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植物細胞獲得原生質體的常用方法

發布時間:2025-03-01 16:09:28

⑴ 植物原生質體的分離方法主要有機械法和___________。

植物原生質體的分離方法主要有機械法和酶解法。

1、機械分離法:常用於分離藻類原生質體,採用滲透方法使細胞發生質壁分離,用刀把細胞壁切破,使原生質體流出。(手工操作難度大,得率低,費時費力)


2、酶解分離法:用酶(瓊脂酶,果膠酶,纖維素酶等)將細胞壁分解。(條件溫和,原生質體完整性好,活力高,得率高)因此原生質體制備多採用酶解法,此法操作過程分為:取材消毒,酶解制備,原生質體收集。

植物原生質體融合的方法

1、鹽類融合法:此法是最早的誘導原生質體融合的方法,鹽類融合法的優點在於鹽類融合劑對原生質體的破壞力小,其缺點是異核體形成的頻率不高;

2、高Ca2+、高pH融合法:它的優點是能獲得較高的融合率,其缺點是對於有些原生質體系統來說,較高的pH可能會產生一定的毒害作用;

3、聚乙二醇融合法(PEG法):其優點是異核體的形成率很高,可重復性較強,對於大多數細胞類型來說毒性很低,形成雙核體的比例很高;

4、電融合法:電融合法是將一定密度的原生質體懸浮至於一個融合的小室中,小室兩端裝電極,其優點是融合的條件更加數據化,便於控制和相互比較。

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