無水葡萄糖的檢測方法

A. 口服葡萄糖耐量試驗的方法

1. OGTT應在無攝入任何熱量8小時後，清晨空腹進行，口服溶於250~300ml水內的無水葡萄糖粉75g或標准饅頭2兩，如用1分子水葡萄糖則為82.5g。兒童則予每公斤體重1.75g，總量不超過75g。糖水在5分鍾之內服完。
2. 從服糖第一口開始計時，於服糖前和服糖後半小時、1小時、2小時、3小時分別在前臂采血測血糖。
3. 試驗過程中，受試者不喝茶及咖啡，不吸煙，不做劇烈運動，但也無須絕對卧床。
4. 血標本應盡早送檢。
5. 試驗前3天內，每日碳水化合物攝入量不少於150g。

B. 怎樣鑒定葡萄糖

1 如果檢測的是食物中是否有還原糖，如葡萄糖
用菲林試劑！由0.1g/ml的NaoH 和0.05g/ml的CuSO4 混合製成
通過水域加熱！
如果有葡萄糖
就會出現磚紅色沉澱！
2 如果是檢測尿液中是否有葡萄糖
則一般用班氏糖鑒定試劑
也要通過水域加熱，如果有葡萄糖
同樣會出現磚紅色沉澱！
3 浙江版本的生物書中一般用的是本尼迪特試劑來鑒定還原糖！包括葡萄糖

