蔗糖溶液濃度的測定方法有哪些

① 糖錘度和濃度怎麼測量，有什麼較好的方法

糖廠的甘蔗原料先被破碎成片狀或條狀製成蔗糖料，然後送入壓榨機壓榨。壓榨出的蔗汁經過亞硫酸清凈、預灰和加熱、硫熏中和、沉降和過濾等工序後得到清汁，此時清汁的濃度約為12~14%Brix，清汁必須經過多效蒸發濃縮為60%Brix的糖漿，並經過硫熏、過濾製成清凈糖漿，清凈糖漿經煮糖、結晶、離心、乾燥製成原糖。甘蔗成熟的判斷標准為brix值超過13%時，ATAGO手持產品PAL系列蔗糖錘度計和MASTER系列蔗糖錘度計(田間檢測或者壓榨的過程測量)可以很直觀的測量brix值從而判斷甘蔗收割標准。
在製糖工業生產中，糖液的錘度和純度的測量，既是對製糖生產過程各工序結果的檢驗，又是控制生產操作的主要依據。其中，錘度表示糖液含糖的濃度，純度是表示糖液中的蔗糖含量；糖液錘度和純度以及其製成品的純度測量在製糖工業中有著非常重要的意義。
過去傳統的測量方法，主要依賴手工檢測手段：糖液錘度、純度以及其製成品的純度，人工測量流程為檢驗員從各檢測點采樣回到化驗室後，將高濃度糖液及糖製品首先按要求用天平稱取一定重量的糖液或糖製品和相應重量的蒸餾水，算出糖水比例或倍數，然後糖水混合攪拌均勻，形成低濃度糖液，倒入量筒或其它容器，用蔗糖錘度計或折光儀測量錘度和溫度，然後取少些低濃度糖液，用旋光儀測量旋光度，後通過人工計算得出原糖液錘度和純度值，再將測量值記錄在案及交給有關操作人員。整過操作過程非常耗時繁瑣，對生產過程實時性沒有多大指導作用。
隨著製糖工業的發展，現在非常迫切需要能在線或快速糖液及糖製品多項指標的測量裝置，可以在短時間內了解糖的多項指標，以便及時調整操作。在線糖錘度計，也稱為在線糖度計、在線糖度儀，是一種國際上最新的專門用於實時在線連續測量糖的垂度和濃度的儀器。德國默斯 MS-570在線微波糖錘度計，採用進口先進的微波測量技術，可以實時在線測量糖的錘度和濃度，廣泛應用於製糖業、食品業、飲料業、煙業、化工業、建材業、紡織業、塑料業等。
據德國默斯高級技術員介紹，MS-570在線微波糖錘度計採用一體式設計，大大簡化安裝方式，節約安裝成本。此外它的結構牢固，無運動部件，機盒達到IP67的防護等級，適用於測量條件惡劣的環境，而且還提供多樣化的後台操控軟體，以便工作人員輕松採集測量數據，對於糖廠等生產環境惡劣的行業，工作人員無需再現場操作測量儀。
目前，德國默斯積極與廣西、雲南、廣東、福建等全國各地糖廠開展合作，推進在線微波糖錘度計在製糖生產線上的落地應用。與傳統的手工檢測手段相比，使用在線微波糖錘度計不僅可以有助於提高整個測量工作效率，還可以提高液錘度和濃度以及其製成品的濃度測量精度，對白糖生產過程實時性具有重要的指導作用。

