如何製成不同抗凝比例的標本方法

『壹』 如何制備抗凝血

檸檬酸鈉與血中鈣離子形成難解離的可溶性絡合物，而阻止血液凝固，但僅用於體外抗凝血，而且使血中鈣離子減少，必要的時候要添加鈣離子。
肝素鈉在體內外均有抗凝血作用，我們自己實驗室做實驗用的是肝素鈉。

『貳』 採集靜脈血液標本，使用抗凝管與非抗凝管有什麼不同謝謝。

抗凝管內含有抗凝劑，可以使血液保持液態，不凝固。非抗凝管一般只是具有真空抽血的功能，不能抗凝。血液沉澱後的結果來抗，抗凝管內可以得到血漿，兒非抗凝管得到的是血清。

『叄』 血標本採集存在的問題應採取哪些防範措施

樓主，你好~~

1 標本容器的選擇不當

不同的檢驗標本需要不同的檢驗容器。采樣所用的容器是否恰當是直接影響檢驗結果的因素之一。常見的使用容器不當有以下情況：血清標本使用有抗凝劑的試管；全血標本使用乾燥試管；血培養標本使用未經消毒的，密封不嚴的培養瓶或不按無菌技術操作造成容器污染而導致雜菌生長，培養失敗。這些都是由於標本容器使用不當人為造成的錯誤。因此，根據不同的檢驗目的選擇標本容器，必須按要求進行採集和使用。同時抽取幾項檢驗血標本時，一般注入容器的順序為：血培養瓶，抗凝管，乾燥試管。動作應迅速准確。
2 采血的時機不當

血液中的很多成分易受飲食影響。血標本做生化檢驗，應在病人空腹時採取。但某些病例的空腹血也可使檢驗結果受到影響。常見原因是：取血前一天晚上病人大量飲酒或半夜加餐，均會使空腹血待測指標發生變化。取血前使用葯物也會影響檢驗結果，在臨床上常常遇到病人血糖濃度很低，可病人一般情況良好，調查發現病人輸入大量維生素c，使血糖測定結果偏低；做細菌培養，在使用抗生素之後留取標本，會使培養陽性率降低。因此護士要根據檢驗內容，事先通知病人，向病人交代清楚有關的注意事項，嚴格掌握標本採集的適宜時機。
3 采血部位不當

臨床上有個別護士貪圖方便，直接從輸液的針頭上接上注射器抽血，或靜脈點滴時從同一血管近心端采血標本，使檢驗標本含有大量新輸入的液體；血氣分析標本取靜脈血送檢；這些都會使檢驗結果與病人病情不符，因此對輸液輸血病人，採集血標本時應在對側肢體採取。血氣分析標本應採取動脈血。
4 采血量不當

取血時要根據不同的檢驗目的，選擇不同的抗凝劑試管。不同的抗凝劑試管，要求的采血量不同，要注意抗凝劑與血液要有一定比例，不能過多過少，並將血液與抗凝劑輕輕搖勻。血抗凝劑過多，易造成血液稀釋，結果偏低，樣品滲透壓改變，細胞形態發生改變。抗凝劑過少或與血液未混勻，均可出現血液凝固或出現肉眼看不見的小凝塊，而影響檢測結果的准確性，往往給臨床醫生帶來假象，延誤了診斷和治療。
5 采血的方法不當