C. 請給一些測定葡萄糖含量辦法，越多越好！

1.向葡萄糖溶液中加入過量新制氫氧化銅加熱，使之充分反應，過濾後加入過量稀硫酸，洗滌乾燥後，稱量剩餘固體（銅）計算出葡萄糖，再除以總體積，就算出葡萄糖的含量。方程式如下：
1）CH2OH（CHOH）4CHO+2Cu(OH)2---加熱→CH2OH（CHOH）4COOH+Cu2O↓+2H2O
2) Cu2O+H2SO4=CuSO4+Cu+H2O
2.把新制氫氧化銅換成銀氨溶液步驟如上，方程式如下：
1）CH2OH-（CHOH）4-CHO+2[Ag（NH3)2]++2OH-==CH2OH-（CHOH）4-COONH4+2Ag↓+H2O+3NH3
不過，這里的固體是銀
3.條件好可以用專業儀器直接幫你測定葡萄糖含量
4.右旋糖酐40葡萄糖注射液—葡萄糖的測定—氧化還原滴定法
方法原理： 供試品精密加碘滴定液後，邊振搖邊滴加氫氧化鈉滴定液，在暗處放置30分鍾，加稀硫酸，用硫代硫酸鈉滴定液滴定，至近終點時，加澱粉指示液繼續滴定至藍色消失，並將滴定結果用右旋糖酐40作空白試驗校正，根據滴定液使用量，計算葡萄糖的含量。 試劑： 1. 碘化鉀 2. 碘滴定液（0.05mol/L） 3. 鹽酸 4. 氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L） 5. 甲基橙指示液 6. 硫酸滴定液（0.5mol/L） 7. 硫代硫酸鈉滴定液（0.1mol/L） 8. 稀硫酸 9. 碳酸氫鈉 10. 澱粉指示液 11. 酚酞指示液 12. 甲基紅-溴甲酚綠混合指示液 13. 基準三氧化二砷 14. 基準鄰苯二甲酸氫鉀 15. 基準無水碳酸鈉 1.6 基準重鉻酸鉀 試樣制備： 1.）碘滴定液（0.05mol/L） 配製：取碘13.0g，加碘化鉀36g與水50mL溶解後，加鹽酸3滴與水適量使成1000mL，搖勻，用垂熔玻璃濾器濾過。 標定：取在105℃乾燥至恆重的基準三氧化二砷約0.15g，精密稱定，加氫氧化鈉滴定液（1mol/L）10mL，微熱使溶解，加水20mL與甲基橙指示液1滴，加硫酸滴定液（0.5mol/L）適量使黃色轉變為粉紅色，再加碳酸氫鈉2g、水50mL與澱粉指示液2mL，用本液滴定至溶液顯淺藍紫色。每1mL碘滴定液（0.05mol/L）相當於4.946mg的三氧化二砷。根據本液的消耗量與三氧化二砷的取用量，算出本液的濃度。 2.）氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L） 配製：取氫氧化鈉適量，加水振搖使溶解成飽和溶液，冷卻後，置聚乙烯塑料瓶中，靜置數日，澄清後備用。取澄清的氫氧化鈉飽和溶液5.6mL，加新沸過的冷水使成1000mL，搖勻。 標定：取在105℃乾燥至恆重的基準鄰苯二甲酸氫鉀約0.6g，精密稱定，加新沸過的冷水50mL，振搖，使其盡量溶解，加酚酞指示液2滴，用本液滴定，在接近終點時，應使鄰苯二甲酸氫鉀完全溶解，滴定至溶液顯粉紅色。每1mL氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）相當於20.42mg的鄰苯二甲酸氫鉀。根據本液的消耗量與鄰苯二甲酸氫鉀的取用量，算出本液的濃度。 貯藏：置聚乙烯塑料瓶中，密封保存；塞中有2孔，孔內各插入玻璃管1支，1管與鈉石灰管相連，1管供吸出本液使用。 3）. 甲基橙指示液 取甲基橙0.1g，加水100mL使溶解。 4.） 硫酸滴定液（0.5mol/L） 配製：取硫酸30mL，緩緩注入適量水中，冷卻至室溫，加水稀釋至1000mL，搖勻。 標定：取在270~300℃乾燥至恆重的基準無水碳酸鈉約1.5g，精密稱定，加水50mL使溶解，加甲基紅-溴甲酚綠混合指示液10滴，用本液滴定至溶液由綠色轉變為紫紅色時，煮沸2分鍾，冷卻至室溫，繼續滴定至溶液由綠色變為暗紫色。每1mL硫酸滴定液（0.5mol/L）相當於53.00mg的無水碳酸鈉。根據本液的消耗量與無水碳酸鈉的取用量，算出本液的濃度。 5）. 硫代硫酸鈉滴定液（0.1mol/L） 配製：取硫代硫酸鈉26g與無水碳酸鈉0.20g，加新沸過的冷水適量使溶解成1000mL，搖勻，放置1個月後濾過。 標定：取在120℃乾燥至恆重的基準重鉻酸鉀0.15g，精密稱定，置碘瓶中，加水50mL使溶解，加碘化鉀2.0g，輕輕振搖使溶解，加稀硫酸40mL，搖勻，密塞，在暗處放置10分鍾後，加水250mL稀釋，用本液滴定至近終點時，加澱粉指示液3mL，繼續滴定至藍色消失而顯亮綠色，並將滴定結果用空白試驗校正。每1mL硫代硫酸鈉滴定液（0.1mol/L）相當於4.903mg的重鉻酸鉀。根據本液的消耗量與重鉻酸鉀的取用量，算出本液的濃度。 室溫在25℃以上時，應將反應液及稀釋用水降溫至約20℃。 6）.稀硫酸 取硫酸57mL，加水稀釋至1000mL。 7. ）澱粉指示液 取可溶性澱粉0.5g，加水5mL攪勻後，緩緩傾入100mL沸水中，隨加隨攪拌，繼續煮沸2分鍾，放冷，傾取上層清液，即得，本液應臨用新制。 8.） 酚酞指示液 取酚酞1g，加乙醇100mL使溶解。 9.）甲基紅-溴甲酚綠混合指示液 取0.1%甲基紅的乙醇溶液20mL，加0.2%溴甲酚綠的乙醇溶液30mL，搖勻。 操作步驟： 精密量取供試品2mL，置具塞錐形瓶中，精密加碘滴定液（0.05mol/L）25mL，邊振搖邊滴加氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）50mL，在暗處放置30分鍾，加稀硫酸5mL，用硫代硫酸鈉滴定液（0.1mol/L）滴定，至近終點時，加澱粉指示液2mL，繼續滴定至藍色消失，並將滴定結果用0.12g（6%規格）或0.20g（10%規格）的右旋糖酐40作用白試驗校正。每1mL碘滴定液（0.05mol/L）相當於9.909mg的C6H12O6·H2O。

