㈠ 培养基灭菌前通常采用什么方法
培养基的灭菌方法
1、高压蒸汽灭菌:
高压蒸汽灭菌适合于耐高温培养基、接种器械和蒸馏水的灭菌。培养基在爱制备过程中混入各种杂菌,分装后应立即灭菌,至少应在24h内完成灭菌工作。灭菌时一般是在0.105MPa压力下,温度121℃时,灭菌15~30min即可。消毒时间不宜过长,也不能超过规定的压力范围,否则有机物质特别是维生素类物质就会在高温下分解,失去营养作用,也会使培养基变质、变色,甚至难以凝固。将蒸馏水或自来水装在三角瓶中,装水量一般不超过瓶的2/3,用牛皮纸或硫酸纸包扎封口,然后放入高压锅中灭菌后即为无菌水。 灭菌后的培养基可放到培养室中预培养3d,若无污染现象,则证明灭菌是彻底的,可以使用。暂时不用的培养基最好置于10℃下保存。含IAA或GA3的培养基应在1周内用完,其他培养基最多也不要超过1个月。
2、过滤灭菌:
一些植物生长调节剂及有机物,如IAA、GA3、ZT、CM等,遇热容易分解,不能与培养基一起进行高温灭菌,而要使用细菌过滤器滤去其中的杂菌。细菌过滤器与滤膜(孔径0.45微米)使用之前要先进行高压灭菌。过滤后的溶液要立即加入培养基中,若为液体培养基,可在培养基冷却至30℃时加入;若为固体培养基,必须在培养基凝固之前(50-60℃)加入,振荡使溶液与其他成分混合均匀。
㈡ 灭菌的具体方法有哪些
干热灭菌
湿热灭菌(饱和蒸汽)
气体灭菌
辐射灭菌法 (X-Rays)
光照灭菌
过氧化氢
出于操作安全和环境保护方面的考虑,气体灭菌在一些国家已经在讨论禁止。
放射灭菌主要对安全的要求非常高,主要用于传统灭菌法不能使用的领域。
过氧化氢灭菌法一般不常用,主要用于表面灭菌。
光照灭菌用的较少,主要是由于认证方面的要求很高。
干热灭菌是蒸汽灭菌的替代方法之一,但主要用于空的玻璃瓶,大量容器,工具的灭菌。
湿热灭菌是成为全世界最常用的灭菌方法。其低廉的操作成本,方便的确认得到大家的广泛认同。
㈢ 在微生物实验室中,对接种环,培养皿,营养肉汤,实验台桌面,无菌室内空气分别采用什么方法进行灭菌
接种环--酒精灯火焰灼烧灭菌
培养皿、营养肉汤--高压灭菌锅里湿热灭菌
实验台桌面--用酒精或消毒剂擦擦,灭菌
无菌室内空气--滤膜过滤空气,臭氧灭菌,紫外线灭菌等等
㈣ 接种环常用的灭菌方法是什么
灭菌指用强烈的物理或化学方法杀灭所有微生物,包括致病的和非致病的,以及细菌的芽胞.常用灭菌方法:灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌法.微生物实验中,接种环常用灼烧灭菌.
故选:B.
㈤ 常用灭菌方法有哪些各有何特点
1、热灭菌法
热灭菌法利用高温使微生物细胞内的一切蛋白质变性,酶活性消失,致使细胞死亡。通常有干热、湿热和间歇加热灭菌等法。
2、干热灭菌
火焰灼烧法或烘箱内热空气灭菌法称为干热灭菌法(dryheatsterilization)。
把金属器械或洗净的玻璃器皿放入电热烘箱内,在150~170℃下维持1~2小时后,可达到彻底灭菌(包括细菌的芽孢)的目的。灼烧(incineration或combustion)是一种最彻底的干热灭菌法,应用范围仅限于接种环、接种针的灭菌或带病原菌的材料、动物尸体的烧毁等。
3、化学试剂灭菌
大多数化学药剂在低浓度下起抑菌作用,高浓度下起杀菌作用。常用5%石炭酸、70%乙醇和乙二醇等。化学灭菌剂必须有挥发性,以便清除灭菌后材料上残余的药物。
化学灭菌常用的试剂有表面消毒剂、抗代谢药物(磺胺类等)、抗生素、生物药物素抗生素是一类有微生物或其他生物生命活动过程中的合成的次生代谢产物或人工衍生物,他们在很低浓度时就能抑制或感染它种生物(包括病原菌,病毒,癌细胞等)的生命活动,因而可用作优良的化学治疗剂。
4、间歇灭菌
间歇灭菌连续3天,每天进行一次蒸气灭菌的方法。此法适用于不能耐 100℃以上温度的物质和一些糖类或蛋白质类物质。一般是在正常大气压下用蒸气灭菌1小时。灭菌温度不超过100℃,不致造成糖类等物质的破坏,而可将间歇培养期间萌发的孢子杀死,从而达到彻底灭菌的目的。
5、辐射灭菌
辐射灭菌在一定条件下利用射线进行灭菌的方法。较常用的有紫外线,其他还有电离辐射(射线加快中子等)。波长在25000~80000纳米之间的激光也有强烈的杀菌能力,以波长26500纳米最有效。辐射灭菌法仅限于某一定材料,因所需设备复杂,难于广泛使用。
㈥ 培养皿的灭菌方法
牛奶一般采用⑥巴氏消毒法;
实验操作者的双手一般用①酒精消毒;
培养基一般采用⑤高压蒸汽灭菌;
培养皿一般采用③干热灭菌;
接种针、接种环一般采用②灼烧灭菌;
接种室需要利用④紫外线灭菌.
故选:C.
㈦ 在微生物的培养过程中,实验室对培养基灭菌常用的方法是________。为防止冷凝
(1)在微生物的培养过程中,实验室对培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌.为防止冷凝水影响细菌的生长,需将培养皿倒置培养.
(2)接种时接种环需要灼烧灭菌;在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线,这样做的目的是通过划线次数的增加,使每次划线时菌体的数目逐渐减少,以便得到单个菌落.每次划线之前及接种之后都要对接种环进行灭菌,因而划5个区域,则需要6次灼烧接种环.该培养基从物理状态上看,属于固体培养基.
(3)检测自来水中大肠杆菌的数量,可选用伊红美蓝培养基,伊红美蓝培养基除了为大肠杆菌的生长繁殖提供水和碳源外,还可以提供氮源和无机盐等基本营养成分.该研究小组在统计菌落数目时,选取菌落数目稳定时的记录作为结果,这样可以防止因培养时间不足而遗漏菌落的数目,图中菌落分布不均匀,由此推测该同学接种时可能的操作失误是涂布不均匀.
故答案为:
(1)高压蒸汽灭菌 倒置
(2)6 固体
(3)氮源和无机盐 培养时间不足 涂布不均匀
㈧ 牛奶、吸管、接种环、培养基、空气灭菌的方式依次是
【答案】A
【答案解析】试题分析:牛奶应用巴氏消毒法,吸管应用干热灭菌,接种环用灼烧灭菌,培养基用高压蒸汽灭菌法,空气用紫外线消毒,故应选A。其余错误。
考点:本题考查灭菌方法和相关知识,意在考察考生对知识点的理解掌握程度。