採集血標本所用方法可直接造成血液成分的變化，如抽血前止血帶在病人臂上縛的時間過長或過緊，都會造成血液成分的變化。對於一些采血困難，縛止血帶過長的病人，可以在針頭刺入靜脈後的短時間內放鬆止血帶，等待數分鍾再抽血。氣體，易揮發物質，ph值等測定時，可採用一些特殊的方法。如：注射器中事先裝有滅菌的抗凝劑，取血後立即將注射器針頭斜面刺入橡皮塞中，盡量避免血液空氣接觸而影響血液成分含量或其ph值。血氣標本采動脈血時最好是血液自動流入注射器內。另外，采血方法不當常可導致標本溶血而影響和干擾檢測項目。紅細胞內液的某些化學成分與血清濃度不同，紅細胞內液濃度高時，溶血導致血漿中濃度增高，反之可產生不同的稀釋作用。通常標本發生溶血的原因：注射器、針頭及容器含水分；采血部位用酒精消毒後，酒精未完全揮發；反復皮下穿刺，甚至刺破血管；抽血速度過快，產生血泡並將泡沫注入容器；振盪血液時過於劇烈；兩次抽血注入同一試管內等。因此，取血時最好使用一次性注射器，采血部位皮膚消毒後應等皮膚乾燥後再抽血，抽血後取下針頭，將血液順管壁緩慢注入試管內，避免將泡沫或用力將血液急速推入容器造成溶血。
6 病人和標本不符

望閱讀愉快~~O(∩_∩)O~~

滿意就請及時採納我吧！如有問題請繼續追問哦！

『肆』 如何配製血液抗凝劑

1 （酸性）檸檬酸葡萄糖溶液B（ACD）（用於新鮮抽提或者是凍存的血樣品）

檸檬酸鈉：1.32%（M/V）

檸檬酸：0.48%（M/V）

葡萄糖：1.47%（M/V）

『伍』 高濃度血液樣本如何製取

液（血液樣本）RNA抽提試劑提取DNA時，血液樣品如何保存？提取步驟是怎樣的
2011-05-30 超過14用戶採納過TA的回答

關注
博凌科為TRIpure LS Reagent 血液（血液樣本）RNA抽提試劑
TRIpure LS Reagent試劑是直接從來源於人，動物、植物，酵母，細菌和病毒的液體樣品中提取總RNA的試劑。在提取血液等液體樣品的RNA時按一定體積比加入該試劑即可.省去了在處理樣品前離心去除液體的步驟。
使用該試劑可以同時提取DNA及蛋白質。提取的RNA樣品可以用於後繼的RT-PCR、Northern blot、dot雜交及體外轉錄等實驗。回收的DNA片段可以用於PCR反應。
血液樣品的保存：
為了保證提取效果，請選擇新鮮的血液進行RNA的提取。在收集到血液樣品後，需要加入抗凝劑。抗凝劑的選擇首選EDTA，其他抗凝劑如：檸檬酸鹽、肝素或者ACD也可以使用。加入抗凝劑的血液樣品最好在幾個小時內進行RNA提取實驗。不同種類的mRNA，其半衰期也不盡相同。調控基因的mRNA的半衰期比看家基因mRNA的半衰期要短。因此，為了保證所提取的RNA能夠包含更全面的信息，請盡量避免使用保存時間過長的血液進行RNA的提取。
基本步驟：
◆ 按照3：1的體積比例加入TRIpure LS reagent和待提取的液體樣品(固體樣品用水調整體積比至3：1）振盪混勻。
◆ 加入氯仿幫助有機相和水相分層。
◆ 異丙醇沉澱RNA。
◆ 漂洗RNA沉澱。
◆ RNase-free H2O重新溶解RNA沉澱。
註：本產品不需要進行紅細胞裂解的步驟，更快，純度高。
產品特點：
◆ 方便--- 不需要分離紅細胞和白細胞
不需要進行另外的紅細胞裂解步驟。
保存條件：
2-8℃避光保存一年。
提取范圍：
血液、血清、血漿、病毒培養液以及任何液體形式的樣品中提取RNA。
產量：
每1ml液體樣品或1mg組織或1×106培養細胞預期的RNA產量
1.人和動物全血，15～20μg
2.人淋巴細胞（約7×107白細胞），60～70μg
3.肝和脾，6～10μg
4.腎，3～4μg
5.骨骼肌和腦組織，1～1.5μg
6.胎盤，1～4μg
7.上皮細胞(1×106 cultured cells)，8～15μg
8.纖維母細胞(1×106 cultured cells)，5～7μg
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『陸』 抗凝標本立即做有什麼影響

