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精氨酸液相检测方法

发布时间:2022-07-02 04:45:24

⑴ 检验氨基酸用什么方法

1.茚三酮反应,氨基酸与其发生反应缩合成蓝色物质。除开脯氨酸和羟脯氨酸,他们与其反应生成黄色衍生物。
2.桑格反应,氨基酸与其反应会生成黄色的2,4-二硝基氨基酸,可以用于鉴定多肽或蛋白质的N端氨基酸。
3.艾德曼反应(DNFB反应),即氨基酸与苯异硫氰酸反应生成相应的苯氨基硫甲酰氨基酸。

⑵ 精氨酸 在高效液相条件下出峰吗

氨基酸在紫外条件下没有吸收,所以直接进样是不出峰,一般测定都采用滴定的方法。
如果液相仪器有条件,可以考虑用衍生的方法检测。衍生就是通过一些活性物质,把没有紫外吸收的样品转化成有紫外吸收的样品,这样就可以检出色谱峰了。有柱前衍生和柱后衍生的一些方法,具体的可以查一下相关的文献。
之前用柱前衍生检测过酪氨酸、组氨酸等氨基酸,不过精密度特别不好。

⑶ 精氨酸的测定方法

该方法采用电位滴定法测定精氨酸(C6H14N4O2)的含量。
该方法适用于精氨酸的含量测定。 供试品加无水甲酸使溶解后,加冰醋酸,照电位滴定法,用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定,并将滴定的结果用空白试验校正,即得。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于8.710mg的C6H14N4O2。
试剂:1. 水(新沸放置至室温)
2. 冰醋酸
3. 无水甲酸
4. 高氯酸滴定液(0.1mol/L)
5. 基准邻苯二甲酸氢钾
6. 无水冰醋酸
7.结晶紫指示液
仪器设备:
试样制备:1. 高氯酸滴定液(0.1mol/L)
配制:取无水冰醋酸(按含水量计算,每1g水加醋酐5.22mL)750mL,加入高氯酸(70~72%)8.5mL,摇匀,放冷,加无水冰醋酸适量使成1000mL,摇匀,放置24小时。若所测供试品易乙酰化,则须用水分测定法测定本液的含水量,再用水和醋酐调节至本液的含水量为0.01%~0.2%。
标定:取在105℃干燥至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾约0.16g,精密称定,加无水冰醋酸20mL使溶解,加结晶紫指示液1滴,用本液缓缓滴定至蓝色,并将滴定结果用空白试验校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于20.42mg的邻苯二甲酸氢钾。根据本液的消耗量与邻苯二甲酸氢钾的取用量,算出本液的浓度。
2.结晶紫指示液
取结晶紫0.5g,加冰醋酸100mL使溶解。
贮藏:置棕色玻璃瓶中,密闭保存。
操作步骤:取该品约80 mg,精密称定,加无水甲酸3mL使溶解,加冰醋酸50mL,照电位滴定法,用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定,并将滴定的结果用空白试验校正,即得。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于8.710mg的C6H14N4O2。
注1:“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一,“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。
注2:“水分测定”用烘干法,取供试品2~5g,平铺于干燥至恒重的扁形称瓶中,厚度不超过5mm,疏松供试品不超过10mm,精密称取,打开瓶盖在100~105℃干燥5小时,将瓶盖盖好,移置干燥器中,冷却30分钟,精密称定重量,再在上述温度干燥1小时,冷却,称重,至连续两次称重的差异不超过5mg为止。根据减失的重量,计算供试品中含水量(%)。
参考文献:中华人民共和国药典,国家药典委员会编,化学工业出版社,2005年版二部,p.831。

⑷ 精氨酸液相检测为什么要进行衍生化

一般氨基酸都没有紫外吸收,如果你直接进液相,那么根本就不会有色谱峰的。
衍生化其实是让氨基酸和衍生试剂反应,然后转化成一种有紫外吸收的物质,这样就会出现色谱峰了。
一般柱前衍生,是吸取氨基酸样品,吸取衍生试剂和缓冲液适量,然后混合,最后一起进样。就像是在色谱柱前做了一个小型的反应似的。

