设计簿层色谱法鉴别洋金花方法

Ⅰ 薄层色谱法的原理

薄层色谱法的原理：薄层色谱法利用各成分对同一吸附剂吸附能力不同，使在流动相（溶剂）流过固定相（吸附剂）的过程中，连续的产生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附，从而达到各成分的互相分离的目的。
薄层色谱法（TLC）系将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上，成一均匀薄层。待点样、展开后，根据比移值（Rf）与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值（Rf）作对比，用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。薄层色谱法是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术，也用于跟踪反应进程。

Ⅱ 薄层色谱法用于杂质检查常用的方法有哪些

杂质对照法,供试品对照法,对照药物法,显色剂.
薄层色谱法(TLC)，系将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上，成一均匀薄层。待点样、展开后，根据比移值(Rf)与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值(Rf)作对比，用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。薄层色谱法是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术，也用于跟踪反应进程。

Ⅲ 下面是我在一个药材网上看到的资料，大惑不解。洋金花与曼陀罗花不是同一种植物

【拉丁名】 Flos Daturae

【英文名】Upright Datura Flower

【别名】曼陀罗、羊惊花、山茄花、风茄花、枫茄花、醉仙桃、大麻子花、广东闹羊花、大喇叭花、金盘托荔枝、假荔枝

【来源】本品为茄科植物白花曼陀罗 Datura metel L.的干燥花。4～11 月花初开时采收，晒干或低温干燥。

亦可用同属其它植物的花，如曼陀罗、毛曼陀罗等。

【产地】栽培或逸为野生。主产江苏，广东、浙江、安徽亦产。

【植物形态】一年生草本，高30～200cm，近无毛。叶互生，茎上部近对生，卵形或宽卵形，长30～200cm，近无毛。叶互生，茎上部近对生，卵形或宽卵形，长5～19cm，宽4～12cm，先端尖，基部不对称，全缘、微波状或每边具3～4短齿；叶柄长2～7cm。花单生，花冠漏斗状、白色，檐部5裂，栽培品常有重瓣；雄蕊5～15。蒴果扁球形，直径约3cm，表面疏生短硬刺，成熟后不规则开裂。花果期4～11月。

【性状】本品多皱缩成条状，完整者长9～15cm 。花萼呈筒状，长为花冠的2/5,灰绿色或灰黄色，先端5 裂，基部具纵脉纹5 条，表面微有茸毛；花冠呈喇叭状，淡黄色或黄棕色，先端5 浅裂，裂片有短尖，短尖下有明显的纵脉纹3 条，两裂片之间微凹；雄蕊5,花丝贴生于花冠筒内，长为花冠的3/4 ；雌蕊1 ，柱头棒状。烘干品质柔韧，气特异；晒干品质脆，气微，味微苦。

【鉴别】

（1） 本品粉末淡黄色。花粉粒类球形或长圆形，直径42～65μm,表面有条纹状雕纹。花萼非腺毛1～3细胞，壁具疣状突起，腺毛头部1～5细胞，柄1～5细胞。花冠裂片边缘非腺毛1～10 细胞，壁微具疣状突起。花丝基部非腺毛粗大，1～5细胞，基部直径约至128μm，顶端钝圆。花萼、花冠薄壁细胞中有草酸钙砂晶、方晶及簇晶。

（2） 取本品粉末1g，加浓氨试液1ml ，混匀，再加氯仿25ml，摇匀，放置过夜，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿1ml 使溶解，作为供试品溶液。另取硫酸阿托品与氢溴酸东莨菪碱对照品，加甲醇制成每1ml 各含4mg 的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录Ⅵ B）试验，吸取上述两种溶液各10μl ，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯－甲醇－浓氨试液（17:2:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

