1. 如何鉴定DNA和RNA(生物)具体做法
高中粗鉴定:用吡罗红(DNA)和甲基绿(RNA)鉴定.
DNA的鉴定
(1)配制二苯胺试剂:取0.1 mL B液;滴入到10 mL A液中,混匀.
(2)鉴定:取4 mL DNA提取液放入试管中,加入4 mL二苯胺试剂,混匀后观察溶液颜色(不变蓝).用沸水浴(100℃)加热10 min.在加热过程中,随时注意试管中溶液颜色的变化(逐渐出现浅蓝色).
附1:研磨液的配制方法
Tris:10.1 g(相对分子质量为121.4),先加50 mL蒸馏水溶解,用物质的量浓度为2 mol/L的盐酸调至pH=8.0,再加下述药品.
NaCl:8.76 g(相对分子质量58.44)
EDTA:37.2 g(相对分子质量372.24)
SDS:20 g(相对分子质量288.3)
待上述药品全部溶解后,再用蒸馏水定溶至1000 mL.
若在室温低于20℃时配制药液,SDS呈沉淀析出,此时需要加温,才能将SDS溶解.如果提前配制的研磨液出现了沉淀,则应加温使沉淀溶解后再使用.
附2:研磨液中几种药品的作用
SDS(十二烷基磺酸钠):可使蛋白质变性,与DNA分离.
EDTA(乙二胺四乙酸二钠):为DNA酶的抑制剂,可以防止细胞破碎后DNA酶降解DNA.
物质的量浓度为0.15 mol/L的氯化钠溶液:能很好地溶解DNA.
Tris/HCl:提供缓冲体系,DNA在这个缓冲体系中呈稳定状态.(Tris为三羟甲基氨基甲烷)
RNA的鉴定
取RNA沉淀约O.2 g,加2 ml 10%H2SO4→沸水浴中加热2 min→加1.5 ml地衣酚试剂→沸水浴中加热→观察颜色变化。
2. 用什么方法检测产品是否含有DNA 和rna
DNA和RNA作为遗传物质,本身都有自己的特性,用于检测的方法也有很多,如下:
首先我们要知道:
DNA:为双链结构,由A 、C 、G、T组成,链有外显子和内含子区域,物质性质中A260/A280在1.8左右,在260nm出有最大吸收峰。
tRNA的二级和高级结构
1、抽提试剂盒分别抽提:将产品分成两份,其中一份用来抽提DNA,此样本加入RNA 酶,另一份用来抽提RNA,此样本加入Dnase I,由此抽提出来的核酸进行琼脂糖凝胶电泳或者aligent 4200/2100仪器检测,考虑到DNA和RNA可能会降解,只有样本完好时,才能轻易地辨别出来。
2、qPCR技术:如1中所示,用1中的样本进行qPCR验证,设计引物时DNA样本跨外显子区域,或者是单独设计内含子区,加标准品对照,RNA正常设计即可,由此得出的结果可以根据扩增长度和两个结果进行判定。
以上为两个最基本的方法,操作简单,成本可控,两个结合起来结果准确,当然还有一些其他的方法,并设计对照试验,采用控制变量法进行研究。
3. 分离DNA和RNA主要方法有哪些
盐析法 DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同 利用这一特点 选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解 而使杂质沉淀 或者相反 以达到分离目的 DNA在NaCl溶液中的溶解度先增大后减小 在DNA溶解度最低时 DNA从溶液中析出 而其他杂质还留在溶液中 达到粗提取的目的
酶水解法 采用RNase(可以买)水解杂质RNA如果混入DNase酶可以采用100度加热15min使其失活 RNase不会失活 反之采用DNase可以提取RNA 混了RNase、时加入蛋白酶K或加碘乙酸钠
4. 怎样区分DNA与RNA
LS讲的DNA遇甲基绿变绿,只能确定存在DNA而无法辨别内部是否存在RNA.RNA遇吡罗红变红,所以直观上可以用吡罗红检验.缺点就是微量的RNA无法检测出来.粗量估计的话用这个比较直观也方便.
还有一种方法就是取样做光谱分析,DNA与RNA的吸收光谱不同,因此能测出微量RNA的存在.
5. 检测DNA和RNA检测方法有什么区别
您好!检测DNA的方法有:1.光密度测定。2.琼脂糖电泳凝胶检测法。3。二苯胺法。
检测RNA的方法有:1.光密度测定。2.苔黒酚法。
主要的嘧啶和嘌呤具有共轭双键,使碱基,核苷,核苷酸和核酸在240-290nm的紫外波段有一段强烈的吸收峰,因此核酸具有紫外吸收特性,在260nm,处是最大的紫外光吸收值,根据朗波-比尔光吸收定律来计算出核酸含量。
6. 请教哪些操作方法区别单链DNA与单链RNA
哪些操作方法区别单链DNA与单链RNA
方法1:DNA溶于苯酚,RNA不溶,故可用苯酚来沉淀,这是最简单的方法。
方法2.:利用吖啶橙的变色特性可鉴别DNA和RNA。吖啶橙作为一种荧光染料已被用于染色固定,非固定细胞核酸,或作溶酶体的一种标记。观察死亡细胞荧光变色性变化以及区别分裂细胞和静止细胞群体。虽然测定DNA和RNA含量时较难获得好的重复性结果,但该方法已被许多实验室广泛采用。
7. 快速鉴别DNA和RNA的方法
简单的应该是用甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿对DNA亲和力强,使DNA显现出绿色,而吡罗红对RNA的亲和力强,使RNA呈现出红色。用甲基绿、吡罗红的混合染色剂染色,可同时显示DNA和RNA的颜色
8. 快速鉴定RNA和DNA的方法是什么 它们的基本原理是什么
DNA和RNA的鉴别,较常用的方法是利用两类核酸中不同的戊糖各自具备的不同的颜色反应,而得以定性鉴别.其中鉴定DNA的方法称为二苯胺法,鉴定RNA的方法称为地衣酚(苔黑酚,3,5-二羟基甲苯)法.上述颜色反应不但可用于两类核酸的定性鉴定,也是定糖法定量测定核酸的依据.