⑸ 18种氨基酸用液相色谱该怎么检测

建立一种准确、快速柱前衍生高效液相色谱法测定脑卒中患者血清 中18种游离氨基酸的方法,为临床治疗脑卒中提供依据.方法:利用高效液相色谱二极管阵列检测法对AQC衍生的氨基酸产物进行分离.采用thermo C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,PH 5.09的乙酸铵溶液和60%的乙腈水溶液为流动相,检测波长248nm,利用梯度洗脱的方式测定血清中1 8种氨基酸.结果:谷氨酰胺在0.0125-2mmol/L浓度范围内,胱氨酸在0.00625-0.25mmol/L浓度范围内,其余16种氨基酸在 0.0 125-0.5mmol/L浓度范围内线性关系良好.R2为0.9907-0.9999,RSD为1-4%.结论:利用此方法可以检测缺血性脑卒中患者血 清中游离氨基酸,测定结果准确可靠,方法简单易行.

⑹ 氨基酸态如何检测

检测概述
科标检测在氨基酸检测方面具有资深经验,为广大客户提供专业、全面的检测服务:

氨基酸是构成蛋白质的基本单位,在食品、医药、饲料添加剂、化妆品及工农业等诸多方面有着广泛的应用。随着生物工程技术产业的发展逐渐成为21世纪全球的主要产业之一,氨基酸的需求量越来越大,品种变更越来越快,工艺改革越来越新。

检测领域

检测产品:豆类谷物、药材、鱼类、肉类、饲料、食用菌类、保健品、化妆品等等。

检测项目:甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、酪氨酸、蛋氨酸、

苏氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、精氨酸和组氨酸、胱氨酸、色氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺等。

检测标准
GB/T 15924.10-2008 实验动物 配合饲料 氨基酸的测定
GB/T 15399-1994 饲料中含硫氨基酸测定方法--离子交换色谱法
GB/T 15400-1994 饲料中色氨酸测定方法--分光光度法
GB/T 17419-1998 含氨基酸叶面肥料
GB/T 18246-2000 饲料中氨基酸的测定
GB/T 18654.11-2008 养殖鱼类种质检验 第11部分:肌肉中主要氨基酸含量的测定
GB/T 23296.12-2009 食品接触材料 高分子材料 食品模拟物中11-氨基十一酸的测定 高效液相色谱法
GB/T 28722-2012 氨基酸中铁和铅的测定 原子吸收光谱法
GB/T 5009.124-2003 食品中氨基酸的测定
GB/T 8315-2013 茶 游离氨基酸总量的测定
NY 1529-2010 含氨基酸水溶肥料
NY/T 1518-2008 鹿茸中氨基酸的测定 氨基酸自动分析仪法
NY 39-1987 饲料级L-赖氨酸盐酸盐
NY/T 56-1987 谷物籽粒氨基酸测定的前处理方法
QB/T 2409-1998 化妆品中氨基酸含量的测定
QB/T 4356-2012 黄酒中游离氨基酸的测定 高效液相色谱法
SN/T 0930-2000 进出口花粉中全氨基酸的测定方法氨基酸自动分析仪法
YC/T 282-2009 烟叶 游离氨基酸的测定 氨基酸分析仪法
YC/T 448-2012 烟草及烟草制品 游离氨基酸测定 离子色谱-积分脉冲安培法
如果有需要可以到第三方检测机构,青岛科标检测

