色譜分離方法包括哪些

⑴ 液相色譜有幾種分離類型各有什麼特點

1、吸附色譜法

吸附色譜法的固定相為吸附劑，色譜的分離過程是在吸附劑表面進行的，不進入固定相的內部。與氣相色譜不同，流動相(即溶劑)分子也與吸附劑表面發生吸附作用。

在吸附劑表面，樣品分子與流動相分子進行吸附競爭，因此流動相的選擇對分離效果有很大的影響，一般可採用梯度淋洗法來提高色譜分離效率。

在聚合物的分析中，吸附色譜一般用來分離添加劑，如偶氮染料、抗氧化劑、表面活性劑等，也可用於石油烴類的組成分析。

2、分配色譜法

這種色譜的流動相和固定相都是液體，樣品分子在兩個液相之間很快達到平衡分配，利用各組分在兩相中分配系數的差異進行分離，類似於萃取過程。

3、離子交換色譜

離子交換色譜通常用離子交換樹脂作為固定相。一般是樣品離子與固定相離子進行可逆交換，由於各組分離子的交換能力不同，從而達到色譜的分離。

離子交換色譜法是新發展起來的一項現代分析技術，已廣泛用於氨基酸、蛋白質的分析，也適合於某些無機離子(NO3-、SO42-、Cl-等無機陰離子和Na+、Ca2+、Mg2+、K+等無機陽離子)的分離和分析，具有十分重要的作用。

4、凝膠色譜法

凝膠色譜法既適用於水溶液的體系，又適用於有機溶劑的體系。

當所用的洗脫劑為水溶液時，稱為凝膠過濾色譜，其在生物界的應用比較多；採用有機溶劑為洗脫劑時，稱為凝膠滲透色譜，在高分子領域應用較多。

(1)色譜分離方法包括哪些擴展閱讀

液相色譜應用非常廣泛，幾乎遍及定量定性分析的各個領域。

(1)分離混合物

高效液相色譜法只要求樣品能製成溶液，不受樣品揮發性的限制，流動相可選擇的范圍寬，固定相的種類繁多，因而可以分離熱不穩定和非揮發性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質。

通過與試樣預處理技術相配合，高效液相色譜法所達到的高解析度和高靈敏度，可分離並同時測定性質上十分相近的物質，能夠分離復雜混合物中的微量成分。並且隨著固定相的發展，還可在充分保持生化物質活性的條件下完成對其的分離。

(2)生化分析

由於高效液相色譜法具有高解析度、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復利用，流出組分易收集等優點，因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、醫葯研究、環境分析、無機分析等各種領域，並已成為解決生化分析問題最有前途的方法。

(3)儀器聯用

高效液相色譜儀與結構儀器的聯用是一個重要的發展方向。高效液相色譜一質譜聯用技術受到普遍重視，如分析氨基甲酸酯農葯和多核芳烴等。

⑵ 色譜法是樣品凈化的主要方法，按其分離原理和操作方式可分為哪些方法

色譜法按分離原理分為吸附色譜、分配色譜、離子交換 色譜和凝膠色譜法。色譜法的操作方式有柱色譜、薄層色譜和紙色譜法。樣品凈化時最常用的是經典微柱色譜，也稱固相萃取或液-固萃取法（LSE）。其主要特點是設備簡單，使用方便，快速，凈化效率高。

⑶ 色譜分析有哪些方法

色譜定性分析的方法：包括純物質對照法、利用保留值經驗規律定性、利用其它方法定性這三種。

色譜分析法的分類比較復雜。根據流動相和固定相的不同，色譜法分為氣相色譜法和液相色譜法。按色譜操作終止的方法可分為展開色譜和洗脫色譜。按進樣方法可分為區帶色譜、迎頭色譜和頂替色譜。

色譜法分離效率高、分離速度快、靈敏度高、可進行大規模的純物質制備。

色譜定性的依據，是在同一特定的色譜條件下，不同的物質在固定相上保留的能力不一樣，因此它們的保留時間不同，也就是說他們的出峰時間不同，可以通過保留時間來進行定性，目前各種色譜定性方法都是基於保留值的。但是不同物質在同一色譜條件下，可能具有相似或相同的保留值。在精度高的色譜上，保留時間可以精確到零點幾秒。從色譜圖中可以得到定性的信息有：被測樣品中有幾種物質，它們大概的比例，從出峰的出峰順度可以粗略的判斷化合物的極性。