【化学成分】含多种莨菪烷类生物碱，以东莨菪碱（scopolamine）含量较高，莨菪碱（hyoscyamine）少量。

【含量测定】

取本品细粉约10g ，于60℃干燥4 小时，精密称定，置索氏提取器中，加乙醇－浓氨试液－乙醚（5:4:10）的混合液使湿润，放置 12 小时，加乙醚70ml，加热回流约 3小时，至生物碱提尽，提取液置水浴上蒸去大部分乙醚，加入0.25mol/L硫酸溶液25ml 混合，继续蒸发除尽乙醚，放置至溶液微温时，用脱脂棉滤过，滤液置分液漏斗中，滤渣先用0.25mol/L硫酸溶液5ml 洗涤，再用水10ml分2次洗涤，洗液与酸液合并，用氯仿分次振摇提取（10ml、5ml、5ml），至氯仿层无色，合并氯仿液，用0.05mol/L硫酸溶液10ml 振摇提取，弃去氯仿液，合并前后得到的两次酸液，用浓氨试液中和后，再多加2ml，迅速用氯仿分次振摇提取（20ml、15ml、15ml、10ml、5ml） ，至生物碱提尽，每次氯仿提取液均通过同一放有无水硫酸钠的滤器滤过，滤器用氯仿4ml 洗涤2次，合并氯仿液，在水浴上蒸去氯仿，残渣中加中性乙醇3ml,蒸干，再继续加热15分钟。残渣加氯仿2ml ，微热使溶解，精密加入硫酸滴定液（0.01mol/L）20ml,置水浴上加热，除去氯仿，放冷，加甲基红指示液2～3滴，用氢氧化钠滴定液（0.02mol/L） 滴定至黄色。每1ml 硫酸滴定液（0.01mol/L） 相当于 6.068mg的东莨菪碱（C17H21NO4）。

本品于60℃干燥4 小时，含生物碱以东莨菪碱（C17H21NO4） 计，不得少于0.30％。

【性味归经】味辛，性温；有毒。归心、肺、肝经。

【功能主治】平喘止咳，镇痛，解痉。用于哮喘咳嗽，脘腹冷痛，风湿痹痛，小儿慢惊；外科麻醉。

【用法用量】 0.3～0.6g ，宜入丸散，亦可作卷烟分次燃吸（一日量不超过1.5g）。外用适量。

【注意】外感及痰热咳喘、青光眼、高血压及心动过速患者禁用。

【贮藏】置干燥处，防霉，防蛀。

【备注】（1）中毒可出现口干，皮肤干燥，瞳孔散大，脉快，颜面潮红，甚则使血压下降而致死。解救可服吐剂，洗胃并服鞣酸制剂，后给以盐类泻剂，强心剂，镇静剂。亦有用绿豆皮4两，金银花2两，连翘1两，甘草5钱。水1000毫升，煎至200毫升，1次服，每2小时服1次。

【摘录】《中国药典》

Ⅳ 薄层色谱法的操作步骤及注意事项

薄层色谱法的操作步骤及注意事项如下：
1、薄层板点样后，应待溶剂挥发完，再放人展开室中展开。
2、展开应密闭，展距一般为8~15cm。薄层板放入展开室时，展开剂不能没过样点。一般情况下，展开剂浸入薄层下端的高度不宜超过0.5cm。
3、展开剂每次展开后，都需要换，不能重复使用。
4、展开后的薄层板用适当的方法，使溶剂挥发完全，然后进行检视。
5、Rf值一般控制在0.3~0.8，当Rf值很大或很小时，应适当改变流动相的比例。
注意事项：铺板用的匀浆不宜过稠或过稀：过稠，板容易出现拖动或停顿造成的层纹；过稀，水蒸发后，板表面较粗糙匀浆配比般是硅胶G：水=1：2～3，硅胶G：羧甲基纤维素钠水溶液=1：2。研磨匀浆的时间，根据经验来定，与空气湿度有关，一般通过拿起研棒时匀浆下滴的情况来判断，越稠越难下滴。匀浆的稀稠除影响板的平滑外，也影响板涂层的厚度，进一步影响上样量。涂层薄，点样易过载；涂层厚，显色不那么明显。通常，板的质量对薄层鉴别的影响不是很，影响最大的是展开剂的配制和展开系统的饱和。

Ⅳ 什么叫薄层色谱法原理是什么！！急！！

一、薄层色谱法

薄层色谱法是一种吸附薄层色谱分离法，它利用各成分对同一吸附剂吸附能力不同，使在流动相（溶剂）流过固定相（吸附剂）的过程中，连续的产生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附，从而达到各成分的互相分离的目的。

二、薄层色谱法的基本原理

例如用硅胶和氧化铝作支持剂，其主要原理是吸附力与分配系数的不同，使混合物得以分离。当溶剂沿着吸附剂移动时，带着样品中的各组分一起移动，同时发生连续吸附与解吸作用以及反复分配作用。

由于各组分在溶剂中的溶解度不同，以及吸附剂对它们的吸附能力的差异，最终将混合物分离成一系列斑点。如作为标准的化合物在层析薄板上一起展开，则可以根据这些已知化合物的Rf值（后面介绍Rf值）对各斑点的组分进行鉴定，同时也可以进一步采用某些方法加以定量。

