梅毒抗體檢測原理方法

1. 梅毒如何檢查

1.暗視野顯微鏡檢查
一期、二期梅毒和早期先天性梅毒應採用暗視野顯微鏡檢查皮損分泌物中的蒼白密螺旋體，陽性者應見到有規律螺旋運動的病原體。暗視野檢查簡便、快捷而准確。一處皮損只有連續3次檢查後仍未發現梅毒螺旋體才能判為陰性。暗視野顯微鏡檢查法不適合用於口腔黏膜的損害，因為顯微鏡下見到的梅毒螺旋體無法與口腔中非致病的螺旋體區別。應注意檢查前皮損部位不能外用抗生素，或使用含抗生素的生理鹽水作為檢查的載液。標本中已死亡的梅毒螺旋體可用直接或間接免疫熒光染色或免疫過氧化物酶染色法鑒別。
2.血清試驗
根據所用的抗原不同分為兩類。
(1)非梅毒螺旋體抗原血清試驗(類脂質血清反應)：用正常牛心肌的心磷脂(cardiolipin)為抗原，與梅毒患者血清中抗心磷脂抗體(即反應素)結合，結合後發現凝集，生成絮狀物為陽性反應。用於梅毒診斷、療效觀察和對復發或再感染的監測。方法有：①性病實驗室試驗(Venereal
Disease
Research
Laboratory
test，又稱VDRL試驗)：該試驗是1946年美國性病研究實驗室創建的，故以該實驗室命名。試驗在玻片上進行，可以定性或半定量，低倍顯微鏡觀察結果。②快速血漿反應素(rapid
plasma
reagin，RPR)試驗：為VDRL試驗的改良法，可使用血漿。原理是用未經處理的活性炭顆粒(直徑3～5μm)吸附VDRL抗原。此顆粒若與待檢血清中的反應素結合，便形成黑色凝集塊，肉眼即可識別，不需低倍鏡觀察。試驗在專用紙卡的反應圈(內徑18
mm)內進行。此試驗敏感性高，具一定特異性，而且經濟、方便、快速，適合大規模篩選且能定性或半定量。(2)梅毒螺旋體抗原血清試驗：用活的或死的梅毒螺旋體或其他成分作為抗原檢查抗梅毒螺旋體抗體。這種方法敏感性及特異性都高，用於證實試驗，尤其適用晚期梅毒，但血和腦脊液行RPR試驗均為陰性者。由於這類方法檢測的是抗梅毒螺旋體IgG抗體，即使患者已經經過充分的治療，IgG抗體仍保持陽性，所以不能用以觀察療效、復發及再感染。

2. 梅毒Trust試驗的原理

用正常牛心肌的心類脂（Cardiolipin 二磷酸醯甘油衍生物）作為抗原，而不是用螺旋體作為抗原，來測定病人血清中的反應素（非特異性抗體---抗心磷脂抗體）。用來初步篩查梅毒螺旋體感染。 反應素在初期梅毒病灶出現後1~2周就可測出，在二期梅毒滴度最高，三期梅毒較低。所用抗原不具有特異性，除梅毒病人外，一些非梅毒疾患也可暫時或長期地存在反應素。例如麻風、結核、傳染性單核細胞增多症、紅斑狼瘡、類風濕性關節炎、雅司、回歸熱、以及一些發熱性疾病。此外，在孕婦、老年人和吸毒者有生物學假陽性反應

3. 梅毒用什麼方法檢測

一般初篩是檢查RPR或TRUST，確證是檢查TPPA或TPHA。最好這兩種實驗都查一下，雙陰可以排除梅毒，雙陽性可以診斷為梅毒，其他TPPA陰性，TRUST陽性是假陽性；TPPA陽性，TRUST陰性是既往感染過梅毒或TPPA假陽性。

