乳糖蛋白的检测方法

㈠ 我们该如何判断自己的乳糖耐受程度

可以通过乳糖不耐受会发生的症状，来判断自己的乳糖耐受程度。

其它症状

如果身体不能吸收和消化乳清蛋白，可能会引起腹胀，这是由于腹部的细菌溶解引起的。皮肤湿疹是一种很容易看到的常见病，但很少有人知道，当乳糖不耐受发生时，也可能会发生皮肤湿疹。所以如果有这样的病，各方面都要考虑到。最后，乳糖不耐受患者也会出现严重的便秘情况。但要强调一点，腹泻和便秘并不矛盾，由于乳清蛋白有一半在体内被消化吸收，进入胃后会有细菌溶解的情况发生，这样就会转化为甲烷气体，限制肠胃的肠蠕动，进而出现严重的便秘。如果出现了以上情况，那么大概率就是乳糖不耐受。平时在饮食方面，就需要更加注重饮食搭配的问题了。

（图片来源于网络，如有侵权，请联系作者删除）

㈡ 如何测定乳制品中蛋白质的含量

测N一般是用凯氏定氮法的。一般来说只有蛋白质含有N，所以可以先测N的量，再通过换算来得到蛋白质的量。（三聚氰胺正是利用了这个定氮法的不足钻了空子）

㈢ 牛奶的检测有哪些

牛奶检测，一般检测乳脂含量，比重，蛋白质含量，乳糖，糖感官评定，理化检验，微生物，掺杂乳，水分、溶解度和杂质度等！用的设备一般乳稠计，罗兹哥特里抽脂瓶，毛氏抽脂瓶，冰点仪，盖勃乳脂计，PLC杂质度过滤机，索式抽脂器等。

检测项目：

理化指标：脂肪、蛋白质、碳水化合物、总干物质等营养素维生素、矿物质、微量元素、营养强化剂等微量成分。

有害物质： 兽药残留、农药残留、重金属等环境污染物。

添加剂：三聚氰胺、皮革水解蛋白、解抗剂、防腐剂等掺假物质。

微生物指标：细菌、病原性微生物等。

乳制品检测：

乳制品工业是食品制造业中发展最快的行业，改革开放以来，我国乳制品工业在行业规模、乳制品产量、技术装备、质量安全等方面都有了根本的转变，但由于乳制品工业发展时间短，发展速度过快，基础薄弱，特别是由于奶源管理、质量控制、

检测手段落后等方面的原因，质量安全问题时有发生，给消费者的生命和财产安全带来损害，所以，乳制品检测水品的提高，是现今社会应该注重的问题。科标生物检测中心可提供乳制品检测服务。

以上内容参考：网络-乳制品检测

㈣ 如何测定牛奶中蛋白质含量,要具本步骤.原理和方法,知道的说下,谢谢

实验原理：
蛋白质是含氮的有机化合物。食品与硫酸和催化剂一同加热消化， 使蛋白质分解，分解的氮与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离， 用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数， 即为蛋白质含量。