(5)设计簿层色谱法鉴别洋金花方法扩展阅读：

薄层色谱法（TLC）薄层色谱具有选用范围广，重现性好等优点，常用于中药各种成分的鉴别。

用固定波长对薄层展开的各斑点作薄层扫描图谱比目测的层析图谱更为客观准确，因而具有更好的指纹鉴别意义。但由于受薄层板的质量和开放式层析系统等外界因素的影响，易引起一定的实验误差。

薄层色谱法与纸层析和纸层析比较TLC快速、分离效率高、灵敏度高、显色方法多样、图像易保存。

Ⅵ 如何保证所建立的薄层色谱鉴别方法的专属性

如何建立薄层色谱法测定有关物质的方法
有关物质是研究药品中除主成分以外的杂质，它可能是原料药合成过程中带入的原料、中间体、试剂、降解物、副产物、聚合体、异构体以及不同晶型、旋光异构的物质，也可能是制剂过程中产生的降解物，或是在贮藏、运输、使用过程中产生的降解物等。这些杂质的存在直接反映药品的有效性和安全性，故要对其进行研究，特别是在药品申报的质量研究资料中需建立其检测方法，并根据生产、稳定性考核等实际情况考虑是否在质量标准中制订该检查项，规定其限度。目前，有关物质的常用测定方法有高效液相色谱法(HPLC法)和薄层色谱法(TLC法)。
1．测定方法类型
常用的方法有杂质对照品法（适用于已知杂质）和自身（稀释）对照法（适用于一般杂质检查，杂质成分少且尚不能取得杂质对照品）。目前国内由于难以获得杂质对照品、故一般均采用自身对照法。
2．展开剂的确定（即专属性试验）
专属性的研究是提供被分析物在杂质和辅料存在时能被区分的证明，该点是色谱条件建立的关键。通常采用在被分析物的对照品或精制品中加入一定量的杂质或辅料，证明色谱条件可将各杂质与被分析物分离[1]。这里的关键是：将多少量的杂质加入到多少量的主成分中。正确的作法是将1%(w/w)浓度量的各杂质加入到100%浓度的主成分中，配制这样的溶液来
验证系统适用性。之所以如此配制，目的是模仿样品中有可能存在的状态，即有少量（1%左右）杂质存在时是否能与主成分达到完全分离，只有这样才能比较客观、科学地反映样品中实际存在情况的（见图1）；而不应把该溶液配制成：主成分与中间体相同浓度的。因为一者实际检测时样品中不可能存在此种情况；二者该浓度不易确定，目前国内申报资料中一般的作法均是配制成较低的一致浓度，这样各斑点当然易于完全分离了，但在实际测定时，由于主斑点急剧增大，很易将相邻杂质包含于主成分斑点中。同样，质量标准中的系统适用性试验用溶液的配制方法亦如此。
3．检出条件的确定

其基本出发点是：主成分与相关杂质均应在该条件下显色，且在相同浓度下，斑点大小应基本一致。薄层板的类型根据被测物质的性质来选用，测定有紫外吸收的物质通常选用GF254或GF365板；测定无紫外吸收、需喷显色剂的，常选用硅胶G板或H板，选用该类薄层板时，显色方法根据被测物质的结构式选取，但当有多个显色方法时，应分别进行试验，选取灵敏度最高的显色方法。如醋酸氢化可的松有关物质的测定，中国药典2000年版采用碱性四氮唑蓝试液显色，美国药典26版采用硫酸-乙醇(10:90)溶液显色，两者均为激素类药物的显色方法。醋酸氢化可的松属于激素类中的肾上腺皮质激素，四氮唑法是肾上腺皮质激素的重要显色方法；而硫酸-乙醇显色法则主要是针对激素类中的雌激素的显色反应，对于属于肾上腺皮质激素类的醋酸氢化可的松则反应活性不强，结果两法的灵敏度相差10倍以上。因此，检出条件的确定，一定要在查阅文献的基础上，并根据试验结果进行综合考虑。
4．供试品溶液浓度的确定（灵敏度试验——最低检出限的测定）
供试品溶液浓度的设定在有关物质检测中是至关重要的，浓度越高、越能反映样品中杂质存在的情况，但若设定得过高，则会产生主斑点严重拖尾、“断腰”等超载现象的发生，产生错误结论；若设定太低，又将达不到检测杂质的目的，观测不到杂质量的变化。其设定是根据最低点样量和最大点样量来综合考虑的。