⑺ 氨基酸的检测方法哪些

1. 分光光度法氨基酸检测:主要是利用氨基酸与衍生剂发生化学反应,产生蓝紫色化合物,该化合物在某一波长处有最大吸收峰,根据吸收值大小得到氨基酸含量。常用的衍生剂为茚三酮。
2. 毛细管电泳法氨基酸检测:根据分离原理的不同,可分为毛细管区带电泳、毛细管凝胶电泳、毛细管等电电泳、毛细管等速电泳以及胶束电动力学毛细管电泳。其中,毛细管区带电泳和胶束电动力学毛细管电泳可用于氨基酸检测。
3. 近红外光谱法氨基酸检测:利用有机化合物的含氢基团在特定波长区域跃迁,产生光谱的变化,结合统计学方法间接地实现氨基酸的定量检测。
4. 气相色谱法氨基酸检测:将氨基酸衍生化处理变为容易气化的物质,根据气态样品中各组分在流动相和固定相中的分配系数的不同,实现对氨基酸的定量分析。
5. 高效液相色谱法氨基酸检测:是最常用的一种氨基酸检测方法。由于大多数氨基酸本身没有紫外吸收和荧光反应,因此需要对样品进行衍生化处理将其转化为有紫外吸收和发射荧光的物质,衍生可分为柱前衍生和柱后衍生。

