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凍精檢測活力方法

發布時間:2022-09-26 06:19:51

⑴ 黃牛能人工受精嗎要專業一點的回答

絕對可以! 牛的人工授精技術分:冷凍顆粒精液製作工藝(引進良種公牛→采精→製成顆粒凍精→利用液氮在零下196℃的條件下保存)和人工授精操作流程(准備工作→保定母牛作發情鑒定→器械消毒→利用2.9%檸檬酸鈉液解凍精液→鏡檢活力達0.35以上→對發情適期母牛輸精)兩個部分。
(一)精液的解凍:冷凍精液使用前必須使用解凍液解凍,方能進行人工授精。
1.解凍液配製:解凍液一般使用2.9%的檸檬酸鈉溶液和維生素B12(2毫升1支)。解凍液配製必須准確,濃度不可偏高偏低,pH為6,宜現配現用,也可用安瓶分裝備用。
維生素B12注意避光保存,防止購進偽劣產品,解凍時防止生水滴入。
2.解凍方法:解凍時先把解凍液倒入小玻璃瓶內,每輸精1頭母牛用解凍液1.52毫升,把裝好解凍液的玻璃瓶(安瓶)放在40℃的溫水中預熱,再將顆粒凍精2粒迅速投入小玻璃瓶中,並不斷地輕輕搖動,待顆粒精液快融化完時立即將小璃玻瓶在溫水中取出,繼續搖動使其全部融化,再進行鏡檢,觀察活力,如活力不低於35%,便可用來輸精。解凍後的精液存放時間不超過1小時。
(二)精力活力的檢查方法:取一點精液,滴在載玻片上,加上潔凈的蓋玻片,使載玻片和蓋玻片之間充滿精液,避免空氣泡藏在裡面,然後放在顯微鏡下放大400倍,觀察精液中前進運動的精子數量,來評定精子活力的等級。評定時一般分為十級:在顯微鏡下100%的精子都是直線前進運動的可以評1.0級,90%直線前進運動的0.9級,其餘依次類推。顆粒凍精解凍後活力達0.35以上方可用。精子活力檢查時,必須在3738℃的環境中進行,冬季必須使用保溫箱,溫度保持3840℃,才能使檢查獲得准確的結果。
(三)發情鑒定:母牛的發情鑒定方法,常用的有以下幾種:
1.外部觀察法:主要是根據母牛的外部和精神狀態來判斷發情的狀況。母牛發情時,表現興奮不安、鳴叫、遊走、啃草減少,尾根舉起,頻頻排尿,追逐和爬跨其他母牛並接受其他母牛爬跨,母水牛發情特徵不如黃牛強烈明顯,表現不規律,雖然也比平時興奮、敏感和不安,但不鳴叫,有時發出「屹屹」叫聲,在夜間,也不太爬跨其他母牛,在欄內常站在一角,注意外界動靜,放牧時常抬頭張望,不太愛吃草。檢查發情母牛的外陰部,可見外陰唇水腫,柔軟而松馳,原有細小皺紋消失,黏膜紅潤,陰門口多開,並出現陰道腔,在尾上端陰門附近可看到黏液的分泌物的結塊,或有透明黏液自陰門流出。
2.陰道檢查法:用陰道開張器觀察陰道的黏膜、分泌物和子宮頸口的變化來判斷母牛的發情狀況。不發情的母牛陰道黏膜蒼白、乾燥、子宮頸外口關閉乾燥、緊縮成菊花。若母牛的陰道內有黏液,陰道黏膜光亮、充血、紅潤、子宮頸外口出現凸、開、紅、濕潤便是發情。
發情開始時,陰唇、陰道及子宮頸外口等部位充血腫脹度輕微,黏膜顏色較淡,以後隨著發情的進展和性慾旺盛,充血腫脹度更甚,顏色漸深,發情末尾時,充血腫脹度又隨之減退,最後完全消失,恢復正常狀態。子宮頸外口的開張度,也隨著發情的進展,由微開到開張,最後又逐漸縮小乃至關閉。發情開始時,黏液量少,呈透明如水樣,稀薄無牽縷性,黏性不強,至發情旺盛期,黏液量增多,顏色為透明或半透明時,牽縷性很強,呈玻璃棒狀較稠,轉入發情末期,黏液量又減少,顏色半透明,混濁或乳白色,黏性差成糊狀。
3.直腸檢查法:主要是檢查卵巢的卵泡發育情況。卵泡的發育隨著母牛的發情變化分四個時期,即:彈泡期→軟泡期(卵泡成熟、泡壁很薄、柔軟、波動明顯呈圓形或卵圓型)→軟皮期。
具體操作:術者剪短指甲,用水潤滑手,手臂插入直腸,盡掏宿糞,然後順著直腸底部用指肚探摸全部卵巢,或按子宮頸、子宮體、子宮角、卵巢次序探摸。找到卵巢用食、中指抓住卵巢系膜,並將該兩指稍微彎曲,固定住卵巢,然後用母指探摸,必須做到小心、細致、輕,試探卵巢大小、形狀、輕硬程度、表現凹凸及卵泡發育狀況,用腦記憶,並進行登記。母牛發情後,有卵泡發育的,最好每隔12小時檢查1次。

