『壹』 肝素鈉的封管濃度是多少
沒有固定濃度,在醫院的肝素封管的濃度多是一支5000u的肝素加入100毫升的氯化鈉注射液當中。(這樣的濃度是安全的,並且濃度更低會更安全,只是封管的效果會差些。)
肝素鈉 (Heparin Sodium )肝素鈉是粘多糖硫酸酯類抗凝血葯。肝素鈉是由豬或牛的腸粘膜中提取的硫酸氨基葡聚糖的鈉鹽,屬粘多糖類物質。近年來研究證明肝素鈉還有降血脂作用。
葯物性狀
本品為白色或類白色的粉末,有引濕性。本品在水中易溶。比旋度 取本品,精密稱定,加水溶解並稀釋成每1ml中含2.5mg的溶液,照瓊脂糖凝膠電泳法試驗,供試品和標准品所顯斑點的遷移距離之比為0.9~1.1。
葯物功能
1.治療各種疾病並發的播散性血管內凝血早期。
2.預防動、靜脈血栓和肺栓塞。
3.治療動、靜脈血栓和肺栓塞,缺血性腦卒中,不穩定型心絞痛(減輕症狀、預防心肌梗塞),急性心肌梗塞(防止早期再梗塞和梗塞區延展,降低病死率)。
4.人工心肺、腹膜透析或血液透析時作為抗凝血葯物。
5.作為溶血栓療法的維持治療。6.用於輸血時預防血液凝固及血庫保存鮮血等體外抗凝劑。
鑒別檢查
(1) 取本品與肝素標准品,分別加水製成每1ml 中含2.5mg 的溶液,照電泳法(附錄Ⅴ F第三法)試驗,供試品和標准品所顯斑點的遷移距離之比應為0.9 ~1.1 。
( 2) 本品的水溶液顯鈉鹽的鑒別反應(附錄Ⅲ)。酸鹼度 取本品0.10g ,加水10ml溶解後,依法測定(附錄Ⅵ H),pH 值應為5.0 ~7.5 。溶液的澄清度與顏色 取本品0.50g ,加水10ml溶解後,溶液應澄清無色;如顯渾濁,照分光光度法(附錄Ⅳ A),在640nm 的波長處測定,吸收度不得大於 0.018;如顯色,與黃色1 號標准比色液(附錄Ⅸ A第一法)比較,不得更深。吸收度 取本品,加水製成每1ml 中含4mg 的溶液,照分光光度法(附錄Ⅳ A)測定,在260nm 的波長處,其吸收度不得大於0.20;在280nm 的波長處,其吸收度不得大於0.15。黏度 精密稱取本品(按實際測得的單位計算相當於40萬單位),加水適量研細,移入乾燥並稱定重量的10ml量瓶中,研缽用水沖洗並移入量瓶中,將量瓶置25℃水浴內,俟溫度平衡後,加25℃水至刻度,搖勻,稱定重量,計算供試品溶液的密度。取溶液,必要時用0.45μm 的濾膜過濾,照黏度測定法(附錄Ⅵ G第一法),用內徑約為 1mm的毛細管,在25℃±0.1 ℃測定其動力黏度,不得大於0.030Pa.s 。總氮量 取本品,照氮測定法(附錄Ⅶ D第二法)測定,按乾燥品計算,含總氮量應為1.3% ~2.5 %。硫 取本品約25mg,精密稱定,照氧瓶燃燒法(附錄Ⅶ C)進行有機破壞,選用1000ml燃燒瓶,以濃過氧化氫溶0.1ml 與水10ml為吸收液,俟生成的煙霧完全吸收後,置冰浴中15分鍾後,加熱緩緩煮沸2 分鍾,冷卻,加乙醇-醋酸銨緩沖液 (pH3.7)50 ml,乙醇30ml,0.1 %茜素紅溶液0.3ml 為指示液,用高氯酸鋇滴定液(0.05mol/L) 滴定至淡橙紅色。每1ml高氯酸鋇滴定液(0.05mol/L) 相當於1.603mg 的S,按乾燥品計算,含硫量不得少於10.0%。乾燥失重 取本品,置五氧化二磷乾燥器內,在60℃減壓乾燥至恆重,減失重量不得過5.0%(附錄Ⅷ L)。熾灼殘渣 取本品0.50g ,依法檢查(附錄Ⅷ N),遺留殘渣應為28.0%~41.0%。
