Ⅰ 簡述抗血清制備程序或制備方法有哪些
A.特異性免疫、抗原;
特異性免疫即非體內原有的,由抗原引發產生抗體的免疫。蛇毒是用來引起免疫反應,所以是抗原。
Ⅱ 外單位送來一個細菌培養物要求鑒定,你如何將其鑒定到種鑒定到血清型用什麼方法
可以用稀釋塗布平板法鑒定
Ⅲ 你好,我們想長期保存抗血清至少一年,看到你說使用過很多防腐劑,能否請教你使用的種類和用量
對不起我不會
Ⅳ 如何鑒定血清的質量
博凌科為生物科技-為你解答:血清質量的鑒定一般包括以下幾個方面: ●理化性質:如滲透壓、pH值、蛋白電泳圖譜、蛋白含量、激素水平、內毒素等。蛋白含量包括血清總蛋白含量(不低於35-45g/L)、球蛋白含量(應小於20g/L)、血紅蛋白含量等。其中球蛋白含量是一 項非常重要的指標,血清中球蛋白主要是抗體,球蛋白含量越低血清質量越高。血紅蛋白也是越低越好。 ●微生物檢測:包括細菌、真菌、支原體、病毒等。特別是對支原體、病毒的檢測,支原體是一種很小的微生物,可通過孔徑22u的濾膜。支原體、病毒污染在光 學顯微鏡下難於察覺,細胞也能生長繁殖,但會影響實驗結果。檢測支原體的方法很多,如培養法、PCR法、熒光染色法、電鏡觀察法等。 ●促生長效果:這是血清重要的特性之一,應當以培養的細胞來檢測。有兩種方法:克隆形成率、貼瓶 率測定法和連續傳代培養法。 (1)克隆形成率測定:一般以懸浮生長的細胞為培養對象,按有限稀釋法做克隆化培養,將不同批號的血清配製成不同濃度的培養基,細胞也稀釋成不同濃度,接種到96孔板,每孔200ul,培養一定時間,統計有克 隆生長的孔,計算出百分比,再與對照的標准血清相比較,就可看出不同批號血清間的區別。比較低的濃度,更能觀察出血清質量間的細微差別。 (2) 貼瓶率測定:是以貼壁細胞為培養對象,將細胞稀釋至低密度,接種至平皿,每皿200或100個細胞,以不同濃度的血清培養基培養,培養一定時間後棄培養基,染色後統計集落數,計算出集落數占接種細胞數的百分比,同樣再與標准血清比較,判斷血清質量高低。 (3)連續傳代培養法:是將細胞培養於 3個一定體積的培養瓶中,待測血清配製為5%濃度,一般於第七天收集細胞,計數,取平均值,中間可以更換一次培養基。連續測試三個周期以上, 觀察細胞生長狀況,並將每次的計數結果與標准血清的測試結果比較。 ●對於使用者,判斷血清質量先從外觀入手。好的血清應該是透明清亮,土黃色或棕黃色,無沉澱或極少沉澱,比較粘稠。如發現血清渾濁、不透明、含許多沉澱物,說明血清污染或血清中的蛋白質變性;若血清呈棕紅色,說明血清中的血紅蛋白含量太高,取材時有溶血現象;如果搖晃時感覺液體稀薄,說明血清中摻入的生理鹽水太多。如果要進一步了解血清的質量,則應連續培養某些細胞,觀察細胞生長狀況。
Ⅳ 豬病常用的血清學診斷方法有哪些
抗原和相應的抗體在動物體內或體外都能發生特異性結合反應,這種反應稱為抗原抗體反應,習慣上把體內的抗原抗體反應稱為免疫反應,體外的抗原抗體反應稱為血清學反應,因為抗體主要存在於血清中。
血清學反應可以用已知的抗體檢查未知的抗原,也可用已知抗原測定未知的抗體。人們根據抗體能與相應抗原發生反應並出現可見的抗原—抗體復合物的原理,設計了許多血清學診斷方法,不僅可以檢測動物體內乃至體外的病原微生物,或其抗原性成分,而且還可以測定動物機體對病原微生物的侵襲或對其抗原成分的免疫反應。在抗原—抗體復合物成不可見狀態時,可以通過瓊脂擴散、凝集實驗以及酶標記等指示系統,使其變為可見或可測狀態。
目前已知的血清學診斷方法很多,現僅介紹幾種在目前條件下規模化豬場通過學習都能做到的診斷方法:
(1)凝集試驗豬病診斷過程中常用的操作方法有以下幾種:
①全血平板凝集試驗實踐中主要用於細菌性疾病的抗體檢測和抗原(經分離培養後)的鑒定。現舉例用已知豬丹毒抗原(丹毒桿菌的純培養液)測定被檢豬血清中的抗體。其操作步驟如下:
a.材料豬丹毒凝集抗原,玻片,9號針頭,酒精棉球,酒精燈,鉑耳(取血環)等。b.操作用鉑耳取已知抗原1滴,置於玻片上。用酒精棉球擦拭針頭,鉑耳在酒精燈上灼燒消毒。用針頭刺破被檢豬的耳靜脈,以鉑耳取血與玻片上的抗原等量混合,在2~3分鍾內觀察結果。c.結果判定出現顆粒狀的凝集,為陽性反應。否則為陰性。
②試管凝集試驗是一種定量法,用於測定被檢血清或其他體液中有否某種抗體及其效價,可做臨床的輔助診斷,或用於流行病學監測。在豬場中,本法常用於豬布氏桿菌病的診斷。
