水中亚硝酸盐检测方法

1. 用国家标准来测定水样中食品中亚硝酸盐测定方法

附：
亚硝酸盐快速检测管 使用说明：
方法原理：按照国标GB/T 5009.33做成的速测管，与标准色卡比较定量。
操作方法：
1. 食盐中亚硝酸盐的快速检测及食盐与亚硝酸盐的快速鉴别：用袋内附带小勺取食盐1平勺，加入到检测管中，加入蒸馏水或纯净水至1ml刻度处，盖上盖，将固体部分摇溶，10分钟后与标准色板对比，该色板上的数值乘上10即为食盐中亚硝酸盐的含量mg/ kg，（国标规定食盐（精盐）中亚硝酸盐的限量卫生标准应≤2 mg/kg）。当样品出现血红色且有沉淀产生或很快退色变成黄色时，可判定亚硝酸盐含量相当高，或样品本身就是亚硝酸盐。
2. 液体样品检测：直接取澄清液体样品1ml加入到检测管中，盖上盖，将试剂摇溶，10分钟后与标准色板对比，找出与检测管中溶液颜色相同的色阶，该色阶上的数值即为样品中亚硝酸盐的含量mg/L（以NaNO2计）。（牛乳及豆浆也可直接检测，结果不得超过0.25mg/L ，有颜色的液体样品可加入一些活性炭脱色过滤后测定）。
3. 固体或半固体样品检测：取粉碎均匀的样品1.0g或1.0ml至10ml比色管中，加蒸馏水或去离子水（纯净水）至刻度，充分震摇后放置，取上清液（或过滤或离心得到的上清液）1.0ml加入到检测管中，盖上盖，将试剂摇溶，10分钟后与标准色板对比，该色板上的数值乘上10即为样品中亚硝酸盐的含量mg/ kg，L（以NaNO2计）。如果测试结果超出色板上的最高值，可定量稀释后测定，并在计算结果时乘上稀释倍数（如从10ml比色管中取出1.0mL转入另一支10ml比色管中，加水至刻度，从中取1.0mL加入到检测管中测定，测试结果乘上100（倍稀释）即为样品中亚硝酸盐的含量。

2. 测亚硝酸盐含量操作

GB5009.33—2010 分光光度法

1、原理

亚硝酸盐采用盐酸萘乙二胺法测定测定。

试样经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料，外标法测得亚硝酸盐含量。

2、试剂和材料

除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯。水为GB/T 6682 规定的二级水或去离子水。

2.1 亚铁氰化钾（K4Fe(CN)6·3H2O）

2.2 乙酸锌（Zn(CH3COO)2·2H2O）

2.3 冰醋酸（CH3COOH）

2.4 硼酸钠（Na2B4O7·10H2O）

2.5 对氨基苯磺酸(C6H7NO3S）

2.6盐酸萘乙二胺(C12H14N2·2HCl）

2.7亚硝酸钠（NaNO2）

2.8硝酸钠（NaNO3）

2.9锌皮或锌棒。

2.10硫酸镉。

2.11亚铁氰化钾溶液(106g/L)：

称取106.0g 亚铁氰化钾（2.1），用水溶解，并稀释至1000mL。

2.12乙酸锌溶液(220g/L)：称取220.0g乙酸锌（2.2），先加30 mL 冰醋酸（2.3）溶解，用水稀释至1000mL。

2.13饱和硼砂溶液(50g/L)：称取5.0g硼酸钠（2.4），溶于100 mL 热水中，冷却后备用。

2.14对氨基苯磺酸溶液（4 g/L） ：称取 0.4g对氨基苯磺酸（2.5），溶于100mL20%

（V/V）盐酸中，置棕色瓶中混匀，避光保存。

2.15盐酸萘乙二胺溶液（2 g/L）：称取0.2 g 盐酸萘乙二胺（2.6），溶于100mL 水中,

混匀后，置棕色瓶中，避光保存。

2.16亚硝酸钠标准溶液（200 μg/mL）：准确称取0.1000g于110℃～120℃干燥恒重的亚硝酸钠，加水溶解移入500 mL容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀。