鉀鹽 取本品0.10g ,置100ml 量瓶中,加水溶解並稀釋至刻度,搖勻,作為供試品溶液(B);另量取標准氯化鉀溶液(精密稱取在150℃乾燥1 小時的分析純氯化鉀191mg ,置1000ml量瓶中,加水溶解並稀釋至刻度,搖勻) 5.0ml,置50ml量瓶中,加(B)溶液稀釋至刻度,搖勻,作為對照溶液(A)。照原子吸收分光光度法(附錄Ⅳ D雜質檢查法)在766.5nm 的波長處分別測定,應符合規定。重金屬 取本品0.50g ,依法檢查(附錄Ⅷ H第二法),含重金屬不得過百萬分之三十。熱原 取本品,加氯化鈉注射液製成每1ml 中含1000單位的溶液,依法檢查(附錄Ⅺ D),劑量按家兔體重每1kg 注射2ml ,應符合規定。
提取技術
一、原料處理:將新鮮的豬腸(或冷凍豬腸自然解凍之後)用清水仔細清洗去除內外污物和外部皮膚脂肪後,絞碎成糜狀,並在充分攪拌下,加入等量的水混合後,再加入少許溶度為0.1%的防腐劑混合均勻。
二、酶解提取:先將上述原料在充分攪拌下,用少量稀鹼液精細地調節至PH值為8-9(可用相應的精密PH試紙進行測定,下同)再加入事先已經絞碎的新鮮胰漿作為酶解劑(所加入的豬胰漿按照原料液實際重量的1%-1.5%為宜),攪勻後,緩慢升溫至40度左右,繼續攪拌,並保持料液PH=7.5-8,保持液溫於37-40度下,酶解3-4小時,然後升溫至47-50度,維持PH值=8.0-8.5,再酌情補加少許豬胰漿後,繼續酶解4-5小時,在上述酶解過程中,如果酶解料液的PH紙復查有所下降之際,就應該及時用少許稀鹼液(5%-8%NaOH溶液)仔細調整。鹽酸調整其PH=5.5-6,然後升溫至80度。在充分攪拌下,加入料液總重量5%左右的精鹽(含NaCL≥95%,鈣鎂鈣鹽<0.5%),使之混溶均勻後,再升溫90度,保溫30分鍾,停止攪拌,趁熱過濾除去雜質,待濾液冷卻至37度時,用稀鹼液調整其PH=10.5,精細過濾,濾液回調其PH=9.0-9.5范圍內進行離子交換吸附處理。
三、離子交換吸附;先將上述酶解提取液冷卻至室溫,仔細撈除浮於液面的油脂薄片層,控制升溫至45度,停止加熱,在攪拌下加入事先預處理好的D-254型樹脂已有效的吸附料液中的肝素鈉成分,新樹脂的用量一般為料液的2.55-3%,用過後的再生樹脂應酌情加大其用量,攪拌、吸附處理3個小時後靜置過濾,濾液可作為生產治療冠心病的新葯冠心舒的原料。 將上述已經吸附有肝素成分的D-254樹脂先用清水充分漂洗,干凈後,再用大約一倍的1.2mol/L氯化鈉溶液對洗滌好的D-254樹脂進行肝素鈉操作:第一次洗脫液為樹脂體積的1.5倍左右,大約洗脫4小時,第二次洗脫為樹脂體積的0.5倍左右 ,洗脫時間為1小時。濾干樹脂,將洗脫液予以合並。 將上述所得的洗脫液調節到PH=10-11,攪拌30分鍾後,靜置6小時,然後仔細的析出上層清液,下部沉澱物盡量的抽濾至干。合並清液和濾液,精細調節PH=6.0-6.5,加入1.5倍量的95%乙醇沉澱過夜,翌日,仔細地烘吸出上層清液,收集下部沉澱物,抽濾至干(母液可套用於調PH值前的洗脫液中)。經真空烘乾,即得肝素鈉粗品。