⑷ 色譜法分幾種

2. 液相色譜法 (liquid chromatography 簡稱 LC)用液體作流動相的色譜法。 3. 超臨界流體色譜法 (SFC) 用超臨界狀態的流體作流動相的色譜法。 超臨界狀態的流體不是一般的氣體或流體 , 而是臨界壓力和臨界溫度以上高度壓縮的氣體 , 其密度比一般氣體大得多而與液體相似 , 故又稱為 「 高密度氣相色譜法 」 （二）按分離原理分 1. 吸附色譜法（ adsorption chromatography ）： 根據吸附劑表面對不同組分物理吸附能力的強弱差異進行分離的方法。 如：氣一固色譜法、液-固色譜法——吸附色譜 2. 分配色譜法 （partition chromatography ）： 根據不同組分在固定相中的溶解能力和在兩相間分配系數的差異進行分離的方法。 如：氣-液色譜法、液-液色譜法——分配色譜 3. 離子交換色譜法（ion exchange chromatography ） 根據不同組分離子對固定相親和力的差異進行分離的方法。 4. 排阻色譜法（ size exclusion chromatography）： 又稱凝膠色譜法 （gel chromatography ）, 根據不同組分的分子體積大小的差異進行分離的方法。 其中：以水溶液作流動相的稱為凝膠過濾色譜法 ；以有機溶劑作流動相的稱為凝膠滲透色譜法。 5. 親合色譜法 (affinity chromatography) 利用不同組分與固定相共價鍵合的高專屬反應進行分離的方法。 （三）按固定相的形式 1. 柱色譜法（column chromatography ）： 固定相裝在柱中 , 試樣沿著一個方向移動而進行分離。 包括 填充柱色譜法：固定相填充滿玻璃管和金屬管中 開管柱色譜法：固定相固定在細管內壁（毛細管柱色譜法） 2. 平板色譜法 （planer chromatography ）： 固定相呈平面狀的色譜法。 包括 紙色譜法： 以吸附水分的濾紙作固定相； 薄層色譜法：以塗敷在玻璃板上的吸附劑作固定相。|||色譜法（又稱層析法）根據其分離原理可分為：吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜與排阻色譜等。吸附色譜法是利用被分離物質在吸附劑上被吸附能力的不同，用溶劑或氣體洗脫使組分分離；常用的吸附劑有氧化鋁、硅膠、聚醯胺等有吸附活性的物質。分配色譜是利用被分離物質在兩相中分配系數的不同使組分分離；其中一相被塗布或鍵合在固體載體上，稱為固定相,另一相為液體或氣體,稱為流動相。常用的載體有硅膠、硅藻土、硅鎂型吸附劑與纖維素粉等。離子交換色譜是利用被分離物質在離子交換樹脂上交換能力的不同使組分分離；常用的有不同強度的陽、陰離子交換樹脂，流動相為水或含有機溶劑的緩沖液。分子排阻色譜法又稱凝膠色譜法，是利用被分離物質分子量大小的不同導致在填料上滲透程度不同使組分分離；常用的填料有分子篩、葡聚糖凝膠、微孔聚合物、微孔硅膠或玻璃珠等，根據固定相和供試品的性質選用水或有機溶劑作為流動相。 色譜法又可根據分離方法分為：紙色譜法、薄層色譜法、柱色譜法、氣相色譜法、高效液相色譜法等。所用溶劑應與供試品不起化學反應,純度要求較高。分析時的溫度,除氣相色譜法或另有規定外，系指在室溫操作。分離後各成分的檢出，應採用各品種項下所規定的方法。採用紙色譜法、薄層色譜法或柱色譜法分離有色物質時，可根據其色帶進行區分，分離無色物質時，可在短波(254nm)或長波(365nm)紫外光燈下檢視，其中紙色譜或薄層色譜也可噴以顯色劑使之顯色，或在薄層色譜中用加有熒光物質的薄層硅膠，採用熒光猝滅法檢視；柱色譜法、氣相色譜法和高效液相色譜法可用接於色譜柱出口處的各種檢測器檢測；柱色譜法還可分部收集流出液後用適宜方法測定。|||氣相色譜法系採用氣體為流動相（載氣）流經裝有填充劑的色譜柱進行分離測定的色譜方法。物質或其衍生物氣化後，被載氣帶入色譜柱進行分離，各組分先後進入檢測器，用記錄儀、積分儀或數據處理系統記錄色譜信號。 高效液相色譜法是用高壓輸液泵將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，經進樣閥注入供試品，由流動相帶入柱內，在柱內各成分被分離後，依次進入檢測器，色譜信號由記錄儀或積分儀記錄。 氣相色譜和液相色譜各有其優缺點和應用范圍： 氣相色譜採用氣體作為流動相，由於物質在氣相中的流速比在液相中快得多，氣體又比液體的滲透性強，因而相比液相色譜，氣相色譜柱阻力小，可以採用長柱，例如毛細管柱，所以分離效率高。 由於氣相色譜毋需使用有機溶劑和價格昂貴的高壓泵，因此氣相色譜儀的價格和運行費用較低，且不易出故障。 能和氣相色譜分離相匹配的檢測器種類很多，因而可用於各種物質的分離與檢測。特別是當使用質譜儀作為檢測器時，氣相色譜很容易把分離分析與定性鑒定結合起來，成為未知物質剖析的有力工具。 氣相色譜不能分析在柱工作溫度下不汽化的組分，例如，各種離子狀態的化合物和許多高分子化合物 氣相色譜也不能分析在高溫下不穩定的化合物，例如蛋白質等。 