看什麼標本了，血離子標本放置過久會使鉀離子升..分離膠管貯存的血標本再離心致鉀離子增高。嚴密控制標本誤差因素，作為實驗分析前質控的標本質量控制應予以廣泛重視，隨著現代醫學科學技術的迅速發展，臨床檢驗技術不斷改進、完善和更新，實驗方法學研究在微量、簡便、快速、准確的基礎上，正朝著超微量、高精度、大批樣、多指標和自動化的方向發展，但是，全面質量管理和臨床醫學科研的日益深入與拓展，都對檢驗質量提出了更高的要求，而在預防性質量控制的諸多因素中，標本誤差的控制十分重要。

標本誤差，系指被檢標本在取送及保存過程中引入的誤差，這類誤差在標本正式檢驗之前即已存在。由於臨床醫院的生化血樣多由醫護人員取送，環節多、時間長，部分醫護人員對於標本誤差因素的認識不足而未能重視，這些都可給檢驗質量帶來一定影響。本文從實驗室內外的不同角度，結合臨床上抽送生化血樣的具體情況做一些分析，供臨床同道參考。

『柒』 如何檢測抗凝血效果

【摘要】 目的 比較病人用EDTA抗凝血和枸櫞酸鈉抗凝血檢測PT、INR結果的差異。方法 120位受試對象用枸櫞酸鈉和EDTA抗凝各采兩管血，分離血漿後在STAGO儀器上檢測PT，對兩種抗凝方式所得PT、INR結果進行線性回歸分析，分析其相關性及其結果間有無顯著性差異。結果 以枸櫞酸鈉法測得PT為y，EDTA法測得PT為x，兩者間PT線性方程為y=0.86x-2.8，R2=0.97，PT結果相關性好，但差異有顯著性。INR線性方程為y=0.95x+0.03，R2=0.98，相關性好且差異無顯著性。討論 EDTA抗凝血漿檢測PT在臨床上是可接受的，但前提條件是應建立自己的參考區間，報告INR結果時還應統計EDTA抗凝血的MNPT（正常人平均PT），根據公式INR=（PT/MNPT）ISI計算INR值。

【關鍵詞】 EDTA; 凝血酶原時間

現階段進行凝血項目檢測都是用枸櫞酸鈉抗凝，抽取血液量與枸櫞酸鈉的比例是9：1，在真空采血管中包含固定量的0.3 ml抗凝劑，真空采血管內的負壓保證了從血管中吸出2.7 ml血液。但是在實際情況中偶爾會發生血液量不足的問題，比例發生改變會影響凝血結果[1]。使用EDTA抗凝管可能會解決這個問題，因為EDTA粉末在抗凝過程中幾乎不對血液造成稀釋，也就不會發生稀釋比例的改變。本文研究在於詮釋用EDTA抗凝時所測得的PT、INR結果與枸櫞酸鈉抗凝時的相關性。

1 材料和方法

1.1 儀器和試劑 Stago 公司生產的STA型全自動凝血分析儀，使用Stago 公司配套試劑，配套質控品。Dade-Behring公司生產的INR校準血漿；

1.2 標本來源 收集本院健康體檢者標本60例，男30例，女30例，年齡20～53歲；收集本院心胸外科心臟瓣膜置換術後及其它原因致PT延長病人標本60例，男35例，女25例，年齡21～55歲。

1.3 實驗方法

1.3.1 枸櫞酸鈉抗凝血MNPT的計算 同一儀器使用不同生產廠家、不同批號的凝血活酶試劑所計算出的正常人平均PT（MNPT）值是不一樣的，故我們應重測所用凝血活酶試劑匹配的儀器MNPT值，而不應使用生產廠家給我們提供的MNPT值[2]。計算MNPT需要至少20份正常血漿。本實驗我們挑選60名健康體檢者，經過儀器測試PT值，剔除>2S的數據, 經統計學處理，計算得出枸櫞酸鈉抗凝血的MNPT值。