⑵ 牛凍精離開儲精低溫罐能保存多久

牛凍精保存是一個特殊環境處理的,長期保存牛凍精需要在液氮-196攝氏度或者乾冰-79攝氏度環境下,根據凍精技術的要求,需要對精子活力進行檢測,提高牛配種的質量,改善牛凍精受孕概率。因此牛凍精離開液氮環境不能超過3秒鍾,不然會影響精.液的活性。

生物界凍存動物精液的時候,需要完全浸泡在液氮環境下的低溫儲罐內,這樣才能保持生物活性,使用的過程中解凍復溫即可。我們使用提桶或者提籃存放動物精液的時候,需要保證斗底離開底座,將提斗平行移到罐體中央,順其自然向上提,用力不要過大,導致把柄折斷或者彎曲的現象,還要注意提斗碰撞頸管,影響罐體真空度。

⑶ 母牛不受精,做人工受精了,但是經常失敗,隔18天又得重做,見過別的養殖場用葯解決這種現象,但是不知

如何提高母牛人工授精的受胎率,提出以下幾點措施。

1 掌握母牛的發情規律,正確鑒定母牛的發情

1.1 母牛發情規律:母牛發情周期平均為21天(18~24天),青年母牛的發情周期較成年母牛短。母牛為全年多次發情,沒有明顯的季節性,飼養管理良好的母牛可全年發情配種和產犢,但在粗放的飼養條件下,冬季由於氣候寒冷、營養差,母牛多表現為休情。牛的發情期較短,有外部發情表現的發情時間約18~24小時,排卵發生在發情停止後6~12小時,故剛發情母牛不應急於配種,應等到發情盛期或發情接近結束時配種。

1.2母牛的發情鑒定

1.2.1 詢問畜主:了解母牛發情情況,包括發情開始時間,性行為表現以及是否與當地公牛交配過等。 1.2.2 觀察母牛發情表現:(1)發情初期:母牛表現不安,抬頭張望,遊走哞叫,食慾減退,陰道粘膜潮紅,陰戶濕潤腫脹,粘液量少,粘性差,此階段一般持續15小時。(2)發情盛期:外陰充血腫脹明顯,常由陰道流出牽縷性強、呈玻璃絲狀的透明粘液,此階段一般持續15小時。(3)發情末期:外陰充血、腫脹消退,出現皺紋,陰門中流出半透明液體,粘液量少,牽縷性差,此階段一般持續13小時。