实验仪器与试剂
（1）定氮蒸馏装置 （2） 硫酸铜
（3） 硫酸钾 （4） 浓硫酸
（5） 2%硼酸溶液
（6） 混合指示液：1份0.1%甲基红乙醇溶液与5份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。也可用2份0.1%甲基红乙醇溶液与1份0.1%次甲基蓝乙醇溶液临用时混合。
（7） 40%氢氧化钠溶液。
（8） 0.05N硫酸标准溶液或0.05N盐酸标准溶液。
实验步骤
（1）试样制备
精密称取 0.2～2.0g 固体样品，移入干燥的 100mL 或 500mL 定氮瓶中，加入 0.2g 硫酸铜，3g 硫酸钾及 20mL 硫酸，稍摇匀后于瓶口放一小漏斗，将瓶以45°角斜支于有小孔的石棉网上。小心加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力，并保持质瓶内液体微沸， 至液体呈蓝绿色澄清透明后，再继续加热 0.5h。取下放冷，小心加 20mL 水。放冷后，移入 100mL 容量瓶中，并用少量水洗定氮瓶，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度， 混匀备用。取与处理样品相同量的硫酸铜、硫酸钾、硫酸按同一方法做试剂空白试验。
（2）定氮装置的连接
于水蒸气发生瓶内装水至约2/3处， 加甲基红指示液数滴及数毫升硫酸，以保持水呈酸性，加入数粒玻璃珠以防暴沸， 用调压器控制，加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。
（3）试样测定
向接收瓶内加入 10mL2% 硼酸溶液及混合指示液1滴， 并冷凝管的下端插入液面下，吸取 10.0mL 样品消化稀释液由小玻杯流入反应室，并以 10mL 水洗涤小烧杯使流入反应室内，塞紧小玻杯的棒状玻塞。将 10mL40% 氢氧化钠溶液倒入小玻杯，提起玻塞使其缓缓流入反应室，立即将玻塞盖紧， 并加水于小玻杯以防漏气。夹紧螺旋夹，开始蒸馏。 蒸气通入反应室使氨通过冷凝管而进入接收瓶内，蒸馏 5min。移动接受瓶，使冷凝管下端离开液面，再蒸馏 1min。然后用少量水冲洗冷凝管下端外部。取下接收瓶，以 0.05N 硫酸或 0.05N 盐酸标准溶液滴定至灰色或蓝紫色为终点。
7 结果计算
7.1计算
(V1-V2)×N×0.014
X= ——————————— ×F×100
m×10÷100
式中： X—样品中蛋白质的含量，%；
V1—样品消耗硫酸或盐酸标准液的体积，mL；
V2—试剂空白消耗硫酸或盐酸标准液的体积，mL；
N—硫酸或盐酸标准溶液的当量浓度；
0.014—1N硫酸或盐酸标准溶液 1mL 相当于氮克数；
m—样品的质量（体积），g(mL)；
F—氮换算为蛋白质的系数。蛋白质中的氮含量一般为15～17.6%，按 16%计算乘以6.25即为蛋白质，花生为5.46。

㈤ 目前蛋白质的精确定量检测方法都有哪些

蛋白质鉴定是指对复配类蛋白品通过前处理提纯并通过生物质谱鉴定蛋白种类及含量（包括具体的分子量、定性、定量结果）或对纯蛋白品通过生物质谱鉴定具体的蛋白类型（包括具体的分子量、定性、定量结果）。
蛋白质种类鉴定业务范围：

水溶性蛋白、水解酶、蛋白酶、脂肪酶； 血清蛋白（白蛋白和球蛋白）、牛血清（白）蛋白、血清球蛋白； 乳清蛋白、复合蛋白质、乳清蛋白粉、β-乳球蛋白，α-乳白蛋白，免疫球蛋白，乳铁蛋白； 大豆分离蛋白、小麦蛋白（谷朊粉）、酪蛋白、纤维素酶、β-葡聚糖酶、内切β-葡聚糖酶、β-葡萄糖苷酶、淀粉酶、葡萄糖氧化酶、木聚糖酶、糖化酶； 碱性蛋白酶、果胶酶、聚半乳糖醛酸水解酶、脂肪酶、过氧化氢酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、胰蛋白酶、超氧化物歧化酶、弹性蛋白酶。 动物饲料，大米，油料种子、谷类食品、谷类，大豆、玉米、鱼肉、果汁等各种食物中蛋白种类及含量。

㈥ 如何鉴定牛奶中的多种蛋白质中有一种是酪蛋白

酪蛋白是牛奶中主要蛋白质,其浓度约为35g/L,是含磷蛋白质的复杂混合物。蛋白质是两性化合物，溶液的酸碱性直接影响蛋白质分子所带的电荷。当调节牛奶的pH值达到酪蛋白的等电点(pl)4.8左右时，蛋白质所带正、负电荷相等，呈电中性，此时酪蛋白的溶解度最小，将会以沉淀的形式从牛奶中析出。而乳糖仍存在于牛奶中，通过离心的方法能将酪蛋白和乳糖分离出。根据酪蛋白不溶于乙醇和乙醚的特性，可用乙醇洗涤以除去粗制品中的脂质，使酪蛋白初步得到纯化。