1.3.2 EDTA抗凝血MNPT的計算 60名健康體檢者的EDTA抗凝血，測試PT結果後，剔除>2S的數據, 經統計學處理，計算得出EDTA抗凝血的MNPT值。

1.3.3 Local ISI(儀器區域國際敏感指數)的建立 儀器不可使用試劑說明書上附帶的ISI值，因為此ISI值是試劑製造商用手工方法所測出的，並非是實驗室儀器對所用批號凝血活酶試劑的Local ISI[3]，所以要重新建立Local ISI。用已標注INR值的校準血漿復溶後，在Stago儀器上測PT 2～3次，得出PT秒數均值，INR=（PT/MNPT）Local ISI，將枸櫞酸鈉及EDTA抗凝血各自的MNPT結果及已知的INR結果代入上式，即可求出Local ISI=lgINR/(lgPT－lgMNPT)，故能分別求出兩種抗凝方式各自的Local ISI。

1.3.4 PT、INR的檢測 本院健康體檢者標本60例，本院心胸外科心臟瓣膜置換術後及其它原因致PT延長病人標本60例用枸櫞酸鈉和EDTA抗凝管各抽一管血，3 500 r/min離心5 min,以制備乏血小板血漿，在4 h內完成檢測。根據公式INR=（PT/MNPT）Local ISI，得到INR值。

1.4 統計學方法 對枸櫞酸鈉和EDTA抗凝所得的各120份標本的PT、INR結果進行線性回歸統計，分析其相關性，並用配對t檢驗分析兩者間是否存在顯著性差異。

2 結 果

2.1 MNPT結果 櫞酸鈉抗凝血MNPT為13.8 s，EDTA抗凝血MNPT為18.6 s。

2.2 Local ISI結果 櫞酸鈉抗凝血Local ISI為1.24，EDTA抗凝血Local ISI為1.33。

2.3 枸櫞酸鈉抗凝血的PT結果為y，EDTA抗凝血的PT結果為x，結果見表1。經線性回歸統計，兩者間PT線性方程為y=0.86x-2.8，R2=0.97, PT結果相關性好，經配對t檢驗，t=-29.8,P=0.0<0.05, 差異有顯著性。

2.4 枸櫞酸鈉抗凝血的INR結果為y，EDTA抗凝血的INR結果為x，結果見表1。經線性回歸統計，兩者間INR線性方程為y=0.95x+0.03，R2=0.98, INR結果相關性好，經配對t檢驗，t=0.699，P=0.492>0.05，差異無顯著性。表1 枸櫞酸鈉與EDTA抗凝血的PT、INR檢測結果

3 討 論

3.1 研究發現PT、INR結果間是有相關性的，在臨床上使用EDTA抗凝管檢測PT是可行的。但同時也發現，PT結果間差異有顯著性，兩種抗凝方式下PT的生物參考區間是不同的，所以要建立EDTA抗凝下PT的參考區間。INR結果間差異無顯著性，因為我們重新計算了EDTA抗凝下的MNPT，從上述結果可見，EDTA抗凝下的MNPT比枸櫞酸鈉抗凝下MNPT要長，通過PT/MNPT在一定程度上消減了EDTA抗凝下PT的延長，INR結果有良好的相關性。因此我們可以報告INR結果或者通過公式換算PT結果y=0.86x-2.8。

3.2 PT結果間的差異主要是因為標本的稀釋不同造成的，因為枸櫞酸鈉抗凝管中存在0.3 ml抗凝劑，血液：抗凝劑=9：1，而EDTA管中抗凝劑是固體粉末，加入血液後幾乎不對血液稀釋，因而抽取血液量的多少十分關鍵，這也是分析前質量控制的一個環節。

