单核细胞检验科检测方法

❶ 检验科标本采集原则

检验科标本采集原则

检验结果是临床医师在诊疗过程中所需要的重要信息，临床医师可以根据这些检验结果及病人的临床情况来区分疾病的不同阶段，观察疾病的变化，判断预后或观察疗效。所以分析前阶段样本的质量保证是直接关系到检验结果能否真实客观地反应患者当前病情的一个重要环节。下面是我为大家带来的检验科标本采集原则，欢迎阅读。

一、病人准备

1.病人状态

一般需在安静状态下采集标本，如患者处于高度紧张的状态时，可使血红蛋白、白细胞增高。由于劳累或受冷等刺激、也可见白细胞的增高。运动能影响许多项目的测定结果。活动的影响可分暂时和持续性两类。暂时性影响如使血浆脂肪酸含量减少;丙氨酸、乳酸含量增高。持续性影响，如激烈运动后使CK、LDH、ALT、AST和GLU等的测定值升高，有些恢复较慢，如ALT在停止运动1h后测定，其值仍可偏高30%～50%。

2.饮食

多数试验要求在采血前禁食12h，因为饮食中的不同成分可直接影响实验结果。

(1) 餐后血液中TG、ALT、GLU、BUN、Na等均可升高，进食高蛋白或高核酸食物，可以引起血中的尿素氮(BUN)和尿酸(UA)的增高。进食高脂肪食物后采集的血液样本，其血清会出现浑浊，可影响许多检验测定的正确性。甚至喝含咖啡的饮料，可引起淀粉酶(AMS)、AST谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)等升高。但空腹时间过长，会使GLU，蛋白质降低，而胆红素升高。

(2) 高脂餐后2～4h采血，多数人ALP含量增高，主要来自肠源性同工酶，且与血型有密切关系，O型或B型兼为Le+分泌型者增高更为明显。

(3) 高蛋白质饮食可使血浆尿素、血氨增加，但不影响肌酐含量。

(4) 高比例不饱脂肪酸食物，可减低胆固醇含量;香蕉、菠萝、番茄可使尿液5-羟色胺增加数倍。

(5) 含咖啡因饮料，可使血浆游离脂肪酸增加，并使肾上腺和脑组织释放儿茶酚胺。食物如含有动物血液，可引起粪隐血假阳性。

(7) 饮酒后使血浆乳酸、尿酸盐、乙醛、乙酸等增加，长期饮酒者高密度脂蛋白胆固醇偏高、平均血细胞体积增加、谷氨酰转肽酶亦较不饮酒的病人为高，甚至可以将这三项作为嗜酒者的筛选检查。

吸烟：瘾大者血液一氧化碳血红蛋白含量可达8%，而不吸烟者含量在1%以下。此外，儿茶酚胺、血清可的松亦较不吸烟者为高，血液学方面亦有变化，白细胞数增加、嗜酸粒细胞减少、中性粒细胞及单核细胞增多、血红蛋白偏高、平均红细胞体积偏高。吸烟组血浆硫氰酸盐浓度明显高于非吸烟组。

3.药物

药物对检验的影响非常复杂，在采样检查之前，以暂停各种药物为宜，如某种药物不可停用，则应了解可能对检验结果产生的影响。庆大霉素、氨芐青霉素可使谷丙转氨酶活性增高、咖啡因可使胆红素增加、维生素C可使血糖、胆固醇、甘油三脂、尿酸严重降低。

4.体位

体位影响血液循环，由于血液和组织间液因体位不同而平衡改变，则细胞成分和大分子物质的改变较为明显，例如由卧位改为站位，血浆ALB、TP、酶、Ca、胆红素、Tch及TG等浓度增高;Hb、HCT、RBC等亦可增加。由于体位的`因素，在确立参考值时，应考虑门诊和住院病人可能存在的结果差异，故采集标本时要注意保持正确的体位和保持体位的一致性。