最低检出限虽然是个绝对值，但真正的意义却是其相对值，即相对于供试品溶液的浓度多少而言，所以测定结果不仅要罗列出其绝对值又应列出其相对值，这样最低检出限才有意义！最大点样量则是通过不断加大供试品溶液浓度，直至主斑点严重拖尾、“断腰”等情况出现时来得到的。然后根据最低检出限，采用“上推法”来确定：如一般设定杂质斑点小于1.0%对照斑点，对照溶液的浓度至少应为最低检出浓度（即最低检出限）的20~50倍，则供试品溶液浓度是最低检出浓度的2000~5000倍；反过来，最低检出浓度应至少达到供试品溶液浓度的0.02%~0.05%。应注意的是：由于最低检出量和最大点样量因试验环境、薄层板质量以及即时试验时其他各因素的不同而改变（即耐受性因数），故供试品溶液的浓度在保证小于最大进样量的情况下，可在此基础上设定得再高一些，以保证该浓度可适用于各种条件下。。

Ⅶ 薄层色谱法的操作

除另有规定外，将1份固定相和3份水在研钵中向一方向研磨混合，去除表面的气泡后，倒入涂布器中，在玻板上平稳地移动涂布器进行涂布（厚度为0.2～0.3mm），取下涂好薄层的玻板，置水平台上于室温下晾干，后在110℃烘30分钟，即置有干燥剂的干燥箱中备用。使用前检查其均匀度（可通过透射光和反射光检视）。
手工制板一般分不含粘合剂的软板和含粘合剂的硬板俩种。
常用吸附剂的基本情况：颗粒的大小，太大洗脱剂流速快分离效果不好，太细溶液流速太慢。一般说来吸附性强的颗粒稍大，吸附性弱的颗粒稍小。氧化铝一般在100-150目。氧化铝分为碱性氧化铝，适用于碳氢化合物、生物碱及碱性化合物的分离，一般适用于PH为9-10的环境。中性氧化铝适用于醛、酮、醌、酯等PH约为7.5的中性物质的分离。酸性氧化铝适用于PH4~4.5的酸性有机酸类的分离。氧化铝、硅胶根据活性分为五个级，一级活性最高，五级最低。
黏合剂及添加剂：为了使固定相（吸附剂）牢固地附着在载板上以增加薄层的机械强度，有利于操作，需要时在吸附剂中加入合适的黏合剂：有时为了特殊的分离或检出需要，要在固定相中加入某些添加剂。
薄层板的活化：硅胶板于105-110℃烘30分钟，氧化铝板于150-160℃烘4小时，可得活性的薄层板。 除另有规定外，用点样器点样于薄层板上，一般为圆点，点样基线距底边2.0cm，样点直径及点间距离同纸色谱法，点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜。点样时必须注意勿损伤薄层表面。
点样直径不超过5mm，点样距离一般为1~1.5cm即可。
样品在溶剂中的溶解度很大，原点将呈空心环——环形色谱效应。因此配制样品溶液时应选择对组分溶解度相对较小的溶剂。
点样方式有点状点样和带状点样。
展开剂也称溶剂系统，流动性或洗脱剂，是在平面色谱中用作流动相的液体。展开剂的主要任务是溶解被分离的物质，在吸附剂薄层上转移被分离物质，使各组分的Rf值在0.2~0.8之间并对被分离物质要有适当的选择性。作为展开剂的溶剂应满足以下要求：适当的纯度、适当的稳定性、低黏度 、线性分配等温线、很低或很高的蒸气压以及尽可能低的毒性。
展开方式总的来讲平面色谱的展开有线性、环形及向心3种几何形式。
A 单次展开 用同一种展开剂一个方向展开一次，这种方式在平面色谱中应用最为广泛。（垂直上行展开，垂直下行展开，一向水平展开，对向水平展开）
B 多次展开 单向对此展开，用相同的展开剂沿同一方向进行相同距离的重复展开，直至分离满意，广泛应用于薄层色谱法
C 双向展开 用于成分较多、性质比较接近的难分离组分的分离。