四、精製:將所得肝素鈉粗品用2%的氯化鈉溶液完全溶解,製成其溶度大約為8%的溶液,在此過程中可適當的升溫助溶。 將上述料夜用5mol/L氫氧化鈉溶液精細地調節PH=8.0-8.2,升溫至78-80度,按照每一億單位加入0.15-0.2mol/L高錳酸鉀溶液至紫紅色不再褪色時即為第一次氧化操作的終點;再加入少許飽和的亞硫酸鈉溶液以紅色剛好褪盡時為宜。 待上述料液適當冷卻後,精細過濾一次,當其濾液溫度下降至36度時,復濾一次,將濾液用少許飽和的氫氧化鈉溶液調節PH=10.5-11.0,在充分攪拌下,緩慢的加入少量的3%-5%過氧化氫溶液,在25-27度下進行第二次氧化,時間為16-24小時,當氧化過程結束後,將料液用"除菌過濾器"過濾,濾液用少許鹽酸調節至PH=5.8-6.5,加入0.9倍量的95%乙醇,於5-10度條件下沉澱處理24小時。 收集上述沉澱物,用少量10%氯化鈉溶液溶解後,再加上3-4倍的95%乙醇進行沉澱,收集沉澱物(乙醇加以回收、蒸餾、脫水後,可循環套用)。沉澱物經無水乙醇脫水,研細,再經丙酮脫水,研細,再經丙酮脫水,遠紅外線真空烘乾(50-60度),即得肝素鈉精品。
抗凝血葯物
心腦血管疾病是人類的頭號疾病殺手。隨著人們生活水平提高帶來的營養過剩、全球環境的惡化、生活節奏加快、人口老齡化加劇,致使全球心腦血管疾病的發病率和死亡率正逐年增高,肝素的出現為眾多心腦血管疾病患者創造了生命的奇跡。
目前肝素是世界上最有效和臨床用量最大的抗凝血葯物,主要應用於心腦血管疾病和血液透析治療,其中,其在血液透析治療中是唯一有效的特效葯物。臨床應用及研究顯示,肝素除具有抗凝血作用外,還具有其他多種生物活性和臨床用途,包括降血脂作用、抗中膜平滑肌細胞(SMC)增生、促進纖維蛋白溶解等作用。此外,低分子肝素是由肝素原料葯作為原料進一步加工成的一大類抗血栓的葯物,具有更為廣泛的臨床醫學用途,成為治療急性靜脈血栓和急性冠脈綜合症(心絞痛、心肌梗塞)等疾病的首選葯物。
近年來國際市場對肝素原料葯的需求十分強勁,肝素制劑用量穩中有升,低分子肝素的市場迅速擴容並保持高速增長趨勢。預計到2012年,全球肝素類葯物市場銷售額將達到91.02億美元,年復合增長率預計為11.03%。
肝素是世界上迄今為止已知的分子結構最復雜的化合物,短期內無法人工化學合成,目前只有來源於豬小腸粘膜的肝素能夠用於臨床治療。肝素原料葯的原料是肝素粗品,其提取只能源自健康生豬的小腸粘膜,由於含有大量雜質蛋白、雜質核酸、微生物等雜質,需經過物理和化學提取分離過程,定向獲取天然結構基團完整的肝素,從而製成肝素原料葯。肝素鈉原料葯是標准肝素制劑的唯一有效成分和低分子肝素原料的生產起點,目前肝素制劑只有按照注射給葯方式用於臨床,這使得肝素原料葯需要有很高的純度,方可保證制劑的用葯安全。
中國生豬屠宰量佔全球50%以上,擁有全球最豐富的肝素原料資源,我國是全球肝素粗品和肝素原料葯的主要生產國,也是全球最大的肝素原料葯出口國,擁有美國FDA認證或歐盟CEP認證標準的肝素原料葯已呈現供不應求的局面,成為全球下游生產企業青睞的重要資源。
主要作用
肝素鈉為抗凝血葯。對凝血過程的許多環節都有影響,可延長凝血時間和凝血酶原時間。本品不論在體內或體外,都有迅速的抗凝血作用。本品主要作用於纖維蛋白的形成,也可使血小板聚集減少。
