檢測dsDNA抗體的標准方法

① 您好醫生我的抗雙鏈DNA（抗dsDNA）（免疫印跡

dsDNA——雙鏈DNA，double-stranded DNA。單鏈DNA——ssDNA，single-stranded DNA。 抗dsDNA（dsDNA抗體）：對診斷SLE有較高的特異性，且與SLE的活動相平行，並可作為治療的估價。隨著疾病活動的控制，抗dsDNA抗體滴度可以下降或消失。抗dsDNA抗體與DNA結合成為免疫復合物在腎小球基底膜沉積，或抗dsDNA抗體直接作用於腎小球抗原造成SLE患者的腎損害。抗dsDNA抗體陽性的患者較陰性患者發生腎炎的危險性高12倍。測定抗dsDNA抗體的方法很多，其中放射免疫法（Farr）敏感，用此法檢測其結合率320%為 陽性，短膜蟲或馬疫錐蟲為底物的間接免疫熒光法（IF－CT或IF－TE）更特異，此法31：5可判陽性。低滴度的抗DNA抗體也可在多種疾病甚至正常人中出現。臨床一般認為：1、抗雙鏈DNA（dsDNA抗體）：對診斷SLE有較高的特異性，且與SLE的活動相平行，並可作為治療的估價。隨著疾病活動的控制，抗dsDNA抗體滴度可以下降或消失。2、考慮狼瘡腎炎的診斷，以及對療效、預後判斷的標准之一。
回復專家:甘肅省人民醫院-中西醫結合風濕免疫科-王晉平主任醫師

② 查免疫十項包括有哪些

免疫十項包括：面抗原、表面抗體、乙肝抗原、乙肝抗體、乙肝核心抗體、乙肝前S1抗原、甲肝抗體、丙肝抗體、人免疫缺陷病毒抗體測定、梅毒。

③ 抗雙鏈DNA（dsDNA）抗體的臨床意義是什麼

抗DNA抗體有兩種類型：抗天然雙鏈DNA抗體和抗變性單鏈DNA抗體。 抗dsDNA抗體主要識別雙螺旋脫氧核糖核酸磷酸支架上的位點，因此與雙鏈、單鏈DNA均能反應。然而，抗ssDNA抗體識別嘌呤和嘧啶鹼基多聚物，不能與雙鏈DNA反應。 抗dsDNA抗體 是系統性紅斑狼瘡的特異性抗體，和抗Sm抗體一起，...是該病的血清學標志物，陽性率為60%-90%。 不僅見於系統性紅斑狼瘡患者（70-95%），也與很多其它自身免疫性疾病有關（葯物誘導性紅斑狼瘡（60%），混合性結締組織病（20-50%），多肌炎/皮肌炎，硬皮病

④ 抗dsDNA抗體是什麼

抗U1RNP或者抗SS-A抗體等多種抗體。

抗dsDNA抗體這是一種自身抗體，通常見於系統性紅斑狼瘡患者病情活動期。這個抗體對於紅斑狼瘡診斷的敏感性和特異性都是非常高的，通常不會見於其他結締組織病。因此是可以預示系統性紅斑狼瘡用戶病情活動的，而且隨著狼瘡患者病情的控制，抗雙鏈DNA抗體是完全可以轉為陰性的。

系統性紅斑狼瘡患者在體內會存在大量的自身抗體，以抗核抗體為代表，還會包括其他抗體，抗雙鏈DNA抗體只是其中的一種而已，另外也會出現抗U1RNP或者抗SS-A抗體等多種抗體。

(4)檢測dsDNA抗體的標准方法擴展閱讀：

注意事項：

1、抗dsDNA抗體是一種診斷系統性紅斑狼瘡的實驗室指標，一般需要抽血才能測定含量，對於他的印象因素，不必過分擔心，只要儀器沒問題，一般的檢查結果沒多大問題。

2、對抗dsDNA的檢測結果應結合臨床分析，必要時應動態觀察。

3、鑒於檢測試劑中DNA抗原的來源不同，鹼基組成和順序可能有一定差異，使抗體結合的表位發生變化。

⑤ 目前採用間接免疫熒光法檢測患者血清中的dsDNA的最佳基質是

正確答案:A
解析：目前用於檢測患者血清中的dsDNA的最佳方法是用馬疫錐蟲或綠蠅短膜蟲作為基質進行間接免疫熒光法，因為這些血鞭毛寄生蟲的蟲體呈圓形或橢圓形，其動基體由純凈的環狀dsDNA構成，除此以外通常不含有其他細胞核抗原
。能與動基體反應的自身抗體只有抗dsDNA抗體，故具有高度特異性
。