⑻ 如何用液相色谱仪测氨基酸

反相高效液相色谱法测定烟叶中的游离氨基酸
氨基酸是烟草中的一类重要化学物质,在烟草调制、醇化或发酵、加工直至燃烧过程中,游离氨基酸与还原糖之间可发生酶催化及非酶催化的棕色化反应,生成多种具有蒸煮、烤香、爆米花香味特征的吡喃、吡嗪、吡咯、吡啶类等杂环化合物,某些氨基酸如苯丙氨酸还可自身分解成香味化合物,如苯甲醇、苯乙醇等。氨基酸含量与烟草制品的吃味有着密切的关系,氨基酸在燃烧裂解过程中一般形成具有刺激性的含氮化合物,对烟气香吃味产生不良影响,个别氨基酸还产生HCN等危害健康的烟气成分。一般说来,氨基酸含量太高,烟气辛辣、味苦、刺激性强烈;含量太低时烟气则平淡无味缺少丰满度。因此对氨基酸的分析是一项很有意义的工作,二十世纪60年代以来,国内外在这方面做了大量的工作[1-5]。
植物游离氨基酸样品的制备,国内外采用的提取剂和纯化方法各不相同。据文献报道[6-7],盐酸、不同浓度的乙醇溶液均可以用来提取植物组织中的游离氨基酸;提取液纯化则有用阳离子交换树脂、5%磺基水杨酸、活性炭或乙醚等方法。本实验对不同的提取方式和不同的纯化方法进行了对比研究,确定提取烟叶中游离氨基酸的较佳提取剂和纯化方法。提取、纯化后的样品,采用OPA、FMOC联合柱前衍生反相高效液相色谱法对烟叶中的游离氨基酸进行了测定。该方法使带氨基和亚氨基基团的氨基酸能够被同时测定,且得到较好的定性定量结果。
1 实验
1.1 仪器
Agilent公司HP1100型高效液相色谱仪(带可变波长紫外检测器和自动进样器),PE公司Lambda Bio40 紫外-可见分光光度计。
1.2 试剂
正缬氨酸(Norvaline,内标),OPA ,FMOC,均为色谱纯,Agilent公司提供;硼酸缓冲溶液,Agilent公司提供;
醋酸钠(NaAc),分析纯,中国医药(集团)上海化学试剂公司;三乙胺(TEA),四氢呋喃(THF),乙腈(CH3CN),甲醇(MeOH),均为色谱纯,Fisher公司试剂;
氨基酸标样包括:天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、天冬酰胺(Asn)、谷氨酰胺(Gln)、丝氨酸(Ser)、组氨酸(His)、甘氨酸(Gly)、苏氨酸(Thr)、丙氨酸(Ala)、精氨酸(Arg)、酪氨酸(Tyr)、胱氨酸(Cys)、缬氨酸(Val)、蛋氨酸(Met)、苯丙氨酸(Phe)、异亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)、脯氨酸(Pro),均为生化试剂,中国医药(集团)上海化学试剂公司;
苯乙烯阳离子交换树脂(732型),天津树脂厂。
1.3 样品处理
将烟叶在烘箱中恒温40℃烘干至恒重,粉碎,过80目筛,筛下物为实验用烟样粉末,置于广口瓶中备用。准确称取烟样粉末1.000g于干燥的洁净试管中,用一定浓度的乙醇溶液室温超声波提取半小时,过滤,相同浓度的乙醇溶液洗涤,再提取一次,合并后的滤液用阳离子交换柱洗脱,然后用95ml 4mol/L氨水淋洗阳离子交换柱,淋洗液恒温浓缩至干,最后用3ml 0.1mol/L稀盐酸溶液溶解浓缩物,将此溶液离心分离20min,0.45μm微孔滤膜过滤,加入浓度为5nmol/μ1的内标10μ1,定容至50ml,HP1100液相色谱仪进行氨基酸分析。
样品自动柱前衍生化:Agilent公司G1313A自动进样器进样。程序为:吸取5μl硼酸缓冲液,再吸取1μ1 OPA试剂,洗针一次,吸取样品2μl,原位混合6次。吸取1μl FMOC试剂,洗针一次,原位混合3次,进样。
1.4 色谱条件
色谱柱:Hypersil AA-ODS C18 2.1×200mm
流动相A:1.36±0.025g醋酸钠,加入500ml纯水溶解,加90μl三乙胺,用1%醋酸调pH=7.20±0.05,再加入1.5ml四氢呋喃,混合均匀。
流动相B:1.36±0.025g醋酸钠,加入100ml纯水溶解,用1%醋酸调pH=7.20±0.05,将此溶液加至200ml乙腈和200ml甲醇的混合物中,并混合均匀。
流速:0.45ml/min
柱温:40℃
紫外检测波长: 0~16min, 338nm; 16~25min,262nm
淋洗梯度:见表1
表1 流动相的淋洗梯度表
Table 1 The gradient time table of mobile phase
序列 时间(min) 流动相A(%) 流动相B(%) 流速(ml/min)
1 0.00 100.0 0.0 0.450
2 15.50 40.0 60.0 0.450
3 18.00 0.0 100.0 0.450
4 21.00 0.0 100.0 0.800
5 23.90 0.0 100.0 0.800
6 24.00 0.0 100.0 0.450
7 25.00 100.0 0.0 0.450
1.5 氮基酸的定性
用标样色谱图、文献参照和标样加入的方法,通过对照保留时间进行定性,对氨基酸的出峰顺序加以确认。
1.6 内标法定量
准确移取浓度为10 pmol/μ1、25 pmol/μ1、50 pmol/μ1、100 pmol/μ1、250 pmol/μ1、500 pmol/μ1、1000 pmol/μ1的氨基酸混合标样100μl于带内衬管的样品瓶中,再加入250pmol/μ1内标溶液100μl,充分混合,液相色谱分析,仪器自动计算各氨基酸的标准曲线。
2 结果与讨论
2.1 萃取溶剂的比较
氨基酸可溶解于水、乙醇、甲醇、稀酸等,因此它们均可作为烟叶中游离氨基酸的萃取溶剂,传统的方法是用乙醇和0.1mol/L的盐酸。实验发现,乙醇和0.1mol/L的盐酸萃取方法比较,提取出的烟叶中的游离氨基酸的总量变化不大,但用盐酸提取的样品分析时RSD%较大,平均8.51%,其中超过10%的有4个,甘氨酸的RSD%最大为20%;而用乙醇提取的样品分析时RSD%相对较小,平均5.12%,超过10%的只有1个。而且盐酸提取液过滤速度慢,需要30-40min,而乙醇提取液过滤只需10min左右;因此,本实验选择乙醇作为烟叶中游离氨基酸的萃取溶剂。
2.2 乙醇浓度的选择
选择五种不同浓度的乙醇溶液进行了烟样中游离氨基酸的提取,测定不同条件下提取液中游离氨基酸的总量,结果如图1。图中显示,在乙醇溶液浓度为80%时,烟样中总游离氨基酸的提取量最大。而且不同浓度下游离氨基酸的RSD%没有明显的变化,因此,选择80%的乙醇溶液来进行烟样中游离氨基酸的提取。