牛奶中含有40％-60%的乳糖，乳糖是一种二糖，它由一分子半乳糖及一分子葡萄糖通过ß-1，4苷键连接。在乳糖分子中，仍保留着葡萄糖部分的半缩醛羟基，所以乳糖是还原性二糖，它的水溶液有变旋光现象，达到平衡时的比旋光度是+53.5。含有一分子结晶水的乳糖的熔点210℃。

主要药品与仪器:
冰醋酸，乙醇n=0.95，乙醚，牛奶，浓盐酸，pH试纸Ph=3-5,PH=7-9,硅胶G，0。02mol/L醋酸钠溶液，乙酸乙酯，异丙酸，吡啶，苯胺，二苯胺，牛乳糖（纯），葡萄糖（纯），活性炭粉，浓硝酸，米伦试剂，硫酸，100g/L氢氧化钠溶液，50g/L氢氧化钠溶液，10g/L硫酸铜溶液，滤纸，尼龙布（200目）。
低速冷冻离心机（大容量），自动指示旋光测定仪，层析缸，抽气吸滤瓶500mL,布氏漏斗，表面皿，烧杯600mL，400mL，100mL，圆底烧瓶，冷凝管，试管10X10mm，薄层层析装置，三角烧瓶500mL，100mL，容量瓶25mL,恒温水浴。

操纵步骤:

1 从牛奶中分离酪蛋白
取50mL去脂牛奶置于150mL烧杯内[1]。在水浴锅中小心加热至40℃，保持温度，边搅拌边慢慢滴加4mL冰醋酸，此时即有白色的酪蛋白沉淀析出，继续滴加稀醋酸溶液，直至酪蛋白不再析出为止，混合液的PH值为4.8[2]。继续搅拌并使悬浊液冷却到室温。放置10min后，将混合物放入离心杯中，于3000r/min离心15min。经滤布过滤上清液于100mL烧杯中，保留做乳糖的分离试验。沉淀（即酪蛋白）转移至另一个烧杯中，加15mL体积分数为=0.95的乙醇，搅匀后于布氏漏斗中抽气过滤，过滤后用滤布代替滤纸。用体积比为1：1的乙醇-乙醚混合液小心洗涤沉淀2次（每次10mL），最后再用5mL乙醚溶液洗涤1次[3]，然后吸滤至干。将干粉铺于表面皿上在室温下挥发去乙醚，烘干，称量并计算牛奶中酪蛋白的含量。
取少量酪蛋白溶解于水中，用缩二脲反应，蛋白黄色反应，米伦反应分别定性地观察产生的蛋白质呈现色。

2 乳糖的分离和鉴定
将实验1中离心分去酪蛋白后的上清液（即乳清）置于小蒸发皿中，用蒸气浴小心浓缩至5mL左右，稍冷却后，迅速加入10mL 95%乙醇，并用玻璃棒搅拌摩擦，使乳糖析出完全。经布氏漏斗抽气过滤用95%乙醇将乳糖晶体洗涤2次（每次用95%的乙醇将乳糖晶体洗涤2次每次5mL），即得粗乳糖晶体。
将得到的粗乳糖晶体溶于尽可能少的热水中（50-60℃，约8-10mL）。然后再在次热溶液中缓慢滴加乙醇，边加边摇，直至产生混浊为止，再小心水浴中加热使混浊消失，将混合液放置过夜，让其自然冷却，吸滤收集析出的晶体用95%乙醇将乳糖晶体洗涤两次（每次用95%乙醇将乳糖晶体洗涤2次每次5mL）。抽干，产品即含有一分子结晶水的纯乳糖（C12H22O11• H2O）。将精制后的乳糖干燥并测定其比旋度。

1．牛奶在实验前不能放置很久，时间过长则其中的乳糖会慢慢变为乳酸影响乳糖分离。
2．加入的醋酸不可过量，过量酸会促使牛奶中的乳糖水解为半乳糖和葡萄糖。
3．洗涤时注意不要靠近火。
4．进行乳糖的变旋光现象操作时应先将测定的仪器和药品准备好，溶液的配置应尽量在2min完成。
5．氨水能迅速催化乳糖的变旋光现象，使之达到平衡。