2.17亚硝酸钠标准使用液（5.0 μg/mL）：临用前，吸取亚硝酸钠标准溶液5.00mL，置于 200mL 容量瓶中，加水稀释至刻度。

2.17硝酸钠标准溶液（200 μg/mL，以亚硝酸钠计）：准确称取0.1232g 于110 ℃～120

℃干燥恒重的硝酸钠，加水溶解，移于入500mL 容量瓶中，并稀释至刻度。

2.18硝酸钠标准使用液（5 μg/mL）：临用时吸取硝酸钠标准溶液2.50mL，置于100mL

容量瓶中，加水稀释至刻度。

3、仪器和设备

3.1 天平：感量为0.1mg 和1mg。

3.2组织捣碎机。

3.3超声波清洗器。

3.4恒温干燥箱。

3.5分光光度计。

4、测定

4.1试样的预处理

新鲜蔬菜、水果：将试样用去离子水洗净，晾干后，取可食部切碎混匀。将切碎的样品用四分法取适量，用食物粉碎机制成匀浆备用。如需加水应记录加水量。

4.2提取

称取5g（精确至0.01g）制成匀浆的试样（如制备过程中加水，应按加水量折算），置于

50 mL烧杯中，加12.5 mL 饱和硼砂溶液，搅拌均匀，以 70 ℃左右的水约300mL 将试样洗入500 mL容量瓶中，于沸水浴中加热15min，取出置冷水浴中冷却，并放置至室温。

4.3提取液净化

在振荡上述提取液时加入5mL 亚铁氰化钾溶液, 摇匀, 再加入5 mL 乙酸锌溶液，以沉淀蛋白质。加水至刻度, 摇匀, 放置30 min, 除去上层脂肪, 上清液用滤纸过滤, 弃去初滤液30mL, 滤液备用。

4.4亚硝酸盐的测定

吸取40.0mL 上述滤液于50mL带塞比色管中，另吸取0.00mL、0.20mL、0.40mL、0.60mL、0.80mL、1.00mL、1.50mL、2.00mL、2.50mL 亚硝酸钠标准使用液（相当于0.0 μg、1.0 μg、2.0 μg、3.0 μg、4.0 μg、5.0 μg、7.5 μg、10.0μg、12.5 μg亚硝酸钠），分别置于50mL 带塞比色管中。于标准管与试样管中分别加入2mL 对氨基苯磺酸溶液，混匀，静置3min～5min 后各加入1mL盐酸萘乙二胺溶液，加水至刻度，混匀，静置15min，用2cm 比色杯，以零管调节零点，于波长538nm处测吸光度，绘制标准曲线比较。同时做试剂空白。

5、分析结果的表述

5.1亚硝酸盐含量计算

亚硝酸盐（以亚硝酸钠计）的含量按式（3）进行计算

式中：

X1——试样中亚硝酸钠的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；

A1——测定用样液中亚硝酸钠的质量，单位为微克（μg）；

m——试样质量，单位为克（g）；

V1——测定用样液体积，单位为毫升（mL）；

V0 ——试样处理液总体积，单位为毫升（mL）。

以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留两位有效数字。

6、精密度

在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%

3. 亚硝酸盐的检测是什么

在检测水中亚硝酸盐时通常采用重氮-偶联反应，使被检测样品生成紫红色染料，然后使用分光光度法进行检测，这种方法灵敏而且选择性强。

这种重氮和偶联的试剂，一般用的都是对氨基苯磺酰胺和a-萘酚，在酸性条件下亚硝酸盐氮与氨基苯磺酰胺反应，生成重氮盐，再与a萘酚偶联生成紫红色样品，然后用540m波长进行检测。

注意事项

由于生活饮用水中常存在亚硝酸盐，所以不能作为测定用稀释液。若显色后颜色很深且有沉淀产生或很快褪变成浅黄色，说明样品中亚硝酸盐含量很髙，须加大稀释倍数重新检测，否则会得出错误结论。阳性样品需重复检测一次，仍为阳性应送实验室复检。

