抗氧化性?你是指抗氧化能力的評價?或者是抗氧化活性的評價?
ORAC是目前世界最流行的評價方法,ORAC分析方法是根據自由基破壞熒光探針, 使熒光強度產生變化原理,以維生素E水溶性類似物Trolox為定量標准,使用熒光微孔板分析儀進行分析。熒光強度的變化大小反映自由基破壞的程度。在抗氧化劑存在時,它可以抑制由自由基引起的熒光變化。抑製程度反映了它對自由基的抗氧化能力。ORAC技術是Brunswick labs 的專利技術,是抗氧化領域的全球領導者,任何抗氧化領域的疑問都可以咨詢。
② 有哪些方法可以評價抗氧化劑的活性
可以評價抗氧化劑的活性的方法:
抗氧化 -評價方法 ORAC
ORAC是(氧化自由基吸收能力)的縮寫,是一種測試抗氧化能力的評價方法體系。
既然科學已證明抗氧化對人體的重要性,那麼對抗
氧化效果進行量化是一個迫切需要解決的問題。只有抗氧化效果可以被量化,才能使企業研發出更好的產品、獲得政府的認可、向消費者證明其產品抗氧化的有效性。
在ORAC方法未推出之前,因為抗氧化測試的極其復雜性,商業界(極其復雜的實驗方案不可能被商業界所應用,當時一個嚴謹的抗氧化實驗往往需要幾個月,且費用巨貴,是商業界無法接受的)無法有效、全面的測試出樣品的抗氧化力,然而商業是科技創新的動力,就像蘋果公司。
ORAC抗氧化測試包括對:過氧化自由基(含親水性、親脂性)、羥基自由基、過氧亞硝基、單線態氧、超氧陰離子這五種人體最主要的活性氧自由基進行全面的分析,能有效得出樣品的抗氧化實際能力及分布情況。
ORAC抗氧化生物測試是比普通抗氧化測試的更高一層的測試方案。利用人體細胞有效測試出樣品的抗氧化力(生物利用度)。
ORAC已被美國AOAC評定為抗氧化測試標准方法,是國際主流測試方法。
其他評價方法
抗氧化不僅僅是一個概念,對生物體抗氧化的效果是可以量化測定的,作為動物實驗一般是服用抗氧化劑一定時間後,測定血液中的酯質過氧化產物丙二醛變化、以及肝臟勻漿中超氧化物歧化酶SOD和谷胱甘肽過氧化物酶GSH-PX的活力變化。從上述兩種酶和MDA的變化狀況來判定抗氧化的強度及效果。作為人體不可能測肝臟勻漿,可以測定血液或者尿液中的MDA,以及血液中的SOD、GXH-PX來判定抗氧化的效果。
食物中氧化劑長期以來倍受國內外學者關注,這是因為:
①食物中抗氧化劑能夠保護食物免受氧化損傷而變質。
②在人體消化道內具有抗氧化作用,防止消化道發生氧化損傷。
③吸收後可在機體其他組織器官內發揮作用。
④來源於食物的某些具有抗氧化作用的提取物可以作為治療葯品。抗氧化劑的作用機理包括鰲合金屬離子、清除自由基、淬滅單線態氧、清除氧、抑制氧化酶活性等。
體外評價方法
雖然很多,但主要基於兩類一個是通過測定樣品抑制脂類物質氧化的能力來評定被測物的抗氧化能力另一個是用樣品對人工合成的自由基的清除能力來反映待測物的抗氧化活性。抗氧化劑在食品和生物體系中的抗氧化活性受很多因素的影響,其中主要包括抗氧化劑在水相和油相間的分配效應,氧化條件和環境,被氧化底物物理狀態等。
1.抗油脂過氧化力測定
脂類包括的范圍很廣,是構成生物膜的主要成分,脂類中的不飽和脂肪酸可以過氧化,脂類過氧化過程中會產生L、LO、LOO-等自由基以及LOOH,這些產物會損傷生物細胞。因此,能夠抑制脂類過氧化具有重要的生物學意義。
A硫氰酸鐵法FTC:硫氰酸鐵鹽(FTC)比色法是基於在酸性條件下,脂質氧化形成的過氧化物可將Fe2+氧化成Fe3+,然後Fe3+與硫氰酸根離子可形成在480-515nm內有最大吸收的紅色絡合物。通常用500nm處吸光值的高低表示物質抗脂質過氧化的能力,吸光值越小,表明物質的抗脂質過氧化能力越強。
B硫代巴比妥酸反應物TBARs法:是評價油脂的氧化程度的常用方法。油脂或者亞油酸氧化後的終產物主要是丙二醛,這些過氧化產物與硫代巴比妥酸作用生成有色化合物,該有色化合物在530nm左右有吸收。
2.清除DPPH能力的側定
DP是一種早期合成的有機自由基,常用來評估抗氧化物的供氫能力,它在有機溶劑中非常穩定,呈紫色,而且在處有一個特徵吸收峰,當遇到自由基清除劑時,DPPH的孤對電子被配對而使其退色,也就是在最大吸收波長處的吸光值變小。因此,可通過測定吸光值的變化來評價樣品對DPPH自由基的清除效果。
