检测巯基的方法

Ⅰ 烫发类产品中巯基乙酸含量怎么检测

化妆品中巯基乙酸及其盐类的测定方法疏基乙酸（HSCH2COOH）分子量92．12，是无色液体，伴有特异臭味，可与水以任何比例混合。
疏基乙酸在碱性条件下有较强的还原作用，因其使用量不同，可使毛发从柔软到断裂。基于这一特点，其在烫发类、脱毛类化妆品中直被广泛采用。由于它有较强的还原作用，所以使用时要控制其含量，以免使烫发剂变成脱毛剂，造成毛发脱落的严重后果，在化妆品中疏基乙酸及其盐类视为限用物质。化妆品卫生标准（GB 7916—87）规定其最大允许浓度如下：2％（疏基乙酸计）用于用后冲洗掉的护发产品；5％（pH12．7）用于脱毛剂；8％（pH9）用于一般的直发和卷发产品；11％（pH11）用于专业使用的直发和卷发产品。
疏基乙酸及其盐类在化妆品分析中普遍采用滴定方法，此法对仪器设备要求不高，而且简单快速，方法精度能满足化妆品分析要求。
1 应用范围
本法适用于测定烫发类、脱毛类疏基乙酸及其盐类。
本法最低检测浓度为10mg/g。
2 原理
以有机溶剂提取化妆品中疏基乙酸及其盐类，用碘溶液滴定定量。
3 试剂
3．1 10％（V/V）盐酸。
3．2 三氯甲烷：优级纯。
3．3 0．05mol/L碘溶液。
3．4 1％（V/V）淀粉溶液。
4 仪器
4．1 酸式滴定管。
4．2 电磁搅拌器。
5 分析步骤
5．1 样品预处理
准确量取2．0ml溶液状样品或称取约3．0g膏状样品于烧杯中，加20ml 10％（V/V）盐酸及50ml水缓慢加热至沸腾（1）。冷却后加5ml三氯甲烷（2）。用电磁搅拌器搅拌5min后备用。
5．2 测定
5．2．1 以0．05mol/L在碘溶液滴定，加入1ml 1％（V/V）淀粉溶液作指示剂，至溶液呈稳定的蓝色即为终点。
6 计算
按下式计算疏基乙酸及其盐类浓度（3）：

式中：A——碘溶液消耗量，ml；
V——取样体积，ml；
m——取样质量，g。
7 本方法准确度
加标回收率87．33％～109．2％。
注解：
（1）本方法中10％HCl加入量以20ml为宜，加入HCl的目的是为了在酸性条件下煮沸赶出样品中的硫化物。
（2）本方法加入三氯甲烷的量以5ml为宜，其目的是排除干扰物，如样品中乳化剂的影响。
（3）计算式中的0．092、0．0184分别表示1ml的1mol碘溶液相当疏基乙酸或疏基乙酸钙的克数。

Ⅱ 测量总巯基含量时dtnb中是加sds还是尿素

SDS、尿素的缓冲溶液溶解蛋白质都可以测定巯基总量.

Ⅲ 巯基怎么修饰到适配体上的

线性DNA在纳米金表面上的构象为连接巯基的一端缠绕在纳米金表面，另一端与表面垂直向外伸展，随着表面探针容量的增加，每条DNA探针缠绕在纳米金表面上的长度不断减小，而同时向外延伸的尾部越来越长，这样就把巯基修饰到适配体上了。

纳米金表面保持被DNA碱基吸附包裹的低表面自由能状态上述构象可以描述为DILOT模型，对于核酸传感器探针设计和基于DNA杂交的纳米组装等应用具有重要的指导意义。是利用动态光散射测定组装过程中线性DNA或核酸适配体与纳米金复合物的水合粒径，结合吸附动力学，分别测定线性DNA或核酸适配体在不同表面包被量时在纳米金表面上的构象。

巯基的检测方法：

1. RP-HPLC法测定巯基含量。

采用色谱柱Kromasil-C18 (250×4.6mm, 5μm)，流动相A(0.1%TFA)和流动相B（甲醇）梯度洗脱：流动相B 40%~80%，0~10min，然后80% B保持5min，流速0.8mL/min，检测波长327nm，得到NTB标准曲线y=3.67059x+0.14123，回收率101.9%，RSD=l.17%，从而建立了一种高灵敏度巯基检测方法。

