㈠ 氯黴素檢測的主要方法
氯黴素檢測方法包括微生物法、色譜法、免疫測定法。微生物法易操作,費用低,但靈敏度低,特異性差。色譜法精確可靠、靈敏度高,檢測極限可達到0. 1μgPkg ,但前處理步驟多,回收率偏低 。免疫測定具有靈敏度高、特異性強、對儀器設備和人員素質要求低以及樣品前處理簡單等優點,適於現場監控和大規模樣品篩選。
㈡ 氯黴素檢測的反應原理
ELISA法:
氯黴素酶聯免疫檢測試劑盒,主要是利用抗原與抗體的特異性免疫化學反應的基本原理來進行的,換句話說,就是利用酶標記物與樣品中的氯黴素與微孔中的抗體進行競爭反應。在整個反應當中,如果樣品中的氯黴素殘留的越多,相對地就會競爭反應越多的酶標記物,使得能結合上抗體的酶標記物相對地減少,用TMB底物顯色,樣品中的氯黴素含量與樣品的吸光度值呈反比,與標准曲線比較即可得出氯黴素含量。
㈢ 氯黴素定量及定性檢測的方法有哪些
氯黴素殘留檢測的主 要方法。闡述了微生物法檢測氯黴素的優缺點,比較了免疫學方法中放射免疫法(RIA)和酶標免疫法(EIA),指出了免疫學方法適合於大規模推廣使用為一 種快速篩選方法,可以採用該方法進行樣品篩選;對色譜學方法中液相色譜(LC)法、氣相色譜(GC)法、液質聯用(LC/MS)法和氣質聯用(GC /MS)法的研究做了綜合、比較,指出了它們各自的優缺點,並認為色譜學方法中氣質聯用(GC/MS)法和液質聯用法可同時定量和定性,靈敏度高、檢測限 低,將是今後氯黴素殘留最主要的檢測方法。
㈣ 今天做水產的氯黴素測定,老師在實驗前進行了「加標」和「內標」,內標是氯黴素標准溶液
最快是用試劑盒方法,但是是半定量。
然後就是用LCMSMS檢測方法,速度也快而且靈敏度高。
稱取5克樣左右+15ml水樣+內標,混勻+甲醇至30ml,混勻,離心+2g氯化鈉+20ml乙酸乙酯,渦旋,離心然後取乙酸乙酯層,過無水硫酸鈉柱(吸水)然後氮吹。用流動相定容,過膜上級。
(因為蜂蜜基質比較干凈,完全不需要過柱凈化)
㈤ 氯黴素檢測的注意事項
1、使用前先將氯黴素標准溶液6瓶,濃縮萃取稀釋液,濃縮洗滌液,酶標記物,底物溶液及微量測試孔條置於室溫下,回溫30分鍾。
2、原倍萃取稀釋液及洗滌液配製
用蒸餾水將10倍濃縮萃取稀釋液及濃縮洗滌液分別以1: 9的比例稀釋(即1mL濃縮液+9mL蒸餾水),即可作為樣品萃取稀釋液與微孔板清洗液。
3、回溫後,取出所需微量測試孔條,將剩餘板條立即放回鋁箔袋中用膠帶封好,置於40℃保存。 針對以下抗生素進行交叉反應之測試,結果如下:
Chloramphenicol =100%
Chloramphenicol(free base) <0.1%
Gentamycin <0.1%
Tetracycline <0.1%
Penicillin G <0.1%
Sulfamethazine <0.1% 生乳(添加1.0ppb)104~117%
蜂蜜(添加0.3ppb)90~110%
蝦及魚肉(添加0.5ppb)95~110%
雞肉(添加0.5ppb) 90~120%
血清(添加0.5ppb)100~120%
內臟(添加1.0ppb) 100~120%
飼料(添加2.0ppb)80~110%
㈥ 怎樣檢測氯黴素
(組織)氯黴素(CAP)j膠體金快速檢測卡用於快速檢測水產品(魚蝦蟹等)、畜禽肉及水體沉積物中的氯黴素殘留,整個檢測過程只需要30分鍾左右,本試紙條為定性檢測,檢測卡靈敏度為0.2ppb。