3.還原能力的測定
還原力的測定是檢驗樣品是否是良好的電子供體的方法,還原力強的樣品應該是良好的電子供應者,它供應的電子不僅能使Fe3+還原為Fe2+,也可以與自由基反應。還原力的測定是用來評價抗氧化劑活性的常用方法。
4.抑制LOX酶實驗
脂肪氧化酶LOX在植物中分布廣泛是一種非血紅素鐵蛋白,分子量為90一100KD。這種酶蛋白有多個多膚鏈組成,含有三價鐵離子金屬輔基則有活性,而包含二價鐵離子的金屬輔基則缺乏活性。在生物體內的主要作用是,專一催化含有順,順一戊二烯結構的多元不飽和脂肪酸的加氧反應,生成具有共扼雙鍵的多元不飽和脂肪酸的氫過氧化物。在生物體內的主耍底物是甘油脂類〔如磷脂)釋放的游離不飽和脂肪酸,其中動物體內的主要底物是花生四烯酸,植物體內的主要底物是亞油酸和亞麻酸,主要產物為過氧羚基型脂肪酸。
上述方法是抗氧化劑的應用效果的體內、外測定評價方法。
③ 用什麼方法可以來測試抗氧化的效果
ORAC是Oxygen Radical Absorption Capacity(氧化自由基吸收能力)的縮寫,是一種測試抗氧化能力的評價方法體系。既然科學已證明抗氧化對人體的重要性,那麼對抗
氧化效果進行量化是一個迫切需要解決的問題。只有抗氧化效果可以被量化,才能使企業研發出更好的產品、獲得政府的認可、向消費者證明其產品抗氧化的有效性。
④ 抗氧化性的方法
抗氧化其實是抵抗自由基。那麼什麼是自由基呢?
人的呼吸、與外界的接觸等等,會在身體進行各種氧化反應,而當人體利用氧氣進行某些代謝反應時,會不可避免的產生一些不穩定的物質,它們的個性非常活潑,不安分,甚至喜歡去攻擊別的細胞,由於它們不受拘束的個性,所以稱之為「自由基」。
大量研究表明,衰老、疾病大都與過量自由基產生有關。所以想要身體健康、延緩衰老,就勢必要抵抗身體里過量的自由基,這就是「抗氧化」的真相。
自由基的來源
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1. 抽煙、喝酒
2. 紫外線、電磁波、光輻射等
3. 環境污染,包括空氣、水、土壤污染等
4. 化學葯品濫用,如食品添加劑、農葯、葯物等
5. 壓力、急躁、焦慮、郁悶等不良情緒
如何抗氧化
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1. 保持良好生活作息
早睡早起睡眠充足,不抽煙喝酒健康生活,這些都是老生常談的話題,但是能堅持做到就能夠擁有健康的身體,這樣對抗氧化,抗自由基是非常有幫助的。
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2. 保持良好的情緒
常言道「相由心生」,一個好的心情會讓人身心舒暢,良好的情緒也有助於減少體內自由基的生成。而糟糕的情緒,過多的壓力不僅會讓人情緒低落,對皮膚的保養也沒有益處。
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3. 攝入高維生素C食物
獼猴桃、檸檬、橙子、柚子、西紅柿、鮮棗、枇杷、番石榴、山楂等等,都是富含維生素C的食物,除此之外多食用新鮮的蔬果也可以為身體帶來豐富的維生素C。大量的維生素C作為抗氧化劑可以清除身體內的自由基,起到很好的抗氧化效果。
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4. 外用精華
很多護膚品都瞄準了抗氧化市場,從而推出了很多抗氧化的精華,日常使用這些抗氧化精華可以輔助肌膚抗氧化,對延緩衰老,維持肌膚年輕化有著不錯的效果,但是要堅持使用。
⑤ 評價抗氧化效果的指標有哪些各有何特點
清除自由基的能力(可重復性強,自由基種類多使用的范圍廣)
對脂類的氧化抑制能力(適用於氧化過程初始階段)
鐵離子的還原能力反映樣品抗氧化能力(快速簡便,可用於天然抗氧化劑)
⑥ 抗氧化是什麼
Anti-Oxidant——抗氧化
氧化是肌膚衰老的最大威脅,日曬、壓力、環境污染等都能讓肌膚自由基泛濫,從而產生面色黯淡、缺水等氧化現象。都是身體產生氧化的「罪魁禍首」。所以無論從健康層面還是從護膚層面,我們都需要在日常生活中注意抗氧化。
