㈠ 除了熱激轉化法還有什麼轉化方法
通過轉化將載體DNA導入受體菌繼而得到含有目的DNA插入的轉化菌株是構建DNA文庫最為關鍵的一步.
化學法(化學葯物如氯化鈣等)轉化
氯化鈣法轉化細胞 細菌處於0℃及CaCl2低滲溶液中時,菌細胞膨脹成球形.轉化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羥基-鈣磷酸復合物粘附於細胞表面,經42℃短時間熱擊處理促進細胞吸收DNA復合物.
直接分離基因最常用的方法是「鳥槍法」,又叫「散彈射擊法」.具體做法：用限制酶將供體細胞中的DNA切成許多片段,將這些片段分別載入運載體,然後通過
運載體分別載人不同的受體細胞,讓供體細胞所提供的DNA（外源DNA）的所有片段分別在各個受體細胞中大量復制（在遺傳學中叫擴增）,從中找出含有目的
基因的細胞,再用一定的方法把帶有目的基因的DNA片段分離出來.但這種方法工作量大,具有一定的盲目性.20世紀80年代以後,隨著DNA核苷酸序列分
析技術的發展,人們已經可以通過DNA序列自動測序儀對提取出的基因進行核苷酸序列分析,並且通過一種擴增DNA的新技術（也叫PCR技術）,使目的基因
片段在短時間內成百萬倍地擴增.上述新技術的出現大大簡化了基因工程的操作技術.