1.2.3 檢查發情母牛生殖器官變化:(1)發情初期:子宮有收縮反應,質地較硬,卵巢上有約0.5cm的發育卵泡,泡壁厚實。(2)發情盛期:子宮收縮反應明顯,質地較滑,卵泡增長到1cm左右,泡壁緊張且局部有彈性。(3)發情末期:子宮收縮反應減弱,卵泡呈小球狀突出於表面,泡壁變薄,波動明顯,有一觸即破感。

2 母牛發情最佳配種時間

配種實踐證明,母牛發情初期進行配種,受胎率僅為5%左右;發情盛期配種,受胎率為50%左右;發情末期配種,受胎率為70%~80%。由此可見,母牛發情末期為配種適期。為了准確掌握配種時間,應採用的方法是:如上午發現母牛安定不動,不要立即配種,要推遲到晚上或第二天清晨進行配種;如果受爬跨安定不動,應推遲到第二天清晨或傍晚配種。早、晚環境安靜,大多數生理機能處於抑制狀態,而生殖系統的興奮性相對增強,排卵快,受孕率高。為了更好把握,可間隔10小時後再重復配種一次。

3 正確解凍,保證精子活力

3.1 從液氮罐中職貯存凍精的技術要求:(1)液氮罐應放在陰涼處,室內要通風,注意不要用不衛生工具污染液氮罐內,及時補充液氮,保證液氮面的高度應高於貯存的凍精,最好將精液沉至罐底。冷凍精液取出後應及時蓋好罐塞,為減少液氮消耗,罐口可用毛巾圍住。(2)取凍精的金屬鑷子用前需插入液氮罐頸口內先預冷1分鍾。(3)從液氮罐中取冷凍精液時,提筒不能高於液氮罐口,應在液氮罐口水平線下,停留時間不應超過5秒鍾,需繼續操作時,可將提筒浸入液氮後再提起。

3.2 凍精的解凍方法:牛的冷凍精液貯存在-196℃的液氮罐中,當從貯存冷凍精液的液氮中取出冷凍精液時,應將冷凍精液迅速解凍。其解凍方法是:(1)熱水解凍法:一般用水溫為38土2℃的熱水來解凍,先將杯中或盒內的水溫調節在38℃,然後用鑷子(要先預冷)夾出細管凍精,迅速豎放或平放埋入熱水中,並輕微搖盪幾下,待凍精溶解(30秒鍾)取出,用滅菌的棉花或衛生紙擦乾細管外壁,用消毒剪刀剪去封口端,進行活力鏡檢,合格後(0.35以上)方可用於輸精。(2)自然水溫解凍法:用自來水或河水作為解凍源來解凍凍精,先用杯子或盒子裝自來水或河水(23℃),然後用鑷子 (要先預冷)夾出細管凍精,迅速豎放或平放埋入水中,並輕微搖盪幾下,待凍精溶解(一般30秒鍾)取出,用滅菌的棉花球或衛生紙擦乾細管外壁,用消毒剪刀剪去封口端,鏡檢活力合格後(0.4以上)方可用於輸精。

3.3 凍精活力檢查:無論哪種劑型的凍精解凍後都要進行鏡檢,活力(直線前進的精子數)在35%(0.35)以上,且還要看幾個視野和不同層次(上、中、下)的精子活力,才能用於輸精。

3.4 裝入輸精槍的要求:裝細管精液的封口端朝上,金屬輸精槍的鋼蕊插入細管棉花塞埠內,將金屬槍連同塑料細管推至套管的頭部,若塑料外套管較長,應將其後端剪去一段,以免造成塑料細管內精液存留在外套管內。