人體的抗氧化物質有自身合成的,也有由食物供給的。酶和非酶抗氧化物質在保護由於運動引起的過氧化損傷中起至關重要的作用。補充抗氧化物質有利於運動機體減少自由基的產生或加速其清除,以對抗自由基的副作用,因而對一般人和運動員的健康都有益,可能延緩運動性疲勞發生和加快體能恢復。年齡大的體力活動者比年輕者服用抗氧化劑效果更好。
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產生氧化的原因
抗氧化抗氧化不僅僅是身體內的環保,現在連臉部肌膚也要開始進行抗氧化工作。簡單的說,臉部的抗氧化就是將青春留在臉上,並且屏除外在環境,比如紫外線、臟污空氣等對皮膚的傷害,再加上年齡的自然老化,讓歲月不會在臉上留下明顯的痕跡。
每天的生活中,有太多會加速肌膚細胞氧化的可怕殺手,手機、電磁波、紫外線、空氣污染、油炸食物及壓力等。真正健康的保養觀念,必須加入修復因素,也就是抗氧化的因素;在日常的肌膚保養品中,加入抗氧化效果的產品,會使肌膚的保養更向上提升。一般來說,除了藉由飲食之外,保養品也有助於臉部抗氧化工作的進行,除了定期的清潔之外,運用加強保濕的產品,或是在重點部位如眼部周圍等進行保養,防止肌膚鬆弛、老化,進而達到抗氧化的成效。
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抗氧化物質
(1) 維生素E
維生素 e是細胞膜內重要的抗氧化物和膜穩定劑。維生素e在維持肌肉組織的正常機構和代謝,特別是在肌肉收縮期間的能量供給和鈣離子攝取和釋放有著重要的作用。補充維生素 e(400~1,600國際單位/天)可減少由大強度運動或其它情況引起自由基增加對機體的損傷。在高於海平面時,補充維生素 e可防止運動能力的降低。因此,認為在高於海平面訓練的運動員補充維生素 e有利於運動成績的提高。推薦每天補充(d-α-生育酚)維生素e的劑量為: 400~800國際單位。
(2) 維生素 C
維生素 c缺乏可大大降低耐力運動能力。補充維生素 c可明顯降低運動誘導的氧化應激。補充維生素c的安全劑量是0.5~3.0克/天。推薦每天補充維生素c的劑量為0.5~2.0克。
(3) 硒
硒是機體抗氧化系統組成成分谷胱甘肽過氧化物酶的必需成分,適當補硒可提高谷胱甘肽過氧化物酶活力,從而提高機體的抗氧化能力。有人報道給游泳運動員每天補充硒100~150微克可減少體內脂質過氧化,提示補硒對耐力運動員可能有益。建議的補硒劑量為每天100~250微克。常用補硒制劑:新稀寶、硒維康。
(4) β-胡蘿卜素
β-胡蘿卜素是維生素a的前體,具有清除自由基的功能,所以β-胡蘿卜素對運動時的氧化應激有保護作用。推薦的β-胡蘿卜素補充量是每天25,000-100,000國際單位。
(5) 輔酶q10
輔酶q是機體中要使用氧的所有細胞的必需成分,因為它是物質氧化產生能量的過程中的氧化磷酸化呼吸鏈的電子傳遞體,運動中能量的需求大大增加,所以輔酶q10可減少人心臟和肌肉自由基生成。對於要維持身體健康的人來說,輔酶q的推薦使用量為每天 30毫克,如果用治療各種疾病,所使用的量就要高於這一劑量。
(6) 番茄紅素
番茄紅素是近幾年國際上最新發現的一種更強有力的抗氧化劑。它如同β-胡蘿卜素,屬胡蘿卜素類物質,在大多數水果和蔬菜中可以找到,是一種天然的生物色素。由於它具有獨特的化學結構,所以可以消除自由基,尤其是氧自由基。據報道番茄紅素提高機體免疫機能的作用比維生素e強100倍。
(7)SOD
SOD是Super Oxide Dimutese縮寫,中文名稱超氧化物歧化酶,是生物體內重要的抗氧化酶,廣泛分布於各種生物體內,如動物,植物,微生物等。SOD具有特殊的生理活性,是生物體內清除自由基的首要物質。SOD在生物體內的水平高低意味著衰老與死亡的直觀指標;現已證實,由氧自由基引發的疾病多達60多種。它可對抗與阻斷因氧自由基對細胞造成的損害,並及時修復受損細胞,復原因自由基造成的對細胞傷害。由於現代生活壓力,環境污染,各種輻射和超量運動都會造成氧自由基大量形成;因此,生物抗氧化機制中SOD的地位越來越重要!