液相色譜則不能分析在色譜條件下為氣體的物質，但卻能分離不揮發、在某溶劑中具有一定溶解度的化合物，例如高分子化合物、各種離子型化合物以及受熱不穩定的化合物（蛋白質、核酸及其它生化物質）。|||色譜法分類 （一）按兩相物理狀態分 1. 氣相色譜法 (gas chromatography 簡稱 GC)用氣體作流動相的色譜法。 2. 液相色譜法 (liquid chromatography 簡稱 LC)用液體作流動相的色譜法。 3. 超臨界流體色譜法 (SFC) 用超臨界狀態的流體作流動相的色譜法。 超臨界狀態的流體不是一般的氣體或流體 , 而是臨界壓力和臨界溫度以上高度壓縮的氣體 , 其密度比一般氣體大得多而與液體相似 , 故又稱為 「 高密度氣相色譜法 」（二）按分離原理分 1. 吸附色譜法（ adsorption chromatography ）： 根據吸附劑表面對不同組分物理吸附能力的強弱差異進行分離的方法。 如：氣一固色譜法、液-固色譜法——吸附色譜 2. 分配色譜法 （partition chromatography ）： 根據不同組分在固定相中的溶解能力和在兩相間分配系數的差異進行分離的方法。 如：氣-液色譜法、液-液色譜法——分配色譜 3. 離子交換色譜法（ion exchange chromatography ） 根據不同組分離子對固定相親和力的差異進行分離的方法。 4. 排阻色譜法（ size exclusion chromatography）： 又稱凝膠色譜法 （gel chromatography ）, 根據不同組分的分子體積大小的差異進行分離的方法。 其中：以水溶液作流動相的稱為凝膠過濾色譜法 ；以有機溶劑作流動相的稱為凝膠滲透色譜法。 5. 親合色譜法 (affinity chromatography) 利用不同組分與固定相共價鍵合的高專屬反應進行分離的方法。 （三）按固定相的形式 1. 柱色譜法（column chromatography ）： 固定相裝在柱中 , 試樣沿著一個方向移動而進行分離。 包括 填充柱色譜法：固定相填充滿玻璃管和金屬管中 開管柱色譜法：固定相固定在細管內壁（毛細管柱色譜法） 2. 平板色譜法 （planer chromatography ）： 固定相呈平面狀的色譜法。 包括 紙色譜法： 以吸附水分的濾紙作固定相； 薄層色譜法：以塗敷在玻璃板上的吸附劑作固定相。|||還有一種現在常用的色譜即：高速逆流色譜，它屬於液－液分配色譜。利用樣品中各組分在兩相溶劑間分配比的差異，進行分離。它是不用固態載體的全液態的液-液分配色譜技術.優點：高效提純，能將樣品中有效成分提純至98％以上理論回收率為100％ ，不存在樣品的不可逆吸附，極大地避免了樣品的變性問題操作簡單，無需太多樣品前處理等。相對於HPLC,溶質的分離原理僅於分配有關，避免了HPLC柱子與柱子之間的重現性差的現象。現在廣泛用於天然產物的制備分離。相關書籍參考《高速逆流色譜分離技術及應用》曹學麗 編著 化學工業出版社|||一）按兩相所處的狀態分類 液體作為流動相，稱為「液相色譜」（liquid chromatograp-hy）；用氣體作為流動相，稱為「氣相色譜」（gas chromatogr-aphy）。固定相也有兩種狀態，以固體吸附劑作為固定相和以附載在固體上的液體作為固定相，所以層析法按兩相所處的狀態可以分為： 液－固色譜（liquid-solid chromatography）液－液色譜（liquid-liquid chromatography） 氣－固色譜（gas-solid chromatography） 氣－液色譜（gas-liquid chromatography）（二）按層析過程的機理分類 吸附層析（adsorption chromatography ）利用吸附劑表面對不同組分吸附性能的差異，達到分離鑒定的目的。分配層析（partition chromatography）利用不同組分在流動相和固定相之間的分配系數（或溶解度）不同，而使之分離的方法。 離子交換層析（ion-exchange chromatography ）利用不同組分對離子交換劑親和力的不同，而進行分離的方法。凝膠層析（gelchromatography）利用某些凝膠對於不同組分因分子大小不同而阻滯作用不同的差異，進行分離的技術。 （三）按操作形式不同分類 柱層析（colum chromatography）將固定相裝於柱內，使樣品沿一個方向移動而達到分離。紙層析（paper chrmatography）用濾紙作液體的載體（擔體support），點樣後，用流動相展開，以達到分離鑒定的目的。薄層層析（thin layper chromatography）將適當粒度的吸附劑鋪成薄層，以紙層析類似的方法進行物質的分離和鑒定。 >|||色譜法根據其分離原理可分為：吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜與排阻色譜等 色譜法又可根據分離方法分為：紙色譜法、薄層色譜法、柱色譜法、氣相色譜法、高效液相色譜法等。