A.材料布氏桿菌病試管凝集抗原(1∶20倍稀釋),布氏桿菌病陽性血清、陰性血清(1∶25倍稀釋),稀釋液(0.5 %石炭酸生理鹽水),滅菌小試管,1毫升吸管,試管架,待檢血清等。B.操作取試管7支置於試管架上,設陽性和陰性血清及抗原對照各1支,測定管4支,以後每增加1個樣品,只需增加4支測定管。
按表10示意稀釋血清,加抗原,完成後每支試管內應含1毫升液體。
Ⅵ 實驗室中抗血清制備後,抗體特異性鑒定最常採用的方法是
正確答案:B
解析:單向免疫擴散常用於待測抗原的定量測定;親和層析和免疫吸附是分離純化的方法;可以用特異性抗原與制備的抗血清進行雙向免疫擴散試驗來鑒定抗血清的特異性
。
Ⅶ 牛血清白蛋白的提取和鑒定方法(設計性實驗報告)
牛血清白蛋白的提取操作步驟:
1、鹽析取離心管一支加入牛血清2mL、加入等量PBS(磷酸鹽緩沖生理鹽水)稀釋血清,搖勻後,逐滴加入pH7.2飽和硫酸銨溶液2mL,邊加邊搖,充分混勻,然後靜止放臵10分鍾,再離心(2000r/min)10min,將上清液傾入試管中。
2、取干凈的比色板,在各孔內滴加一滴納氏試劑
3、取玻璃紙一張,折成袋形,將離心後的上清液倒入袋內,用線扎緊上口(注意要留有空隙),用玻璃棒懸在盛有半杯蒸餾水的100mL燒杯內,使透析袋下半部侵入水中,對蛋白液進行透析,常用玻璃棒攪拌袋外(燒杯中)液體,以縮短透析時間。
4、每隔2分鍾檢查一次,更換蒸餾水多次,用納氏試劑檢查袋外液體的NH4+,觀察顏色變化並記錄,直至袋內鹽分透析完畢。
5、將袋內液體傾入試管,即得牛血清白蛋白溶液。
牛血清白蛋白的鑒定方法:
1、點樣取一張膜條,將薄膜無光澤面向下,放入培養皿中的巴比妥緩沖液中使膜條充分浸透,取出,用干凈濾紙吸去多餘的緩沖液,以薄膜的無光澤面距一端1.5㎝處做點樣線,將牛血清樣品與待測的牛血清白蛋白溶液分別用點樣器在同一張薄膜的點樣線處不同位置點樣。標准液點一次,待測液點三次。
2、電泳將點樣後的膜條致於電泳槽架上,放置時膜條無光澤面向下,點樣端致於陰極,待平衡5min後,打開電源,調節電源,調節電泳儀的電壓為160伏,通電60min,關閉電源後用鑷子將模條取出。
3、 染色將膜條直接浸於盛有氨基黑10B的染色液中,染2分鍾後取出,立即浸於漂洗液中,分別在漂洗液1、2、3中各漂洗5min,直至背景漂洗干凈為止,用濾紙吸干薄膜。
4、鑒定比較樣品和待測液中白蛋白在薄膜上的電泳結果,看位置是否一致。
(7)抗血清的鑒定方法有哪些怎麼保存擴展閱讀:
牛血清白蛋白
牛血清中的簡單蛋白,是血液的主要成分(38g/1000ml),分子量68kD。等電點4.8。含氮量16%,含糖量0.08%。僅含已糖和已糖胺,含脂量只有0.2%。白蛋白由581個氨基酸殘基組成,其中35個半胱氨酸組成17個二硫鍵,在肽鏈的第34位有一自由巰基。白蛋白可與多種陽離子、陰離子和其他小分子物質結合。
血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營養作用。在動物細胞無血清培養中,添加白蛋白可起到生理和機械保護作用和載體作用。牛血清白蛋白(BSA),又稱第五組分,是牛血清中的一種球蛋白,包含583個氨基酸殘基,分子量為66.430 Da,等電點為4.7。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應用,例如在western blot中作為Blocking agent。
Ⅷ 鑒定血清中維生素A的技術方法有哪些鑒定一份血清需要多少時間
5天
Ⅸ 血清 怎麼郵寄!
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Ⅹ 什麼是抗血清檢測法
植物病毒是一種由核酸和蛋白質組成的抗原,當把經過純化的某種已知病毒注射到脊椎動物體內後,就會產生一種相應的抗體。
抗體主要存在於血清中,含有抗體的血清稱為抗血清。注射到動物體內的病毒不同,所產生的抗血清也不同。
抗原和抗體之間能發生高度專一性的免疫反應,藉助這種反應,就可用已知病毒的抗血清鑒定未知病毒的種類。其方法之一是將待測植株的一滴汁液加到幾種不同的抗血清中,在哪一種抗血清中出現沉澱,就證明該植株帶有哪一種病毒。
這個過程在很短時間內即可完成。因此,病毒的抗血清鑒定法既靈敏又快捷,是目前常用的一種病毒檢測方法。