② 怎樣測定果實中的可溶性糖、還原糖和蔗糖

答：果實中含有葡萄糖、果糖和蔗糖，這三者糖總稱為可溶性（水溶性）糖。葡萄糖、果糖為六碳糖，稱單糖，它們含有醛基和酮基，容易被氧化，又稱為還原糖。蔗糖是十二碳糖，叫做雙糖，不易被氧化，又稱為非還原糖。測定前要先加酸使之水解，生成一個葡萄糖和一個果糖，再測定溶液中可溶性糖的含量。由於在未水解的溶液中還有還原糖，故應以二者之差來計算蔗糖含量。
所有的水果果實都含有葡萄糖和果糖，大部分也含有蔗糖，少數果實，如葡萄不含蔗糖。3種糖以果糖最甜，蔗糖次之，葡萄糖較差，甜度之比為100∶66∶45。
蘋果的分析結果通常為：可溶性糖為9%～14%（一般為11%～12%），還原糖7%～10%（一般為9%～10%），蔗糖為0.7%～5%（一般為2%～3%）。梨的可溶性糖為7%～14%，（一般為8%～10%），還原糖6%～9%，蔗糖為0.6%～5%。仁果類（蘋果、梨）的果糖含量較高，而核果類（桃、李、杏）中葡萄糖稍高於果糖。
（1）方法原理
鐵氰化鉀在鹼性溶液中可氧化還原糖，用糖的浸出液滴定已知濃度一定量的鐵氰化鉀溶液時，鐵氰化鉀即被還原成亞鐵氰化鉀，還原糖被氧化成糖酸。溶液中有鐵氰化鉀存在時，溶液呈現指示劑的顏色。當鐵氰化鉀全部還原為亞鐵氰化鉀時，再多滴一滴糖液，指示劑就被還原成土黃色的三酚甲烷化合物，根據所消耗的糖液體積，計算糖的含量。
（2）試劑配製
①1%鐵氰化鉀溶液：准確稱取105℃烘乾100克分析純的K3Fe（CN）6於300毫升燒杯中，加去離子水溶解，轉移於1升容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻，過濾後貯於棕色瓶中備用。
②2.50摩爾/升氫氧化鈉（NaOH）溶液：在小燒杯中，稱取NaOH（分析純）105克，溶於水中，冷卻後用水稀釋至1升（A液）。搖勻後從A液中吸取5毫升，加水至100毫升（B液）。吸取B液10～15毫升，用0.1摩爾/升標准酸標定其濃度。B液濃度乘以20即為A液濃度。要求A液恰為20.50摩爾/升。
③中性醋酸鉛溶液：稱取300克醋酸鉛［Pb（CH3COO）2·3H2O］和50克氧化鉛（PbO）加水50毫升，在沸水浴上加熱至白色或紫紅色（約需2～3小時），然後邊攪拌邊加水950毫升，將此混合液倒入瓶中，蓋好，放溫暖處，直至溶液澄清。過濾後保存在密封的棕色瓶中備用。
④飽和硫酸鈉（Na2SO4·10H2O）溶液：稱取165克 Na2SO4·10H2O溶解於1升水中。
⑤次甲基藍指示劑：1.0克次甲基藍溶於100毫升水中。
⑥甲基紅指示劑：0.2克甲基紅溶於100毫升60%乙醇中。
⑦8%氫氧化鈉溶液：8克氫氧化鈉溶於水稀釋至100毫升。
⑧稀氫氧化鈉溶液：8%氫氧化鈉溶液10毫升稀釋至100毫升。
⑨濃鹽酸（HCl）：比重1.19，分析純。
（3）儀器設備
萬分之一的天平。百分之一的天平、恆溫水浴鍋、高速組織搗碎機等。
樣品的採集：在果園里按照不同處理取樹冠外圍中部有代表性的無病蟲果實若干（不得少於10個），帶回實驗室，把取來的果實樣品洗凈擦乾或用濕毛巾擦凈果皮。分析蘋果、梨、葡萄時，需帶果皮。剝皮容易的桃樣品則應去皮，柑橘要去掉外果皮和裡面的白色網紋。西瓜、甜瓜則只取可食部分。葡萄、蘋果、桃、李、杏、柑橘和西瓜的種子均棄去，蘋果和梨還應去掉鱗片。
取樣時，對蘋果、梨、桃、西瓜、甜瓜等新鮮水果，取每個果實中部縱橫各一片，用不銹鋼刀切碎。柑橘取每個果實對角線的兩瓣；漿果（葡萄）取每個果穗的上下左右各方面果實數粒。有時葡萄用汁液進行分析。
（4）測定方法
①糖液的提取：用400毫升燒杯，在受皿天平上稱取切碎的樣品150克，加150毫升去離子水，在高速組織搗碎機上攪拌3分鍾。用小燒杯在工業天平上稱取漿狀物50克（相當於樣品25克）用水洗至250毫升容量瓶中，使瓶內液體約為150毫升，用8%氫氧化鈉溶液中和溶液中的有機酸，每加1～2滴，搖勻溶液，並用紅石蕊試紙少許投入瓶中，當紅石蕊試紙在溶液中明顯變藍為止。
將瓶放入80℃的水浴中30分鍾，每隔5分鍾搖動一次，同時注意調節水浴溫度。從水浴中取出瓶，趁熱逐滴加入中性醋酸鉛，以沉澱其中的蛋白質和色素等，每加數滴，充分搖動瓶子，然後靜止片刻，觀察上層溶液是否清亮，如已清亮就不加醋酸鉛，以防過量，反而使溶液變得混濁無法濾出清夜（據經驗，25克元帥系蘋果約需中性醋酸鉛1.6～1.8毫升，酸多的蘋果，如國光，用量稍多些；25克梨則需1.5～3.5毫升）放置數分鍾，再加入醋酸鉛用量3～4倍的飽和硫酸鈉溶液，使多餘的鉛生成硫酸鉛沉澱，將容量瓶放冷，加水至250毫升，搖勻，用濾紙過慮到250毫升的三角瓶中，這一糖液即可用來還原糖的測定。
②還原糖的測定：進行正式測定前，應先預測一次。在100毫升三角瓶中，用三個滴定管分別加入1%鐵氰化鉀溶液20毫升，2.50摩爾/升氫氧化鈉溶液5毫升及糖液3毫升，將三角瓶放在有石棉鐵絲網的300瓦小電爐上電熱煮沸1分鍾，加一滴次甲基藍指示劑，隨即變加熱邊用上述糖液繼續滴定，滴定速度要慢，使溶液保持微沸，在接近終點時，每加一滴糖液，都要充分搖動。溶液顏色的變化：綠—紅—藍紫—紫—土黃，從紫色突變土黃即達到終點。消耗的總糖量（包括先加入的3毫升）在4～6毫升之間時，結果最精確。如果消耗糖液超過8毫升，表示糖的濃度過淡，可取10毫升鐵氰化鉀溶液及2.50摩爾/升氫氧化鈉溶液2.5毫升與糖液重新滴定。如果煮沸1分鍾，加次甲基藍指示劑後溶液立即變藍，說明糖液太濃，需要稀釋一倍後再滴定。
正式滴定：從上述預測，即可大致得到與20毫升鐵氰化鉀溶液作用時糖的消耗量，正式滴定時，在20毫升鐵氰化鉀和5毫升氫氧化鈉溶液中，先加入比上述糖用量少0.5毫升的糖液（例如，預測時消耗為5.00毫升，則先加入4.5毫升）煮沸1分鍾，加指示劑1滴，邊加熱邊逐滴滴入糖液，每加一滴都要充分搖動，直到終點為止。
③可溶性糖的測定：在還原糖的滴定中，溶液里雖然有蔗糖，但是它不能被鐵氰化鉀所氧化，所以只能滴定出還原糖的含量。如欲滴定蔗糖，則另取糖液加酸水解，轉化成等量的葡萄糖和果糖後，再照上法滴定。
測定步驟：吸取糖的濾液50毫升，放入1容量瓶中，另取100毫升容量瓶，加50毫升水，插入溫度計，以觀察溫度變化，將它們一並放入預先加熱到70℃的水浴中，當瓶內溫度升至60℃時，取出容量瓶，用滴定管准確加入3毫升鹽酸（比重1.19），將容量瓶再放入水浴中（注意經常搖動），待瓶內溫度升至70℃時，在68～70℃下保持准確8分鍾，取出容量瓶迅速冷卻，加甲基紅指示劑2滴，用8%氫氧化鈉溶液中和快到中性時，可改用稀氫氧化鈉溶液直到溶液由紅變為橙色。如果發現溶液變為黃色，並變混濁，說明加鹼過多，要用稀鹽酸調回至橙紅色。水解好的糖液加水至100毫升，照還原糖的測定與20毫升鐵氰化鉀溶液進行標定。
鐵氰化鉀液濃度的確定：准確稱取在110℃烘過2小時的分析純葡萄糖0.2000克溶於水，稀釋至100毫升。用此溶液與100毫升鐵氰化鉀液滴定，方法同上，記下糖液用量。
（5）結果計算
10毫升鐵氰化鉀溶液相當於葡萄糖的克數（G）為：
G＝M×V/100
還原糖（%）＝2G×V1×100/W×V2
可溶性糖（%）＝2G×V1×2×100/W×V3
蔗糖（%）＝［可溶性糖（%）-還原糖（%）］×95%
式中：M——葡萄糖的重量（克）：
V——滴定10毫升鐵氰化鉀溶液所用的標准葡萄糖溶液的體積（毫升）；
V1——糖浸出液定容體積（毫升）；
V2——還原糖測定中20毫升鐵氰化鉀溶液消耗的待測糖溶液的體積（毫升）；
V3——可溶性糖測定中20毫升鐵氰化鉀溶液消耗的水解後待測糖溶液的體積（毫升）；
W——樣品的鮮重（克）；
2——在可溶性糖的測定中吸出50毫升濾液，水解後定容至100毫升即將原來糖液稀釋了一倍。