在做标准曲线的时候可以自行配制，也可以买现成的标准溶液，在移取的时候，可以用移液管或者是移液枪，但是要经过检验合格。

以上内容参考网络-亚硝酸盐

4. 如何化学实验仪器检测水中亚硝酸盐是否存在

用棕色环反应，[Fe+ (NO)+]SO4 硫酸亚硝酰铁(I) 棕色，可溶性的配合物，利用硫酸亚硝酰铁(I) 棕色的生成，可用于鉴定NO3- 和NO2-（棕色环反应）。 NO3-的鉴定 3 Fe2+ + NO3- + 4H+ = 3 Fe3+ + NO + H2O FeSO4 + NO ＝ [Fe+ (NO)+]SO4 生成棕色的硫酸亚硝酰铁(I) NO2-的鉴定 酸性条件下分解 2H+ + 2NO2- = H2O + NO + NO2 3Fe2+ + NO + 2 SO42- = [Fe (NO)]SO4 生成棕色的硫酸亚硝酰铁(I) 鉴定NO3-，NO2-会有干扰的作用，所以要事先消除 NO2- 的干扰，消除NO2- 干扰的方法是先用I-除去： 2 NO2- + 2 I- + 4 H+ ＝ 2 NO↑ + I2 + 2 H2O NO3- 在稀酸介质中不能氧化I-。参考资料：无机化学网络教程: http://ce.sysu.e.cn/Echemi/inocbx/content/12_4.html

5. 检验亚硝酸钠的方法

先检亚硝酸盐，取样品溶液十毫升，加对氨基苯磺酰胺稀盐酸溶液1毫升，再加盐酸萘乙二胺溶液1毫升，应显粉红色，钠的检验用焰色法，显鲜黄色。

6. 亚硝酸盐的测定原理与有关方程式

主要有碘量法、分光光度法等方法，
碘量法：
在酸性溶液中，碘酸钾和碘化钾作用后析出的游离碘，
将水中的亚硫酸盐氧化成硫酸盐，过量的碘与淀粉作用呈现蓝色即为终点。其反应为：
KIO3＋5KI＋6HCl→3I2＋3H2O＋6KCl
SO32－＋I2＋H2O→SO42－＋2HI
本法适于测定亚硫酸盐含量大于2mg/L的水样。
比色法：
亚硝酸盐与对氨基苯磺酸作用，生成不稳定的化合物，随即与α—萘胺作用，生成红色偶氮化合物。
此偶氮化合物的最大吸收波长为524nm。本方法的测定范围为0~0.5mg/L。
水样中亚硝酸盐的测定就是根据上述反应原理，通过分光光度计比色获取水样中亚硝酸盐的含量。

