elisa是什么检测方法

A. elisa实验原理是什么

ELISA实验原理是酶分子与抗体或抗抗体分子共价结合，此种结合不会改变抗体的免疫学特性，也不影响酶的生物学活性。酶标记抗体可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。滴加底物溶液后，底物可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色氧化型，出现颜色反应。

因此，可通过底物的颜色反应来判定有无相应的免疫反应，颜色反应的深浅与标本中相应抗体或抗原的量呈正比。此种显色反应可通过ELISA检测仪进行定量测定，这样就将酶化学反应的敏感性和抗原抗体反应的特异性结合起来，使ELISA方法成为一种既特异又敏感的检测方法。

ELISA实验基本方法

ELISA实验基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( 聚苯乙烯微量反应板 ) 表面，使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行，用洗涤法将液相中的游离成分洗除。常用的 ELISA 法有双抗体夹心法和间接法，前者用于检测大分子抗原，后者用于测定特异抗体。

ELISA方法已被广泛应用于多种细菌和病毒等疾病的诊断。在动物检疫方面，ELISA在猪传染性胃肠炎、牛副结核病、牛传染性鼻气管炎、猪伪狂犬病、蓝舌病等的诊断中已为广泛采用的标准方法。

B. 酶联免疫反应（ELISA）是用来测什么的

ELISA法是现代医学临床免疫诊断的重要方法，它的基本原理是：使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性，再使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅刊物定性或定量分析。由于酶的催化频率很高，故可极大地地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。ELISA可用于测定各类抗原，也可用于测定抗体。比如现代检测的各类病毒、寄生虫等抗原抗体、激素、肿瘤标志物还有一些毒物药物都是通过该项技术进行测定的。在这种测定方法中有3种必要的试剂： 固相的抗原或抗体、酶标记的抗原或抗体和酶作用的底物。
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C. ELISA检测方法的原理及其优缺点是什么

1.
直接法（direct
elisa）
将抗原直接固定在固相载体上，参加酶符号的一级抗体，即可测定抗原总量，此一级抗体的特异性非常重要。
优势：操作手续简略，因无须运用二抗可防止交互反响。
缺陷：实验中的一抗都得用酶符号，但不是每种抗体都适合做符号，费用相对进步。
2.间接法（indirect
elisa）
此测定办法与直接法相似，不一样在于一级抗体没有酶符号，改用酶符号的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量。
优势：二抗能够加强信号，并且有多种挑选能做不一样的测定剖析。不加酶符号的一级抗体则能保存它最多的免疫反响性。
缺陷：交互反响发作的机率较高。
3.双抗体夹心法（sandwich
elisa）
被检测的抗原包被在两个抗体之间，其间一个抗体将抗原固定于固相载体上，即捕捉抗体。另一个则是检测抗体，此抗体可用酶符号后直接测定抗原的量；或不符号，再透过酶符号的二级抗体来测定抗原的量。这两种抗体有必要当心选择，才可防止交互反响或竞争一样的抗原联系部位。
优势：高活络、高专一性，抗原无须事前纯化。
缺陷：抗原必定得具有两个以上的抗体联系部位。
4.竞争法（competitive
elisa）
样本里的抗原（自在抗原）和纯化并固定在固相载体上的抗原（固定抗原）一同竞争一样的抗体，当样品里的自在抗原越多，就能够联系越多的抗体，而固定抗原就只能联系到较少的抗体，反之亦然。经清洁过程，洗去自在抗原和抗体的复合物，只留下固定抗原和抗体的复合物，拿来与只要固定抗原的对照组成果相比拟，依据呈色区别就可计算出样品里的抗原含量。
优势：可适用比拟不纯的样本，并且数据再现性很高。
缺陷：全体的敏感性和专一性都较差。
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D. ELISA的目的是什么

1. ELISA可以用来检测血清样本，看有还是没有某个抗原或抗体，也可以看该抗原或抗体是多还是少，可以比较不同血清样本之间该抗原/抗体的含量高低。
   

2. 如果该抗原是一个病原，或该抗体是一个对某病原具有特异性的抗体，则ELISA检测该抗原或该抗体的结果，可以用来帮助判断，提供血清的个体，是否感染或曾经感染过这个病原。
   