4 應用直腸把握輸精技術

4.1 直腸把握輸精技術:在牛的人工授精技術應用中,採用直腸固定子宮頸輸精法,效果較好,受胎率比用其它輸精方法可提高15%~20%。輸精操作步驟:輸精前先將雙手的指甲剪短磨平,捲起袖子,消毒(用0.1%高錳酸鉀溶液)手臂和母牛的後軀部,然後塗上肥唣沫,右手(或左手)五指並攏,握成錐形,慢慢插入母牛肛門里掏盡直腸內糞便,然後用拇指探明子宮頸口的位置,隔腸壁握住子宮頸,固定好。用另一隻手將准備好的輸精腔,在不接觸外陰部的條件下插入陰道前庭的裂縫內,插入時動作要輕陝謹慎,先斜向上(與水平錢成45度角)插入10~15cm,即通過陰道前庭之後,再稍往下依水平方向插入陰道內,直到子宮頸外緣為止,插入後輸精槍應與直腸內的手取得一致,槍端對准子宮頸外口,右手(或左手)將子宮下左右輕輕擺動,以便輸精槍導入子宮內。

判斷輸精槍是否已插入子宮有兩種方法:一是摸子宮頸,如果輸精槍在宮頸的中間,表明已經插入;二是擺動輸精槍,如果子宮頸同時跟著移動,說明已經插入。

確定輸精槍已經插入5~6cm左右,就可將精液慢慢注射入內,壓射時,可用直腸內的手將子宮稍往下壓,使輸精槍前低後高,使精液容易流入,避免倒流。對很快要排卵或卵子已排出的母牛,為了保證將精液輸得更深一些,縮短精子到達輸卵管上1/3處的時間,增加受精機會,可將輸精槍直接插入到排卵一側子宮角進行深部輸精(對剛排卵不久的母牛尤其適用)。輸精完畢,先將輸精槍取出,直腸里的手按壓子宮頸片刻後再取出。

4.2 輸精過程中遇到的問題及解決方法:(1)術者手伸入母牛,直腸遇到困難時採取以下方法:①性情暴躁的母牛,固定於配種架上,後肢加以固定,以防踢傷人。如在野外輸精,則將牛固定在樹幹上。②拒絕人手伸入直腸的母牛可由助手持輸精槍,右手提起母牛尾根,左手伸入直腸。③當母牛努責時,讓努責波過去腸壁鬆弛,再向前伸手。(2)輸精槍不能順利插入母牛陰道時可採取以下方法:①遇陰門閉合時,可在直腸內用左肘部下壓陰部,即可壓開陰門。②老母牛陰道多向腹腔下沉,應先向下方插入10cm左右,再平插下插。③肥胖母牛陰道壁肥厚,易造成阻礙輸精槍插入,這時手握輸精槍輕輕左右、上下滑動,切勿硬插,以免傷及陰道粘膜。④誤插入尿道時,可將輸精槍拉出後,再沿陰道上擘前進。(3)找不到子宮頸口時,可採取如下方法:①育成母牛子宮頸細小如指,多在近處找。②老母牛的子宮頸大,往往垂下,須提子宮頸管。③有的母牛,子宮頸常閉縮在陰門最近處,須用手按壓使其伸展。(4)如果輸精槍對不上子宮頸口時則採取如下方法:①手把握子宮頸過前,使頸口游離下垂,因而輸精槍對不上子宮頸口,這時將手後移,把握子宮頸口處。②輸精槍偏入子宮外圍的,應退出輸精槍,用手指定位引導。③被子宮頸口內擋住的,手將子宮頸管向前拉,使其伸展。④子宮頸管過粗難以握住的,把它壓在骨盆腔側壁或下壁。⑤輸不出精液的,可將輸精槍稍向前插,再在向後拉的同時注出精液。

5 加強飼養管理

由於環境氣候和飼養管理水平條件各地均有差異,所以牛群繁殖率也有明顯差異,特別是農村的牛群,由於飼養條件差,往往造成母牛特別是哺乳母牛產後出現泛情時間較長,發情受胎率低,產犢間隔大大延長,有的造成兩年才產一頭犢牛。營養因素影響母牛的生殖內分泌活動,使母牛初情期延遲或配種後胚胎發生早期死亡。妊娠母牛若管理不善,使役過度、滑倒、擠壓、喝冰凍水、吃霉爛飼草飼料等均易造成流產。母牛分娩時未及時接生和護理,易發生難產和犢牛死亡。因此,應加強母牛飼養管理,經常補飼,搞好妊娠母牛護理。對連續兩個情期、兩次以上適時輸精不懷孕的母牛,應作詳細的檢查和觀察,正確診斷,對症用葯治療,中西葯相結合,及早治癒,以提高母牛的受胎率。