(水體)氯黴素(CAP)j膠體金快速檢測卡用於快速檢測水體中的氯黴素殘留,整個檢測過程只需要10分鍾左右,本試紙條為定性檢測,靈敏度為0.3ppb。
檢測原理:
氯黴素檢測卡應用了競爭抑制免疫層析的原理,樣品中的氯黴素在流動的過程中與膠體金標記的特異性單克隆抗體結合,抑制了抗體和NC膜檢測線(T)上氯黴素-蛋白偶聯物的結合。如果樣品中氯黴素含量大於0.2ppb,檢測線(T)線顯色比C線淺,結果為陽性;反之,檢測線(T)顯色比質控線(C)深或者一樣深,結果為陰性。
結果判定:
1、 陰性(-):檢測線(T)顯色比質控線(C)深或者一樣深,表示樣品中氯黴素濃度低於檢測限或者不含氯黴素。
2、 陽性(+):檢測線(T)線顯色比C線淺,或者檢測線(T)不顯色,表示樣品中氯黴素殘留濃度大於檢測限。
3、 無效:質控線(C)不顯色;可能是操作不當或者檢測卡失效。用新的檢測卡重新檢測。
㈦ 氯黴素檢測的具體實行
a) 將3克已均質的樣品放入15mL離心管中,再加入6mL乙酸乙酯,震盪5分鍾。
b) 用離心機離心1700×g10分鍾,取2mL上層液(乙酸乙酯)至10mL玻璃管中,於50℃下,利用氮氣將有機溶劑吹乾。
c) 在此玻璃管中加入正己烷1mL,先將殘余物完全溶解後,再加入1mL樣品稀釋液,震盪30秒鍾。
d) 用離心機離心1700×g 10分鍾,利用吸管吸去包含中問乳化層部分的上層液(正己烷),再吸取下層液(水層)備用。
稀釋倍數:1
若待測物為白蝦可按以下流程將樣品做8倍濃縮以增加檢品敏感度
a) 將6克已均質的樣品放入15mL離心管中,再加入6mL乙酸乙酯,震盪5分鍾。
b) 用離心機離心1700×g 10分鍾,取4mL上層液(乙酸乙酯)至10mL玻璃管中,於50℃下,利用氮氣將有機溶劑吹乾。
c) 在此玻璃管中加入正己烷2mL,先將殘余物完全溶解後,再加入0.5mL樣品稀釋液,震盪30秒鍾。
d) 用離心機離心1700×g 10分鍾,利用吸管吸去包含中問乳化層部分的上層液(正己烷),再吸取下層液(水層)備用。
稀釋倍數:0.125 1、於適當微孔中分別加入100mL標准溶液(0,0.05,0.15,0.45,1.35和4.05ppb)。
2、在另外的微孔中加入100mL 已完成前處理的樣品溶液。
3、再於每一微孔中另再加入50mL酶標記物。
4、輕敲盤子四周,使其充分混合後於室溫下避光靜置溫育1小時。
5、將微孔中的反應液甩掉,再將洗液加滿每一微孔後甩掉,重復洗3次。
6、最後一次甩掉後,在吸水紙上拍干。
7、於每一微孔中加入底物溶液100mL後,輕敲盤子四周,使其充分混合。
8、於室溫下避光靜置溫育20分鍾。
9、於每一微孔中加入100mL反應終止液。
10、用酶標儀於波長450nm下判讀。
㈧ 氯黴素的檢測方法有哪些啊
液相色譜(LC)法
氣相色譜(GC)法
液—質聯用(LC/MS)
氣—質聯用(GC/MS)法
㈨ 蜂蜜中氯黴素葯物的殘留如何快速檢測,用哪個品牌的比較好
可以用美正生物的氯黴素快速檢測試紙條,本產品用於快速檢測蜂蜜中氯黴素葯物的殘留,適用於各類企業、檢測機構、監督部門的現場快速檢測。
檢測步驟
【樣品處理】
1. 稱取3.0±0.03g樣本至50mL聚苯乙烯離心管中,加入3mL去離子水振盪5分鍾,使其充分溶解;
