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nk细胞的检测方法

发布时间:2022-08-04 01:38:42

① NK细胞毒性检验的方法

方法首先将外周血单个核细胞(PBMCs)与K562细胞以3:1比例混合,2h后加入莫能菌素,1.5h后加入CD107a和CD56标记抗体,流式细胞仪分析CD107a阳性细胞的频率。其次观察CD107a抗体孵育时间、不同效靶比例对CD107a阳性细胞检测的影响。最后观察该方法与传统LDH释放法检测NK细胞毒活性的一致性。结果NK细胞活化后可在其表面检测到高水平表达的CD107a分子,效靶细胞孵育结束后加入CD107a抗体可降低检测背景,低效靶比例同样具有检测敏感性。该方法与LDH释放法的检测结果一致。结论利用CD107a抗体标记检测NK细胞毒活性的方法具有快速、敏感、所需效应细胞少的优点。

② NK细胞和T细胞的检测方法什么

NK细胞和T细胞的检测方法是什么哈
就是说明你很健康,
最起码你的淋巴细胞的值正常啦,

如何测量外周血中的NK细胞

正确答案:C 解析:细胞免疫水平检测的项目包括:外周血T细胞及其亚类的计数、NK细胞活性测定、血清细胞因子测定、黏附分子及其配体的检测 。而特异性抗体水平的检测属于体液免疫水平检测项目 。

④ 不属于NK细胞检测方法的是

正确答案:E
解析:一般用K562细胞株作为靶细胞测定人NK细胞活性,用YAC细胞株测小鼠NK细胞活性,检测方法有形态法、酶释放法、荧光法、核素法和化学发光法

⑤ NK细胞和T细胞的检测方法是什么哈正常值是多少呢

NK细胞和T细胞是通过流式细胞仪检测的,主要是根据NK细胞表面特异性表达CD3-CD16+CD56+,而T细胞表面特异性表达CD3+,这样添加相应抗体标记后再通过流式细胞仪就能检测出来绝对数量和比例大小
这两个细胞比例的正常值根据不同地区,不同医院参考值不一样的。

⑥ nk细胞是什么

自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)是机体重要的免疫细胞,不仅与抗肿瘤、 抗病毒感染和免疫调节有关,而且在某些情况下参与超敏反应和自身免疫性疾病的发生。
自然杀伤细胞对HIV的抑制作用
NK细胞的来源
NK细胞确切的来源还不十分清楚,一般认为直接从骨髓中
自然杀伤细胞(NK细胞)
衍生,其发育成熟依赖于骨髓的微环境。小鼠和人的体外实验表明,胸腺细胞在体外IL-2等细胞因子存在条件下培养也可诱导出NK细胞。小鼠脾脏在体内IL-3诱导下可促进NK细胞的分化。NK细胞主要分布于外周血中,占PBMC5~10%,淋巴结和骨髓中也有NK活性,但水平较外周血低。
由于NK细胞具有部分T细胞分化抗原,如80~90%NK细胞CD2+,20~30%NK细胞CD3+(表达CD3ζ链),30%NK细胞CD8+(α/α)和75~90%NK细胞CD38+,而且NK细胞具有IL-2中亲和性受体,在IL-2刺激下可发生增殖反应,活化NK细胞可产生IFN-γ,因此一般认为NK细胞与T细胞在发育上关系更为密切。
NK细胞的表型
与T细胞、B细胞相比,NK细胞表面标志的特异性是相对的。人NK细胞mIg-,部分NK细胞CD2、CD3和CD8阳性,表达IL-2受体β链 (P75,CD122),CD11b/CD18阳性。常用检测NK细胞的标记有CD16、CD56、CD57、CD59、CD11b、CD94和LAK-1(见表7-10)。
一种稳定表达在NK和LAK细胞表面的LAK-1分子,120kDa,NK细胞在IL-2条件下培养20天LAK-1仍为阳性,而HNK-1(CD57)和CD16部分消失。LAK的杀伤活性可被抗LAK-1 McAb所抑制。
表7-10 检测人NK细胞常用的标志
表7-11 NK细胞和其它细胞毒效应细胞的表面标志(%)
NK细胞的活化
NK细胞可通过多种途径被活化,包括膜表面的CD2、CD3分子和多种细胞因子。
通过CD3分子的ζ链
NK细胞不表达TCR/CD3复合物,但部分NK细胞表达CD3ζ链,当用CD16抗体刺激NK细胞活化时,ζ链发生酪氨酸磷酸化,引起胞浆内Ca??2+? 浓度升高,IP3水平增加,促进细胞因子合成和ADCC作用。
通过CD2分子
CD2与CD58相互作用或用CD2 McAb刺激可活化NK细胞,CD3 ζ链发生酪氨酸磷酸化。

⑦ NK细胞和T细胞的检测方法是什么哈正常值是多少

采用流式细胞术检测54例局部进展期乳腺癌患者新辅助化疗前后的静做免疫功能(NK细胞、后T淋巴细胞亚群及NK细胞免疫功能的变化,T细胞亚群)检测要多少探讨局部进展期乳腺癌患者新辅助化疗前。方法

⑧ 如何判断NK细胞是否有效

方法首先将外周血单个核细胞(PBMCs)与K562细胞以3:1比例混合,2h后加入莫能菌素,1.5h后加入CD107a和CD56标记抗体,流式细胞仪分析CD107a阳性细胞的频率。其次观察CD107a抗体孵育时间、不同效靶比例对CD107a阳性细胞检测的影响。

⑨ 用流式方法检测哪些nk细胞上的标志物

用流式方法检测哪些nk细胞上的标志物
胞内流式分析法是用抗细胞因子抗体与细胞表面或胞内特定亚群标志组合,即可检测不同细胞亚群细胞因子的分泌,同时采用特殊的化学与抗体选择,确保静止与无细胞因子分泌细胞的最小荧光背景.具有其它方法难以比拟的优点:快速:流式定量检测细胞内细胞因子可在一天内完成,实验流程需6-8小时,实际操作时间为1-2小时,快速简便; 简便:无需组织培养,可以全血分析,无需分离PBMCs; 灵敏度高:高度灵敏的荧光标记与检测系统; 高效:可以在同一个细胞内同时检测两种或更多种细胞因子,也可根据细胞免疫表型区分分泌细胞因子的细胞的亚型,进行多参数相关分析; 安全:减少样本处理与生物源性污染 接近生物体的分析条件:全血检测保留细胞及生化微环境更准确反映了体内状况.生物帮上面有这方面的详细内容,

⑩ 检测T,B,NK和吞噬细胞免疫功能的方法分别有哪些

免疫细胞功能试验包括体内和体外试验。免疫细胞功能体外试验主要根据免疫细胞的增殖活性、分泌活杀伤活性等特性而进行实验设计。具体免疫细胞功能检测内容包括:①淋巴细胞功能检测,包括T细胞增殖试验、T细胞分泌功能测定、T细胞介导的细胞毒试验以及体内试验;B细胞增殖试验、溶血空斑试验、酶联免疫斑点法以及体内试验;NK细胞活性检测方法:酶释放法、放射性核素释放法、化学发光法、流式细胞术法等。②吞噬细胞功能检测,方法有趋化功能检测、吞噬和杀菌功能测定等。

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