7. 亚硝酸钠的检验方法

一、 测定方法
重氮化偶合分光光度法二、 方法依据
《生活饮用水卫生规范》（2001）
三、 测定范围
1. 本法用重氮化偶合分光光度法测定生活饮用水及其水源水中的亚硝酸盐氮。
2. 本法适用于测定生活饮用水及其水源水中亚硝酸盐氮的含量。
3. 水中三氯胺产生红色干扰。铁，铅等离子可能产生沉淀，引起干扰。铜离子起催化作用，可分解重氮盐使结果偏低，有色离子干扰，也不应存在。
4. 本法最低检测质量为0.05µg亚硝酸盐氮，若取50mL水样，最低检测质量浓度为0.001mg/L。
四、测定原理
在pH1.7以下，水中亚硝酸盐与氮基苯磺酰胺重氮化，再与盐酸N-(1萘)-乙二胺产生偶合反应。生成紫红色的偶氮染料。比色定量。
五、试剂
1.氢氧化铝悬浊液
称取125g硫酸铝钾[KAl(SO4)2.12H2O]或硫酸铝铵[NH4Al(SO4)2.12H2O]溶于1000mL纯水中。加热至60oc，缓缓加入55mL氨水(ρ20=0.88g/mL)。使氢氧化铝沉淀完全。充分搅拌后静置，弃取上清液。用纯水反复洗涤沉淀，至倾出上清液中不含氯离子（用硝酸银溶液试验）。然后加入300mL纯水成悬浊液，适应前振摇均匀。
2.对氨基苯磺酰胺溶液：（10g/L）
3.盐酸N-(1萘)-乙二胺溶液（1.09g/L）
4.亚硝酸盐氮标准储备液[ρ(NO2-_N)=50µg/mL]：
称取0.2463g在玻璃干燥器内放置24h的亚硝酸钠（NaNO2），溶于纯水中，并定容至1000mL。每升加2mL氯仿保存。
5.亚硝酸盐氮标准使用液[ρ(NO2-_N)=0.1µg/mL]：
取10.00mL标准储备液于容量瓶中，用纯水定容至500mL。再从中吸取10mL，用纯水于容量瓶中定容至100mL。
六．仪器
具塞比色管50mL
分光光度计
七．分析步骤
1.若水样中浑浊度或色度过大，可先取100mL，加入2mL氢氧化铝悬浮液，搅拌后静置数分钟，过滤。
2.先将水样或处理后的水样用酸或碱调进中性，取50mL置于比色管中。
3.另取50mL比色管配制标准浓度系列。其中空白与最低检测限必须配制。其他系列视检测的具体情况而定。
4.向水样及标准系列中分别加入1mL对氨基苯磺酰胺溶液。摇匀后放置2-8min，加入1.0mL盐酸N-(1萘)-乙二胺溶液。立即混匀。
5.于540nm波长下，用1 cm比色皿，以纯水作参比，在10min-2hr内测定吸光度。如含量低于4mg/L，改用3cm比色皿。
6.绘制标准曲线。从标准曲线上查得水样中亚硝酸盐氮的含量。
八、计算
ρ（NO2-N）=m/V
式中：ρ（NO2-N）----水样中亚硝酸盐氢的质量浓度，㎎/L
m----从标准曲线上查得样品中亚硝酸盐氢的质量，㎎
v----水样体积，mL

8. 如何检测鱼缸水里的氨和硝亚酸盐的含量

直接取澄清液体样品1ml加入到检测管中，盖上盖，将试剂摇溶，10分钟后与标准色板对比，找出与检测管中溶液颜色相同的色阶，该色阶上的数值即为样品中亚硝酸盐的含量mg/L。
实验原理：
在PH 1.7以下，水中亚硝酸盐与对氨基苯磺酰胺重氮化，再与盐酸N-（1-萘）-乙二胺产生偶合反应，生成紫红色的偶氮染料，比色定量。 试剂：
1、 对氨基苯磺酰胺溶液（10g/L）:称取5g对氨基苯磺酰胺
（H2NC6H4SO3NH2）,溶于350 mL盐酸溶液（1+6）中。用纯水稀释至500 mL。
2、 盐酸N-（1-萘）-乙二胺溶液（1.0g/L）：又名NEDD溶液，称
取0.2g盐酸N-（1-萘基）-乙二胺（C10H7NH2CHCH2·NH2·2HCl），溶于200 mL纯水中。储存于冰箱中。可稳定数周，如试剂颜色变深，应弃去重配。
3、 亚硝酸盐氮标准使用溶液【ρ（NO2-N）=0.10µg/mL】 仪器吸管：（1）、分光光度计
（2）、50 mL具塞比色管： 30支
（3）、5 mL刻度吸管：10支
4、1mL比色皿：1个
分析步骤：
1、 取50mL水样置于比色管中。
2、 取50mL比色管7支，分别加入亚硝酸盐氮标准液0mL、0.50mL、1.00mL、2.50mL、5.00mL、7.50mL、10.00mL，用纯水稀释至50mL。
3、 向水样及标准色列管中分别加入1 mL对氨基苯磺酰胺溶液，摇匀后放置2min~8min。加入1.0 mL盐酸N-（1-萘基）-乙二胺溶液，立即混匀。
4、 于540nm波长，用1cm比色皿，以纯水作参比，在10min至2h内，测定吸光度。
5、 绘制标准曲线，从曲线上查出水样中亚硝酸盐氮的含量。
计算：
ρ（NO2-N）=m/V
注：ρ（NO2-N）——水样中亚硝酸盐氮的质量浓度，单位为mg/L
m——从标准曲线上查得样品管中亚硝酸盐氮的质量，单位为微克（µg）
V——水样体积，单位为毫升（mL）