③ 如何通過質壁分離現象測定蔗糖溶液濃度

基本無法通過質壁分離現象測定蔗糖溶液濃度，因為質壁分離現象的強弱無法准確判斷，而且只要發生質壁分離，現象基本相同。但可以估計蔗糖溶液濃度與不同植物細胞內蔗糖溶液濃度關系依次判斷。具體方法如下：

1. 臨時裝片製作，選用紫色特別深的洋蔥外表皮，將洋蔥放在水中浸泡一下，可以使洋蔥吸水較多，而且代謝也比較旺盛，實驗效果明顯。

2. 將洋蔥的外層剝去兩層，因為處於最外的可能已經死亡。

3. 取表皮:在洋蔥的外表皮上，用刀片劃"井"字，用鑷子輕輕撕取一小塊，撕取單層細胞，如果撕的太厚，則會使細胞重疊，嚴重影響實驗效果。

4. 製片:在載玻片中央滴上一滴清水，然後將取下的洋蔥表皮放在水中，平展開來，加上蓋玻片，並觀察。（注意:Ⅰ:洋蔥表皮不能捲曲起來;Ⅱ:不能帶有氣泡;Ⅲ加蓋玻片時，要從一側大約45°角放下，在載玻片和蓋玻片之間充滿了清水，以便擠出空氣）