本品可用於預防和治療血栓栓塞性疾病,如:心肌梗塞、肺栓塞、腦血管栓塞、外周靜脈血栓等,可防止血栓的形成和擴大。還可用於DIC的早期,及其它體內外的抗凝。早期應用可以防止纖維蛋白原和凝血因子的耗竭。也可在輸血時代替枸櫞酸鹽或體外循環時作為體外抗凝血葯。
注意事項
1.禁用於有出血性素質和伴有血液凝固延緩的各種疾病、肝腎功能不全、嚴重高血壓、腦出血、急性感染引起的心內膜炎(人工瓣膜引起的心內膜炎除外)、大腦手術及脊柱手術後、胃腸道有持續的引流管、流產、活動性肺結核、剝脫性皮膚病、潰瘍病及對本品過敏者,以及妊娠末3個月的孕婦、臨產婦。
2.慎用於乙醇中毒、過敏體質、月經期中、有佔位性病變者,孕婦及產婦等。
3.如有嚴重出血現象,可靜注硫酸魚精蛋白急救,注射速度<20mg/分鍾或10分 鍾內注射50mg為宜(1mg硫酸魚精蛋白可中和100U肝素鈉)。但應注意:①應用魚精蛋白過量,可有抗凝血作用,因魚精蛋白乾擾凝血致活酶。②由於肝素代謝,故肝素注射後間隔的時間越長,中和肝素所用的魚精蛋白的量也越小。
4.用葯之前,進行血小板計數,用葯期間應每周2次做血小板計數,並定期測定凝血時間。如凝血時間>30分鍾,表明用葯過量。應注意觀察有無出血情況。
5.本品皮下注射的一種特殊方法一深皮下脂肪層注射法:注射部位為腹壁或髂嵴上的脂肪層。可避免一般淺層皮下注射易致血腫、疼痛,且作用時間短的缺點。用結核菌素空針抽准劑量,更換注射針頭,然後消毒皮膚(消毒時要輕,不可重按,以免皮下出血),在離開肚臍至少5cm處,以及沒有疤痕的腹白線以外處提起一塊腹壁,固定好針頭,慢慢推注葯物(不要回抽針芯看回血)。注完後迅速拔出針,在針孔處輕壓約1分鍾,不可按摩。如此每次更換注射部位。
6.本品有利尿作用,約發生在治療開始後的36-48小時內,直至停葯後的48小時內,應注意使患者多飲水,記好出入量。
7.吸煙、喝酒可影響本品的作用,應禁止。
8.本品可抑制醛固酮的分泌,引起鉀瀦留,如連用多日,應測血鉀。
9.本品可引起血液中的抗凝血酶Ⅲ的消耗增多,在停用本品後的24-48小時後開始恢復正常。在此期間,發生血栓的可能性增多,故不可突然停用,一般於停葯前的3-5天加用口服抗凝血葯以預防,並逐漸減量直至停用。
10.如有過敏反應時,應及時停葯。
11.有發生與創傷有關的出血危險,應避免受創傷,同時停止對患者進行損傷性的操作如肌內注射、導尿等。
12.按乾燥品計算,每毫克的效價不得少於150U。
13.用量過大時可引起自發性出血,如:粘膜出血、關節積血、傷口出血等。
14.以下疾病者需禁用:肝腎功能不全、潰瘍病、嚴重高血壓、腦出血、孕婦、先兆流產、外科手術後、血友病者。
『貳』 您好,血透病人長期用肝素,會有怎樣的負作用,
主要副作用還是來自肝素本身的治療效果。
血透過程中,為了達到抗凝效果,使用肝素是一個正規的操作。
但是這個操作用是存在矛盾的,尤其是對於有出血傾向的高危病人,抗凝的使用放大了出血的可能及危險程度,現在多數血透時,使用低分子肝素,安全性比普通肝素高,但是費用也高。
如果血透的人沒有出血傾向的話,副作用是不大的
『叄』 體重100公斤透析病人,低分子肝素鈣怎麼用