⑥ 自身免疫性疾病，常和其他系統性

一、自身免疫性溶血性貧血（AIHA）：機體免疫功能異常，或服用某些葯物後，紅細胞表面抗原性發生變化，產生抗紅細胞膜表面抗原的自身抗體。自身抗體與自身抗原結合，激活補體，破壞紅細胞，導致貧血。特點：
（1）體內出現抗紅細胞自身抗體。
（2）抗人球蛋白試驗（Coombstest）陽性。
（3）紅細胞壽命縮短。
（4）AIHA多見於中年女性。
（5）繼發性者多繼發於淋巴系統惡性病、結締組織病、感染和葯物應用後。
（6）引起AIHA的葯物有青黴素、奎尼丁、異煙肼、對氨基水楊酸、磺胺類、甲基多巴等。抗紅細胞抗體可分為三類：①溫抗體，為IgG型，37°C可與RBC結合，不聚集RBC.②冷凝集素，為IgG型，低溫時與RBC結合使其凝集，引起冷凝集素綜合征。③DonathLaidsteiner抗體，為IgG型，低溫時與兩種補體成分結合，溫度升高至37°C時，激活補體鏈，導致溶血，引起陳發性冷性血紅蛋白尿症（PCH）。PCH繼發於梅毒或病毒感染後。病毒感染後引起的多見於兒童或年輕患者。
二、免疫性血小板減少性紫癜（ITP）：主要表現為皮膚黏膜紫癜，血小板↓，骨髓中巨核細胞可增多，女性多發，發病率1／lOO00，患者有抗血小板抗體，其使血小板壽命縮短。
三、重症肌無力（MG）：患者體內存在神經肌肉接頭乙醯膽鹼受體的自身抗體，該抗體結合到橫紋肌細胞的乙醯膽鹼受體上，使之內化並降解，使肌細胞對運動神經元釋放的乙醯膽鹼的反應性降低。引起骨骼肌運動無力。
四、肺出血腎炎綜合征（Goodpasture綜合征）：患者體內可檢到抗腎小球基底膜Ⅳ型膠原抗體，由於肺泡基底膜與腎小球基底膜有共同抗原，故肺、腎同時發病。青年男性多見，反復咯血、血尿、蛋白尿，最後發展為腎衰。
五、系統性紅斑狼瘡（SLE）：是一種累及多器官、多系統的炎症性結締組織病，多發於青年女性。其臨床症狀比較復雜，可出現發熱、皮疹、關節痛、腎損害、心血管病變（包括心包炎、心肌炎和脈管炎）、胸膜炎、精神症狀、胃腸症狀、貧血等；疾病常呈漸進性，較難緩解。免疫學檢查可見IgG、IgA和IgM增高，尤以IgG顯著；血清中出現多種自身抗體（主要是抗核抗體系列）和免疫復合物，活動期補體水平下降。抗dsDNA和抗Sm抗體是本病的特徵性標志。
SLE的實驗診斷：
（1）抗核抗體
1）免疫熒光法檢測抗核抗體：該法以小鼠肝細胞、Hep-2細胞（人喉癌上皮細胞株）、Hela細胞（官頸癌細胞株）或小鼠腹水癌細胞等作為抗原片，以Hep-2細胞抗原片敏感性較高。
2）抗DNA抗體：分為天然（雙鏈）DNA（ds-DNA）和變性（單鏈）DNA（ss-DNA）抗體。Ds-DNA抗體的測定方法有間接免疫熒光法（以短膜蟲或馬疫錐蟲為抗原）、間接酶標抗體法（以短膜蟲為抗原）、補體結合抗體法（以短膜蟲為抗原，以抗人C3熒光抗體為第二抗體）、酶聯免疫吸附試驗（ELISA，以DNA為抗原）和放射免疫分析法（即Farr法）等多種方法。
前四種方法檢測到的都是低親和力的抗dsDNA抗體，或敏感性低，或檢測結果不穩定、重復性差。Farr法檢測dsDNA抗體的特異性最高，結果可靠，重復性好，因此是目前國際上公認的檢測抗ds-DNA抗體的標准方法。當抗ds-DNA抗體結合率>20％時對診斷SLE有意義。
3）抗可提取性核抗原（ENA）抗體：目前抗ENA抗體的檢測方法有雙向免疫擴散或對流免疫電泳和免疫印跡法醫|學教|育網搜集整理。近年來隨著分子生物學技術的發展，可以以重組抗原為底物，通過酶聯免疫吸附試驗（ELISA）檢測特異性抗體。
4）抗增殖細胞核抗原抗體。
（2）抗組蛋白抗體。
（3）抗核糖體抗體。
（4）抗Ku抗體。
（5）皮膚狼瘡帶試驗。
與SLE病情判斷有關的免疫學檢測包括：
1）血沉和C反應蛋白（CRP），SLE活動時血沉增快，CRP改變不明顯。
2）血清蛋白，包括白蛋白、球蛋白、纖維蛋白原、冷球蛋白冷凝集素等。
3）血清補體，包括總補體（CH50）和Cl、C3、C4、C2及C9.
4）循環免疫復合物（CIC）聚乙二醇（PEG）沉澱法。
5）類風濕因子。
6）細胞免疫功能。
六、類風濕性關節炎（RA）：一種以關節病變為主的全身性結締組織炎症，多發於青壯年，女性多於男性。本病的特徵是關節及周圍組織呈對稱性、多發性損害，部分病例可有心、肺及血管受累。免疫學檢查可見血清及滑膜液中出現類風濕因子，血清IgG、IgA和IgM水平升高。其他自身抗體也可出現：例如，抗角蛋白抗體；抗RA33抗體；抗環瓜氨酸抗體（抗CCP抗體）；抗核周因子等，對類風濕的早期診斷很有幫助。
七、乾燥綜合征（SS）：乾燥綜合征是一種侵犯外分泌腺，尤以唾液腺和淚腺為主的慢性自身免疫病，它可同時累及多種臟器。乾燥症和乾燥性角膜炎是SS的主要臨床表現。乾燥綜合征的實驗診斷包括：
（1）抗SS-A和抗SS-B抗體：檢測方法有：①雙向擴散（DID）法；②對流免疫電泳（CIE）法；③免疫印跡（IBT）法。
（2）其他免疫學異常：①高丙球蛋白血症，呈多克隆性，因此可引起血沉增快、血清絮狀和濁度試驗異常。②類風濕因子（RF）和循環免疫復合物（CIC），RF多為IgM型，IgG型和IgA型少；CIC可呈陽性。③其他自身抗體，抗核抗體（ANA）在SS患者中可呈陽性。
（3）與SS診斷有關的其他實驗：①淚液分泌試驗；②唾液分泌試驗。