2. 采用分子荧光光谱法作为反应条件，用反相高效液相色谱梯度洗脱法测定巯基。

用OPA、丹酰氯、茚三酮与半胱氨酸反应，测其可见紫外吸收光谱及荧光光谱；在不同PH、温度、反应时间条件下，用OPA与半胱氨酸反应测其荧光度；分别吸收0.1mmol/L半胱氨酸溶液0、20、40、60、80、100μl，各加入10μlHO,室温下反应30min，然后加热蒸干，残渣用200μl OPA衍生液，定容至5 ml，4 min时测其荧光光谱。取pH8.4的硼酸缓冲溶液5μl，混合10次；加入OPA衍生液2μl，混合进样走HPLC。梯度条件：洗脱液B所占比例0min为0，17min线性增加至60%，17.5min线性增加至100%，20min洗脱结束。激发波长为340nm,荧光检测波长为450nm。

3.柱前衍生高效液相色谱-紫外检测法。

以tris(2-carboxylethyl)–phosphine (TCEP)为还原剂，7–fluorbenzo–2–oxa–1,3–diazole–4-sulfonate(SBD-F)为衍生剂，N-乙酰半胱氨酸为内标，C8色谱柱分离，流动相为甲醇－磷酸盐缓冲液（pH =3. 0），梯度洗脱，385 nm处检测。线性范围为8. 3～1042. 6μmol/L,最低检测限为0.42μmol/L,日内精密度为1.67%～1.86%,日间精密度为2.08%～3.06 %,平均回收率为98.1%～103.2 %。

4. 电化学脱附与荧光技术联用。

将样品固定在烷基硫醇自组装膜修饰的金电极表面，通过荧光试剂马来酰亚胺与游离巯基反应原位标记GSH,恒电位条件下脱附电极表面吸附物，检测脱附物在0.1 mol·L.KOH溶液中的荧光强度。

5.拉曼光谱法。

对于巯基在拉曼光谱方面研究主要集中在含巯基的芳香族化合物上，根据李晓伟等研究，巯基与银反应生成牢固的－SAg键，失去了原有的特征性巯基氢键，其光谱特点发生明显改变。

以上内容参考：网络-巯基

Ⅳ 求救巯基乙酸的分析方法

疏基乙酸（HSCH2COOH）分子量92．12，是无色液体，伴有特异臭味，可与水以任何比例混合。

疏基乙酸在碱性条件下有较强的还原作用，因其使用量不同，可使毛发从柔软到断裂。基于这一特点，其在烫发类、脱毛类化妆品中直被广泛采用。由于它有较强的还原作用，所以使用时要控制其含量，以免使烫发剂变成脱毛剂，造成毛发脱落的严重后果，在化妆品中疏基乙酸及其盐类视为限用物质。化妆品卫生标准（GB7916—87）规定其最大允许浓度如下：2％（疏基乙酸计）用于用后冲洗掉的护发产品；5％（pH12．7）用于脱毛剂；8％（pH9）用于一般的直发和卷发产品；11％（pH11）用于专业使用的直发和卷发产品。

疏基乙酸及其盐类在化妆品分析中普遍采用滴定方法，此法对仪器设备要求不高，而且简单快速，方法精度能满足化妆品分析要求。

1应用范围

本法适用于测定烫发类、脱毛类疏基乙酸及其盐类。

本法最低检测浓度为10mg/g。

2原理

以有机溶剂提取化妆品中疏基乙酸及其盐类，用碘溶液滴定定量。

3试剂

3．110％（V/V）盐酸。

3．2三氯甲烷：优级纯。

3．30．05mol/L碘溶液。

3．41％（V/V）淀粉溶液。

4仪器

4．1酸式滴定管。

4．2电磁搅拌器。

5分析步骤

5．1样品预处理

准确量取2．0ml溶液状样品或称取约3．0g膏状样品于烧杯中，加20ml10％（V/V）盐酸及50ml水缓慢加热至沸腾（1）。冷却后加5ml三氯甲烷（2）。用电磁搅拌器搅拌5min后备用。