( 8)天然蝦青素
天然蝦青素是迄今為止人類發現自然界最強的抗氧化劑,其抗氧化活性遠遠超過現有的抗氧化劑。蝦青素(astaxanthin在港台地區又稱為蝦紅素)是一種紅色素,可以賦予觀賞魚、三文魚、蝦和火烈鳥粉紅的顏色。其化學結構類似於 β -胡蘿卜素 。蝦青素是類胡蘿卜組的一種。也是類胡蘿素合成的最高級別產物, β -胡蘿卜素、葉黃素、角黃素、番茄紅素等都不過是類胡蘿卜素合成的中間產物,因此在自然界,蝦青素具有最強的抗氧化性。
其清除自由基的能力是:
天然VE的1000倍,
天然 β - 胡蘿卜素的10倍,
葡萄籽的17倍,
黃體素的200倍,
OPC的150倍,
Q10的60倍,
只有藻類和酵母菌和細菌等可以產生蝦青素,更高等的動物不能轉化出這種化學結構。
天然蝦青素還有一個明確的特點是唯一能通過血腦屏障的一種類胡蘿卜素
總之,體力活動尤其是急性大強度運動時體內自由基產生增加,並且形成鏈式反應引起膜結構等損傷。雖然眾多的研究結果不一致,有關體力活動者補充抗氧化劑尚有大量的問題需要闡明,但現有證據均支持運動後服用抗氧化劑。慎重應用抗氧化劑對膳食不足和 /或體力活動(運動)時需求增加有益。
值得注意的是,自由基作為人體自然免疫系統的一部分發揮著有益的作用。長期濫用抗氧化劑可能有損自由基的正面作用。因此,補充抗氧化物質前要了解運動人體的抗氧化狀態,所用的劑量要適度,最好在運動營養師或醫師的指導下服用。
目前,國內一些運動保健飲(食)品含有一些抗氧化物質,具有一定的抗氧化作用,如沙棘制劑、彌猴桃汁、酸棗汁、等含有維生素c,梅參等運動飲料含生物活性物質絞股藍,還有多種中葯保健品,如長白景仙靈口服液、益壽回春湯等也具有抗氧化的作用,它們有的可以減少血液中mda的含量,有的可維持血還原型谷胱甘肽含量或谷胱甘肽過氧化物酶活力,這都是一些很好的阻止自由基損傷運動人體的天然制劑。
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抗氧化效果的評價方法
抗氧化不僅僅是一個概念,對生物體抗氧化的效果是可以量化測定的,作為動物實驗一般是服用抗氧化劑一定時間後,測定血液中的酯質過氧化產物丙二醛變化、以及肝臟勻漿中超氧化物歧化酶SOD和谷胱甘肽過氧化物酶GSH-PX的活力變化。從上述兩種酶和MDA的變化狀況來判定抗氧化的強度及效果。作為人體不可能測肝臟勻漿,可以測定血液或者尿液中的MDA,以及血液中的SOD、GXH-PX來判定抗氧化的效果。
食物中氧化劑長期以來倍受國內外學者關注,這是因為①食物中抗氧化劑能夠保護食物免受氧化損傷而變質②在人體消化道內具有抗氧化作用,防止消化道發生氧化損傷@吸收後可在機體其他組織器官內發揮作用④來源於食物的某些具有抗氧化作用的提取物可以作為治療葯品。抗氧化劑的作用機理包括鰲合金屬離子、清除自由基、淬滅單線態氧、清除氧、抑制氧化酶活性等
體外評價抗氧化的方法
雖然很多,但主要基於兩類一個是通過測定樣品抑制脂類物質氧化的能力來評定被測物的抗氧化能力另一個是用樣品對人工合成的自由基的清除能力來反映待測物的抗氧化活性。抗氧化劑在食品和生物體系中的抗氧化活性受很多因素的影響,其中主要包括抗氧化劑在水相和油相間的分配效應,氧化條件和環境,被氧化底物物理狀態等。
1.抗油脂過氧化力測定
脂類包括的范圍很廣,是構成生物膜的主要成分,脂類中的不飽和脂肪酸可以過氧化,脂類過氧化過程中會產生L、LO、LOO-等自由基以及LOOH,這些產物會損傷生物細胞。因此,能夠抑制脂類過氧化具有重要的生物學意義。