⑸ 色譜法按原理分為幾類

按色譜法分離所依據的物理或物理化學性質的不同，又可將其分為5類，分別是：

1、吸附色譜法：利用吸附劑表面對不同組分物理吸附性能的差別而使之分離的色譜法稱為吸附色譜法。適於分離不同種類的化合物（例如，分離醇類與芳香烴）。

2、分配色譜法：利用固定液對不同組分分配性能的差別而使之分離的色譜法稱為分配色譜法。

3、離子交換色譜法：利用離子交換原理和液相色譜技術的結合來測定溶液中陽離子和陰離子的一種分離分析方法，利用被分離組分與固定相之間發生離子交換的能力差異來實現分離。

離子交換色譜主要是用來分離離子或可離解的化合物。它不僅廣泛地應用於無機離子的分離，而且廣泛地應用於有機和生物物質，如氨基酸、核酸、蛋白質等的分離。

4、尺寸排阻色譜法：是按分子大小順序進行分離的一種色譜方法，體積大的分子不能滲透到凝膠孔穴中去而被排阻，較早的淋洗出來；中等體積的分子部分滲透；

小分子可完全滲透入內，最後洗出色譜柱。這樣，樣品分子基本按其分子大小先後排阻，從柱中流出。被廣泛應用於大分子分級，即用來分析大分子物質相對分子質量的分布。

5、親和色譜法：相互間具有高度特異親和性的二種物質之一作為固定相，利用與固定相不同程度的親和性，使成分與雜質分離的色譜法。例如利用酶與基質（或抑制劑）、抗原與抗體，激素與受體、外源凝集素與多糖類及核酸的鹼基對等之間的專一的相互作用；

使相互作用物質之一方與不溶性擔體形成共價結合化合物，用來作為層析用固定相，將另一方從復雜的混合物中選擇可逆地截獲，達到純化的目的。可用於分離活體高分子物質、過濾性病毒及細胞。或用於對特異的相互作用進行研究。

其應用：

色譜法的應用可以根據目的分為制備性色譜和分析性色譜兩大類。

制備性色譜的目的是分離混合物，獲得一定數量的純凈組分，這包括對有機合成產物的純化、天然產物的分離純化以及去離子水的制備等。

相對於色譜法出現之前的純化分離技術如重結晶，色譜法能夠在一步操作之內完成對混合物的分離，但是色譜法分離純化的產量有限，只適合於實驗室應用。

分析性色譜的目的是定量或者定性測定混合物中各組分的性質和含量。定性的分析性色譜有薄層色譜、紙色譜等，定量的分析性色譜有氣相色譜、高效液相色譜等。色譜法應用於分析領域使得分離和測定的過程合二為一，降低了混合物分析的難度縮短了分析的周期，是比較主流的分析方法。