㈦ 如何测定乳粉中的乳糖和蔗糖含量试写出试验思路和流程

方法二 乳糖、蔗糖和总糖的测定（莱因-埃农氏法） 9 方法提要 乳糖：样品经除去蛋白质以后，在加热条件下，直接滴定已标定过的费林氏液，样液中的乳糖将费林氏液中的二价铜 还原为氧化亚铜。以次甲基蓝为指示剂，以终点稍过量时，乳糖将蓝色的氧化型次甲基蓝还原为无色的还原型次甲基 蓝。根据样液消耗的体积，计算乳糖含量。 蔗糖：样品除去蛋白质后，其中蔗糖经盐酸水解转化为具有还原能力的葡萄糖和果糖，再按还原糖测定。将水解前后 转化糖的差值乘以相应的系数即为蔗糖含量。 总糖：乳糖和蔗糖之和。 10 试剂 所有试剂，如未注明规格，均指分析纯；所有实验用水，如未注明其他要求，均指三级水。 10．1 费林氏液（甲液和乙液） 10．1．1 甲液：取34.639g硫酸铜，溶于水中，加入0.5mL浓硫酸，加水至500mL。 10．1．2 乙液：取173g酒石酸钾钠及50g氢氧化钠溶解于水中，稀释至500mL，静置两天后过滤。 10．2 次甲基蓝溶液：10g/L。 10．3 盐酸溶液：体积比1：1。 10．4 酚酞溶液：0.5g酚酞溶液于75mL体积分数为95%的乙醇中，并加入20mL水，然后再加入约0.1mol/L的氢氧化钠 溶液，直到加入一滴立即变成粉红色，再加入水定容至100mL。 10．5 氢氧化钠溶液：c（NaOH）为300g/L。取300g氢氧化钠，溶于1000mL水中。 10．6 乙酸铅溶液：c（PbAc 2 ）为200g/L。取20g乙酸铅，溶解于100mL水中。 10．7 草酸钾-磷酸氢二钠溶液：取草酸钾3g，磷酸氢二钠7g，溶解于100mL水中。 11 仪器 ：常用理化实验室仪器。 12 操作步骤及结果计算 12．1 费林氏液的标定 12．1．1 用乳糖标定 12．1．1．1 称取预先在92～94℃烘箱中干燥2h，乳糖标样约0.75g（准确至0.2mg），用水溶解并稀释至250mL。将 此乳糖溶液注入一个50mL滴定管中，待滴定。 12．1．1．2 预滴定：取10mL费林氏液（甲、乙液各5mL）于250mL三角烧瓶中。再加入20mL蒸馏水，从滴定管中放出 15mL乳糖溶液于三角瓶中，置于电炉上加热，使其在2min内沸腾，沸腾后关小火焰，保持沸腾状态15s，加入3滴次甲 基蓝溶液（10.2），继续滴入乳糖溶液至蓝色完全褪尽为止，读取所用乳糖 的毫升数。 12．1．1．3 精确滴定：另取10mL费林氏液（甲、乙液各5mL）于250mL三角烧瓶中，再加入20mL蒸馏水，一次加入比 预备滴定量少0.5～1.0mL的乳糖溶液，置于电炉上，使其在2min内沸腾，沸腾后关小火焰，维持沸腾状态2min，加入 3滴次甲基蓝溶液，然后继续滴入乳糖溶液（一滴一滴徐徐滴入），待蓝色完全褪尽即为终点。以此滴定量作为计算 的依据（在同时测定蔗糖时，此即为转化前滴定量）。 12．1．1．4 按式（2）、（3）计算乳糖测定时，费林氏液的乳糖校正值（f 1 ）: V 1 ——滴定时消耗乳糖液量，mL； m 1 ——称取乳糖的质量，g； AL 1 ——由乳糖液滴定毫升数查表1所得的乳糖数，mg。 表1 乳糖及转化糖因数表（10mL费林氏液） 12．1．2 用蔗糖标定 12．1．2．1 称取在105℃烘箱中干燥2h的蔗糖约0.2g（准确到0.2mg），用50mL水溶解并洗入100mL容量瓶中，加水 10mL，再加入10mL盐酸（10.3），置75℃水浴锅中，时时摇动，在2min30s至2min45s之间，使瓶内温度升至67℃。 自达到67℃后继续在水浴中保持5min，于此时间内使其温度升至69.5℃，取出，用冷水冷却，当瓶内温度冷却至35℃ 时，加2滴甲基红指示剂（10.4），用300g/L的氢氧化钠（10.5）中和至呈中性。冷却至20℃，用水稀释至刻度，摇 匀。