5.时间

病人准备还应考虑病人的生物钟规律，特别是激素水平分析，如女性生殖激素与月经周期密切相关;胆固醇则在经前期最高，排卵时最低;纤维蛋白原在经前期最高，血浆蛋白则在排卵时减少。生长激素于入睡后会出现短时高峰。胆红素、血清铁以清晨最高;血浆蛋白在夜间降低;血Ca往往在中午出现最低值。故采血时间应在相同时间进行。

二、标本采集

标本采集是直接关系检验结果的基本要素，如果标本采集不当，即使最好的仪器设备也难以弥补在采集标本时引入的误差和错误。

现将各种标本的采集要点分述如下：

(一) 血液标本

1.标本采集注意事项：

(1) 采静脉血时止血带结扎过久，可引起误差。如以结扎1min的样品结果为基数，则结扎3min，可使血浆总蛋白增加5%，胆固醇增加5%，铁增加6%，胆红素增加8%，乳酸则不能使用止血带。

(2) 血清标本应避免溶血。许多物质红细胞内和血清中(血浆)的含量是不一样的。如ALT红细胞内比血清高出数倍。血钾、AST高出几十倍，而HDH则高出百倍以上，一旦溶血，特别是严重溶血，造成血清(浆)中这些物质的测定值增高，干扰测定结果。

(3) 要特别注意采血不能在输液的同侧进行，更应杜绝在输液管内采血，因输液成分会影响检测结果(使相应的结果偏高，如输K+、Glu时，可使所测K+、Glu明显增高)，或使血液稀释结果偏低。

细胞培养的样品要采用无菌技术，防止污染。

(4) 标本采集后，必须在试管或容器上帖上检验申请单号码、住院病人应有床号、姓名，且应当场核对无误。

(5) 采血顺序 摘自北京协和医院检验科《检验样本留取及采集指南》

推荐采用直针采血方式，顺序如下：

①血培养管，②凝血项目管(蓝帽)，③血沉管(黑帽)，④血清管(红帽或黄帽)，⑤肝素血浆管(绿帽)，⑥EDTA 管(紫帽)，⑦ 抑制血糖酵解管(灰帽)

注：采用注射器采集血培养时，厌氧瓶优先。

特殊情况采用蝶翼方式采血，且无血培养管时，顺序如下：

①白帽管(弃置管，也可送检生化免疫项目)，②凝血项目管(蓝帽)，③血沉管(黑帽)，④血清管(红帽或黄毛)，⑤肝素血浆管(绿帽)，⑥EDTA 管(紫帽)，⑦ 抑制血糖酵解管(灰帽)

注：采用蝶翼方式采集血培养时，需氧瓶优先。

在实际工作中，如患者静脉条件较差，有可能采血不足，血培养优先考虑需氧管，其它管应首先考虑凝血(蓝帽)和血沉(黑帽)检测管，因为这两种标本对血量要求最严格，且二者抗凝剂均为枸橼酸钠。

(二) 尿液标本

根据采集时间可分为清晨空腹尿、随机尿、计时尿(2h、3h、12h、24h等)、午后尿、餐后尿、症状典型时尿等。

(1) 晨尿为住院病人留尿的主要方法，早晨起床后收集第一次尿，可用尿常规检验。

(2) 随机尿多为门诊就诊病人的留尿检验方法。

(3) 餐后尿为收集进餐后2h尿，主要用于了解葡萄糖代谢情况，用以筛查隐性糖尿病或轻症糖尿病。

(4) 计时尿应于计时开始时排空尿液，然后于规定时间内至截止时间留尿，计时尿多用于肾功能和有形成分排出率的评估，亦用于计算淀粉酶或肌酐的排出率。

(三) 粪便标本

采集后及时送检，如作原虫阿米巴检查应保持一定的温度，且立即送检，立即检查，如检查蛲虫则不必送检粪样，而应于晨起时排便前用棉拭擦肛门周围，可得虫卵。粪便标本应不污染容器外表，一般以无滤漏容器留取5～10g即可。

(四) 脑脊液、浆膜腔液、关节液

均由临床医师穿刺采样，检验科应提供专用的各种试管或容器，及时送送检。

(五) 痰液标本

采集晨间第一口痰，多用于细胞学及微生物学检查。采样前应先反复漱口，经深呼吸数次后用力咳痰，不可吐入唾液。微生物培养取样应在抗生素等药物治疗开始之前，如已使用用抗菌药物，则应选血液药物浓度最低水平时采样。

