酶試驗陽性；若培養物不變色，為氧化酶

試驗陰性。

5.綠膿菌素試驗：取可疑菌落 2 個—3 個，分別接種在綠膿菌素測定培養基上，置 36℃

±1℃培養 24h±2h，加入氯仿 3mL—5mL，充分振盪使培養物中的綠膿菌素溶解於氯仿液

內，待氯仿提取液呈藍色時，用吸管將氯仿移到另一試管中並加入 1mol/L 的鹽酸 1mL 左

右，振盪後，靜置片刻。如上層鹽酸液內出現粉紅色到紫紅色時為陽性，表示被檢物中有

綠膿菌素存在。

6 .硝酸鹽還原產氣試驗：挑取可疑的銅綠假單胞菌純培養物，接種在硝酸鹽腖水培養基

中，置 36℃±1℃培養 24h±2h，觀察結果。凡在硝酸鹽腖水培養基內的小倒管中有氣體者，

即為陽性，表明該菌能還原硝酸鹽，並將亞硝酸鹽分解產生氮氣。

7. 明膠液化試驗：取銅綠假單胞菌可疑菌落的純培養物，穿刺接種在明膠培養基內，置

36℃±1℃培養 24h±2h，取出放置於 4℃±2℃冰箱 10min—30min，如仍呈溶解狀或表面溶解

時即為明膠液化試驗陽性；如凝固不溶者為陰性。

8. 42℃生長試驗：挑取可疑的銅綠假單胞菌純培養物，接種在普通瓊脂斜面培養基上，

置於 42℃±1℃培養箱中，培養 24h—48h，銅綠假單胞菌能生長，為陽性，而近似的熒光假

單胞菌則不能生長。

金黃色葡萄球菌檢測方法：

1 增菌：取 1:10 稀釋的樣品 10mL 接種到 90mL SCDLP 液體培養基中，置 36℃±1℃培養

箱，培養 24h±2h。

註：如無此培養基也可用 7.5%氯化鈉肉湯。

2. 分離：自上述增菌培養液中，取 1—2 接種環，劃線接種在 Baird Parker 平板培養基，

如無此培養基也可劃線接種到血瓊脂平板，置 36℃±1℃培養 48h。在血瓊脂平板上菌落呈

金黃色，圓形，不透明，表面光滑，周圍有溶血圈。在 Baird Parker 平板培養基上為圓形，

光滑，凸起，濕潤，顏色呈灰色到黑色，邊緣為淡色，周圍為一混濁帶，在其外層有一透

明帶。用接種針接觸菌落似有奶油樹膠的軟度。偶然會遇到非脂肪溶解的類似菌落，但無

混濁帶及透明帶。挑取單個菌落分純在血瓊脂平板上，置 36℃±1℃培養 24h±2h。

3. 染色鏡檢：挑取分純菌落，塗片，進行革蘭氏染色，鏡檢。金黃色葡萄球菌為革蘭氏

陽性菌，排列成葡萄狀，無芽胞，無莢膜，致病性葡萄球菌，菌體較小，直徑約為 0.5mm —1mm。

4. 甘露醇發酵試驗：取上述分純菌落接種到甘露醇發酵培養基中，在培養基液面上加入

高度為 2mm—3mm 的滅菌液體石蠟，置 36℃±1℃培養 24h±2h，金黃色葡萄球菌應能發酵

甘露醇產酸。

5. 血漿凝固酶試驗：吸取1:4新鮮血漿0.5mL，置於滅菌小試管中，加入待檢菌24h±2h肉

湯培養物0.5mL。混勻，置36℃±1℃恆溫箱或恆溫水浴中，每半小時觀察一次，6h之內如呈

現凝塊即為陽性。同時以已知血漿凝固酶陽性和陰性菌株肉湯培養物及肉湯培養基各

0.5mL，分別加入無菌1:4血漿0.5mL，混勻，作為對照。

㈤ 高二生物:分解菌方法,測定細菌數量方法,獲取單菌落方法。越全越好

現在用的多的就是這幾種，樓主挑著看吧

細菌計數1.計數器測定法：
即用血細胞計數器進行計數。取一定體積的樣品細胞懸液置於血細胞計數器的計數室內，用顯微鏡觀察計數。由於計數室的容積是一定的(O.1mm3)，因而根據計數器刻度內的細菌數，可計算樣品中的含菌數。本法簡便易行，可立即得出結果。
本法不僅適於細菌計數，也適用於酵母菌及黴菌孢子計數。
2、電子計數器計數法:
電子計數器的工作原理是測定小孔中液體的電阻變化，小孔僅能通過一個細胞，當一個細胞通過這個小孔時，電阻明顯增加，形成一個脈沖，自動記錄在電子記錄裝置上。