1ml低分子肝素相當於9500IU抗凝血因子Xa。在預防和治療中,低分子肝素應通過皮下注射給葯。在血透中,通過血管內注射給葯。不能用於肌肉注射。脊髓/硬膜外麻醉或脊髓腰椎穿刺時,低分子肝素的給葯時機應遵循特殊注意事項(參見【注意事項】)[u]皮下注射技術[/u]皮下注射時,患者易取卧位,注射部位為前外側或後外側腹壁的皮下脂肪組織內,左右側交替。注射針應垂直、完全插入注射者用拇指和食指捏起的皮膚皺褶內,而不是水平插入。在整個注射過程中,應維持皮膚皺褶的存在。預防性治療下列推薦內容常規適用於所有全麻下施行手術的患者。硬膜外麻醉施行手術的患者,因理論上有增加硬膜外血腫形成的可能性,術前是否注射應酌情考慮。使用頻率:每日注射一次劑量:* 中度血栓栓塞形成危險的手術對於中度血栓栓塞形成危險的手術,而且患者沒有顯示有嚴重的血栓栓塞危險,每日注射2850IU(0.3ml)就可以有效起到預防作用。大約在術前2小時進行第一次注射。* 高度血栓栓塞形成危險的手術:髖關節和膝關節手術使用的劑量應該隨患者的體重進行調節。每日注射的劑量是:38IU/kg- 術前,例如手術前12小時- 術後,例如手術後12小時- 以後每日使用,一直到手術後第三天從手術後第四天起劑量調整為57IU/kg。可從下表中依據患者體重范圍決定劑量體重(kg) 從術前到術後第三天每日每次速碧林R 從第四天起每次速碧林R <51 0.2ml 0.3ml 51-70 0.3ml 0.4ml >70 0.4ml 0.6ml* 其他情況:對一些具有高度血栓栓塞形成危險的手術(尤其是腫瘤)和/或患者(尤其是有血栓栓塞疾病病史)。2850IU(0.3ml)低分子肝素就足夠了。治療持續時間:依據血栓栓塞形成危險度來選擇抗凝治療時間。對所有病例,這個治療可輔助其他一些標準的治療方法如下肢用彈力襪,一直到患者能完全走路為止。對於普外手術,肝素的平均使用時間小於10天。一些骨科手術尤其是髖關節手術,如果需長時間抗凝治療,可持續使用肝素或隨後口服抗凝葯物。盡管如此,這些治療中所伴隨的相對危險至今仍未評估。實驗室監測:[u]在整個肝素治療過程中,必須監測血小板計數(參見【注意事項】)。[/u]在正常情況下使用時,預防劑量的低分子肝素並不影響激活的部分凝血活酶時間(APTT)。因此治療中檢測該項指標沒有意義,也無需檢測抗凝血因子Xa的活性。治療性用葯* 對已形成的深靜脈栓塞的治療對深靜脈血栓形成有任何懷疑,就應盡快用適當的檢測手段予以確定。使用頻率:每日2次注射,間隔12小時劑量:每次注射劑量85IU/kg可依據患者的體重范圍,按0.1ml/10kg的劑量每12小時注射一次,見下表體重 每次速碧林R 40-49kg 0.4ml 50-59kg 0.5ml 60-69kg 0.6ml 70-79kg 0.7ml 80-89kg 0.8ml 90-99kg 0.9ml ≥100kg 1.0ml當選擇了對應於患者體重的劑量後,應將注射器垂直,調整推桿至所需刻度,從而獲取所需的注射劑量。應注意對體重大於100kg或低於40kg的患者,估計用量比較困難,可能出現低分子肝素用量不足或出血症狀,對這些患者應當加強臨床觀察。治療持續時間:低分子肝素的使用時間不應超過10天。包括用抗Vit K制劑平衡的時間(參見【注意事項】監測血小板計數)。除非禁忌,口服抗凝葯物應盡早使用。* 治療不穩定性心絞痛和非Q波性心肌梗塞[u]每日2次皮下注射[/u]86IU抗Xa因子/kg的低分子肝素(間隔12小時),聯合使用阿司匹林(推薦劑量:在160-325mg的負荷劑量後,口服劑量75-325mg)。