在中華人民共和國葯典中，共有超過約600種化學合成葯和超過約400種中葯的質量控制應用了高效液相色譜的方法。

⑹ 色譜法有哪些類型其分離的基本原理是什麼

柱色譜法，又稱層析法。是一種以分配平衡為機理的分配方法。柱色譜主要分為吸附柱色譜、分配柱色譜兩種。

1. 吸附柱色譜原理
在一定條件下，硅膠與被分離物質之間產生作用，這種作用主要是物理和化學作用兩種.物理作用來自於硅膠表表面與溶質分子之間的范德華力.化學作用主要是硅膠表面的硅羥基與待分離物質之間的氫鍵作用。色譜管為內徑均勻、下端縮口的硬質玻璃管，下端用棉花或玻璃纖維塞住，管內裝入吸附劑。吸附劑的顆粒應盡可能保持大小均勻，以保證良好的分離效果。除另有規定外，通常多採用直徑為0.07～0.15mm的顆粒。色譜柱的大小，吸附劑的品種和用量，以及洗脫時的流速，均按各品種項下的規定。
在吸附柱色譜中，吸附劑是固定相，洗脫劑是流動相，相當於薄層色譜中的展開劑。吸附劑的基本原理與吸附薄層色譜相同，也是基於各組分與吸附劑間存在的吸附強弱差異，通過使之在柱色譜上反復進行吸附、解吸、再吸附、再解吸的過程而完成的。所不同的是，在進行柱色譜的過程中，混合樣品一般是加在色譜柱的頂端，流動相從色譜柱頂端流經色譜柱，並不斷地從柱中流出。由於混合樣中的各組分與吸附劑的吸附作用強弱不同，因此各組分隨流動相在柱中的移動速度也不同，最終導致各組分按順序從色譜柱中流出。如果分步接收流出的洗脫液，便可達到混合物分離的目的。一般與吸附劑作用較弱的成分先流出，與吸附作用較強的成分後流出。

2. 分配柱色譜原理
方法和吸附柱色譜基本一致。裝柱前，先將載體和固定液混合，然後分次移入色譜柱中並用帶有平面的玻棒壓緊；供試品可溶於固定液，混以少量載體，加在預制好的色譜柱上端。洗脫劑需先加固定液混合使之飽和，以避免洗脫過程中兩相分配的改變。

⑺ 色譜分離法按操作方式不同，可分為哪三種

按操作形式可分為：紙色譜法(PC)、薄層色譜法(TLC)、柱色譜法。
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【色譜法分類】
按兩相的物理狀態可分為：氣相色譜法(GC)和液相色譜法(LC)。氣相色譜法適用於分離揮發性化合物。GC根據固定相 不同又可分為氣固色譜法(GSC)和氣液色譜法(GLC)，其中以GLC應用最廣。液相色譜法適用於分離低揮發性或非揮發性、熱穩定性差的物質。LC同樣 可分為液固色譜法(LSC)和液液色譜法(LLC)。此外還有超臨界流體色譜法(SFC)，它以超臨界流體（界於氣體和液體之間的一種物相）為流動相（常 用CO2），因其擴散系數大，能很快達到平衡，故分析時間短，特別適用於手性化合物的拆分。
按原理分為：吸附色譜法(AC)、分配色譜法(DC)、離子交換色譜法(IEC)、排阻色譜法(EC，又稱分子篩、凝膠過濾(GFC)、凝膠滲透色譜法(GPC）和親和色譜法。（此外還有電泳。）
按操作形式可分為：紙色譜法(PC)、薄層色譜法(TLC)、柱色譜法。
【色譜分離原理】
高效液相色譜法按分離機制的不同分為液固吸附色譜法、液液分配色譜法（正相與反相）、離子交換色譜法、離子對色譜法及分子排阻色譜法。
http://www.kesure.com/home/procts_view.asp?id=26

⑻ 什麼是色譜分離

色譜分離技術又稱層析分離技術或色層分離技術，是一種分離復雜混合物中各個組分的有效方法。
它是利用不同物質在由固定相和流動相構成的體系中具有不同的分配系數，當兩相作相對運動時，這些物質隨流動相一起運動，並在兩相間進行反復多次的分配，從而使各物質達到分離。

⑼ 什麼是色譜分離法

利用各組分在不同的兩相之間的分配系數或吸附系數不同，從而達到分離各組分的分析方法，我們稱為色譜分離法，之所以稱為色譜分離，是因為這種方法首先被發現於植物色素的分離。