并在此温度下保温30min后再按12.1.1.2和12.1.1.3操作。得出滴定10mL费林氏液所消耗的转化糖量。 12．1．2．2 按式（4）、（5）计算蔗糖测定时，费林氏液的蔗糖校正值（f 2 ）： V 2 ——滴定时消耗蔗糖液量，mL； m 2 ——称取蔗糖的质量，g； AL 2 ——由蔗糖液滴定毫升数查表1所得的转化糖数，mg。 12．2 乳糖的测定 12．2．1 样品处理 12．2．1．1 称取2.5～3g样品（准确至0.01g），用100mL水分数次溶解并洗入250mL容量瓶中。 12．2．1．2 加4mL乙酸铅（10.6）、4mL草酸钾-磷酸氢二钠溶液，每次加入试剂时都要徐徐加入，并摇动容量瓶， 用水稀释至刻度。静止数分钟，用干燥滤过滤，弃去最初25mL滤液后，所得滤液作滴定用。 12．2．2 滴定 12．2．2．1 预滴定：将此滤液注入一个50mL滴定管中，待测定。取10mL费林氏液（甲、乙液各5mL）于250mL三角烧 瓶中，再加入20mL蒸馏水，置于电炉上加热，使其在2min内沸腾，沸腾后关小火焰，保持沸腾状态15s，加入3滴次甲 基蓝（10.2），然后徐徐滴入乳糖溶液至蓝色完全褪尽为止，读取所用乳糖的毫升数。 12．2．2．2 精确滴定：另取10mL费林氏液（甲、乙各5mL）于250mL三角烧瓶中，再加入20mL蒸馏水，一次加入比预 备0.5～1.0mL的乳糖溶液，置于电炉上，使其在2min内沸腾，沸腾后关小火焰，维持沸腾状态2min，加入3滴次甲基 蓝溶液，然后一滴一滴徐徐滴入乳糖溶液，待蓝色完全褪尽即为终点。以此滴定量作为计算的依据（在同时测定蔗糖 时，此即为转化后滴定量）。 12．2．3 乳糖含量的计算 式中：L——样品中乳糖的质量分数，g/100g； F 1 ——由消耗样液的毫升数查表1所得乳糖数，mg； f 1 ——费林氏液乳糖校正值； V 1 ——滴定消耗滤液量，mL； m——样品的质量，g。 12．3 蔗糖的测定 12．3．1 转化前转化糖量的计算 利用测定乳糖时的滴定时，自表1中查出相对应的转化糖量，按式（7）计算： 式中：F 2 ——由测定乳糖时消耗样液的毫升数查表1所得乳糖数，mg； f 2 ——费林氏液蔗糖校正值； V 1 ——滴定消耗滤液量，mL； m——样品的质量，g。 12．3．2 样液的转化及滴定 取50mL样液于100mL容量瓶中，加水10mL，再加入10mL的盐酸（10.3），置75℃水浴锅中，时时摇动，在2min30s至2min45s 之间，使瓶内温度升至67℃。自达至67℃后继续在水浴中保持5min，于此时间内使其温度升至69.5℃，取出，用冷水 冷却，当瓶内温度冷却至35℃时，加2滴酚酞溶液剂（10.4），用氢氧化钠（10.5）中和至呈中性，冷却至20℃，用 水稀释至刻度，摇匀。并在此温度下保温30min后再按12.2.2滴定，得出滴定10mL费林氏液所消耗的转化液量。 式中：F 3 ——由V2 2 1查得转化糖数，mg； f 2 ——费林氏液蔗糖校正值； m——样品的质量，g； V 1 ——滴定消耗转化液量，mL。 12．3．3 蔗糖含量的计算 式中：L 1 ——转化后转化糖的质量分数，%； L 2 ——转化前转化糖的质量分数，%。 12．3．4 若样品中乳糖与蔗糖之比超过3：1时，则计算乳糖时应在滴定量中加上表2中的校正值数后再查表1和计算。 12．3．5 总糖=蔗糖+乳糖 13 允许差 13．1 重复性 ：由同一分析人员在短时间间隔内测定的两个结果之间的差值，不应超过结果平均值的1.5%。 13．2 重现性 ：由不同实验室的两个分析人员对同一样品测得的两个结果之差，不应超过结果平均值的2.5%。 表2 乳糖滴定量校正值数 方法三 蔗糖的测定——（酶比色法） 同GB/T 16286。

