檢測蛋白質方法與肽鍵有關

① 檢測蛋白質的方法中，取決於完整的肽鏈是

C.
蛋白質溶液在238nm處的光吸收的強弱，與肽鍵的多少成正比。

② 雙縮脲為什麼可以檢驗蛋白質，是因為肽鍵嗎

雙縮脲反應是銅離子在鹼性條件下與蛋白質中的肽鍵發生絡合反應；氨基酸分子中不含肽鍵（-CO-NH-），不反應。氨基酸分子之間脫水結合後才能形成肽鍵，因此蛋白質有陽性反應。
http://..com/question/70253228.html?si=2
一定要採納啊！！！

③ 為什麼雙縮脲試劑可以鑒定蛋白質是由於蛋白質有肽鍵

雙縮脲試劑是由質量濃度為0.1g/mL的NaOH溶液和質量濃度為0.01g/mL的CuSO4組成的
而從以上比例可看出鹼是過量的 是因為雙縮脲（H2NOC-NH-CONH2)在鹼性條件下與二價銅離子結合成了紫色的絡合物
而蛋白質的鑒定實際上是因為肽健（-CO-NH-)與二價銅離子在鹼性條件下結合成了紫色的絡合物
因為肽健與雙縮脲結構相似

④ 為什麼使用280nm紫外吸收法測定蛋白質取決於完整肽鍵

不好意思哈~上一個答案自以為是了~不好意思！

「使用280nm紫外吸收法測定蛋白質取決於完整肽鍵」這句話本身就是錯的吧，

我在網上發現了兩種說法，就是同樣的題目卻給出了不一樣的答案：一個題是：1988
53．在下列檢測蛋白質的方法中，哪一種取決於完整的肽鍵?280nm紫外吸收法；

另一題是：

第一種說法沒有任何合理的解釋，第二種倒解釋的蠻有道理的

會不會是第一題的答案錯了啊~

⑤ 雙縮脲為什麼可以檢驗蛋白質，是因為肽鍵嗎

雙縮脲反應是銅離子在鹼性條件下與蛋白質中的肽鍵發生絡合反應；氨基酸分子中不含肽鍵（-CO-NH-），不反應。氨基酸分子之間脫水結合後才能形成肽鍵，因此蛋白質有陽性反應。
http://..com/question/70253228.html?si=2

一定要採納啊！！！

⑥ 通常用什麼方法監測組織中的肽和蛋白質

肽和蛋白質含有肽鍵，可以用雙縮脲試劑檢測。雙縮脲試劑可以和肽（至少兩個肽鍵）、蛋白質發生紫色反應。

⑦ 蛋白質含量測定的標准方法

測定蛋白質的方法可分為兩大類：一類是利用蛋白質的共性，即含氮量、肽鍵和折射率測定蛋白質含量；另一類是利用蛋白質中特定氨基酸殘基、酸性和鹼性基團以及芳香基團等測定蛋白質含量。常見的方法有：凱氏定氮法、雙縮脲法、酚試劑法及紫外吸收法。
1.凱氏定氮法
准備4個50mL凱氏燒瓶並標號，想1、2號燒瓶中加入定量的蛋白質樣品，另外兩個燒瓶作為對照，在每個燒瓶中加入硫酸鉀-硫酸銅混合物，再加入濃硫酸，將4個燒瓶放到消化架上進行消化，之後進行蒸餾，全部蒸餾完畢後用標准鹽酸滴定各燒瓶中收集的氨量，直至指示劑混合液由綠色變回淡紫紅色，即為滴定終點，結算出蛋白質含量。
2.雙縮脲法
雙縮脲法是第一個用比色法測定蛋白質濃度的方法，硫銨不幹擾顯色， Cu2+與蛋白質的肽鍵，以及酪氨酸殘基絡合，形成紫藍色絡合物，此物在540nm波長處有最大吸收。首先利用標准蛋白溶液和雙縮脲試劑繪制標准曲線，將待測血清與硫酸鈉在待測試管中混合，並用只加入硫酸鈉不含血清的試管作為對照，將兩支試管加入等量的雙縮脲試劑，充分混合後於37℃環境中放置10分鍾，在540nm波長進行比色，以對照管調零，讀取吸光度值，由標准曲線上直接查出蛋白質含量。雙縮脲法常用於0.5g/L～10g/L含量的蛋白質溶液測定。
3.酚試劑法
取6支試管分別標號，前5支試管分別加入不同濃度的標准蛋白溶液，最後一支試管加待測蛋白質溶液，不加標准蛋白溶液，每支試管液體總量通過加入蒸餾水補足而保持一致，將液體混合均勻，在室溫下放置30分鍾，以未加蛋白質溶液的第一支試管作為空白對照，於650nm波長處測定各管中溶液的吸光度值
4.紫外吸收法
大多數蛋白質在280nm波長處有特徵的最大吸收，這是由於蛋白質中有酪氨酸，色氨酸和苯丙氨酸存在，可用於測定0.1～0.5mg/mL含量的蛋白質溶液。取9支試管分別標號，前8支試管分別加入不同濃度的標准蛋白溶液，1號試管不加標准蛋白溶液，最後一支試管加待測蛋白質溶液，而不加標准蛋白溶液，每支試管液體總量通過加入蒸餾水補足而保持一致，將液體混合均勻，在280nm波長處進行比色，記錄吸光度值。