(六) 阴道分泌物

由妇产科医师采样后即时送检，否则影响滴虫动力，易于漏检。

(七) 其他标本

根据具体检验项目而定，临床医师在开申请单前，应同检验科相关部门联系并询问详细后，注明检查要求，再采样并及时送检。

总之，各种检验标本的采集合适与否，直接关系检验质量，应予以重视。

三、标本保存和运送

标本保存和运送是检验质量保证的重要环节之一。由于采集的标本受各种因素的影响，可能使检验结果受或大或小的误差，因此必须正确掌握标本保存和运送。标本采集后尽量立即送检，如在室温放置时间过长会造成血液成分的变化(如血糖及酶活性降低)，也可造成溶血现象。

(1) 采样后须立即送检的常规项目：血氨、血沉、血气分析、酸性磷酸酶、乳酸以及各种细菌培养，特别是厌氧菌培养。

(2) 采样后0.5h内送检的常规项目：血糖、电解质、血液细胞学、凝血试验、体液细胞学、涂片找细菌、霉菌等。

(3) 采样后1～2 h内送检的常规项目：各种蛋白质类、色素类、激素类、脂类、酶类、抗原、抗体测定等。

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❷ 请教：小鼠单个核细胞分离及Ficoll

单核细胞（monocytes）是体积最大的白细胞.其细胞核常偏位,呈多形性,如卵圆形、肾形、马蹄形、不规则形等,常有折叠感；染色质呈疏松网状,着色较浅.胞质较多,嗜碱性,但因含大量细小的嗜天青颗粒而染成灰蓝色,颗粒含过氧化物酶.血涂片,Giemsa染色 .
单个核细胞是指只有一个细胞核的细胞.一般医学检验书上说的是“外周血中单个核的白细胞”包括“淋巴细胞和单核细胞”.外周血单个核细胞（Peripheral blood mononuclear
cell,PBMC)即外周血中具有单个核的细胞,包括淋巴细胞和单核细胞.体外检测淋巴细胞首先要分离外周血单个核细胞,目前主要的分离方法是
Ficoll-hypaque（葡聚糖－泛影葡胺）密度梯度离心法,因为血液中各有形成分的比重存在差异,因此得以分离.红细胞和
粒细胞密度大于分层液,同时因红细胞遇到Ficoll而凝集成串钱状而沉积于管底.血小板则因密度小而悬浮于血浆中,唯有与分层液密度相当的单个核细胞密
集在血浆层和分层液的界面中,呈白膜状,吸取该层细胞递经洗涤高心重悬.本法分离单个核细胞纯度可达95%,淋巴细胞约占90%～95%,细胞获得率可达
80%以上,其高低与室温有关,超过25℃时会影响细胞获得率.

❸ 单核细胞是否单个核细胞如果不是，二者有何联系

单核细胞（monocytes）体积白细胞.其细胞核偏位,呈形性,卵圆形、肾形、马蹄形、规则形等,折叠；染色质呈疏松网状,着色较浅.胞质较,嗜碱性,含量细嗜青颗粒染灰蓝色,颗粒含氧化物酶.血涂片,Giemsa染色 .
单核细胞指细胞核细胞.般医检验书说外周血单核白细胞包括淋巴细胞单核细胞.外周血单核细胞（Peripheral blood mononuclear
cell,PBMC)即外周血具单核细胞,包括淋巴细胞单核细胞.体外检测淋巴细胞首先要离外周血单核细胞,目前主要离
Ficoll-hypaque（葡聚糖－泛影葡胺）密度梯度离,血液各形比重存差异,离.红细胞
粒细胞密度于层液,同红细胞遇Ficoll凝集串钱状沉积于管底.血板则密度悬浮于血浆,唯与层液密度相单核细胞密
集血浆层层液界面,呈白膜状,吸取该层细胞递经洗涤高重悬.本离单核细胞纯度达95%,淋巴细胞约占90%～95%,细胞获率达
80%,其高低与室温关,超25℃影响细胞获率.