該法測定結果較准確，但它只識別顆粒大小，而不能區分是否為細菌。因此，要求菌懸液中不含任何碎片。
3、活細胞計數法
常用的有平板菌落計數法，是根據每個活的細菌能長出一個菌落的原理設計的。取一定容量的菌懸液，作一系列的倍比稀釋，然後將定量的稀釋液進行平板培養，根據培養出的菌落數，可算出培養物中的活菌數。此法靈敏度高，是一種檢測污染活菌數的方法，也是目前國際上許多國家所採用的方法。使用該法應注意：①一般選取菌落數在30～300之間的平板進行計數，過多或過少均不準確；②為了防止菌落蔓延，影響計數，可在培養基中加入O．001％2，3，5一氯化三苯基四氮唑(TTC)；③本法限用於形成菌落的微生物。
廣泛應用於水、牛奶、食物、葯品等各種材料的細菌檢驗，是最常用的活菌計數法。
4、比濁法
比濁法是根據菌懸液的透光量間接地測定細菌的數量。細菌懸浮液的濃度在一定范圍內與透光度成反比，與光密度成正比，所以，可用光電比色計測定菌液，用光密度(OD值)表示樣品菌液濃度。
此法簡便快捷，但只能檢測含有大量細菌的懸浮液，得出相對的細菌數目，對顏色太深的樣品，不能用此法測定。
5、測定細胞重量法
此法分為濕重法和乾重法。濕重法系單位體積培養物經離心後將濕菌體進行稱重；乾重法系單位體積培養物經離心後，以清水洗凈放人乾燥器加熱烘乾，使之失去水分然後稱重。
此法適於菌體濃度較高的樣品，是測定絲狀真菌生長量的一種常用方法。
6、測定細胞總氮量或總碳量
氮、碳是細胞的主要成分，含量較穩定，測定氮、碳的含量可以推知細胞的質量。此法適於細胞濃度較高的樣品。
7、顏色改變單位法（colour change unit,簡稱CCU）
這種方法通常用於很小，用一般的比濁法無法計數的微生物，比如支原體等，因為支原體的液體培養物是完全透明的，呈現為清亮透明紅色，因此無法用比濁法來計數，由於支原體固體培養很困難，用cfu法也不容易計數，因此需要用特殊的計數方法，即CCU法。它是以微生物在培養基中的代謝活力為指標，來計數微生物的相對含量的，下面以解脲脲原體為例單介紹其操作：，簡
（1）取12隻無菌試管，每一管裝1.8ml解脲脲原體培養基。
（2）在第一管加入0.2ml待測解脲脲原體菌液，充分混勻，從中吸取0.2ml加入第二管，依次類推，10倍梯度稀釋，一直到最末一管
（3）於37度培養，以培養基顏色改變的最末一管作為待測菌液的CCU，也就是支原體的最大代謝活力，比如第六管出現顏色改變，他的相對濃度就是10的6次方CCU/ml.
一般來說，比濁法和菌落計數法就可以滿足絕大多數細菌的計數，但是對支原體這樣比較特殊的微生物，用CCU法比較合適。

㈥ 蔓延菌落如何計數

如何蔓延到一半則一半計數在乘以2，如果蔓延整個平皿則無法計數了

㈦ 菌落總數標准，菌落總數計數方法

膨化食品的菌落總數不得超過10000cfu/g，大腸菌群不得超過90MPN/100g。固體飲料產品的菌落總數不得超過1000cfu/g，大腸菌群應不得超過90MPN/100g，黴菌不得超過50cfu/g。食醋中的菌落總數不得超過10000cfu/mL。

一、菌落總數標准

1、膨化食品：膨化食品的菌落總數不得超過10000cfu/g，大腸菌群不得超過90MPN/100g。

2、固體飲料：固體飲料產品的菌落總數不得超過1000cfu/g，大腸菌群應不得超過90MPN/100g，黴菌不得超過50cfu/g。

3、糕點、麵包、月餅：月餅產品中菌落總數不得超過1500cfu/g，大腸菌群不得超過30MPN/100g，黴菌不得超過100cfu/g。蛋糕產品中的菌落總數不得超過10000cfu/g，大腸菌群不得超過300MPN/100g，黴菌不得超過150cfu/g。