⑷ 使用液氮貯存凍精時應注意哪些事項

現代母牛配種都採用人工授精的方式。人工授精是利用器械採取公牛的精液,經品質檢查和適當處理,再利用器械把精液輸送到母牛生殖道的適當部位的一種方法。人工授精可以使優秀種公牛凍精在全世界范圍使用;可以提高母牛的受胎率;可防止疾病特別是生殖道傳染病的傳播。凍精的製作、儲存和定期抽檢凍精活力在公牛站完成。藉助於液氮罐,凍精儲存在液氮(超低溫,-196℃)中。液氮罐的結構包括由鋁合金板製作的外殼和內膽,其間的夾層為高真空狀態,以防止氣體的熱對流。常見的液氮罐多為10升、30升、50升。液氮罐在運輸中應輕拿輕放,避免碰撞,特別注意對其頸部的保護,口部不宜密封;平時放置於陰暗處,盡量減少開罐次數和時間。液氮易揮發,因此,需要定期向液氮罐中添加液氮。液氮罐在使用過程中若發現液氮消耗顯著或罐外掛霜,表明液氮罐已壞,應及時更新。貯存凍精的液氮罐,每年至少要徹底清洗一次,要沖洗干凈並控干後方可使用。將不同牛的凍精按品種、畜號、劑型、製作凍精的批次,分別有序地裝在液氮罐里,始終浸入液氮罐內長期保存。

從液氮罐取出冷凍精液時,提筒不得提出液氮罐口外,可將提筒置於罐頸下部,用長柄鑷子夾取,確認所找的凍精後隨即按需要量取出,並把提筒(塑料管)迅速放回原處。尋找凍精動作要快,超過10秒應將提筒放回原處,然後再一次尋找。

什麼是凍精

利用SX-MOFLO精子分離設備分離奶牛XY精子,將分離後的奶牛X精子冷凍保存。探討奶牛X性控凍精解凍後存活時間、不同方法進行人工授精的受胎率,為奶牛X性控凍精的大規模推廣應用提供依據。方法與結果:(1)取不同種公牛、不同批次的X性控凍精及普通凍精解凍後倒入5 mL試管內搖勻,至37°C水浴鍋中,每2 h檢測一次精子活力,4 h後每小時檢測一次精子活力,直至無運動精子。結果奶牛X性控凍精存活時間為5~12 h,比同種普通精子的存活時間短2~10 h。(2)應用奶牛X性控凍精人工授精的母牛的情期受胎率(59.4%=342/576)與普通凍精的情期受胎率(60.6%=129/213)相比,無顯著差