⑦ 什麼是dsDNA

抗dsDNA抗體是什麼?抗dsDNA抗體常和自身免疫病紅斑狼瘡聯系在一起。紅斑狼瘡（sle）是一個累及身體多系統多器官，臨床表現復雜，病程遷延反復的自身免疫性疾病。紅斑狼瘡可分為系統性紅斑狼瘡（SLE）和盤狀紅斑狼瘡（DLE）兩大類。紅斑狼瘡常表現出免疫檢察異常，可以出現很多自身抗體的陽性，其中抗核抗體陽性率最高，其次就是抗dsDNA抗體。
抗dsDNA抗體的靶抗原是成雙鹼基對的DNA雙螺旋結構,主要見於系統性紅斑狼瘡,是目前公認的高度特異性抗體,也被列為狼瘡的診斷標准之一。
抗dsDNA抗體在狼瘡中,陽性率為60-90%,活動期的狼瘡陽性率一般更高,而非活動期的則相應較低.所以抗dsDNA抗體與狼瘡疾病活動性緊密相關,其抗體滴度隨疾病的活動與緩解而升降。血清中抗dsDNA抗體水平升高時,提示疾病復發；血清中抗dsDNA抗體呈升高水平,同時伴有補體降低,則提示狼瘡腎炎的危急性大；狼瘡的緩解期血清中抗dsDNA抗體水平降低甚至可以轉陰。
綜上所述,抗dsDNA抗體常作為狼瘡的活動指標,可以用於監測病情變化,葯物治療效果觀測。
系統性紅斑狼瘡患者也可以表現出抗dsDNA抗體陰性，但是陰性者的比例並不大。