薄层展开室需预先用展开剂饱和，可在室中加入足够量的展开剂，并在壁上贴二条与室一样高、宽的滤纸条，一端浸入展开剂中，密封室顶的盖，使系统平衡或按正文规定操作。将点好样品的薄层板放入展开室的展开剂中，浸入展开剂的深度为距薄层板底边0.5～1.0cm（切勿将样点浸入展开剂中），密封室盖，待展开至规定距离（一般为10～15cm），取出薄层板，晾干，按各品种项下的规定检测。
影响展开的因素
A 相对湿度的影响
B溶剂蒸汽的影响（a 展开室的饱和b预吸附）
C 温度的影响
D 展距的影响与分离度仅正比与展距的平方根。 A 光学检出法
a自然光（400~800nm）
b紫外光（254nm或365nm）
c荧光一些化合物吸收了较短波长的光，在瞬间发射出比照射光波长更长的光，而在纸或薄层上显出不同颜色的荧光斑点（灵敏度高、专属性高）
B 蒸汽显色法
多数有机化合物吸附碘蒸气后显示不同程度的黄褐色斑点，这种反应有可逆及不可逆两种情况，前者在离开碘蒸气后，黄褐色斑点逐渐消退，并且不会改变化合物的性质，且灵敏度也很高，故是定位时常用的方法；后者是由于化合物被碘蒸气氧化、脱氢增强了共轭体系，因此在紫外光下可以发出强烈而稳定的荧光，对定性及定量都非常有利，但是制备薄层时要注意被分离的化合物是否改变了原来的性质。
C 物理显色法
用紫外照射分离后的纸或薄层后，使化合物产生光加成，光分解、光氧化还原及光异构等光化学反应，导致物质结构发生某些变化，如形成荧光发射功能团。发生荧光增强或淬灭及荧光物质的激发或发射波长发生移动等现象，从而提高了分析的灵敏度和选择性。
D 试剂显色法
广泛应用的定位方法。用于纸色谱的显色剂一般都适用于薄层色谱，还有防腐剂的显色剂不适合用于纸色谱及含有有机黏合剂薄层的显色，又时喷显色剂后续加热，这也不是用于纸色谱。
显色方法a喷雾显色：显色剂溶液以气溶胶的形式均匀的喷洒在纸和薄层。b 浸渍显色：挥去展开剂的薄层板，垂直的插入盛有展开剂的浸渍槽中，设定浸板及抽出速度和规定在显色剂中浸渍的时间。
显色试剂
a 通用显色剂硫酸溶液（硫酸：水 1：1，硫酸：乙醇1：1）、0.5%碘的氯仿溶液、中性0.05%高锰酸钾溶液、碱性高锰酸钾溶液（还原性化合物在淡红色背景上显黄色斑点）
b 专属显色剂
⑸测定比移值
在一定的色谱条件下，特定化合物的Rf值是一个常数，因此有可能根据化合物的Rf值鉴定化合物。
⑹ 薄层扫描
薄层扫描法指用一定波长的光照射在经薄层层析后的层析板上，对具有吸收或能产生荧光的层析斑点进行扫描，用反射法或透射法测定吸收的强度，以检测层析谱。对于中成药复方制剂，亦可用相应的原药材按需要组合作阴、阳对照，然后比较其薄层扫描图谱加以鉴别。使用仪器为薄层扫描仪。
如需用薄层扫描仪对色谱斑点作扫描检出，或直接在薄层上对色谱斑点作扫描定量，则可用薄层扫描法。薄层扫描的方法，除另有规定外，可根据各种薄层扫描仪的结构特点及使用说明，结合具体情况，选择吸收法或荧光法，用双波长或单波长扫描。由于影响薄层扫描结果的因素很多，故应在保证供试品的斑点在一定浓度范围内呈线性的情况下，将供试品与对照品在同一块薄层上展开后扫描，进行比较并计算定量，以减少误差。各种供试品，只有得到分离度和重现性好的薄层色谱，才能获得满意的结果。

Ⅷ 薄层色谱法及高效液相色谱法鉴别药物的依据分别是什么

and with it I leave my curse. My curse on St. Gildas, on Marie Trevec, and on her descendants. I will come back to St. Gildas when my remains are disturbed. Woe to that Englishman whom my branded skull shall touch!’”