D. BOD5的檢測方法和步驟

將預先選好量程並按量程范圍量好體積的水樣倒入培養瓶中，在主機攪拌器上連續攪拌。並將主機和培養瓶放入培養箱中。

調節培養箱內溫度為20C±1°，待樣品恆溫後進行五日培養。培養瓶中的水樣在連續攪拌的情況下保證了足夠的溶解氧供微生物進行生化反應。水樣中的有機物經過生物氧化作用，轉變成氮、碳和硫的氧化物。在這一過程中，從水樣中溢出的氣體二氧化碳被氫氧化鈉(或氫氧化鉀)吸收。

由於好氣微生物的反應，將消耗水中的氧氣，呼出二氧化碳，如果及時地用NaOH吸收生成的二氧化碳，培養瓶內上部空間的氧氣不斷地供給試樣中微生物的需氧量，這就造成了氣體氧分壓的下降，用差壓計測出氧分壓的下降量就可以測出水樣的B0D值。

(4)無水葡萄糖的檢測方法擴展閱讀：

一般水質檢驗所測BOD5隻包括含碳物質的耗氧量和無機還原性物質的耗氧量。有時需要分別測定含碳物質耗氧量和硝化作用的耗氧量。常用的區別含碳和氮的硝化耗氧的方法是向培養瓶中投加硝化抑制劑，加入適量硝化抑制劑後，所測出的耗氧量既為含碳物質的耗氧量。

在5天培養時間內，硝化作用的耗氧量取決於是否存在足夠數量的能進行此種氧化作用的微生物，原污水或初級處理的出水中這種微生物的數量不足，不能氧化顯著量的還原性氮。

而許多二級生化處理的出水和受污染較久的水體中，往往含有大量硝化微生物，因此測定這種水樣時應抑制其硝化反應。在測定BOD5的同時，需要葡萄糖和谷氨酸標准溶液完成驗證試驗。

E. 有幾種方法測定葡萄糖含量各自的原理是什麼

有兩種方法來測定。

第一種用菲林試劑來測定，原理為：

CH2OH（CHOH）4CHO+2[Ag(NH3）2OH]（水浴加熱）→CH2OH（CHOH）4COONH4+2Ag↓+3NH3+H2O

注意事項：⑴ 試管內壁必須潔凈

⑵ 銀氨溶液隨用隨配不可久置；

⑶ 水浴加熱，不可用酒精燈直接加熱；

⑷ 可加入氫氧化鈉，以促進反應進行；

⑸ 銀鏡可用稀HNO3浸泡洗滌除去。

加熱還原生成的銀附著在試管壁上，形成銀鏡，所以，這個反應也叫銀鏡反應。

第二種用新制的氫氧化銅溶液來測定，原理為：

葡萄糖溶液與新制氫氧化銅懸濁液反應生成磚紅色沉澱。（濃度高時生成黃色沉澱）

CH2OH（CHOH）4CHO+2Cu(OH)2---加熱→CH2OH（CHOH）4COOH+Cu2O↓+2H2O

注意事項：⑴ 新制2Cu(OH)2懸濁液要隨用隨配、不可久置。

⑵ 配製新制Cu(OH)2懸濁液時，所用NaOH溶液必須過量。

⑶ 反應液必須直接加熱至沸騰。

⑷ 葡萄糖分子中雖然含有醛基，但是d-葡萄糖中不含有醛基。

葡萄糖是自然界分布最廣且最為重要的一種單糖，它是一種多羥基醛。

純凈的葡萄糖為無色晶體，有甜味但甜味不如蔗糖（一般人無法嘗到甜味），易溶於水，微溶於乙醇，不溶於乙醚。天然葡萄糖水溶液旋光向右，故屬於「右旋糖」。

葡萄糖在生物學領域具有重要地位，是活細胞的能量來源和新陳代謝中間產物，即生物的主要供能物質。植物可通過光合作用產生葡萄糖。在糖果製造業和醫葯領域有著廣泛應用。

化學性質

它是自然界分布最廣泛的單糖。葡萄糖含五個羥基，一個醛基，具有多元醇和醛的性質。

用途：

生物培養基。金屬還原劑。滴定硼酸的絡合物形成劑。微量分析。測定全血葡萄糖。可直接被人體吸收。

正常人體每分鍾利用葡萄糖的能力為每公斤體重6毫克。是一種能直接吸收利用，補充熱能的碳水化合物，是人體所需能量的主要來源，在體內被氧化成二氧化碳和水，並同時供給熱量，或以糖原形式貯存。能促進肝臟的解毒功能，對肝臟有保護作用。是生物體內最為常見的能源物資。