④ 請問蔗糖的測定步驟

蔗糖的測定方法1.原理
樣品經除去蛋白質後，蔗糖經鹽酸水解轉化為還原糖，再按還原糖測定。水解前後還原糖的差值為蔗糖含量。
2.適用范圍
GB5009.8-85。本方法適合於所有食物樣品蔗糖的檢測。
3.儀器
（1） 滴定管
（2） 25ml古式坩堝或G4垂融坩堝
（3） 真空泵
（4） 水浴鍋
4.試劑
除特殊說明外，實驗用水為蒸餾水，試劑為分析純。
4.1 6 mol/L鹽酸：量取50ml鹽酸加水稀釋至100 ml。
4.2 甲基紅指示劑：稱取10mg甲基紅，用100ml乙醇溶解。
4.3 5 mol/L氫氧化鈉溶液：稱取20g氫氧化鈉加水溶解並稀釋至100ml。
4.4 鹼性酒石酸銅甲液：稱取34.639g 硫酸銅（CuSO4·5H2O），加適量水溶解，加0.5ml硫酸，再加水稀釋至500ml，用精製石棉過濾。
4.5 鹼性酒石酸銅乙液：稱取173g酒石酸鉀鈉與50g氫氧化鈉，加適量水溶解，並稀釋至500ml，用精製石棉過濾，貯存於橡膠塞玻璃瓶中。
4.6 精製石棉：取石棉先用3mol/L鹽酸浸泡2～3天，用水洗凈，再加2.5mol/L氫氧化鈉溶液浸泡2～3天，傾去溶液，再用熱鹼性酒石酸銅已液浸泡數小時，用水洗凈。再以3 mol/L 鹽酸浸泡數小時，以水洗至不呈酸性。然後加水振搖，使成微細的漿狀軟縣委，用水浸泡並貯存於玻璃瓶中，即可用做填充古式坩堝用。
4.7 0.1000mol/L高錳酸鉀標准溶液。
4.8 1mol/L氫氧化鈉溶液：稱取4g 氫氧化鈉，加水溶解並稀釋至100ml。
4.9 硫酸鐵溶液：稱取50g硫酸鐵，加入200ml水溶解後，慢慢加入100ml硫酸，冷卻後加水稀釋至1L。
4.10 3mol/L鹽酸：量取30ml鹽酸，加水稀釋至120ml。
5.操作方法
5.1樣品處理：
5.1.1乳類、乳製品及含蛋白質的食品：稱取約0.5～2 g固體樣品（吸取2～10 ml液體樣品），置於250 ml容量瓶中，加50 ml水，搖勻。加入10 ml鹼性酒石酸銅甲液及4 ml1mol/L氫氧化鈉溶液，加水至刻度，混勻。靜置30min，用乾燥濾紙過濾，棄去初濾液，濾液備用。
5.1.2酒精性飲料：吸取100 ml樣品，置於蒸發皿中，用1 mol/L氫氧化鈉溶液中和至中性，在水浴上蒸發至原體積1/4後，移入250 ml容量瓶中。加50 ml水，混勻。以下按5.1.1自"加10ml鹼性酒石酸銅甲液"起依法操作。
5.1.3含多量澱粉的食品：稱取2～10 g樣品，置於250 ml容量瓶中，加200 ml水，在45℃水浴中加熱1 h，並時時振搖。（注意：此步驟是使還原糖溶於水中，切忌溫度過高，因為澱粉在高溫條件下可糊化、水解，影響檢測結果。）冷卻後加水至刻度，混勻，靜置。吸取200 ml上清液於另一250 ml容量瓶中，以下按5.1.1自"加10ml鹼性酒石酸銅甲液"起依法操作。
5.1.4汽水等含有二氧化碳的飲料：吸取100 ml樣品置於蒸發皿中，在水浴上除去二氧化碳後，移入250 ml容量瓶中，並用水洗滌蒸發皿，洗液並入容量瓶中，再加水至刻度，混勻後，備用。
5.2樣品水解：吸取2份50ml樣品處理液，置於100ml錐形瓶中，一份加入5 ml 6 mol/L鹽酸，在68～70℃中水解15 min（注意溫度和時間，如果溫度過高或時間過長，一些大分子糖也可被水解）。冷卻後加2滴甲基紅指示劑（注意：如果樣品液顏色較深，可以用廣泛pH試紙或外指示劑，如溴麝香草酚藍），用5mol/L氫氧化鈉溶液中和至中性，轉至容量瓶中，加水定容至100ml，混勻。另一份直接加水稀釋至100ml。
5.1 樣品測定：
吸取50ml樣品溶液，於400ml燒杯中，加入25ml鹼性酒石酸甲液及25ml乙液，於燒杯上蓋一表面皿，加熱，控制在4min內沸騰，再准確煮沸2min，趁熱用鋪好石棉的古氏坩堝或G4垂融坩堝抽濾，並用60℃熱水洗滌少別及沉澱，至洗液不成鹼性為止。將古氏坩堝或垂融坩堝放回原400ml燒杯中，加25 ml硫酸鐵溶液及25ml水，用玻棒攪拌使氧化亞銅完全溶解，以0.1mol/L高錳酸鉀標准液滴定至微紅色為終點。
同時吸取50ml水，加與測樣品時相同量的鹼性酒石酸銅甲、乙液，硫酸鐵溶液及水，按同一方法做試劑空白實驗。