4. RPR 檢測原理

RPR---不加熱梅毒螺旋體反應素實驗
原理：用正常牛心肌的心脂質作為抗原，測定病人血中的梅毒螺旋體的反應素（抗脂質抗體）。
是凝集反應。

5. 什麼是梅毒螺旋體特異抗體測試

TPHA法檢測梅毒螺旋體抗體

一、概述：
梅毒螺旋體存在於病人的血液或腦脊液內，在特殊厭氧環境里可體外人工培養。當病人感染梅毒螺旋體後3-4周，可在血液中檢出針對梅毒螺旋體特異性抗體，並在治療後相當長時間內仍然可檢出。在病人血清中可檢出二種抗體，一種是針對非螺旋體抗原的抗體（即針對牛心肌磷脂的抗體，如RPR及國內一些EIA和金標法均是檢測此非特異性抗體），這種抗體在疾病活動期可檢出，但在治療後或疾病轉入慢性期後會很快下降，而另一種是針對螺旋體抗原的特異性抗體,治療後仍可在相當長的時間內檢出，在疾病的慢性期也保持高滴度反應。OMEGA TPHA 試驗是一種檢測針對螺旋體抗原的抗體的特異的、靈敏的被動的血凝試驗。OMEGA TPHA 試劑盒的質量標准已經中國葯品生物製品檢定所核定。
二、試驗原理：
試驗血球為用梅毒螺旋體特異性抗原包被經過醛化和鞣化的雞紅細胞，對照血球為沒用上述抗原包被的經過醛化和鞣化的雞紅細胞，如果是陽性標本，當和致敏的雞紅細胞混合後，抗體和抗原的結合會引起致敏血球的凝集，在血凝板底部形成凝集塊，如為陰性標本，則血細胞在孔底形成緻密的沉澱。
三、試劑盒組成： 試驗細胞懸液 8.5ml 陽性對照血清 2 ml 稀釋液 2 0ml
對照細胞懸液 8.5ml 陰性對照血清 2 ml 細胞滴管 2 支
以上所有試劑均為工作濃度。試劑盒中的陰陽對照血清已經1：20稀釋，可直接實驗不必再稀釋。陽性對照的效價為1：2560左右。
細胞滴管的滴量為每滴75ul，其中紅色滴管用於致敏血細胞，白色滴管用於對照血細胞。
待檢標本：應用血清標本，腦脊液標本。血清標本可貯於—20℃保存，但保存不應超過4至6星期。標本不應有溶血或含有脂肪。標本要防止混入唾液，否則會影響結果的正確性。
四、操作方法：
1.在反應板的第一排：每孔加25u（1滴）稀釋液
在反應板的第二排：每孔加100ul（4滴）稀釋液
在反應板的第三排和第四排：每孔加25ul（1滴）稀釋液
2.取標本25ul，加在第一排的孔中。
3.對樣品進行以下稀釋：用25 ul移液器將加樣後的第一排孔中的液體混勻後取出25 ul加入第二排的孔中，混勻後再取25 ul加入第三排的孔中，混勻後，從第三排孔中吸出25 ul丟棄，另從第二排孔中取25 ul加入第四排孔中，混勻後，再從第四排孔中吸25ul丟棄。
4.在第四排孔中加75 ul（1滴）試驗細胞懸液，在第三排孔中加75 ul（1滴）對照細胞懸液。輕輕搖晃反應板後加蓋靜置45—60分鍾後判讀結果。
五、結果判斷：
1.目測：凡出現細胞凝集為陽性反應，不出現凝集者陰性反應。
—/不凝集：細胞沉積在板孔中央呈邊緣光滑的紐扣狀；
±/可凝：細胞沉積在板孔中央呈邊緣光滑的環狀；
+/凝集：細胞形成多邊形成或不規則環狀沉積。
2+—4+/強凝集：細胞形成邊緣粗糙不規則形狀或薄膜狀覆蓋到板孔底。
2.加入對照血細胞的反應孔不應出現凝集，如果出現凝集，說明存在抗血細胞抗體，應重復試驗。重復試驗時，應經1000rpm離心5分種，取上清液用稀釋液按1：5稀釋，再進行試驗，如果加入試驗細胞懸液仍出現凝集，可判為陽性結果。
3.儀器測定：可應用奧林帕斯的PK7200或改進後的雷勃MK3酶標儀。
六、儲存4—8℃ ，切勿冷凍。注意運輸和儲存過程中切勿將試劑盒倒置

6. 梅毒抗體的檢測方法

--國產艾康
採用膠體金免疫檢潮技術和層析原理定性檢測血漬l漿)樣本中的梅毒螺旋體抗體。檢測時樣本中梅毒抗體可與膠體金標記抗原結合形成抗原抗體復合物?由於層析作用復台物沿紙條向前移動經過檢測線時與預包被的抗原結合形成「Au—TP Ag—TP Ab—TP Ag」夾心物而凝聚顯色。游離的膠體金標記梅毒抗原則在對照線處與預包被的兔抗TP抗體結合而富集顯色。陰性標本則僅在對照線處顯色。 —進口愛衛
膠體金法（免疫層析法）人類免疫缺陷病毒（HⅣ 1/2）抗體檢測試劑盒是應用膠體金免疫層析技術建立的靈敏、特異、操作簡便的一步法HⅣ 1/2抗體定性檢測試劑。用於定性檢測人血清或血漿樣本中的HⅣ 1型和HⅣ 2型的特異性抗體，以輔助診斷HⅣ感染，其陽性結果需用免疫印跡法確認。唾液檢測試紙全球認可度比較高的是美國克利普特公司的aware愛衛品牌。

7. 梅毒如何檢查

您可以直接掛一個皮膚科，內科都可以，只要能開梅毒滴度測定就可以了。梅毒滴度測定1：2 尚屬正常范圍，但是要注意跟蹤監測，一般要一個月後，3個月後，6個月後連續復查3次正常，就算是康復了。

8. 什麼是梅毒抗體

梅毒是由蒼白螺旋體感染引起的一種性傳播性疾病 。梅毒螺旋體感染人體後出現兩種抗體：一種是特異性抗體(TPHA)，為lgM。當有補體存在和厭氧條件下，對活螺旋體的動力有抑製作用，並可將螺旋體殺死或溶解，對機體的再感染有保護作用。另一類是非特異性抗體（快速血漿反應素 RPR）。為lgA與lgM的混合物，可與正常生物組織中的類脂抗原發生非特異性結合，對人體無保護作用。
梅毒抗體的實驗檢測有將梅毒的病原體菌體和將菌體成分作為抗原的實驗方法，尤其梅毒螺旋體抗原是在大腸桿菌中發現的,被認為是梅毒主要抗原,檢測梅毒抗體的方法主要有EIA法、粒子凝集法、血球凝集法等.此外,還有用於快速檢查的金標法.。