F. 測定葡萄糖含量的方法

 
 
 
 葡萄糖注射液中葡萄糖含量的測定 
摘要  運用氧化還原滴定的原理設計葡萄糖注射液中葡萄糖含量的測定方案並具體實施。從而進一步掌握Na2S2O3及I2標准溶液的配製和標定方法，鞏固氧化還原滴定的操作技能。學會間接碘量法測定葡萄糖含量的方法和原理，進一步掌握返滴定法技能。其中，葡萄糖分子中含有醛基，能被IO-定量地氧化為羧基。故可將一定量過量的I2在鹼性條件下加入葡萄糖溶液中，使醛基完全轉化為羧基。再將其酸化，用Na2S2O3標准溶液滴定析出的I2。所用指示劑為澱粉。根據所加I2標准溶液的量及滴定所耗Na2S2O3標准溶液的量結合反應式中各物質之間的計量關系，便可計算葡萄糖的含量。該方法簡便易行且准確度高，基本符合實驗要求。 
關鍵詞  葡萄糖注射液  間接碘量法  返滴定法 
1引言 
葡萄糖注射液中葡萄糖含量的測定目前有以下幾種方法 方案一：旋光測定法 
根據葡萄糖分子結構中的五個碳都是手性碳原子，具有旋光性，可採用旋光法測定含量。取出旋光計的測定管，先用蒸餾水為空白對儀器進行校正。用供試液體（5％葡萄糖注射液）沖洗數次，緩緩注入供試液體適量（注意勿使發生氣泡）。置於旋光計內，讀取旋光度，連續測定3次，取平均值。 方案二：間接碘量法。 
碘與NaOH作用能生成NaIO，而C6H12O6能定量地被NaIO氧化。在酸性條件下，未與C6H12O6作用的NaIO可轉變為I2析出，只要用標准Na2S2O3溶液滴定析出的I2，便可計算C6H12O6的含量。 
本實驗採用第二種方案進行葡萄糖注射液中葡萄糖含量的測定。 
2實驗原理 
    在鹼性溶液中，碘與氫氧化鈉作用可生成次碘酸鈉（NaIO),葡萄糖能定量的被次碘酸鈉氧化成葡萄糖酸（C6H12O7）。過量的NaIO可以轉化為NaIO3和NaI。在酸性條件下，NaIO3和NaI作用析出I2，然後用Na2S2O3標准溶液滴定析出的I2，便可計算出葡萄糖的含量。其反應如下： 
1、I2與NaOH作用：      I2+2NaOH=NaIO+NaI+H2O 
2、C6H12O6和NaIO定量作用：  C6H12O6+ NaIO=C6H12O7+NaI     3、總反應式：       I2+C6H12O6+2NaOH=C6H12O7+2NaI+H2O 

 
4、C6H12O6作用完後，過量的NaIO發生歧化反應：   3NaIO=NaIO3+2NaI 5、在酸性條件下NaIO3和NaI作用：   NaIO3+5NaI+6HCl=3I2+6NaCl+3H2O 6、析出過量的碘用Na2S2O3標准溶液滴定：  I2+2Na2S2O3=Na2S4O6+2NaI 實驗還涉及到Na2S2O3和 I2溶液的標定 
1、Na2S2O3的標定    Cr2O72-+6I-+14H+=2Cr3++3I2+7H2O                          I2+2S2O32-=S4O62-+2I
-      
                                     
Cr2O72-~3I2~6S2O32-    
             3
223
227
223
2200.256)(6OSNaOSNaOCrKOSNa
VcVcVc

   
      