⑧ 自身免疫病全項檢查都有哪些

免疫系統檢查主要包括:血常規、免疫球蛋白測定、補體測定、腫瘤標志物、激素系列、抗核抗體、自身抗體系列如抗Sm抗體等、甲狀腺功能測定、生化全項以及抗磷脂抗體等，必要時需要做骨髓穿刺活檢等。

具體的檢查還需要結合患者具體的臨床症狀來選擇相應的檢查。建議患者去正規公立風濕免疫科或者是相關科室就診，聽從醫生的建議，接受規范化的檢查及治療，以免延誤病情。

免疫性疾病防治原則：

1、免疫缺陷可應用替代療法，如丙種球蛋白缺乏所致的免疫缺陷可應用丙種球蛋白治療 ； 還可應用免疫加強劑來提高機體的免疫反應性。

2、脫離或避免導致異常免疫反應的物質，如控制環境、停用某些葯物等。

3、Ⅰ型變態反應可進行特異性脫敏療法來提高機體對致敏物質的耐受性。

4、Ⅰ型變態反應還可應用葯物來抑制介質的產生，以阻斷免疫反應。

5、應用葯物來拮抗介質的作用和它們導致的組織反應。

6、用免疫抑制劑來抑制過度活躍的免疫反應。

7、除去激發免疫反應的感染灶和產生自身免疫的病灶。

8、清除可使臨床症狀加重的各種刺激。

以上內容參考網路—免疫性疾病、網路—自身免疫性疾病

⑨ 如何正確理解自身抗體實驗室檢測結果

1. 自身抗體滴度與疾病的相關性 有些自身抗體是高特異性指標。如抗Sm抗體對SLE、抗可溶性肝抗原/肝胰抗原抗體對AIH等，一旦出現陽性（即使是低滴度）， 基本上就可做出診斷。但如果這些指標為陰性，也不能排除相關疾病的存在。相反有些指標雖然在疾病中的陽性率比較高，但特異性差，在很多疾病甚至健康人群中均可出現陽性（如ANA），這種抗體只有在高滴度時，才對相關疾病有診斷意義。自身抗體的滴度不僅對疾病診斷非常重要，並且有些抗體的滴度(如抗dsDNA抗體)與疾病的活動度密切相關，可用於療效和病程監控。 2. 關於抗核抗體(ANA)的滴度范圍 檢測ANA的標准方法為間接免疫熒光(IIF)法，最好用Hep-2細胞和靈長類肝冰凍組織切片作為檢測基質。我科實驗室採用的是 德國歐蒙公司Hep-2/猴肝檢測ANA間接免疫熒光試劑盒。其起始稀釋度為1:100，滴度超過1:320時，則提示自身免疫性疾病。由於不同檢測系統的起始稀釋度和滴度系統不同，檢測到的滴度數值不能直接進行比較。對ANA的結果不僅要關心其定性和滴度結果，同時還應了解所用檢測系統的實驗基質和起始稀釋度（正常參考范圍）。我科實驗室ANA (IIF)的臨界值(起始稀釋度)為1:100。 在正常人群中ANA陽性率3-15%，抗體滴度較低，在年齡大於60歲的正常人群中ANA陽性率可高達10-37%。 ANA滴度及臨床意義如下： ANA滴度 熒光強度 臨床意義 <1:100 - ANA陰性，血清標本中未檢出抗核抗體。 1:100 (+) 可疑陽性，繼續追蹤觀察。少數正常人群也可能陽性。 1:320 + 弱陽性，提示可能存在相關疾病。極少數正常人也可能陽性。 1:1000 ++ 中等陽性，提示可能存在相關疾病。 1:3200 +++ 強陽性，高度提示存在相關疾病。 1:10000 ++++ 很強的陽性，高度提示存在相關疾病。 3. 自身抗體檢測方法對結果的影響 不同的檢測方法對實驗結果有一定影響，如抗dsDNA抗體檢測常用的方法有ELISA、放射免疫分析法和間接免疫熒光法(IIF)。