9. 请问DNA和RNA的区别
1、结构不同:
DNA是双螺旋结构。RNA一般为单链长分子,不形成双螺旋结构。它的碱基组成与DNA的不同,RNA没有碱基T(胸腺嘧啶),而有碱基U(尿嘧啶)。
2、功能不同:
脱氧核糖核酸(DNA)是分子结构复杂的有机化合物。作为染色体的一个成分而存在于细胞核内。功能为储藏遗传信息。
核糖核酸(RNA)存在于生物细胞以及部分病毒、类病毒中的遗传信息载体,有催化生化反应过程的活性功能,即具有酶的活性。
3、应用不同:
鉴定亲子关系用得最多的是DNA分型鉴定。人的血液、毛发、唾液、口腔细胞等都可以用于用亲子鉴定,十分方便。
使RNA聚合酶可依照DNA上的碱基序列合成相对应之信使RNA(mRNA)的过程. 在人体需要酵素或是蛋白质时,都会需要进行此过程,才能借由信使mRNA,将密码子带出核模外. 好让核糖体进一步的利用信使RNA(mRNA)来翻译,合成所需之蛋白质。
(9)鉴别dna和rna的方法扩展阅读:
1、DNA是高分子聚合物,DNA溶液为高分子溶液,具有很高的粘度,可被甲基绿染成绿色。DNA对紫外线(260nm)有吸收作用,利用这一特性,可以对DNA进行含量测定。当核酸变性时,吸光度升高,称为增色效应;当变性核酸重新复性时,吸光度又会恢复到原来的水平。
较高温度、有机溶剂、酸碱试剂、尿素、酰胺等都可以引起DNA分子变性,即DNA双链碱基间的氢键断裂,双螺旋结构解开—也称为DNA的解螺旋。
2、在细胞中,根据结构功能的不同,RNA主要分三类,即tRNA(转运RNA),rRNA(核糖体RNA),mRNA(信使RNA)。mRNA是合成蛋白质的模板,rRNA是组成核糖体的组分,是蛋白质合成的工作场所。
10. 如何设计实验区别RNA和DNA
首先要清楚DNA和RNA的区别,然后依此来设计实验
RNA与DNA最重要的区别一是RNA只有一条链,二是它的碱基组成与DNA的不同,RNA没有碱基T(胸腺嘧啶),而有碱基U(尿嘧啶)。所以导致他们有以下性质上的不同。
1.两性解离:DNA无,只有酸解离,碱基被屏蔽(在分子内部形成了H键)。RNA有,有PI。
2.粘度大:DNA;RNA,粘度由分子长度/直径决定,DNA为线状分子,RNA为线团。
3.碱的作用:DNA耐碱RNA易被碱水解。
4.显色反应:
鉴别DNA和RNA+浓HCl RNA ------→ 绿色化合物
DNA ------→ 蓝紫色化合物苔黑酚
二苯胺啡啶溴红(荧光染料)和溴嘧啶都可对DNA染色,原理是卡在分子中,DNA的离心和电泳显色可用它们。
DNA和RNA的鉴别染色
利用吖啶橙的变色特性可鉴别DNA和RNA。吖啶橙作为一种荧光染料已被用于染色固定,非固定细胞核酸,或作溶酶体的一种标记。观察死亡细胞荧光变色性变化以及区别分裂细胞和静止细胞群体。虽然测定DNA和RNA含量时较难获得好的重复性结果,但该方法已被许多实验室广泛采用。
5.溶解性:都溶于水而不溶于乙醇,因此,常用乙醇来沉淀溶液中的DNA和RNA。DNA溶于苯酚而RNA不溶,故可用苯酚来沉淀RNA。
6.紫外吸收:核酸的λm=260nm,碱基展开程度越大,紫外吸收就越厉害。当A=1时,DNA:50ug/ml,RNA和单链DNA:40ug/ml,寡核苷酸:20ug/ml。用A260/A280还可来表示核酸的纯度。
7.沉降速度:对于拓扑异构体(核苷酸数目相同的核酸),其沉降速度从达到小依次为:RNA ; 超螺旋DNA > 解链环状DNA ; 松弛环状DNA ; 线形DNA也就是在离心管中最上层是线形DNA,最下面是RNA。
8.电泳:核苷酸、核酸均可以进行电泳,泳动速度主要由分子大小来决定,因此,电泳是测定核酸分子量的好方法。
9.DNA分子量测定最直接的方法:用适当浓度的EB(溴嘧啶)染色DNA,可以将其他形式的DNA变成线形DNA,用电镜测出其长度,按B-DNA模型算出bp数,根据核苷酸的平均分子量就可计算出DNA的分子量。