2、碘的標定        I2+2S2O32-
=S4O62-+2I
- 
              
        V
Vc3
22322OSNaOSNac2/1
 
3、葡萄糖注射液中葡萄糖的含量  
   
計算式：
%10050
6
126
L
gOHCW標示量
葡萄糖含量 
3實驗儀器及材料 
3.1 儀器 
    稱量瓶、電子台秤、分析天平、容量瓶（250ml）、移液管（25ml）、量筒（10ml）、錐形瓶（25ml，3個）、酸式滴定管（50ml）、燒杯（50ml）、玻璃棒、碘量瓶 3.2 葯品 
    K2Cr2O7（S）、鹽酸（6mol/L）、KI溶液（100g/L)、澱粉（5g/L)、Na2S2O3溶液（0.1mol/L）、I2溶液（0.05mol/L）、NaOH溶液（1mol/L）、葡萄糖注射液（5%） 
4 實驗方法 
4.1 0.1mol/L Na2S2O3標准溶液的標定 4.1.1 K2Cr2O7標准溶液的配製 
    准確稱取1.2~1.3g分析純K2Cr2O7固體於小燒杯中，加少量的水溶解並轉入到250mL的容量瓶中，用水稀釋到刻線，搖勻。並計算其准確濃度 

)
(100000
.25100021101612632232222

LgOHCMOSNavOSNacIvIc葡萄糖含量＝

 
4.1.2  Na2S2O3溶液的標定 
    准確移取25mlK2Cr2O7標准溶液於碘量瓶中，加5mL 6mol/L HCl溶液和10mL 100g/LKI，立即密塞搖勻，置暗處5min，然後沖洗瓶蓋並用蒸餾水稀釋至100 mL左右，用待標定Na2S2O3溶液滴定至K2Cr2O7標准溶液呈淺黃綠色時，加2mL 5g/L澱粉，繼續滴定至藍色剛好褪去，記錄所需體積，平行測定3次，計算Na2S2O3溶液的准確濃度。 4.2  0.05mol/L I2溶液的標定 
    准確移取25mLI2標准溶液於錐形瓶中，加50ml蒸餾水，用Na2S2O3標准溶液滴定至溶液呈淺黃綠色，加2ml 5g/L澱粉，繼續滴定至藍色剛好褪去，溶液呈無色即為終點。 4.3  葡萄糖含量的測定 
    用移液管移取5%葡萄糖注射液25.00ml於250ml容量瓶中，加水稀釋至刻線，搖勻。然後移取25.00ml上述溶液於碘量瓶中，准確加入I2標准溶液25ml，慢慢滴加NaOH邊加邊搖，直至溶液呈淺黃色，將碘量瓶加塞搖勻，於暗處放置10~15min，加2ml 6mol/L HCl酸化，立即用Na2S2O3標准溶液滴定，至溶液呈淺黃色，加2ml 5g/L澱粉，繼續滴定至藍色消失即達到滴定終點，記錄數據，平行滴定3次，計算其含量。

G. OGTT是什麼意思

OGTT就是葡萄糖耐量試驗，是一種糖負荷試驗。它具體做法是，先空腹抽血，查靜脈血糖，然後口服75g無水葡萄糖，分別於半小時、1小時、2小時、3小時抽血查靜脈血糖。

OGTT是糖尿病的確診試驗，在正常情況下，空腹血糖在3.9-6.1mmol/L，0.5-1小時達到最高峰，之後血糖逐漸下降，3小時恢復正常值。可以了解胰島β細胞的功能，以及機體對葡萄糖的調節能力。應該注意在試驗期間要安靜休息，不能劇烈運動，更不能進食其他東西。

在做之前需要注意：

1、身體如果處於疾病狀態，發燒、感冒或者是腹痛、腹瀉，就需要等恢復以後再做。

2、在做這個試驗之前應該保持正常吃飯，不要刻意控制，這樣的話有可能會影響結果的可靠性。

3、檢查的時候要空腹來。醫院的醫生給開好葡萄糖粉，需要的是75g無水葡萄糖粉，在家裡面從醫院開完以後，就給它用白開水或礦泉水，大概量是200-300mL，用溫水這樣更容易把葡萄糖粉沏開。