E. ELISA有些什么方法各有啥优缺点

• ELISA是一种广泛应用在测定液体样本中的蛋白、抗体、或激素的免疫分析技术。酶联免疫吸附试验的标准程序，通常是把蛋白、抗体、或激素等（即抗原）直接或是以捕捉抗体（capture Ab）固定在固相载体上，再加入一级检测抗体（primarydetection Ab），形成一个抗原抗体的复合物。如果该抗体已经用酶（enzyme）标记了，即可用来直接测定抗原的量，若无，则可利用另一个酶标记的二级抗体来测定抗原的量。测定抗原量的方法是加入该酶的底质（substrate），作用后产生出现的颜色深浅和样本中的抗原量呈正比的关系，依此原理计算出样本中的抗原总量或浓度。

  
  

• 1.直接法（direct ELISA）

• 将抗原直接固定在固相载体上，加入酶标记的一级抗体，即可测定抗原总量，此一级抗体的特异性非常重要。

• 优势：操作手续简短，因无须使用二抗可避免交互反应。

• 缺点：试验中的一抗都得用酶标记，但不是每种抗体都适合做标记，费用相对提高。

  
  

• 2.间接法（indirect ELISA）

• 此测定方法与直接法类似，差别在于一级抗体没有酶标记，改用酶标记的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量。

• 优势：二抗可以加强信号，而且有多种选择能做不同的测定分析。不加酶标记的一级抗体则能保留它最多的免疫反应性。

• 缺点：交互反应发生的机率较高。

• 
  

• 3.双抗体夹心法（sandwich ELISA）

• 被检测的抗原包被在两个抗体之间，其中一个抗体将抗原固定于固相载体上，即捕捉抗体。另一个则是检测抗体，此抗体可用酶标记后直接测定抗原的量；或不标记，再透过酶标记的二级抗体来测定抗原的量。这两种抗体必须小心选取，才可避免交互反应或竞争相同的抗原结合部位。

• 优势：高灵敏、高专一性，抗原无须事先纯化。

• 缺点：抗原一定得拥有两个以上的抗体结合部位。

  
  

• 4.竞争法（competitive ELISA）

• 样本里的抗原（自由抗原）和纯化并固定在固相载体上的抗原（固定抗原）一起竞争相同的抗体，当样品里的自由抗原越多，就可以结合越多的抗体，而固定抗原就只能结合到较少的抗体，反之亦然。经清洗步骤，洗去自由抗原和抗体的复合物，只留下固定抗原和抗体的复合物，拿来与只有固定抗原的对照组结果相比较，根据呈色差异就可计算出样品里的抗原含量。

• 优势：可适用比较不纯的样本，而且数据再现性很高。

• 缺点：整体的敏感性和专一性都较差。

  
  

• 5.最新ELISA技术：

• 基于细胞法（cell-based ELISA）：

• 是一种新的定性蛋白检测技术，将细胞直接在微孔板里培养，待检测时，不需抽提蛋白和裂解细胞，便可直接测量微孔板里蛋白经刺激或抑制作用后的变化。

• 优势：无需裂解细胞，所以目标蛋白损失最少，可测定完整细胞、黏附细胞、还有非粘附细胞。

• 缺点：不能测定抗原量。

  
  

F. 什么叫ELISA法

1971年瑞典学者Engvail和Perlmann,荷兰学者Van
Weerman和Schuurs分别报道将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法，即酶联免疫吸附测定法
(enzyme-linked
immunosorbent
assay
,
ELISA)
。ELISA已成为分析化学领域中的前沿课题
，它是一种特殊的试剂分析方法，是在免疫酶技术(
immunoenzymatic
techniques
)
的基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术
。

G. 请问在hiv检测中ELISA是什么检测法，几代试剂

ELISA就是我们常说的酶联法。
现在国内最差也是用3代试剂，有些地方会用4代试剂。
4代试剂（检查抗原+抗体）——窗口期为4周。因为抗原于3-4周达到复制的峰值，此时通过4代试剂检查，如果感染了HIV，抗原/抗体至少有一个为阳性，如果都是阴就排除了。
3代试剂（只查抗体）——窗口期为6周。
以上为理论分析+临床经验的结果，可以说是99.9%的准确度。