❹ 人血单核细胞的提取方法

DNA和RNA的提取，您可采用现有的试剂盒方便快捷，对于血样DNA的提取步骤如下，可参考：
(1) 冷冻血样(主要为血细胞)室温解冻，个转移500 μL至1.5 mL Eppendorf管，加入等体积PBS液，充分混匀，12 000 r/m离心10 min (4℃)，弃去上清液，重复上述步骤至上清夜透明、沉淀呈淡黄色。
(2) 在离心管中加入DNA抽提缓冲液500 μL，摇动，使血细胞沉淀脱离离心管管壁，37℃水浴1 h。
(3) 加蛋白酶K 5 μL (20 mg/mL)并混匀，55℃过夜至澄清，尚未澄清者，可补加5 μL蛋白酶K混匀继续消化直至澄清。
(4) 将反应液冷却至室温，加Tris-饱和酚500 μL，温和摇动离心管20 min，使其充分混匀；4℃，12000 r/m离心10 min，将上清液转入另一1.5 mL离心管中，重复一次。
(5) 加氯仿500 μL，充分混匀20 min，4℃，12000 r/m离心10 min，将上清液转入另一1.5 mL离心管中。
(6) 加氯仿和异戊醇混合液(24:1) 500 μL，充分混匀20 min，4℃，12000 r/m离心10 min，将上清液转入另一1.5 mL离心管中。
(7) 加0.1倍体积的NaAc缓冲液及2倍体积的冰冷的无水乙醇，混合转动离心管直至白色的絮状沉淀析出，-20℃保存30 min～60 min。
(8) 4℃，12000 r/m离心10 min，弃上清液，用体积分数70%的冷乙醇漂洗DNA沉淀2次。
(9) 4℃，12000 r/m离心10 min，弃上清液，室温下使乙醇挥发干净，约3～4 h。
(10)干燥后的DNA溶于80～100 μL的TE液，4℃保存直至DNA完全溶解。
(11) 8 g/L琼脂糖凝胶电泳检测其质量，待分光光度计测定浓度后，-80℃保存不知道对你有没有帮助

❺ 五分类血细胞分析指的是什么

将血液中的白细胞分成五个类别：中性杆状核粒细胞、中性分叶核粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞，通过一些仪器的检测对红细胞、白细胞等进行分析的技术。

而其发展离不开库尔特兄弟的库尔特原理，因此大量血细胞分析仪在各国的实验室里发挥着作用。常用的设备为半自动或全自动生化检测仪。

(5)单核细胞检验科检测方法扩展阅读

检测方法

1、阻抗、激光散射和荧光染色技术检测法

直流电阻抗法（DC）用于测量细胞体积大小。这种技术主要应用在Sysmex研制和开发的SE-9000、SE-9500、XE-2100、XT-1800等系列血液分析仪中，中仪康辉（北京）国际贸易有限公司为该系列产品国内部分区域分销商。

2、电阻抗和射频电导联合检测法

这种方法是分别采用四个检测系统来检测不同类型的细胞：淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞检测系统、嗜酸性细胞和嗜碱性细胞两种检测系统、幼稚细胞检测系统。