H. 怎樣檢測果酒的總糖

1．原理

利用費林溶液與還原糖煮沸，生成氧化亞銅沉澱的反應，以次甲基藍為指示液，以樣品或經水解後的樣品滴定煮沸的費林溶液，達到終點時，稍微過量的還原糖將藍色的次甲基藍還原為無色，以示終點。根據樣品消耗量求的總糖或還原糖。改進後在鹼性酒石酸銅乙液中加入少量亞鐵氰化鉀，可反應生成氧化亞銅沉澱與亞鐵氰化鉀發生絡合反應，形成可溶性絡合物，消除紅色沉澱對滴定終點觀察的干擾，使終點變色明顯。

2．試樣和材料

2.1鹽酸溶液(1+1)。

2.2氫氧化鈉溶液：200g。

2.3標准葡萄糖溶2.5g/L：精確稱取2.5g（稱准至0.0001g）在105℃～110℃烘箱內烘乾3h，並在乾燥箱中冷卻的葡萄糖用水溶解並定容至1000ml。

2.4 次甲基藍指示液10g/L：稱取1.0g次甲基藍溶解於水中，稀釋至100ml。

2.5 費林氏溶液

a)配製：按GB/T603-2002配製。同改進後在費林氏鹼性酒石酸銅乙液時，每升加入鐵氰化鉀4g。

b)標定預備試驗：吸取費林溶液甲乙液各5.00mL於250mL瓶中，加50mL，搖勻，在電爐上加熱至沸騰，在沸騰狀態下用制備好葡萄糖標准溶液滴定，當溶液藍色將消失呈紅色時，加2滴次甲基藍指示液，繼續滴定至藍色消失，呈無色或淡黃色。記錄消耗葡萄糖標准溶液體積。

c) 正式試驗：吸取費林溶液甲乙液5.00mL於250瓶中，加50mL和比預備試驗少1mL葡萄糖標准溶液，加熱至沸騰，並保持2min，加2滴次甲基藍指示液，一定在沸騰狀態中1min內用葡萄糖標准溶液滴至終點，記錄消耗葡萄糖標准溶液總體積（V）。

d)計算

式中：F—相當於萄萄糖的克數g；m—稱取無水葡萄糖質量g；V—消耗萄萄糖標准溶液的總體積ml。

3．樣品的制備

3.1 測定總糖用試樣：准確吸取一定量的樣品（V1）於100ml容量瓶中，含總糖量為0.2 g～0.4g，加5mL酸溶液(1+1),加水至20mL搖勻。於68+1℃水浴鍋上水解15min，取出冷卻。在酸度計上用200g/L氫氧化鈉溶液中和至中性，調溫至20℃，加水定容至刻度（V2）。

3.2 測還原糖用試樣：准確吸取一定量的樣品（V1）於100ml容量瓶中，含還原糖量為0.2 g～0.4g，加水定容刻度。

4．分析步驟

試樣代替葡萄糖標准溶液，按2.5b同樣操作，記錄消耗試樣的體積（V3），結果按照公式（4）計算。

測定干葡萄酒樣品2.5b操作時，正式滴定需要用葡萄糖標准溶液滴定至終點。結果按照公式(5)計算。

式中X—還原糖的含量g/L；

F—費林氏液甲乙各5mL相當於葡萄糖克數g；

V1—樣品的體積mL；

V2—釋後或水解定容樣品的體積mL；

V3—樣品的體積 mL；

G—葡萄糖標准溶液的准確濃度g/ mL；

V—葡萄糖標准溶液的體積mL；

所得結果應表示至一位小數。

5．精密度

在重復性條件下獲得的兩次測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的2%。

結論討論：加入亞鐵氰化鉀目的是使費林溶液與試樣中還原糖生成氧化亞銅沉澱與亞鐵氰化鉀發生絡合反應，形成可溶性絡合物，消除紅色沉澱，使終點變色明顯。試驗原理未變，終點判定未改變，不影響檢測結果。改進後終點易於觀察，結果准確可靠。

I. 葡萄糖的鑒定

葡萄糖是還原糖，最常用斐林試劑檢測：將0.1g/ml的NaoH 2ml和0.05g/ml的CuSO4 4-5滴混合製成斐林試劑，加入葡萄糖混勻後水浴加熱，出現磚紅色沉澱。斐林試劑要現配現用。班氏試劑、本尼迪特試劑也可鑒定葡萄糖，試劑成分和反應後顏色有區別，如有需要，可以追問。