但是目前FDA、CDC和试剂生产商统一达成的共识，也就是针对普通人，最保守的窗口期是3个月。无论什么试剂，3个月都100%排除。

H. ELISA是什么

1971年瑞典学者Engvail和Perlmann,荷兰学者Van Weerman和Schuurs分别报道将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法，即酶联免疫吸附测定法 (enzyme-linked immunosorbent assay , ELISA) 。ELISA已成为分析化学领域中的前沿课题 ，它是一种特殊的试剂分析方法，是在免疫酶技术( immunoenzymatic techniques ) 的基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术 。
它采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接，然后通过酶与底物产生颜色反应，用于定量测定。测定的对象可以是抗体也可以是抗原。

在这种测定方法中有3种必要的试剂：①固相的抗原或抗体（免疫吸附剂） ②酶标记的抗原或抗体（标记物）③酶作用的底物（显色剂）

测量时，抗原（抗体）先结合在固相载体上，但仍保留其免疫活性，然后加一种抗体（抗原）与酶结合成的偶联物（标记物），此偶联物仍保留其原免疫活性与酶活性，当偶联物与固相载体上的抗原（抗体）反应结合后，再加上酶的相应底物，即起催化水解或氧化还原反应而呈颜色。
其所生成的颜色深浅与欲测的抗原（抗体）含量成正比。 这种有色产物可用肉眼、光学显微镜、电子显微镜观察，也可以用分光光度计（酶标仪）加以测定。其方法简单，方便迅速，特异性强

I. 医学上ELISA，是什么意思。

酶联免疫吸附测定（enzyme linked immunosorbent assay，简写ELISA）

指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上，利用抗原抗体特异性结合进行免疫反应的定性和定量检测方法；酶联免疫吸附测定（ELISA）为免疫学中的经典实验。

基本原理为：使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。

(9)elisa是什么检测方法扩展阅读

结果判断——

1、定性测定：

定性测定的结果判断是对受检标本中是否含有待测抗原或抗体作出"有"或"无"的简单回答，分别用"阳性"、"阴性"表示。"阳性"表示该标本在该测定系统中有反应。"阴性"则为无反应。

2、定量测定：

ELISA操作步骤复杂，影响反应因素较多，特别是固相载体的包被难达到各个体之间的一致，因此在定量测定中，每批测试均须用一系列不同浓度的参考标准品在相同的条件下制作标准曲线。

J. 什么是ELISA

ELISA即酶联免疫吸附测定，指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上，利用抗原抗体结合专一性进行免疫反应的定性和定量检测方法。

ELISA应用的范围很广，而且正在不断地扩大，原则上ELISA可用于检测一切抗原、抗体及半抗原，可以直接定量测定体液中的可溶性抗原。在实际应用方面可用于疾病的临床诊断、疾病监察、疾病普查、法医检查、兽医及农业上的植物病害的诊断检定等。

(10)elisa是什么检测方法扩展阅读 ：

ELISA操作步骤复杂，影响反应因素较多，特别是固相载体的包被难达到各个体之间的一致，因此在定量测定中，每批测试均须用一系列不同浓度的参考标准品在相同的条件下制作标准曲线。

测定大分子量物质的夹心法ELISA，标准曲线的范围一般较宽，曲线最高点的吸光度可接近2.0，绘制时常用半对数值，以检测物的浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标，将各浓度的值逐点连接，所得曲线一般呈S形，其头、尾部曲线趋于平坦，中央较呈直线的部分是最理想的检测区域。

ELISA也可应用于病毒抗体检测：流感病毒、腮腺炎病毒、麻诊、风疹、轮状病毒、疱疹病毒、巨细胞病毒、EB病毒、腺病毒、肠道病毒、脑炎病毒、黄热病毒、狂犬病毒和脊髓灰质炎病毒等，其敏感性都超过目前常用的检测方法。此外，还可用于鉴定病毒型别，例如疱疹病毒。

参考资料：网络-ELISA