2.3 不同纯化方法的确定
在最佳乙醇溶液浓度下,分别用活性炭加入提取液吸附杂质、乙醚加入提取液萃取分离杂质、5%磺基水杨酸加入提取液沉淀去除杂质和阳离子交换树脂吸附杂质四种方法进行了纯化实验。结果发现,活性炭作为纯化剂时其色谱图中杂质峰较少,但同时氨基酸峰亦有多个消失,主要是因为活性炭对氨基酸也有较强的吸附,它在吸附杂质的同时也吸附了需要检测的氨基酸,故活性炭不适合作为纯化剂使用。乙醚和5%磺基水杨酸作为纯化剂时,杂质去除不完全,其色谱图均表现为杂质峰较多,湮没了大量氨基酸峰,且基线漂移严重,给定性定量工作带来困难。当用阳离子交换树脂进行纯化时,其色谱图中杂质峰较少,基线平稳,氨基酸峰分离较好,均可以进行定性和定量分析,故本实验选择了阳离子交换树脂作为纯化手段。
2.4 色谱分离
2.5 线性范围及标准曲线
分别取浓度为10 pmol/μ1、25 pmol/μ1、50 pmol/μ1、100 pmol/μ1、250 pmol/μ1、500 pmol/μ1、1000 pmol/μ1的氨基酸混合标样加入等体积的250 pmol/μ1的内标溶液,进行HPLC分析,以氨基酸浓度为横坐标,氨基酸与内标的面积比为纵坐标,得到各个氨基酸的标准曲线,如表2所示。从表中可以看出,各氨基酸在10-1000 pmol/μ1的浓度范围内均有良好的线性,各氨基酸标准曲线的线性相关系数均大于0.99。
表2 氨基酸的标准曲线
Table 2 Standard curves of 17 amino acids
氨基酸 线性方程 相关系数
Asp Y=0.007037x+0.004689 0.9972
Glu Y=0.007520x+0.005375 0.9961
Ser Y=0.006903x+0.038212 0.9988
His Y=0.003719x+0.020168 0.9945
Gly Y=0.005851x+0.018235 0.9966
Thr Y=0.006932x+0.021072 0.9978
Ala Y=0.006275x+0.015314 0.9912
Arg Y=0.006088x+0.016113 0.9920
Tyr Y=0.006734x+0.015022 0.9993
Cys Y=0.006004x+0.009876 0.9985
Val Y=0.006432x+0.009932 0.9927
Met Y=0.006574x+0.010346 0.9905
Phe Y=0.005098x+0.019023 0.9962
Ile Y=0.005976x+0.016235 0.9953
Leu Y=0.006044x+0.015332 0.9964
Lys Y=0.006833x+0.010437 0.9969
Pro Y=0.022455x+0.009376 0.9922
2.6 重现性实验
取云南C2F99烟样做平行实验(n=5),进行烟叶中游离氨基酸含量的检测,结果发现: Asp和 Glu含量的RSD%分别为8.0%和8.6%,这可能是二者的分离度不高引起的;His的RSD%为9.0%,这可能与其含量较低,分离效果不好有关。其它氨基酸含量的RSD%均处在3%~7%。
2.7 回收率实验
用标样加入法进行回收率实验,结果见表3。 Thr的回收率仅为68.0%,原因可能与其含量较少有关;其它15种氨基酸的回收率在81.0%~110.5%,平均回收率为93.9%,说明该方法的回收率结果令人满意。
表3 分析方法的回收率
Table 3 Recovery percents of the analytical method
氨基酸 加入量(mg/g烟样) 样品含量(mg/g烟样) 测定值(mg/g烟样) 差值(mg/g烟样) 回收率%
Asp 0.200 0.320 0.499 0.179 89.5
Glu 0.200 0.309 0.484 0.175 87.5
Asn 0.200 0.986 1.208 0.222 110.0
Ser 0.200 0.172 0.334 0.162 81.0
Gln 0.200 0.186 0.368 0.182 91.0
His 0.200 0.106 0.297 0.191 95.5
Gly 0.200 0.064 0.279 0.215 107.5
Thr 0.200 0.052 0.188 0.136 68.0
Ala 0.200 0.642 0.835 0.193 96.5
Arg 0.200 0.266 0.463 0.197 98.5