4、食醋：食醋中的菌落總數不得超過10000cfu/mL 。

5、餅干：非夾心餅乾的菌落總數不得超過750cfu/g，夾心餅乾的菌落總數不得超過2000cfu/g，餅干產品的黴菌計數不得超過50cfu/g。

6、滅菌乳：滅菌乳菌落總數不得超過10cfu/g，大腸菌群不得超過3MPN/100g。

7、冷凍飲品：含澱粉或果類的冷凍飲品菌落總數不得超過3000cfu/g，大腸菌群不得超過100MPN/100g，含乳蛋的冷凍飲品的菌落總數不得超過25000cfu/g，大腸菌群不得超過450MPN/100g。

8、蜜餞：蜜餞食品中菌落總數不得超過1000cfu/g，黴菌不得超過50cfu/g。

9、調味品：雞精調味料中大腸菌群不得超過90MPN/100g。

10、瓶裝水：飲用純凈水的菌落總數不得超過20cfu/ml，大腸菌群不得超過3MPN/100ml。瓶（桶）裝飲用水的菌落總數不得超過50cfu/ml，大腸菌群不得超過3MPN/100ml。天然礦泉水的菌落總數不得超過50cfu/ml，大腸菌群應為0。

11、醬腌菜：醬腌菜產品的大腸菌群不得超過30MPN/100g。

12、食糖：白砂糖、綿白糖的菌落總數不得超過100cfu/g。

13、肉乾、肉脯：肉製品中大腸菌群不得超過30MPN/100g。

14、油炸小食品：油炸類炒貨大腸菌群不得超過30MPN/100g。

15、果、蔬汁飲料：果(蔬)汁及果(蔬)汁飲料產品的菌落總數不得超過100cfu/mL，酵母不得超過20cfu/mL。

16、果凍：果凍中菌落總數不得超過100cfu/g，大腸菌群不得超過30MPN/100g。

17、黃酒：黃酒產品的菌落總數不得超過50cfu/ml。

18、芝麻醬：芝麻醬產品的大腸菌群不得超過90個/100g。

19、碳酸飲料：碳酸飲料產品的酵母不得超過10cfu/mL，菌落總數不得超過100cfu/mL，大腸菌群不得超過6MPN/100mL。

20、熟肉製品：熟肉製品的菌落總數不得超過30000cfu/g。

21、豆製品、麵筋：定型包裝非發酵豆製品的菌落總數不得超過750cfu/g；定型包裝發酵性豆製品的大腸菌群不得超過30MPN/100g。

22、方便麵：方便麵的面塊+調料菌落總數不得超過50000cfu/g，大腸菌群不得超過150MPN/100g。

二、菌落總數計數方法

1、具體操作方法

（1）培養到一定時間後，計算每個平板上的菌落數。可用肉眼觀察，必要時可以使用放大鏡檢查。記下各平板的菌落總數後，求出同稀釋度的各平板平均菌落數，計算出原始樣品中每克（或每毫升）中的菌落數。

（2）到達規定培養時間後，應當立即計數。如果不能立即計數，應將平板放置於0-4℃的環境下，且不得超過24小時。

2、菌落數選擇

（1）當平板上面有鏈狀菌落生長，如果呈鏈狀生長的菌落之間沒有任何明顯界限，則應作為一個菌落計算；如存在有幾條不同來源的鏈，則每條鏈均應按一個菌落計算，不能把鏈上生長的每一個菌落分開計數。

（2）當平板上面有片狀菌落生長，該平板一般不宜採用，如果片狀菌落不到平板的一半，而另一半又分布均勻，則可以使用半個平板的菌落數乘以2代表全平板的菌落數。

（3）當平板內的菌落數過多（即所有稀釋度均大於300時），但分布很均勻的時候，可取平板的一半或四分之一計數，再乘以相應稀釋倍數作為該平板的菌落數。

（4）不同稀釋度的菌落數應與稀釋倍數成反比（同一稀釋度的二個平板的菌落數應基本接近），即稀釋倍數愈高菌落數愈少，稀釋倍數愈低菌落數愈多。如果出現逆反現象，應視為檢驗中的差錯，不作為檢樣計數報告的依據。