3.3 使用EDTA抗凝血的優勢在於抗凝管可與血液學分析使用同一管血液，血樣進行完血液學分析後可分離血漿，用於凝血項目檢測，便於檢驗科儀器自動化的建立。使用一管血液不僅節省抗凝管，而且病人沒有必要抽取更多管血液，也便於醫療廢棄物的處理，不會因為血量的多少造成稀釋不同而影響結果。

3.4 本文使用經過計算的EDTA抗凝下的Local ISI，與枸櫞酸鈉抗凝下的Local ISI是不一樣的，因為現階段沒有EDTA抗凝下的INR定值血漿存在，以後若有INR定值血漿來校準ISI會使得EDTA抗凝的使用更方便，更有市場。

【參考文獻】
[1] 徐愛麗,毛慶民,張樂研.標本採集量對PT、APTT檢測結果的影響[J].臨床軍醫雜志,2007,35(6):913.

[2] 倪贊明，徐明光，王曉明，等.凝血酶原時間ISI/INR系統測定中的一些問題及改進意見[J]檢驗醫學,2006,21(5):492�495.

[3] 許蕾,王學鋒,李泳，等.血漿凝血酶原時間測定中建立儀器區域國際敏感指數的實驗控討[J]檢驗醫學,2004,19(5):441�443.

『捌』 如何制備血清和血漿

血清和血漿均是不含細胞（包括血小板）等有形成分的血液液體部分，其主要區別是血清不含凝血因子和血小板，血漿則含有凝血因子，它們的制備方法如下：

1、血清的制備：獲得的血液不能抗凝，盛於離心管或可以離心的器皿中，靜置或置37℃環境中促其凝固，待血液凝固後，將其平衡後離心（一般為3000rpm，離心 5～10min），得到的上清液即為血清，可小心將上清吸出（注意切勿吸出細胞成分），分裝備用。

2、血漿制備：在盛血的容器中先加人一定比例的抗凝劑（抗凝劑：血液 = 1：9，將血液加到一定量後顛倒混勻，離心（離心條件同上）後所得的上清液即為血漿。初用者最好將上清移至另一清潔容器，吸出血漿時用毛細吸管貼著液面逐漸往下吸，切忌不能吸起細胞成分。

3、富含血小板血漿制備：將獲得的血液經800rpm，離心5min，其上清即為富含血小板血漿。

(8)如何製成不同抗凝比例的標本方法擴展閱讀：

鑒別方法

1、血清

血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內抽出，放入試管中，不加抗凝劑，則凝血反應被激活，血液迅速凝固，形成膠凍。凝血塊收縮，其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清，也可於凝血後經離心取得。在凝血過程中，纖維蛋白原轉變成纖維蛋白塊，所以血清中無纖維蛋白原，這一點是與血漿最大的區別。

而在凝血反應中，血小板釋放出許多物質，各凝血因子也都發生了變化。這些成分都留在血清中並繼續發生變化，如凝血酶原變成凝血酶，並隨血清存放時間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區別之處。但大量未參加凝血反應的物質則與血漿基本相同。為避免抗凝劑的干擾，血液中許多化學成分的分析，都以血清為樣品。

2、血漿

血漿是血液的液體成分，血細胞懸濁於其中。人體含有2750-3300毫升血漿，約占血液總體積的55%。血漿的絕大部分是水（體積的90%），其中溶解的物質主要是血漿蛋白，還包括葡萄糖、無機鹽離子、激素以及二氧化碳。血漿的主要功能是運載血細胞，同時也是運輸分泌產物的主要媒介。

將新鮮血液離心，使血細胞沉降，上層淡黃色清液即是血漿。血漿與血清的區別是血清中不含纖維蛋白原等凝血因子。

參考資料來源：網路-血清

『玖』 交叉配血兩個標本抗凝集可以不一樣嗎

可以治兩個標准抗炎及必須是一樣的不可以