Val 0.200 0.090 0.259 0.169 84.5
Phe 0.200 0.218 0.406 0.188 94.0
Ile 0.200 0.026 0.191 0.165 82.5
Leu 0.200 0.028 0.199 0.171 85.5
Pro 0.200 1.432 1.653 0.221 110.5
Tyr 0.200 0.062 0.245 0.183 91.5
2.8 样品分析
利用该方法对不同等级的烟叶中游离氨基酸的含量进行了分析,结果见表4。从表中可以看出,在所分析的样品中,烤烟烟叶中含量最高的氨基酸是Pro,白肋烟烟叶中含量最高的氨基酸是Asp和Asn;白肋烟烟叶中氨基酸的含量高于烤烟烟叶;相同等级的烤烟烟叶,云南烟叶中的氨基酸含量高于其它产区。
表4 不同等级烟叶中游离氨基酸的含量(mg/g烟样)
Table 4 Amounts of free amino acids in different
grade tobacco leaves(mg/g tobacco leaves)
氨基酸 云南烤烟C1F 云南烤烟C2F 云南烤烟C1L 云南烤烟B1F 云南烤烟B2F 福建烤烟B1F 福建烤烟C1F 四川烤烟C1F 四川烤烟B1F 贵州烤烟C1F 贵州烤烟B1F 贵州烤烟C1L 鄂西白肋中一 鄂西白肋中二
Asp 0.24 0.31 0.60 0.40 0.38 0.37 0.26 0.37 0.26 0.26 0.32 0.35 1.73 1.59
Glu 0.36 0.32 0.21 0.17 0.16 0.11 0.15 0.20 0.30 0.32 0.29 0.25 0.54 0.61
Asn 0.91 0.34 1.50 0.95 0.38 0.18 0.25 0.35 0.32 0.44 0.55 0.48 7.70 7.62
Ser 0.16 0.10 0.18 0.16 0.10 0.12 0.24 0.21 0.19 0.20 0.19 0.15 0.62 0.58
Gln 0.19 0.05 0.22 0.17 0.04 0.06 0.10 0.11 0.10 0.11 0.15 0.10 0.18 0.20
His 0.11 0.02 0.14 0.10 0.06 0.06 0.11 0.09 0.07 0.09 0.08 0.09 0.20 0.22
Gly 0.10 0.09 0.19 0.17 0.07 0.08 0.12 0.15 0.12 0.15 0.13 0.12 0.16 0.19
Thr 0.05 0.05 0.08 0.06 0.05 0.04 0.08 0.09 0.08 0.07 0.06 0.05 0.19 0.16
Ala 0.65 0.55 0.84 0.69 0.54 0.51 0.65 0.59 0.55 0.48 0.53 0.70 0.57 0.55
Arg 0.29 0.21 0.32 0.28 0.18 0.26 0.32 0.28 0.25 0.33 0.29 0.33 0.48 0.42
Tyr 0.06 0.07 0.06 0.07 0.06 0.05 0.07 0.05 0.06 0.06 0.07 0.06 0.10 0.15
Val 0.10 0.10 0.12 0.11 0.10 0.14 0.15 0.13 0.12 0.15 0.14 0.13 0.21 0.25
Met 0.07 0.07 0.09 0.08 0.06 0.06 0.08 0.08 0.08 0.07 0.09 0.08 0.12 0.13
Phe 0.26 0.12 0.28 0.23 0.10 0.21 0.25 0.21 0.25 0.28 0.30 0.33 0.44 0.59
Pro 1.14 0.83 2.13 1.51 0.69 0.66 1.03 1.23 1.11 1.32 1.18 1.09 0.25 0.35
总量 4.69 3.23 6.96 5.15 2.97 2.91 3.86 4.14 3.86 4.33 4.37 4.31 13.49 13.61
3 结论
本烟叶中游离氨基酸的分析方法采用80%的乙醇作为萃取溶剂,阳离子交换树脂对提取液进行纯化,能够最大程度地提取烟叶中的游离氨基酸并较好地去除了影响氨基酸测定的杂质,使色谱图中杂质峰较少;OPA、FMOC联和柱前衍生使带氨基和亚氨基基团的氨基酸同时得到测定;良好的梯度洗脱使各个氨基酸峰得到较好的分离,并使定量结果更加可靠。