9. 梅毒檢測卡的技術原理

梅毒抗體檢測試劑為例以膠體金為指示標記採用雙抗原夾心法原理制備而成，在檢測卡的加樣孔加一滴待測血清和兩滴緩沖液，如果血清中含有一定量的Syp-Ab時，則與金標中的Syp-Ag免疫結合成復合物。層析到T線時，復合物再與包埋於T線的梅毒重組抗原免疫結合，從而橋聯膠體金在T線顯色。剩餘的金標繼續層析至C線時，金標與此處包埋的多抗免疫結合橋聯膠體金而顯色。若血清中不含有Syp-Ab或低於一定量時，T線處的瘧疾重組抗原不與金標發生免疫反應，C線處的多抗與金標仍免疫結合，會出現單一顯色。

10. 梅毒檢測方法有哪些

梅毒檢測方法有哪些 ？很多人在性生活方面沒有節制，或者不注意衛生，很容易的被梅毒盯上。而梅毒感染之後不會立刻發病，而是有一定的潛伏期。那麼，梅毒檢測方法有哪些？

梅毒檢測方法有哪些

梅毒是由蒼白螺旋體所引起的一種慢性傳染病，有先天性和獲得性兩種，主要是由於不潔性交引起的。梅毒的表現極為復雜，幾乎可侵犯各種器官組織，早期主要侵犯皮膚和黏膜，晚期主要侵犯心血管和中樞神經系統。梅毒可通過胎盤傳給下一代，導致胎兒先天梅毒。

診斷梅毒，除病史和臨床表現外，還需要通過病原體檢查和梅毒血清檢查來確診。梅毒血清學檢查的方法有兩種，分別是非梅毒螺旋體試驗，和梅毒螺旋體試驗。

所有孕婦均應在首次產前檢查時進行梅毒血清學篩查。首先用上述兩種血清學方法中的一種進行篩查，若結果呈陽性，需立即用另一種方法進行驗證。結合病史和臨床表現，可以確診梅毒。

梅毒血清學檢查的方法有兩種：

①非梅毒螺旋體試驗：包括性病研究實驗室試驗(VDRL)和快速血漿反應素試驗(RPR)等，可行定性和定量檢測。此法用於篩查和療效判斷，但缺乏特異性，確診需進一步作螺旋體試驗。

②梅毒螺旋體試驗：包括熒光螺旋體抗體吸附試驗(FTA-ABS)和梅毒螺旋體被動顆粒凝集試驗(TP-PA)等，測定血清IgG抗體。由於該抗體終身陽性，故不能用於觀察療效、鑒別復發或再感染。

孕婦在進行梅毒血清學檢查時，首先用上述兩種血清學方法中的一種進行篩查，若結果呈陽性，需立即用另一種方法進行驗證。若兩者均呈陽性，結合病史及臨床表現，可以確診梅毒。

梅毒血清試驗注意事項

梅毒血清試驗是用於梅毒疾病的診斷試驗。妊娠梅毒不但能給孕婦健康帶來影響，更能影響胎兒發育，導致流產、早產、死胎等嚴重後果。即使妊娠能維持到分娩，所生嬰兒患先天性梅毒的幾率也很高。有些胎兒雖然發育正常，但在通過產道時，仍有可能與生殖器病損接觸而感染。

未經治療的早期妊娠梅毒婦女，大部分胎兒會成為先天性梅毒兒。大部分潛伏期梅毒婦女的胎兒在幼兒期會成為先天性梅毒兒。

實施產前梅毒篩查可及時發現孕產婦人群中的梅毒感染者，對於選擇和採取各種有效的干預性預防措施，阻斷或降低梅毒母嬰傳播的發生，提高優生優育的水平，具有十分重要的意義。

產前梅毒篩查和對妊娠梅毒進行規范的治療及隨訪，可以防止90%以上的先天梅毒的出現，與此同時還進行性伴通知，使性伴得以治療，最終可以減少傳染源，切斷傳播途徑，杜絕先天梅毒的發生。特別的需要注意梅毒血清試驗的事項：

1、備孕女性應在孕前做一次梅毒血清試驗，若沒有進行產前檢查或檢查時間已經超過三個月，則懷孕後需及早做梅毒血清檢查。

2、做梅毒血清試驗會抽取孕婦肘關節靜脈血檢查，不需要空腹。一般上午抽血下午出結果，下午抽血第二天上午出結果。

3、梅毒血清學檢查是診斷梅毒的重要依據，但不是唯一依據。診斷梅毒，除依據化驗結果外，更重要的依據是詳細了解患者的生活史和既往病史，以及詳細的體查。綜合分析後慎重作出判斷，才能避免梅毒化驗結果假陽性造成的誤診。

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