2. 加入6mL乙酸乙酯振盪30秒~1分鍾;
3. 室溫4000r/min 離心5分鍾(如離心後出現乳化現象,可手動搖晃後繼續離心5分鍾或置於熱水中待溶解後再次離 心);
4. 移取4mL上層有機相至離心管中(離心管可根據氮吹儀 型號選擇不同規格),於50~60℃氮氣流下吹乾; 5. 加入800μL氯黴素樣本稀釋液,充分振盪後,取200 μL進行分析。
【檢測步驟】
1. 使用前將試紙條、微孔試劑、樣本稀釋液和待檢樣本恢復 至室溫(20~25℃);一次檢測樣本數量不要超過8個; 如果一次檢測樣本數量超過8個,請按照8個一組,分批檢測。
2. 取所需數量的微孔和試紙條,並做好標記,將微孔置於40℃乾式加熱器上。
3. 用移液器取200μL振盪混勻的待檢樣本加入微孔並反復 吸打直至紅色固體充分混勻進行孵育,計時3分鍾。
4. 將試紙條立即插入微孔中進行反應,計時5分鍾。
5. 取出試紙條去除下端樣品墊並在1分鍾內根據圖示進行 判讀或者配合儀器判讀。
注意事項
1. 不同批次試紙條、微孔、二維碼均不能混用。
2. 槍頭與離心管等耗材不可混用,以免交叉污染。
3. 產品為一次性消耗品,請在有效期內使用。
4. 請勿觸摸試紙條中央白色膜區,檢測時避免陽光直射和風 直吹,如不小心接觸後請遺棄。
5. 微孔打開時不要用力過猛,以免有粉末飛出。已開封的產 品請按照要求密封儲存,並盡快使用,以免影響檢測結果。
6. 請勿用自來水、純水及蒸餾水等做陰性對照。
7. 遇到樣本檢測結果呈陽性,建議重復測試一次。
8. 試紙條檢測線出現明顯斷點,會影響檢測結果,建議重復測試一次。
9. 反應後,務必立即去掉試紙條下端的樣品墊,並在1分鍾內判讀結果,因為試紙條乾燥後顏色深度會有變化,影響最後的結果。
10. 試劑從試劑桶取出後,請立即蓋好試劑桶蓋。如果一次用不完8個微孔,需將剩餘微孔立即放回到裝有乾燥劑的試 劑桶中密封保存。
11. 本產品檢測結果僅供參考,如需確證,請參照國家相關標准方法。
㈩ 水產品中的氯黴素殘留用什麼方法檢測比較好
氯黴素主要液質聯用和氣質聯用的方法 一般用液質方法好點 氣質方法需要衍生化,衍生化的方法對定量都有一定的風險。
GB/T 20756-2006 可食動物肌肉、肝臟和水產品中氯黴素、甲碸黴素和氟苯尼考殘留量的測定 液相色譜-串聯質譜法
SN/T 1864-2007 進出口動物源食品中氯黴素殘留量的檢測方法 液相色譜-串聯質譜法
農業部781號公告-2-2006 動物源食品中氯黴素殘留量的測定 高效液相色譜-串聯質譜法
如果你實在要用氣質聯用方法
農業部781號公告-1-2006 動物源食品中氯黴素殘留量的測定 氣相色譜-質譜法
農業部958號公告-14-2007 水產品中氯黴素、甲碸黴素、氟甲碸黴素殘留量的測定 氣相色譜-質譜法
SC/T 3018-2004 水產品中氯黴素殘留量的測定 氣相色譜法
當然還有酶聯免疫 半定量的方法
DB34/T 821-2008 動物組織中氯黴素的殘留測定——酶聯免疫吸附法
SN/T 1604-2005 進出口動物源性食品中氯黴素殘留量的檢驗方法 酶聯免疫法
農業部1025號公告-26-2008 動物源食品中氯黴素殘留檢測 酶聯免疫吸附法
我們一般都是用液質聯用的檢測方法 檢出限比較低 而且定量結果比較穩定可靠。