⑤ 間苯二酚分光光度法測定蔗糖含量的主要依據是什麼

測定蔗糖含量的主要依據旋光法、氣相色譜法、液相色譜法、分光光度法等。

有關蔗糖含量的測定法有很多，如旋光法、氣相色譜法、液相色譜法、分光光度法等。其中旋光法測量准確性較差。

氣相色譜法和液相色譜法測量過程較復雜；文獻報道的分光光度法，是在蔗糖的溶液中加入顯色劑間苯二酚或2，4，6-三硝基酚，反應生成有色物質，並測其吸光度，文獻報道的分光光度法，用酶水解蔗糖，加入4-氨替吡啉苯酚顯色，再測吸光度。

但在以上試驗中加入了有污染的間苯二酚等。用紫外分光光度法在酸性條件下直接測定蔗糖還未見報道。方法基於在酸性條件下,蔗糖水 解生成果糖和葡萄糖，果糖受熱破壞後，其產物在285nm處有較大的紫外吸收。通過試驗,確定了最佳條件，並建立了測定蔗糖的新紫外分光光度法。

⑥ 測定糖的含量的方法有哪些

糖的測定方法
一般有四種方法：
1、 直接滴定法。

原理為 糖還原天藍色的氫氧化銅為紅色的氧化亞銅。缺點：水樣中的還原性物質能對糖的測定造成影響。

2、 高錳酸鉀滴定法。

所用原理同直接滴定法。缺點：水樣中的還原性物質能對糖的測定造成影響，過程較為復雜，誤差大。

3、硫酸苯酚法。

糖在濃硫酸作用下，脫水形成的糠醛和羥甲基糠醛能與苯酚縮合成一種橙紅色化合物，在10-100mg范圍內其顏色深淺與糖的含量成正比，且在485nm波長下有最大吸收峰，故可用比色法在此波長下測定。苯酚法可用於甲基化的糖、戊糖和多聚糖的測定，方法簡單，靈敏度高，實驗時基本不受蛋白質存在的影響，並且產生的顏色穩定160min以上。

缺點：如果水樣呈橙紅色（大部分水樣為黃色），會對比色法造成較大的干擾。

4、蒽酮法

糖在濃硫酸作用下，可經脫水反應生成糠醛和羥甲基糠醛，生成的糠醛或羥甲基糠醛可與蒽酮反應生成藍綠色糠醛衍生物，在一定范圍內，顏色的深淺與糖的含量成正比，故可用於糖的測定。

缺點：，不同的糖類與蒽酮試劑的顯色深度不同，果糖顯色最深，葡萄糖次之，半乳糖、甘露糖較淺，五碳糖顯色更淺。

綜合比較；採用蒽酮法能將最為准確地測定尾水中糖的含量。

（一） 直接滴定法

Ⅰ、原理

v 一定量的鹼性酒石酸銅甲、乙液等量混合，立即生成天藍色的氫氧化銅沉澱，這種沉澱很快與酒石酸鈉反應，生成深藍色的可溶性酒石酸鉀鈉銅絡合物。在加熱條件下，以次甲基藍作為指示劑，用標液滴定，樣液中的還原糖與酒石酸鉀鈉銅反應，生成紅色的氧化亞銅沉澱，待二價銅全部被還原後，稍過量的還原糖把次甲基藍還原，溶液由藍色變為無色，即為滴定終點。根據樣液消耗量可計算出還原糖含量。
樣品經除去蛋白質後，在加熱條件下，以次甲基藍做指示劑，滴定標定過的鹼性酒石酸銅溶液（用還原糖標准溶液標定鹼性酒石酸銅溶液），根據樣品溶液消耗體積計算還原糖量。

Ⅱ、儀器和試劑
1．儀器
酸式滴定管，可調電爐（帶石棉板），250ml容量瓶。
2．試劑

1. 鹽酸。

2. 鹼性酒石酸銅甲液：稱取15g硫酸銅（CuSO4·5H2O）及0.05g次甲基藍，溶於水中並稀釋至1000mL。

3. 鹼性酒石酸銅乙液：稱取50g酒石酸鉀鈉與75g氫氧化鈉，溶於水中，再加入4g亞鐵氰化鉀，完全溶解後，用水稀釋至1000 ml，貯存於橡膠塞玻璃瓶內。

4. 乙酸鋅溶液：稱取21.9 g乙酸鋅，加3ml冰乙酸，加水溶解並稀釋至100ml。

5. 亞鐵氰化鉀溶液：稱取10.6g亞鐵氰化鉀，用水溶解並稀釋至100ml。

6. 葡萄糖標准溶液：准確稱取1.0000g經過96℃±2℃乾燥2h的純葡萄糖，加水溶解後加入5ml鹽酸，並以水稀釋至1000L。此溶液相當於1mg/ml葡萄糖（註：加鹽酸的目的是防腐，標准溶液也可用飽和苯甲酸溶液配製）。