這 三種方法所能檢測的抗體的親和力差別很大，放射免疫法的特異性最高，IIF次之，ELISA較差。因此ELISA檢出抗dsDNA陽性時，應用其它方法確認。 4. 自身抗體流行病學資料的積累 在IIF檢測時，很多熒光模型相對應的靶抗原尚不清楚，且這些熒光模型的臨床意義不明確。隨著對自身免疫性疾病及其相關自 身抗體研究的深入，越來越多的以前認為沒有臨床意義的抗體成為新的研究焦點。因而對於這些結果，實驗室也應該報告，以引起臨床的重視，通過臨床和實驗室的共同努力，不斷積累這些熒光模型的流行病學資料。 5. 為何患者ANA陽性，卻無明顯臨床症狀？ ANA陰性結果提示患者體內不存在抗核抗體。若患者僅僅出現ANA陽性結果而無其他臨床表現或指征，則並不提示自身免疫性疾 病。主要原因如下： 1）ANA在健康人群中的陽性率約為3-15%，而且ANA的產生與患者的年齡相關，年齡在65歲以上的健康人群ANA陽性率可高達1 0-37%。另外健康人群在感染病毒的情況下，也可能出現ANA陽性，但這些抗體多為短暫出現。 2）一些葯物治療可能引起ANA陽性。因此ANA陽性需結合患者用葯情況綜合判斷。 3)一些特殊疾病（如腫瘤）也可能導致ANA陽性。
目前已有的研究表明，自身抗體往往早於臨床症狀出現。對於SLE患者而言，至少有一種以上SLE相關自身抗體在臨床診斷前即 已出現（最早達9.4年前，平均為3.3年），而且抗體與疾病特異性越高，出現的時間越晚。另外，隨著SLE病情進展，抗體產生的數量逐漸增加（見參考文獻[1]）。 6. 如何認識間接免疫熒光法ANA陰性，而印跡法靶抗原（SSA、Jo-1、M2、和dsDNA等）結果陽性的實驗結果？ 客觀上不同的檢測方法學之間存在敏感度和特異性的差異。因此針對上述問題應根據靶抗原的實際結果，進行具體情況具體分析。 1）由於SSA和Jo-1抗原在真核細胞中的表達量不高，而且細胞固定劑對於抗原結構也可能產生影響，因此基於培養細胞作為基 質的間接免疫熒光法絕非抗SSA和Jo-1抗體的最佳檢測方法（見參考文獻[2]）。 2）抗線粒體M2抗體對PBC疾病的診斷具有良好的敏感性和特異性。有研究表明臨床明確診斷的PBC患者樣本，即使應用大鼠腎 檢測抗線粒體M2抗體也可能出現熒光法陰性而重組抗原方法陽性的結果（見參考文獻[3]）。 3）對於dsDNA抗體臨床檢測，由於不同實驗體系中所應用的抗原來源不同、抗原呈現形式不同以及反應條件不同等因素的影響， 因此不同實驗方法學之間的結果並不具備可比性（見參考文獻[4]）。 7. 單獨出現Ro52抗體陽性是否具有臨床意義？ 目前已有的研究表明，抗SSA抗體主要提示乾燥綜合症、SLE和新生兒紅斑狼瘡等疾病。但Ro52抗體在許多疾病中（如風濕性疾 病、感染性疾病和自身免疫型肝病等）均有一定的發生率，因此單獨Ro52抗體陽性結果缺乏疾病 ，需結合其他檢測指標或臨床症狀綜合判斷。例如自身免疫性肝炎患者出現SLA/LP抗體和Ro52抗體同時陽性，則提示患者病情較重、預後較差。

⑩ 抗核抗體十1:100t

抗核小體抗體採用ELISA法測定，測定值>20 RU/mL為陽性。抗dsDNA抗體採用間接免疫熒光法，以馬疫錐蟲為底物，滴度≥1∶5判為陽性。
就結果看可能採用的血凝法,該抗體的特異性不是很高，有一部分正常人也是陽性的（假陽性），如果不結合其它的免疫學檢查結果，是沒有多大意義的。