3、稀釋度選擇

（1）計數時應選取菌落數在30-300之間，無蔓延菌落生長的平板（SN標准要求為25-250個菌落），然後乘以稀釋倍數進行報告。

（2）如果稀釋度均大於300，則取最高稀釋度的平均菌落數乘以稀釋倍數報告。

（3）如果稀釋度均小於30，則以最低稀釋度的平均菌落數乘稀釋倍數報告。

（4）如果菌落數有的大於300，有的又小於30，但均不在30-300之間，則應以最接近300或30的平均菌落數乘以稀釋倍數報告。

（5）如果所有稀釋度均無菌落生長，則應按小於1乘以最低稀釋倍數報告。

（6）如果2個稀釋度均在30-300之間，按國家標准方法要求應以二者比值決定，比值小於或等於2時取平均數，比值大於2則選擇較小數字。

（7）如果只有一個稀釋度平板上的菌落數在30-300之間，應當計算兩個平板菌落數的平均值，然後根據平均值乘以相應稀釋倍數進行計算。

4、報告

（1）當菌落數在1-100以內時，按照實際數字進行報告。如果菌落數大於100時，報告前2位有效數字，第3位數四捨五入計算。

（2）固體檢樣以克為單位報告，液體檢樣以毫升為單位報告，表面塗擦則以平方厘米為單位報告。

㈧ 進行菌種質量檢測的常用方法有哪些

1、直接觀察。對引進菌種觀察包裝是否合乎要求，棉塞有無松動，試管、玻璃瓶和塑料袋有無破損，棉塞和管、瓶或袋中有無病蟲侵染，菌絲色澤是否正常，有無發生變化。然後在瓶塞邊作深吸氣，聞其是否具備特有的香味。原種和栽培種可取出小塊菌絲體觀察其顏色和均勻度，並用手指捏料塊檢驗含水量是否符合標准。

2、顯微鏡檢驗。若菌絲透明，呈分枝狀、有橫隔、鎖狀聯合明顯，再加上具有不同品種固有的特徵，則可認為是合格菌種。

3、觀察菌絲長速。將供測的菌種接入新配製的試管斜面培養基上，置於最適宜的溫、濕度條件下進行培養，如果菌絲生長迅速、整齊濃密、健壯有力，則表明是優良菌種，否則即是劣質菌種。