7. 果糖標准溶液：按⑹操作，配製每毫升標准溶液相當於1mg的果糖。

8. 乳糖標准溶液：按⑹操作，配製每毫升標准溶液相當於1mg的乳糖。

9. 轉化糖標准溶液：准確稱取1.0526g純蔗糖，用100ml水溶解，置於具塞三角瓶中加5ml鹽酸（1+1），在68℃~70℃水浴中加熱15min，放置至室溫定容至1000ml，每ml標准溶液相當於1.0mg轉化糖。

Ⅲ、實驗步驟
1．樣品處理
⑴ 乳類、乳製品及含蛋白質的食品：稱取約2.50～5.00g固體樣品（吸取25～50ml液體樣品），置於250 ml容量瓶中，加50 ml水，搖勻。邊搖邊慢慢加入5ml乙酸鋅溶液及5ml亞鐵氫化鉀溶液，加水至刻度，混勻。靜置30 min，用乾燥濾紙過濾，棄去初濾液，濾液備用。（注意：乙酸鋅可去除蛋白質、鞣質、樹脂等，使它們形成沉澱，經過濾除去。如果鈣離子過多時，易與葡萄糖、果糖生成絡合物，使滴定速度緩慢；從而結果偏低，可向樣品中加入草酸粉，與鈣結合，形成沉澱並過濾。）

⑵ 酒精性飲料：吸取100ml樣品，置於蒸發皿中，用1 mol/L氫氧化鈉溶液中和至中性，在水浴上蒸發至原體積1/4後，移入250ml容量瓶中，加水至刻度。

⑶ 含多量澱粉的食品：稱取10.00～20.00g樣品，置於250ml容量瓶中，加200ml水，在45℃水浴中加熱1h，並時時振搖（注意：此步驟是使還原糖溶於水中，切忌溫度過高，因為澱粉在高溫條件下可糊化、水解，影響檢測結果。）。冷後加水至刻度，混勻，靜置，沉澱。吸取200ml上清液於另一250ml容量瓶中，慢慢加入5ml乙酸鋅溶液及5ml亞鐵氫化鉀溶液，加水至刻度，混勻，沉澱，靜置30 min，用乾燥濾紙過濾，棄去初濾液，濾液備用。

⑷ 汽水等含有二氧化碳的飲料：吸取100ml樣品置於蒸發皿中，在水浴上除去二氧化碳後，移入250ml容量瓶中，並用水洗滌蒸發皿，洗液並入容量瓶中，再加水至刻度，混勻後備用。（注意：樣品中稀釋的還原糖最終濃度應接近於葡萄糖標准液的濃度。）

2. 標定鹼性酒石酸銅溶液：吸取5.0ml鹼性酒石酸銅甲液及5.0ml乙液，置於150ml錐形瓶中（注意：甲液與乙液混合可生成氧化亞銅沉澱，應將甲液加入乙液，使開始生成的氧化亞銅沉澱重溶），加水10 ml，加入玻璃珠2粒，從滴定管滴加約9 ml葡萄糖標准溶液或其他還原糖標准溶液，直至溶液蘭色剛好褪去為終點，記錄消耗的葡萄糖標准溶液或其他還原糖標准溶液總體積，平行操作三份，取其平均值，計算每10 ml（甲、乙液各5 ml）鹼性酒石酸銅溶液相當於葡萄糖的質量或其他還原糖的質量（mg）。（注意：還原的次甲基藍易被空氣中的氧氧化，恢復成原來的藍色，所以滴定過程中必須保持溶液成沸騰狀態，並且避免滴定時間過長。）

3. 樣品溶液預測：吸取5.0 ml鹼性酒石酸銅甲液及5.0 ml乙液，置於150 ml錐形瓶中，加水10 ml，加入玻璃珠2粒，控制在2 min內加熱至沸，趁沸以先快後慢的速度，從滴定管中滴加樣品溶液，並保持溶液沸騰狀態，待溶液顏色變淺時，以每兩秒1滴的速度滴定，直至溶液藍色褪去，出現亮黃色為終點。如果樣品液顏色較深，滴定終點則為蘭色褪去出現明亮顏色（如亮紅），記錄消耗樣液的總體積。（注意：如果滴定液的顏色變淺後復又變深，說明滴定過量，需重新滴定。） 當試樣溶液中還原糖濃度過高時應適當稀釋，再進行正式測定，使每次滴定消耗試樣溶液的體積控制在與標定鹼性酒石酸酮溶液時所消耗的還原糖標准溶液的體積相近，約在10ml左右。當濃度過低時則採取直接加入10ml樣品溶液，免去加水10ml，再用還原糖標准溶液滴定至終點，記錄消耗的體積與標定時消耗的還原糖標准溶液體積之差相當於10ml試樣溶液中所含還原糖的量。