A硫氰酸鐵法FTC:硫氰酸鐵鹽(FTC)比色法是基於在酸性條件下,脂質氧化形成的過氧化物可將Fe2+氧化成Fe3+,然後Fe3+與硫氰酸根離子可形成在480-515nm內有最大吸收的紅色絡合物。通常用500nm處吸光值的高低表示物質抗脂質過氧化的能力,吸光值越小,表明物質的抗脂質過氧化能力越強。
B硫代巴比妥酸反應物TBARs法:是評價油脂的氧化程度的常用方法。油脂或者亞油酸氧化後的終產物主要是丙二醛,這些過氧化產物與硫代巴比妥酸作用生成有色化合物,該有色化合物在530 nm左右有吸收。
2.清除2,2一二苯代苦味阱DPPH能力的側定
DP是一種早期合成的有機自由基,常用來評估抗氧化物的供氫能力,它在有機溶劑中非常穩定,呈紫色,而且在處有一個特徵吸收峰,當遇到自由基清除劑時,DPPH的孤對電子被配對而使其退色,也就是在最大吸收波長處的吸光值變小。因此,可通過測定吸光值的變化來評價樣品對DPPH自由基的清除效果
3.還原能力的測定
還原力的測定是檢驗樣品是否是良好的電子供體的方法,還原力強的樣品應該是良好的電子供應者,它供應的電子不僅能使Fe3+還原為Fe2+,也可以與自由基反應。還原力的測定是用來評價抗氧化劑活性的常用方法。
4.抑制 LOX酶實驗
脂肪氧化酶LOX在植物中分布廣泛是一種非血紅素鐵蛋白,分子量為90一100KD。這種酶蛋白有多個多膚鏈組成,含有三價鐵離子金屬輔基則有活性,而包含二價鐵離子的金屬輔基則缺乏活性。在生物體內的主要作用是,專一催化含有順,順一戊二烯結構的多元不飽和脂肪酸的加氧反應,生成具有共扼雙鍵的多元不飽和脂肪酸的氫過氧化物。在生物體內的主耍底物是甘油脂類〔如磷脂)釋放的游離不飽和脂肪酸,其中動物體內的主要底物是花生四烯酸,植物體內的主要底物是亞油酸和亞麻酸,主要產物為過氧羚基型脂肪酸
上述方法是抗氧化劑的應用效果的體、內外測定評價方法。
⑦ 抗氧化性怎麼檢驗
FRAP,ABTS以及ORAC法等等;
FRAP:即"亞鐵還原能力實驗",一種在低pH條件下,利用亞鐵離子與TPTZ生成藍紫色復合物來測量樣品抗氧化能力的實驗,廣泛運用於食品與保健品的抗氧化能力分析;
ABTS:總抗氧化能力檢測試劑盒(ABTS法),即Total Antioxidant Capacity Assay Kit with ABTS method,簡稱T-AOC Assay Kit,是一種採用2,2'-azino-bis作為顯色劑,可以對血漿、血清、唾液、尿液等各種體液,細胞或組織等裂解液、植物或中草葯抽提液、或各種抗氧化物(antioxidant)溶液的總抗氧化能力進行檢測的試劑盒;
ORAC:ORAC是氧化自由基吸收能力的縮寫,氧化自由基吸收能力又稱為抗氧化能力。ORAC分析方法是根據自由基破壞熒光探針,使熒光強度產生變化原理,以維生素E水溶性類似物Trolox為定量標准,使用熒光微孔板分析儀進行分析。熒光強度的變化大小反映自由基破壞的程度。在抗氧化劑存在時,它可以抑制由自由基引起的熒光變化。抑製程度反映了它對自由基的抗氧化能力。
⑧ 為什麼用DPPH做為測定抗氧化的指標