⑹ 什麼是精液冷凍保存

精液冷凍保存是利用液氮(-196℃)或其他製冷設備作為冷源,將精液經過特殊處理後,保存在超低溫的環境中以達到長期保存的目的。是動物品種遺傳物質長期保存的一種方式。
目前普遍使用液氮作為精液冷凍保存的冷源。液氮是氮氣在降溫壓縮條件下形成的一種無色、無味、無毒的液體、沸點為-195.8℃;液氮性不活潑,滲透性很弱;無徹底殺傷生物細胞的能力,故精子、細菌、微生物等均能在其中生存;液氮還具有溫度低、體積小、便於運輸的特點。
冷凍精液目前通用的劑型有塑料細管和顆粒兩種劑型。
塑料細管型
優點是可大批生產、產品質量均勻、可避免液氮對精液的污染。每個細管上都應印有種畜的品種、名號、批號及出廠日期。現比較流行的有0.25毫升和0.5毫升兩種型號。
顆粒型
所需設備簡單、體積小、便於貯存。但缺點是容易污染、產品不規格、不易標記。
精液冷凍工藝流程為:采精—精液品質檢查—稀釋分裝—平衡—檢查凍前活力—液氮凍結—抽樣解凍並檢查活力—置液氮內保存。
精液的解凍:細管型凍精解凍時可直接置於35~40℃溫水中,待凍精溶化一半時取出備用。顆粒型凍精解凍有干解凍和濕解凍兩種:干解凍是先將滅菌細管置於35~40℃水中恆溫後,投入凍精顆粒,搖動至完全溶化,同時加入1毫升20~30℃的解凍液;濕解凍是先將盛有1毫升解凍液的安瓿置於35~40℃的水中恆溫,再投入顆粒凍精,搖動至溶化取出備用。

⑺ 如何貯存和取用冷凍精液

一般奶牛場多不飼養公牛,而是購買冷凍精液進行人工授精。因此,冷凍精液的貯存和取用對確保精液的質量,提高母牛的繁殖率有重要影響。貯存和取用公牛冷凍精液要注意以下幾方面的問題:
(1)要購買管理水平較高、公牛經過後裔測定且證明種用性能優良、精液質量符合國家標準的種公牛站的牛冷凍精液。每次采購同一頭批凍精,應抽樣檢查其活力、密度、項體完整率、畸形率和微生物指標。要求活力≥0.35,直線運動精子的密度≥1000萬個,頂體完整率≥40%,畸形精子率≤20%,非病原細菌數≤1000個/毫升)。
(2)無論是塑料細管冷凍精液或顆粒冷凍精液,要貯存在高真空保溫的液氮罐內運輸、貯存。在運輸、貯存過程中,應避免碰撞液氮罐而導致保溫效果下降。液氮罐應放置在清潔、乾燥處的木質墊板上貯存,周圍不能有化學品。
(3)要定期檢查液氮罐,保持罐中有足夠量的液氮存量。
(4)取用凍精時,一次只能取計劃需要的凍精,其他凍精不可提到罐口以下3.5厘米線之上。尋找凍精超過10秒鍾,應將分裝桶放回液氮罐內10秒鍾,然後再提起尋找,以保持凍精的冷度。(5)取用的凍精,取出後置38℃水浴瞬時解凍,或採取其他解凍方法後,應予以保溫並在最短時間內輸精完畢。
(6)每一頭公牛的精液,應放置在同一分裝桶內,並有分裝清單,清單上包括公牛號、數量和取用記錄,以縮短取出時間,保證凍精質量不受升溫的傷害。
(7)為保持液氮罐的清潔,減少污染,在清洗液氮罐時,預備好的清潔液氮罐應並列放置,快速轉移,凍精裸露在罐外的時間不能超過35秒鍾。

⑻ 凍精解凍過程復雜嗎

不復雜,只要注意好時間和溫度就可以。稀釋液恆溫36℃,解凍水溫恆溫到整50℃,將凍精精液細管快速放到50℃水裡,並同步打開秒錶,計時16秒,拿出精液細管,並擦乾,剪開精液細管空氣端,用精液杵棒將精液杵進稀釋液,輕輕搖勻,均勻取樣,檢測精液活力,合格後,馬上配合深部輸精管去配種

⑼ 想使用豬凍精但還是不放心,不知道活力怎麼

凍精解凍後首先要看精子活力,達到70%以上,再進行下一步配種,接下來再等18天左右看其有無反情,最後只需要等豬仔出生後看其初生重,抗病力,生長速度等即可。

⑽ 我國牛凍精生產的國家質量標準是什麼

中國農業部規定凍精活力必須達到0.35以上,解凍後的有效精子數在800萬個以上。而國外對凍精質量通常用受胎率來判斷。

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