4. 樣品溶液測定：吸取5.0 ml鹼性酒石酸銅甲液及5.0 ml乙液，置於150 ml錐形瓶中，加水10 ml，加入玻璃珠2粒，在2 min內加熱至沸，快速從滴定管中滴加比預測體積少1 ml的樣品溶液，然後趁沸繼續以每兩秒1滴的速度滴定直至終點。記錄消耗樣液的總體積，同法平行操作兩至三份，得出平均消耗體積。

5. 計算
樣品中還原糖的含量（以某種還原糖計）按下式計算。
X=〔A/(m×V/250×1000)〕×100
式中：X--樣品中還原糖的含量(以某種還原糖計)，單位 g/100g；
A—鹼性酒石酸銅溶液（甲、乙液各半）相當於某種還原糖的質量，單位 mg；
m--樣品質量，單位 g；
V--測定時平均消耗樣品溶液的體積，單位 ml；
計算結果保留小數點後一位。

注意：

滴定結束，錐形瓶離開熱源後，由於空氣中氧的氧化，使溶液又重新變藍，此時不應再滴定。

（二）高錳酸鉀滴定法

v 原理 將樣液與一定量過量的鹼性酒石酸銅溶液反應，還原糖將二價銅還原為氧化亞銅，經過濾，得到氧化亞銅沉澱，加入過量的酸性硫酸鐵溶液將其氧化溶解，而三價鐵鹽被定量地還原為亞鐵鹽，用高錳酸鉀標准溶液滴定所生成的亞鐵鹽，根據高錳酸鉀溶液消耗量可計算出氧化亞銅的量，再從檢索表中查出氧化亞銅量相當的還原糖量，即可計算出樣品中還原糖含量。

（三）硫酸苯酚法

Ⅰ、原理

糖在濃硫酸作用下，脫水形成的糠醛和羥甲基糠醛能與苯酚縮合成一種橙紅色化合物，在10-100mg范圍內其顏色深淺與糖的含量成正比，且在485nm波長下有最大吸收峰，故可用比色法在此波長下測定。苯酚法可用於甲基化的糖、戊糖和多聚糖的測定，方法簡單，靈敏度高，實驗時基本不受蛋白質存在的影響，並且產生的顏色穩定160min以上。

多糖在硫酸的作用下先水解成單糖，並迅速脫水生成糖醛衍生物，然後與苯酚生成橙黃色化合物。再以比色法測定。

Ⅱ、試劑

1． 濃硫酸：分析純，95.5%

2． 80%苯酚：80克苯酚（分析純重蒸餾試劑）加20克水使之溶解，可置冰箱中避光長期儲存。

3． 6%苯酚：臨用前以80%苯酚配製。（每次測定均需現配）

4． 標准葡聚糖（Dextran,瑞典Pharmacia）,或分析純葡萄糖。

5． 15%三氯乙酸（15%TCA）：15克TCA加85克水使之溶解，可置冰箱中長期儲存。

6． 5%三氯乙酸（5%TCA）：25克TCA加475克水使之溶解，可置冰箱中長期儲存。

7． 6mol/L 氫氧化鈉：120克分析純氫氧化鈉溶於500ml水。

8． 6mol/L 鹽酸

Ⅲ、操作。

1．製作標准曲線：准確稱取標准葡聚糖（或葡萄糖）20mg於500ml容量瓶中，加水至刻度，分別吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml,各以蒸餾水補至2.0ml，然後加入6%苯酚1.0ml及濃硫酸5.0ml,搖勻冷卻，室溫放置20分鍾以後於490nm測光密度，以2.0ml水按同樣顯色操作為空白，橫坐標為多糖微克數，縱坐標為光密度值，得標准曲線。

2．樣品含量測定：

①取樣品1克（濕樣）加1ml 15%TCA溶液研磨，再加少許5％TCA溶液研磨，倒上清液於10毫升離心管中，再加少許5％TCA溶液研磨，倒上清液，重復3次。最後一次將殘渣一起到入離心管。注意：總的溶液不要超出10毫升。（既不要超出離心管的容量）。

②離心，轉速3000轉/分鍾，共三次。第一次15分鍾，取上清液。後兩次各5分鍾取上清液到25毫升錐形比色管中。最後濾液保持18毫升左右。（測肝胰腺樣品時，每次取上清液時應過濾。因為其脂肪含量大容易夾帶殘渣。）

③水浴，在向比色管中加入2毫升6mol/L 鹽酸之後搖勻，在96℃水浴鍋中水浴2小時。

④定容取樣。水浴後，用流水冷卻後加入2毫升6mol/L 氫氧化鈉搖勻。定容至25毫升的容量瓶中。吸取0.2 ml的樣品液，以蒸餾補至2.0ml，然後加入6%苯酚1.0ml及濃硫酸5.0ml,搖勻冷卻室溫放置20分鍾以後於490nm測光密度。每次測定取雙樣對照。以標准曲線計算多糖含量。