9. 实验室中亚硝酸盐应怎样鉴定

亚硝酸盐具有强还原性，所以重氮化是其特征反应之一

一、 测定方法 重氮化偶合分光光度法 质量标准
二、 方法依据 《生活饮用水卫生规范》（2001）
三、 测定范围 1. 本法用重氮化偶合分光光度法测定生活饮用水及其水源水中的亚硝酸盐氮。 2. 本法适用于测定生活饮用水及其水源水中亚硝酸盐氮的含量。 3. 水中三氯胺产生红色干扰。铁，铅等离子可能产生沉淀，引起干扰。铜离子起催化作用，可分解重氮盐使结果偏低，有色离子干扰，也不应存在。 4. 本法最低检测质量为0.05µg亚硝酸盐氮，若取50mL水样，最低检测质量浓度为0.001mg/L。
四、测定原理 在pH1.7以下，水中亚硝酸盐与氮基苯磺酰胺重氮化，再与盐酸N-(1萘)-乙二胺产生偶合反应。生成紫红色的偶氮染料。比色定量。
五、试剂 1.氢氧化铝悬浊液 称取125g硫酸铝钾[KAl(SO4)2.12H2O]或硫酸铝铵[NH4Al(SO4)2.12H2O]溶于1000mL纯水中。加热至60oc，缓缓加入55mL氨水(ρ20=0.88g/mL)。使氢氧化铝沉淀完全。充分搅拌后静置，弃取上清液。用纯水反复洗涤沉淀，至倾出上清液中不含氯离子（用硝酸银溶液试验）。然后加入300mL纯水成悬浊液，适应前振摇均匀。 2.对氨基苯磺酰胺溶液：（10g/L） 3.盐酸N-(1萘)-乙二胺溶液（1.09g/L） 4.亚硝酸盐氮标准储备液[ρ(NO2-_N)=50µg/mL]： 称取0.2463g在玻璃干燥器内放置24h的亚硝酸钠（NaNO2），溶于纯水中，并定容至1000mL。每升加2mL氯仿保存。 5.亚硝酸盐氮标准使用液[ρ(NO2-_N)=0.1µg/mL]： 取10.00mL标准储备液于容量瓶中，用纯水定容至500mL。再从中吸取10mL，用纯水于容量瓶中定容至100mL。
六．仪器 具塞比色管50mL 分光光度计
七．分析步骤 1.若水样中浑浊度或色度过大，可先取100mL，加入2mL氢氧化铝悬浮液，搅拌后静置数分钟，过滤。 2.先将水样或处理后的水样用酸或碱调进中性，取50mL置于比色管中。 3.另取50mL比色管配制标准浓度系列。其中空白与最低检测限必须配制。其他系列视检测的具体情况而定。 4.向水样及标准系列中分别加入1mL对氨基苯磺酰胺溶液。摇匀后放置2-8min，加入1.0mL盐酸N-(1萘)-乙二胺溶液。立即混匀。 5.于540nm波长下，用1 cm比色皿，以纯水作参比，在10min-2hr内测定吸光度。如含量低于4mg/L，改用3cm比色皿。 6.绘制标准曲线。从标准曲线上查得水样中亚硝酸盐氮的含量。
八、计算 ρ（NO2——N）=m/V 式中：ρ（NO2——N）----水样中亚硝酸盐氢的质量浓度，㎎/L m----从标准曲线上查得样品中亚硝酸盐氢的质量，㎎ v----水样体积，mL