DPPH法名稱: 1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl radical 2,2-Diphenyl-1-(2,4,6-trinitrophenyl)hydrazyl ) 分子式:C18H12N5O6 分子量:394.32 暗紫色大稜柱形晶體。mp127~129度(分解)。一般試劑含量不小於98% 該品具有刺激性。吸入、口服或皮膚接觸有害。大量使用應穿適當的防護服和戴手套。主要用途是阻聚劑。也常用於抗氧化成分的體外抗氧化性評價。 DPPH法:DPPH法於1958年被提出,廣泛用於地量測定生物試樣、分類物質好和食品的抗氧化能力。 DPPH在有機溶劑中是一種穩定的自由基,其醇溶液呈紫色,且需低溫避光儲藏,具有單一電子,故能接受一個電子或氫離子,在波長為517nm下具有最大吸收。有自由基清除劑存在時,DPPH的單電子被捕捉而使其顏色變淺,在最大光吸收波長處的吸光值下降,且下降程度呈線性關系,吸光度水平的降低表明抗氧化性的增加,從而以評價試驗樣品的抗氧化能力。此抗氧化能力用抑制率來表示,抑制率越大,抗氧化性越強。
⑨ 食品中主要的抗氧化劑的檢測方法包括哪些
對於生物體的代謝有一種自相矛盾的情況,雖然大部分地球上的生物需要氧氣來維持生存,但同時氧氣又是一種高反應活性的分子,可以通過產生活性氧物質破壞生物體。所以生物體中建立了一套由抗氧化的代謝產物和酶構成的復雜網路系統,通過有抗氧化作用的代謝中間體和產物與酶之間的協同配合使得重要的細胞成分比如DNA、蛋白質和脂類免受氧化損傷。抗氧化系統大體上通過兩種方式實現抗氧化作用,一種是通過阻止活性氧物質的產生來實現的,另一種是在這些活性物質對細胞的重要成分造成損傷之前清除它們來達到抗氧化作用的 。然而這些活性氧物質也有重要的細胞功能,比如在生化反應中充當氧化還原信號分子。因此生物體中抗氧化系統的作用不是氧化性物質徹底地全部清除,而是將這些物質保持在適當的水平。
在細胞內產生的活性氧物種包括過氧化氫(H2O2)、次氯酸(HClO)、自由基例如羥基自由基(·OH)和超氧化物陰離子(O2) 。羥基自由基特別不穩定,能無特異性地迅速與大多數生物分子反應。這類物種主要是由金屬催化過氧化氫還原(比如芬頓反應)產生的 。這些氧化劑通過引發鏈反應比如脂質的過氧化反應、或氧化DNA和蛋白質破壞細胞。受到損害的DNA如果沒有得到修復會引起突變、誘發癌症。對蛋白質造成的損傷會使酶的活性受到抑制、蛋白質發生變性或降解。
⑩ 食物抗氧化性的測定
抗氧化活性實驗方法(體外實驗)
1、清除DPPH自由基能力的測定
稱取一定量的DPPH,用無水乙醇配製成0.04mg/mL的DPPH溶液。分別取2mL不同濃度(2,4,6,8mg/mL)的溶液,加入2mL DPPH溶液,混合均勻,室溫放置30min後,5000r/min離心10min。取上清液於517nm處測吸光值。用Vc作為陽性對照。樣品對DPPH自由基的清除率用以下公式計算:
2、總還原能力的測定
在10mL離心管中分別加入0.2mol/L pH 6.6的磷酸緩沖液2.5mL和不同濃度(2,4,6,8mg/mL)的溶液1mL,加入2.5 mL 1%鐵氰化鉀,混合均勻後於50℃反應20min。取出後加入2.5mL 10%三氯乙酸終止反應,5000r/min離心10min。取上清液2.5mL,加入2.5mL蒸餾水和0.5mL FeCl3,混勻後靜置10min,在700nm處檢測吸光值。Vc作為陽性對照。
採用鄰苯三酚自氧化法測定。取50mmol/L Tris-HCl緩沖液(pH8.2)4.5mL,置25℃水浴中保溫20min,分別加入1mL樣品溶液和0.4mL 25mmol/L鄰苯三酚溶液,混勻後於25℃水浴中反應5min,加入1mL 8mmol/L HCl終止反應,於299nm處測定吸光度(Ax),空白對照組以相同體積蒸餾水代替樣品。按下式計算O2-清除率:
A0—空白對照液的吸光度; Ax—加入樣品溶液後的吸光度;
Ax0—不加顯色劑H2O2樣品溶液本底的吸光度。