優質菌種的標准

食用菌的種類雖然繁多，但從總體上看，每一個優良菌種均有＂純、正、壯、潤、香＂的共性。其標準是：

1、菌種的純度要高，不能有雜菌感染，也不能有其他類似的菌種。

2、菌絲色澤要純正，多數種類的菌絲應純白、有光澤，原種、栽培種菌絲應連結成塊，無老化變色現象。

3、菌絲要粗壯，分枝多而密，接種到培養基吃料塊，生長旺盛。

4、培養體要濕潤，與試管（瓶）壁緊貼而不幹縮，含水適宜。

5、具有每品種特有的清香味，不可有霉、腐氣味。

㈨ 黴菌和酵母菌的測定還有什麼方法

黴菌和酵母菌介紹及檢測方法
一、黴菌和酵母菌介紹：
黴菌和酵母菌及其檢驗酵母菌是真菌中的一大類，通常是單細胞，呈圓形,卵圓形、臘腸形或桿狀。黴菌也是真菌，能夠形成疏鬆的絨毛狀的菌絲體的真菌稱為黴菌。
黴菌和酵母廣泛分布於自然界並可作為食品中正常菌相的一部分。長期以來，人們利用某些黴菌和酵母加工一些食品，如用黴菌加工乾酪和肉，使其味道鮮美；還可利用黴菌和酵母釀酒、制醬；食品、化學、醫葯等工業都少不了黴菌和酵母。但在某些情況下，黴菌和酵母也可造成中腐敗變質。由於它們生長緩慢和競爭能力不強，故常常在不適於細菌生長的食品中出現，這些食品是pH低、濕度低、含鹽和含糖高的食品、低溫貯藏的食品，含有抗菌素的食品等。由於黴菌和酵母能抵抗熱、冷凍，以及抗菌素和輻照等貯藏及保藏技術，它們能轉換某些不利於細菌的物質，而促進致病細菌的生長；有些黴菌能夠合成有毒代謝產物－黴菌毒素。黴菌和酵母往往使食品表面失去色、香、味。例如，酵母在新鮮的和加工的食品中繁殖，可使食品發生難聞的異味，它還可以使液體發生混濁，產生氣泡，形成薄膜，改變顏色及散發不正常的氣味等。因此黴菌和酵母也作為評價食品衛生質量的指示菌，並以黴菌和酵母計數來制定食品被污染的程度。目前已有若干個國家制訂了某些食品的黴菌和酵母限量標准。我國已制訂了一些食品中黴菌和酵母的限量標准。
二、檢驗方法：
黴菌和酵母的計數方法，與菌落總數的測定方法基本相似。主要步驟為：將樣品製作成10倍梯度的稀釋液，選擇3個合適的稀釋度，吸取1mL於平皿，傾注培養基後，培養觀察，計數。對黴菌的計數，還可以採用顯微鏡直接鏡檢計數的方法。
具體檢測標准參見：
GB4789.15-94，《中華人民共和國國家標准食品衛生微生物檢驗黴菌和酵母計數》
三、說明：
1．樣品的處理。為了准確測定黴菌和酵母數，真實反映被檢食品的衛生質量，首先應注意樣品的代表性。對大的固體食品樣品，要用滅菌刀或鑷子從不同部位採取試驗材料，再混合磨碎。如樣品不太大，最好把全部樣品放到滅菌均質器杯內攪拌2min。液體或半固體樣品可用迅速顛倒容器25次來混勻。
2．樣品的稀釋：為了減少櫚稀釋倍數的誤差，在連續遞增稀釋時，每一稀釋度應更換一根吸管。在稀釋過程中，為了使黴菌的孢子充分散開，需用滅菌吸管反復吹吸50次。
3．培養基的選擇：在黴菌和酵母計數中，主要使用以下幾種選擇性培養基。
馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂培養基（PDA）：黴菌和酵母在PDA培養基上生長良好。用PDA作平板計數時，必項加入抗菌素以抑制細菌。
孟加拉紅（虎紅）培養基：該培養基中的孟加拉紅和抗菌素具有抑制細菌的作用。孟加拉紅還可抑制黴菌菌落的蔓延生長。在菌落背面由孟加拉紅產生的紅色有助於黴菌和酵母菌落的計數。
高鹽察氏培養基：糧食和食品中常見的麴黴和青黴在該培養基上分離效果良好，它具有抑制細菌和減緩生長速度快的毛霉科菌種的作用。
4．傾注培養。每個樣品應選擇3個適宜的稀釋度，每個稀釋度傾注2個平皿。培養基熔化後冷卻至45℃，立即傾注並旋轉混勻，先向一個方向旋轉，再轉向相反方向，充分混合均勻。培養基凝固後，把平皿翻過來放溫箱培養。大多數黴菌和酵母在25－30℃的情況下生長良好，因此培養溫度25~28℃。培養3d後開始觀察菌落生長情況，共培養5d觀察記錄結果。
5．菌落計數及報告：選取菌落數10~150之間的平板進行計數。一個稀釋度使用兩個平板，取兩個平板菌落數的平均值，乘以稀釋倍數報告。固體檢樣以g為單位報告，液體檢樣以mL 單位報告。關於稀釋倍數的選擇可參考細菌菌落總數測定。
6．黴菌直接鏡檢計數法：對黴菌計數，可以採用直接鏡檢的方法進行計數。
在顯微鏡下，黴菌菌絲具有如下特徵：
平行壁：黴菌菌絲呈管狀，多數情況下，整個菌絲的直徑是一致的。因此在顯微鏡下菌絲壁看起來象兩條平行的線。這是區別黴菌菌絲和其他纖維時最有用的特徵之一。
橫隔：許多黴菌的菌絲具有橫隔，毛霉、根霉等少數黴菌的菌絲沒有橫隔。
菌絲內呈粒狀：薄壁、呈管狀的菌絲含有原生質，在高倍顯微鏡下透過細胞壁可見其呈粒狀或點狀。
分枝：如菌絲不太短，則多數呈分枝狀，分枝與主幹的直徑幾乎相同，有分枝是鑒定霉功得出可靠的特徵之一。
菌絲的頂端：常呈鈍圓形。無折射現象。
凡有以上特徵之一的絲狀均可判定為黴菌菌絲。
觀察視野中有無菌絲，凡符合下列情況之一者為陽性視野。
一根菌絲長度超過視野直徑1/6；
一根菌絲長度加上分枝的長度超過視野直徑1/6；
兩根菌絲總長度超過視野直徑1/6；
三根菌絲總長度超過視野直徑1/6；
一叢菌絲可視為一個菌絲，所有菌絲（包括分枝）總長度超過視野直徑1/6。
根據對所有視野的觀察結果，計算陽性視野所佔比例，並以陽性視野百分數（%）報告結果。計算公式：
每件樣品陽性視野（%）=（陽性視野數 / 觀察視野數）×100