㈧ 如何检测细胞中的糖类，脂肪、蛋白质

细胞中的糖类鉴定：
还原性糖（葡萄糖、麦芽糖、乳糖等）用斐林试剂，且水浴加热形成砖红色沉淀；
淀粉用碘液鉴定，淀粉遇碘变蓝
细胞中的脂肪用苏丹Ⅲ染液鉴定，用显微镜观察呈橘黄色，用苏丹Ⅳ染液鉴定，用显微镜观察呈红色。
细胞中的蛋白质用用双缩脲试剂产生紫色反应

㈨ 乳糖检测标准是什么

百检乳糖检测标准

GB 1886.98-2016食品安全国家标准 食品添加剂 乳糖醇(又名4-β-D吡喃半乳糖-D-山梨醇)

GB 1886.176-2016食品安全国家标准 食品添加剂 异构化乳糖液

GB 5009.8-2016食品安全国家标准 食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定

GB 5413.5-2010食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中乳糖、蔗糖的测定

GB 25595-2018食品安全国家标准 乳糖

GB/T 33409-2016β-半乳糖苷酶活性检测方法 分光光度法

HG/T 3461-2012化学试剂 一水合α-乳糖(α-乳糖)

NY/T 1422-2007乳及乳制品中乳糖的测定酶-比色法

NY/T 2279-2012食用菌中岩藻糖、阿糖醇、海藻糖、甘露醇、甘露糖、葡萄糖、半乳糖、核糖的测定 离子色谱法

NY/T 2659-2014牛乳脂肪、蛋白质、乳糖、总固体的快速测定 红外光谱法

SN/T 0871-2012出口乳及乳制品中乳糖的测定方法

TB/T 2930-1998铁路生活饮用水中总大肠菌群检测法β-半乳糖苷酶滤膜荧光法

YY/T 1190-2010乳糖胆盐发酵培养基

㈩ 乳糖不耐受有哪些检测方法 低乳糖牛奶能解决乳糖不耐受吗

乳糖不耐受检测方法：

为了避免不适当饮奶对健康造成的损害，专家建议：最好在饮奶前检查自己是否耐受乳糖，然后选择不同类型的奶制品，检查的办法分三类。

1．临床诊断，医生根据患者腹痛、腹胀、腹泻等症状，确定其是否耐受乳糖。这种方法的缺点是不能发现隐性乳糖不耐受者。

2．在饮用牛奶后做“呼氢试验”。这种做法需要特殊仪器，如受试者有吸烟史或蔗糖不耐受症，测试结果会不准确。

3．在饮用牛奶后，测试尿液中半乳糖的浓度，这是目前国外最常用的一种方法，更为简便、经济、可靠。伊利在本次活动中选用的即为此种检测方法。

低乳糖奶可以解决乳糖不耐受：

在牛奶加工过程中，加入安全的乳糖酶，像体内乳糖被正常消化一样，乳糖被消化为葡萄糖和半乳糖。由于酶的消化，牛奶中的乳糖含量便下降，所以这样的牛奶被称作低乳糖牛奶。 由于低乳糖牛奶生产中，利用乳糖酶将乳糖消化成更利于吸收的葡萄糖和半乳糖，这类产品可以满足正常消费者、乳糖不耐受者、乳糖酶缺乏者饮用牛奶、充分吸收牛奶营养的需要。 由于乳糖的甜度较乳糖酶消化后的产物---葡萄糖和低聚半乳糖合起来的甜度低，所以，仔细品尝会发现，低乳糖牛奶甜度比正常牛奶略为甜一点。