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dna同位素標記用了哪些方法

發布時間:2024-11-28 21:23:27

㈠ 高中生物實驗哪些用到差速離心法,哪些用到梯度離心法。

高中生物實驗哪些用到差速離心法,哪些用到梯度離心法。?觀察線粒體、葉綠體、蛋白質的結構時用到了差速離心法。
利用同位素標記法觀察DNA時用到了梯度離心法。
密度梯度離心中單一樣品組份的分離是藉助於混合樣品穿過密度梯度層的沉降或上浮來達到的;差速離心法是用不同強度的離心力使具有不同質量的物質分級分離。
密度梯度離心只用一個離心轉速,而差速離心用兩個甚至更多的轉速。密度梯度離心的物質是密度有一定差異的,而差速離心是適用於混合樣品中各沉降系數差別較大組分。
(1)dna同位素標記用了哪些方法擴展閱讀:
使用密度梯度離心法時,注意離心前將樣品小心鋪放在密度梯度溶液表面,離心形成區帶。離心後不同大小、不同形狀、有一定沉降系數差異的顆粒在密度梯度液中形成若干條界面清楚的不連續區帶。再通過虹吸、穿刺或切割離心管的方法將不同區帶中的顆粒分開收集,得到所需的物質。
注意事項:
1、梯度介質應具備足夠大的溶解度,以形成所需的密度梯度范圍。
2、梯度介質不會與樣品中的組分發生反應。
3、梯度介質也不會引起樣品中組分的凝集、變性或失活。
4、若離心時間過長由於顆粒的擴散作用,會使區帶越來越寬。為此,應適當增大離心力、縮短離心時間,可以減少由於擴散而導致的區帶擴寬現象。

㈡ 檢測染色體DNA上插入了目的基因的方法

分子雜交技術。但是,可以用同位素標記的核酸探針與染色體dna雜交,將通過檢測同位素的放射性,判斷探針是否與染色體結合,結合則是插入目的基因。這也用到同位素標記了,但現在也有用熒光物質標記的探針,所以在兩種技術選一的情況下,是分子雜交技術。
真糾結啊,那就信書吧。其實檢測方法很多,不只課本那一種。
具體步驟:用同位素標記的目的基因的單鏈做探針與可能插入目的基因的染色體dna雜交(也是單鏈),洗去未結合的探針,結合的不被洗去。再通過同位素的放射性,如果存在雜交,將在顯影的膠片上將呈現痕跡,則是插入目的基因了;如果沒有雜交,探針都被洗去,膠片不出現特定痕跡,那麼就可以判斷目的基因未插入染色體。

㈢ 有幾種核酸標記的方法

通過核酸標記技術可將細胞因子cDNA作為基因探釗檢測細胞內細胞因子 基因組 DNA或mRNA。主要有以下幾種方法:
1.應用同位素(或非同位素)標記的cDNA探針,檢測經Northern blot後細胞因子mRNA水平或採用打點雜交法。
2.應用標記cDNA探釗與細胞或組織切片進行原位雜交,然後進行放射自顯影。
3.細胞因子mRNA經反轉錄為cDNA,用特異性細胞因子引物經聚合酶鏈反應(PCR)擴增細胞因子cDNA,Southern blot後用標記探針檢測特異細胞因子DNA水平。

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