⑧ 說明常用蛋白質測定方法的原理,並對各種方法加以比較

1、凱氏定氮法

准備4個50mL凱氏燒瓶並標號，想1、2號燒瓶中加入定量的蛋白質樣品，另外兩個燒瓶作為對照，在每個燒瓶中加入硫酸鉀-硫酸銅混合物，再加入濃硫酸，將4個燒瓶放到消化架上進行消化。

消化完畢後進行蒸餾，全部蒸餾完畢後用標准鹽酸滴定各燒瓶中收集的氨量，直至指示劑混合液由綠色變回淡紫紅色，即為滴定終點，結算出蛋白質含量。

2、雙縮脲法

雙縮脲法是第一個用比色法測定蛋白質濃度的方法，硫銨不幹擾顯色， Cu2+與蛋白質的肽鍵，以及酪氨酸殘基絡合，形成紫藍色絡合物，此物在540nm波長處有最大吸收。

利用標准蛋白溶液和雙縮脲試劑繪制標准曲線，將待測血清與硫酸鈉在待測試管中混合，並只加入硫酸鈉不含血清的試管作對照，將兩支試管加入等量的雙縮脲試劑，混合後於37℃環境中放置10分鍾，在540nm波長進行比色，以對照管調零，讀取吸光度值，標准曲線上直接查出蛋白質含量。

3、酚試劑法

取6支試管標號，前5支試管分別加入不同濃度的標准蛋白溶液，最後一支試管加待測蛋白質溶液，不加標准蛋白溶液，每支試管液體總量加入蒸餾水補足而保持一致，混合均勻，在室溫下放置30分鍾，以未加蛋白質溶液的第一支試管作為空白對照，於650nm波長處測定各管中溶液的吸光度值。

4、紫外吸收法

大多數蛋白質在280nm波長處有特徵的最大吸收，這是由於蛋白質中有酪氨酸，色氨酸和苯丙氨酸存在，可用於測定0.1～0.5mg/mL含量的蛋白質溶液。

取9支試管分別標號，前8支試管分別加入不同濃度的標准蛋白溶液，1號試管不加標准蛋白溶液，最後一支試管加待測蛋白質溶液，而不加標准蛋白溶液，每支試管液體總量通過加入蒸餾水補足而保持一致，將液體混合均勻，在280nm波長處進行比色，記錄吸光度值。

5、考馬斯亮藍法

Bradford濃染液的配製：將100mg考馬斯亮藍G-250溶於50ml 95%乙醇，加入100ml85%的磷酸，用蒸餾水補充至200ml，此染液放4℃至少6個月保持穩定。

標准曲線蛋白質樣本的准備：盡量使用與待測樣本性質相近的蛋白質作為標准品，測定抗體，可用純化的抗體作為標准。待測樣本是未知的，也可用抗體作為標准蛋白。通常在20ug—150ug/100ul之間繪制標准曲線。

將待測樣本溶於緩沖溶液中，該緩沖溶液應與製作標准曲線的緩沖溶液相同(最好用PBS)。按1：4用蒸餾水稀釋濃染料結合溶液，出現沉澱，過濾除去。

每個樣本加5ml稀釋的染料結合溶液，作用5～30min。染液與蛋白質結合後，將由紅色變為藍色，在595nm波長下測定其吸光度。注意，顯色反應不得超過30min。根據標准曲線計算待測樣本的濃度。