⑼ 国家标准检测蛋白质含量测定方法

蛋白质含量测定方法就是检测N元素的含量,像三聚氰胺的问题,就是通过增加N的含量使“蛋白质”含量提高的。

国家标准检测蛋白质含量的方法叫做凯氏定氮法,食物中的蛋白质在催化加热条件下分解,导致氨和硫酸结合产生硫酸铵。 碱蒸馏采用无硫,硼酸吸收,用硫酸或盐酸标准滴定溶液滴定,根据酸耗计算氮含量,再乘以转化系数,即蛋白质含量。

具体操作步骤如下:

1.样品处理

精确称量0.2-2.0g固体样品或2-5g半固体样品或吸收10-20ml液体样品(约30-40mg氮当量)。将其转移至干燥的100毫升或500毫升氮气固定瓶中,加入0.2克硫酸铜,6克硫酸钾和20毫升硫酸,轻轻摇动,在瓶口放置一个小漏斗,将瓶子倾斜石棉网上有45度角,有小孔。

加热小火后,内容物碳化,泡沫完全停止,加强火力,保持瓶内液体稍微沸腾,直至液体呈蓝绿色澄清透明,然后继续加热0.5小时。取出并冷却,小心加入20毫升水,冷却,移入100毫升容量瓶中,用少量水洗净氮气瓶,洗净液放入容量瓶中,然后用水冲洗至刻度,混匀备用。

取相同量的硫酸铜,硫酸钾和浓硫酸作为试剂进行空白试验。然而,这种方法很危险,很难在实验室中证明。大多数实验室都有一个消化器,可以一次处理16个以上的样品和一个可以自行设定温度的呼吸机。它更安全,更可操作。

(9)精氨酸液相检测方法扩展阅读

除了凯氏定氮法以外,标准的测量方法还有:

食品中的蛋白质在催化加热条件下被分解,分解产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵,在pH4.8的乙酸钠-乙酸缓冲溶液中与乙酰丙酮和甲醛反应生成黄色的3,5-二乙酰-2,6-二甲基-1,4-二氢化吡啶化合物。在波长400nm 下测定吸光度值,与标准系列比较定量,结果乘以换算系数,即为蛋白质含量。

样品在900~1200℃下燃烧。在燃烧过程中,产生混合气体。 诸如碳,硫和盐的干扰气体被吸收管吸收,氮氧化物被还原成氮。 形成的氮气流由热导检测器(TCD)检测。

⑽ 如何检测精氨酸含量

要攀蒸鬓携馨馨纂笋馨羲l缤篆黔景瑟墓馨鬓鑫摹暴鹜翼摹囊{霎)馨蠢鬃鬓夔敖{蔚簸蘸篓羹缨豁如汤矛竺L一精氨酸是合成蛋白质和肌酸的重要原料,几是人和动物体内的半必需氨基酸,在医药和食品工业上具有广泛用途。目前,L一精氨酸的生产很多是通过发酵进行,因而对发酵液中L一精氨酸的测定有着相当重要的意义。建立一种简单、快速而又有效的检侧方法,对筛选出产酸高,具有优良比状的菌环嗦也是必要的。本文针对类似的文献报道,就发酵液中L-精氨酸定量检测的甲蔡酚一双乙酞法进行了研究。1材料与方法1 .1显色液409几NaoH溶液,8电几甲茶酚正丙醇…

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