Ⅸ 从洋金花提取东莨菪碱方法

洋金花为茄科植物毛花蔓陀罗(Datum innoxia Miller)的花，主要含生物碱，为中麻药方剂中的主药，临床上治疗气管炎有效。
一、实验目的
l、通过本实验掌握生物碱的一般提取分离方法。
2、掌握氧化铝柱色谱分离莨菪碱和东莨菪碱的实验方法，从而了解柱色谱的一般实验操作技术。
3、了解东莨菪碱和莨菪碱的检识方法。
二、实验原理
洋金花中的主要化学成份
l、东食着碱(Scopolamine)又名：莨菪胺、天仙子碱mp59℃(一水合物)。
2、莨菪碱（Hyoscyamine）又名：天仙子胺mp108.5℃
3、莨菪酸（Tropic acid） mp118℃
4、去甲莨菪碱（Norhyoscyamine） mp142℃
5、曼陀罗碱（Meteloidine） mp141℃

本实验是利用游离生物碱及其盐均能溶于乙醇的性质，用乙醇回流提取总生物碱，再利用东莨菪碱和莨菪碱碱性强弱不同，与碱性氧化铝吸附力强弱不同，用氧化铝柱色谱进行分离。
三、实验内容
(一)提取总碱：取洋金花粗粉50克，置1000毫升园底烧瓶中加95％乙醇300毫升，置水浴上回流提取1小时，倾出提取液，药渣再用95％乙醇200毫升不浴回流提取30分钟，倾出提取液，药渣再用95％乙醇200毫升回流提取30分钟，倾出提取液，三次提取液合并，用玻璃漏斗过滤，滤液回收乙醇至无醇味，浓缩液加1％盐酸l00毫升使溶解，抽滤，滤液用氯仿(40，20，20毫升)萃取脂溶性杂质，酸水液用10％NaOH调至pH9一l0用氯仿萃取(60，50，30，20毫升)四次，氯仿液用无水硫酸钠脱水干燥，回收氯仿得总碱。
(二)莨菪碱与东莨菪碱的分离
这两种生物碱我们用碱性氧化铝干柱色谱进行分离，其操作步骤如下：
1、装柱：将色谱柱垂直固定在铁支架上，柱底填一块棉花，打开活塞，称取100—120目碱性氧化铝40克，经漏斗慢慢装入柱中，一边装填，一边用橡皮塞轻轻敲击色谱柱，使其装填均匀紧密，最后使吸附剂表面形成一水平面。
2、上样：将上述所得总生物碱用少量氯仿溶解，用吸管小心将氯仿溶液加在吸附剂表面上，切勿破坏吸附剂平面，为了防止平面被损坏，可剪一直径同色谱柱内径大小一样的滤纸，小心放在吸附剂平面上，或在其上面加1—2厘米厚的石英砂，把氯仿溶液加到滤纸片上或石英砂上。
3、展开(洗脱)：加样完毕，立即小心加入氯仿(也应注意防止破坏吸附剂平面)，展开洗脱，当溶剂前沿到达柱底部时，用50毫升锥形瓶收集洗脱液，并控制流速，使每分钟流出液为60一80滴，每瓶收集50毫升，更换锥形瓶，编上序号，并在柱上经常添加氯仿，使溶剂面始终高于吸附剂表面，东莨菪碱先洗脱下来，莨菪碱后洗脱下来。
4、溶剂回收，按序号分别回收溶剂后，再氧化铝薄层检查，以氯仿—丙酮—乙醇(8：2：1)展开，改良碘化铋钾试剂显色。相同部分合并。
(三)检识反应及薄层检查
1、生物碱沉淀反应
分别取东莨菪碱，莨菪碱少量，置白瓷板中蒸发到干，加2滴稀HCl溶解，
分别加以下生物碱沉淀试剂：
(1)碘—碘化钾试液
(2)改良碘化铋钾试液
(3)苦味酸试液
观察结果：
2、Vitali反应：分别取东莨菪碱和莨菪碱少量，置于白瓷板中，加发烟硝酸5滴，于水浴上蒸干，放冷后，加10％KOH乙醇溶液2—3滴，观察颜色变化，并加以解释。
3、薄层色谱
吸附剂：碱性氧化铝150一180目，干法铺板。
展开剂：氯仿—丙酮—乙醇(8：2：1)
样品：东莨菪碱氯仿溶液
莨菪碱氯仿溶液
东莨菪碱标准品
莨菪碱标准品
显色剂：改良碘化铋钾，喷洒
四、实验说明及注意事项
l、装柱还可采用湿法：将洗脱剂加到吸附剂中，搅拌成稀糊状，加到层析柱中，使吸附剂依重力自然下沉到柱底部，打开活塞使洗脱剂流出，但要保证溶剂表面始终高于吸附剂表面。干法装柱操作简便、迅速、不受洗脱剂的限制，但柱效不高。
2、柱色谱和薄层色谱用的氧化铝要注意活度，一般Ⅱ—Ⅲ级即可，活度不够就不能将样品中成分分开。