Ⅳ、注意

（1）此法簡單、快速、靈敏、重復性好，對每種糖僅製作一條標准曲線，顏色持久。

（2）製作標准線宜用相應的標准多糖，如用葡萄糖，應以校正系數0.9校正μg數。

（3）對雜多糖，分析結果可根據各單糖的組成比及主要組分單糖的標准曲線的校正系數加以校正計算。

（4）測定時根據光密度值確定取樣的量。光密度值最好在0.1——0.3之間。比如：小於0.1之下可以考慮取樣品時取2克，仍取0.2ml樣品液，如大於0.3可以減半取0.1ml的樣品液測定。

（四）蒽酮法

Ⅰ、實驗原理

糖在濃硫酸作用下，可經脫水反應生成糠醛和羥甲基糠醛，生成的糠醛或羥甲基糠醛可與蒽酮反應生成藍綠色糠醛衍生物，在一定范圍內，顏色的深淺與糖的含量成正比，故可用於糖的測定。

該法的特點是幾乎可以測定所有的碳水化合物，不但可以測定戊糖和己糖，而且可以測所有的寡糖類和多糖類，其中包括澱粉、纖維素等（因反應液中的濃硫酸可以把多糖水解成單糖而發生反應。所以，用蒽酮法測出的碳水化合物含量，實際上是溶液中全部可溶性碳水化合物總量。在沒有必要細致劃分各種碳水化合物的情況下，用蒽酮法可以一次測出總量。此外，不同的糖類與蒽酮試劑的顯色深度不同，果糖顯色最深，葡萄糖次之，半乳糖、甘露糖較淺，五碳糖顯色更淺。故測定糖的混合物時，常因不同糖類的比例不同造成誤差，但測定單一糖類時，則可避免此種誤差。

Ⅱ、試劑：

蒽酮試劑，0.20 g蒽酮溶入100 mL 95%濃硫酸中，冰箱保存；

Ⅲ、方法：

樣品2.0 mL加5.0 mL蒽酮試劑，混勻，然後水浴煮沸10 min，取出冷卻至室溫，在620 nm處測定其吸光度，根據標准曲線計算水樣中糖的濃度。（標線以葡萄糖為標樣）

⑦ 可溶性糖含量的測定方法有哪些

1、苯酚法

苯酚法可用於甲基化的糖、戊糖和多聚糖的測定，方法簡單，靈敏度高，基本不受蛋白質存在的影響，並且產生的顏色穩定160min以上。

2、蒽酮比色法

一個快速而簡便的定糖方法。蒽酮可以與游離的己糖或多糖中的己糖基、戊糖基及己糖醛酸起反應，反應後溶液呈藍綠色，在620nm處有最大吸收。本法多用於測定糖原的含量，也可用於測定葡萄糖的含量。

(7)蔗糖溶液濃度的測定方法有哪些擴展閱讀

1、苯酚法測定可溶性糖的原理是：糖在濃硫酸作用下，脫水生成的糠醛或羥甲基糠醛能與苯酚縮合成一種橙紅色化合物，在10～100ug范圍內其顏色深淺與糖的含量成正比，且在485nm波長下有最大吸收峰，故可用比色法在此波長下測定。

2、蒽酮比色法實驗原理：蒽酮可以與游離的已糖或多糖中的已糖基、戊糖 基及已糖醛酸起反應，反應後溶液呈藍綠色，在620nm處有最大吸收。

⑧ 測量溶液濃度的方法有哪些

測量溶液濃度的方法可以用專用的測量濃度儀鏡測量，或者用ph試紙進行測量

⑨ 怎樣測定植物中蔗糖含量

這個問題恐怕沒有簡單方法能解決啊。我個人觀點如下：
1.先取部分植物組織（例如：一段甘蔗），稱重後完全粉碎（這個可能比較難），然後加大量純凈水溶解。
2.將濾去殘渣後的糖水，加入一些催化劑讓蔗糖水解為葡萄糖。（催化劑大概是什麼酶一類的）
3.將充分水解後的葡萄糖溶液進行銀鏡反應，記錄氯化銀的用量。
4.根據氯化銀的用量計算出葡萄糖量，再根據葡萄糖量計算蔗糖量。
以上應該都是高中化學學的，本人高中過去6年了，所以很多也忘了，自己試驗吧。

⑩ 蔗糖溶液如何測定植物細胞液的濃度

利用質壁分離的原理
先用一定濃度（低濃度）的蔗糖溶液處理植物細胞。用顯微鏡觀察。加大濃度，至出現質壁分離的了解狀態。這時候的蔗糖溶液近似於細胞液的濃度。
原理。外界溶液濃度大於細胞內液，細胞失水
外界溶液濃度小於細胞內液，細胞吸水