3、多角度激光偏振光散射检测法

采用这种技术的仪器使用鞘流液将标本血稀释，稀释后白细胞的内部结构近似于自然状态，只有嗜碱性细胞由于其吸湿的特性而使细胞结构有轻微改变。

4、采用图像分析的单纯细胞检测法

该技术采用图像分析法，将血片染色，用含有扫描镜头的显微镜扫描每个视野，将获取的细胞图像与仪器内存储的标准图像进行对照分析，判断该细胞的类型。

❻ 血常规检查方法包括哪些项目

血常规检查即传统的血常规检查，现在统称为血液分析，血液分析有两种方法，即手工法和仪器分析法。手工法为传统方法，用显微镜检测，包括血红蛋白、红细胞计数、白细胞计数和白细胞分类等四项。仪器分析法则除上述四项外，根据仪器的性能不同，并因白细胞分类不同而分为二分类机、三分类机和五分类机，通常以三分类为多。三分类机检查的各项参数见例表。 血液分析参考值(包括仪器分析法和手工法) 检查项目 英文缩写 正常参考值 血红蛋白 HGB或Hb 男(120-160)g/L 女(110-150)g/L 红细胞计数 RBC 男(4.0-5.5)×1012/L 女(3.5-5.0)×1012/L 红细胞压积 HCT 男(0.40-0.54)L/L 女(0.37-0.48)L/L 平均红细胞体积 MCV (80-92)fk 平均红细胞血红蛋白含量 MCH (27-31)pg 平均红细胞血红蛋白浓度 MCHC (320-360)g/L 红细胞分布宽度 RDW 11.6-14.8% 血小板计数 PLT或BPC (100-300)×109/L 血小板压积 PCT 男0.108%-0.272% 女0.114%-0.282% 平均血小板体积 MPV (6.8-13.5)fk 血小板分布宽度 PDW 15.5%-18.1% 白细胞计数 WBC 成人(4-10)×109/L 儿童(5-12)×109/L 新生儿(15-20)×109/L 分类 DC ＾ 嗜中性粒细胞百分数 N或GRAN 50%-70% 嗜中性粒细胞绝对值 N或GRAN (2-7)×109/L 嗜酸性粒细胞百分比 E或EOS 0.5%-5.0% 嗜酸性粒细胞绝对值 E或EOS (0.02-0.5)×109/L 嗜碱性粒细胞百分比 B或BASO 0-1% 嗜碱性粒细胞绝对值 B或BASO (0-0.1)×109/L 单核细胞百分比 M或MONO 3-8% 单核细胞绝对值 M或MONO (0.12-0.8)×109/L 淋巴细胞百分数 L或LYM 20%-40% 淋巴细胞绝对值 L或LYM (0.8-4.0)×109/L 中间值细胞百分数 MID 3-10% 中间值细胞绝对值 MID (0.3-1.0)×109/L (文章出处：家庭医生报 2001年第28期)

❼ 传染性单核细胞增多症的检查

血白细胞总数正常、升高或减少，可先正常或减少，1周末升高，淋巴细胞增多，血涂片中异型淋巴细胞比例≥10%。血清EB病毒抗体测定，早期抗原（EA）-IgG效价≥1：20，病毒衣壳抗原（VCA）-IgM阳性或效价≥1：10，VCA-IgG效价≥1：160，或VCA-IgG在恢复期比急性期升高4倍以上，EB核抗原在病程3～4周阳性。分子生物学方法检测血液、唾液、口腔上皮细胞、尿液中的EB病毒DNA阳性。骨髓检查基本正常。
此外还可行肝脾B超检查。出现并发症时，可进行相应的检查如X线胸片、心电图等。

❽ 单核细胞是什么

单核细胞是血液中最大的血细胞，也是体积最大的白细胞，是机体防御系统的一个重要组成部分。单核细胞来源于骨髓中的造血干细胞，并在骨髓中发育，当它们从骨髓进入血液时仍然是尚未成熟的细胞。

目前认为它是巨噬细胞和树突状细胞的前身，具有明显的变形运动，能吞噬、清除受伤、衰老的细胞及其碎片。单核细胞还参与免疫反应，在吞噬抗原后将所携带的抗原决定簇转交给淋巴细胞，诱导淋巴细胞的特异性免疫性反应。

(8)单核细胞检验科检测方法扩展阅读

与其他血细胞比较，单核细胞内含有更多的非特异性脂酶，并且具有更强的吞噬作用。当机体发生炎症或其他疾病都可引起单核细胞总数百分比发生变化，因此检查单核细胞计数成为辅助诊断的一种重要方法。

单核细胞也是对付细胞内致病细菌和寄生虫的主要细胞防卫系统，还具有识别和杀伤肿瘤细胞的能力。

正常值参考范围

1.单核细胞百分比（MONO%）：0.03～0.08（3%～8%）

2.单核细胞绝对值（MONO#）：(0.12～0.8)×10^9/L