5．2测定

5．2．1以0．05mol/L在碘溶液滴定，加入1ml1％（V/V）淀粉溶液作指示剂，至溶液呈稳定的蓝色即为终点。

6计算

按下式计算疏基乙酸及其盐类浓度（3）：

式中：A——碘溶液消耗量，ml；

V——取样体积，ml；

m——取样质量，g。

7本方法准确度

加标回收率87．33％～109．2％。

注解：

（1）本方法中10％HCl加入量以20ml为宜，加入HCl的目的是为了在酸性条件下煮沸赶出样品中的硫化物。

（2）本方法加入三氯甲烷的量以5ml为宜，其目的是排除干扰物，如样品中乳化剂的影响。

（3）计算式中的0．092、0．0184分别表示1ml的1mol碘溶液相当疏基乙酸或疏基乙酸钙的克数。

Ⅳ 10mmol/LDTNB怎么配置 为什么我用去离子水配置的不能溶解完全要注意什么谢谢高手指点！

可以考虑稍微加热下

DTNB为Ellman试剂。它用于比色法测定生物样 品中巯基。它易溶于水。在巯基化合物的存在下，无色的DTNB将被转变成黄 色的5-巯基-2-硝基苯甲酸。由于5-巯基-2-硝基苯甲酸在412 nm处具有最大吸收，DTNB的吸收光谱并不干扰巯基的测定。

配置方法：

准确称取0.198gDTNB用50mMNa2HPO4（pH＝7.0）配制成50ml溶液，存放于棕色瓶中，于暗处低温保存备用。应该注意的是配置缓冲、浓度，储存时要避免见光。

应用举例：

半胱氨酸中自由巯基的定量检测方法

一、试剂的配制：

1、Tris－HCL缓冲液（0.25M）：DDW准确配制后，用盐酸调节pH＝8.3；

2、半胱氨酸标准溶液（1mM）：准确称取0.017563gL－半胱氨酸（175.63），用1ml甲酸溶解，以DDW定容至100ml；

3、DTNB（分子量：396.35）标准溶液（10mM）：准确称取0.198175gDTNB用50mMNa2HPO4（pH＝7.0）配制成50ml溶液，存放于棕色瓶中，于暗处低温保 存备用

4、DTNB分析溶液（0.1mM）：由1体积10mMDTNB标准液加99体积0.25M的Tris缓冲液配制而成，现用现配。

二、标准曲线的制作;

1、25℃条件下，用Tris缓冲液稀释半胱氨酸标准液配成梯度的稀释液（5.0ml）， 其浓度分别为：0.00mM、0.025mM、0.05mM、0.1mM、0.15mM、0.2mM；

2、取上述各浓度溶液1ml分别加入到5ml预先恒温于25℃水中的DTNB分析溶液，摇匀，准确静止10min，立即于波长412nm处测定吸光度值（A）。

根据目的蛋白的吸光度在标准曲线上读出对应的浓度即可

Proct Name:DTNB

Proct Number:D8130

Proct Brand:Sigma

CAS Number:69-78-3

Molecular Formula:[-SC6H3(NO2)CO2H]2

Molecular Weight:396.35

Ordering Information

Ⅵ 用紫外怎么检测巯基

以tris(2-carboxylethyl) – phosphine (TCEP)为还原剂，7–fluorbenzo–2–oxa –1,3– diazole– 4-sulfonate(SBD-F)为衍生剂，N-乙酰半胱氨酸为内标，C8色谱柱分离，流动相为甲醇 -磷酸盐缓冲液（pH =3. 0）,梯度洗脱 ,385 nm处检测。线性范围为8. 3～1042. 6 μmol/L,最低检测限为 0. 42μmol/L,日内精密度为 1. 67%～1. 86%,日间精密度为 2. 08%～3. 06 %,平均回收率为 98. 1%～103. 2 %

Ⅶ 求助：请问巯基用红外光谱是不是很难检测出

cookie634(站内联系TA)应该能够出来，在2500-2600左右，比较明显。qingyy(站内联系TA)巯基的伸缩振动在2550－2590cm－1，在这个区域的吸收峰不多。它红外光谱很特征，但是比较弱。如果样品在此处没有吸收的话，那是很容易识别的。看看你的样品，如果没有共轭双键或者三键的话就可以用红外光谱测出来。