初始的86IU抗Xa因子/kg劑量可通過一次性靜脈推注和皮下注射給葯。治療時間一般在6天左右達到臨床穩定。依據患者體重范圍調整劑量 治療不穩定性心絞痛和非Q波性心肌梗塞 體重 注射劑量(kg) 初始的一次性靜脈推注 皮下注射(每12小時) <50 0.4ml 0.4ml 51-59 0.5ml 0.5ml 60-69 0.6ml 0.6ml 70-79 0.7ml 0.7ml 80-89 0.8ml 0.8ml 90-99 0.9ml 0.9ml ≥100 1.0ml 1.0ml因為沒有低分子肝素同溶栓葯物聯合使用的臨床資料,故如有必要進行溶栓治療,建議停止低分子肝素治療,並隨訪患者。實驗室監測:[u]在整個肝素治療期間,必需監測血小板計數(參見【注意事項】)。[/u]可能需要測定抗凝血因子Xa的活性(最好使用醯胺分解法)以估計患者個體敏感度,尤其是對臨床上無效,出血或有腎臟損害的患者。在治療第二天肝素注射後3到4小時之間采血檢查,檢測值一般為0.5-1IU抗凝血因子Xa/ml。血液透析通過血管注射對於無出血危險或血透持續4小時左右的患者,應在透析開始時通過動脈端單次注射大約65IU/kg劑量的低分子肝素。可依據患者體重范圍調整使用劑量 體重 每次速碧林R量 <50 kg 0.3ml 51-70kg 0.4ml >70kg 0.6ml如有必要,可依據患者個體情況或血透技術條件調整使用劑量。如有出血危險,可將標准劑量減半。
『肆』 肝素怎麼配
你好,一隻肝素是12500單位,臨床一般按100毫克計算。血透室一般常用的配製方法是一毫升肝素(500毫克)加生理鹽水19毫升,每毫升含肝素25毫克。根據患者的具體情況,按醫囑給葯。
『伍』 血透病人肝素鈉公式
沒有固定濃度,在醫院的肝素封管的濃度多是一支5000u的肝素加入100毫升的氯化鈉注射液當中。(這樣的濃度是安全的,並且濃度更低會更安全,只是封管的效果會差些。) 肝素鈉 (Heparin Sodium )肝素鈉是粘多糖硫酸酯類抗凝血葯。肝素鈉是由豬或牛...8656
『陸』 一支肝素2毫升,12500單位,怎麼計算出4000或者三千單位過程
4000單位 為 x 毫升。x/4000 = 2/12500x = 0.64 毫升
『柒』 肝素億數怎麼算
肝素沒有億數的說法。
肝素的計算單位,一般或以公斤或以有效價IU來計算。
你所說的億數,其實是指有效價的單位以億級來作數量基數。
『捌』 50ml生理鹽水,0.4ml肝素,U值是多少,求計算U值的公式
肝素規格一般是2ml(12500U),0.4ml肝素U值是2500U。
只要不是稀釋後取,與生理鹽水數量無關。
計算公式是12500/2*0.4=2500.
『玖』 正常人血漿中肝素的濃度是多少
血漿肝素水平的監測,現以凝固試驗應用較多,如凝血酶時間、部分凝血活酶時間等〔1~3〕,這些方法均是以一段時間范圍衡量肝素的抗凝活性,無法精確定量測定。最近有高效液相色譜法分離測定血中游離肝素含量的報道〔4〕。本文介紹用高效毛細管電泳法(HPCE)測定血漿中肝素含量,能直接定量測定,且與凝血酶法〔3〕測定結果進行對照,含量抗凝效果一致。本文
方法快速、方便、靈敏度高,能直接進行大劑量檢測,且不受纖維蛋白降解產物(FDP)等其它因素的影響。與高效液相色譜法相比具有操作簡便、自動進樣等優點。
1 研究對象
正常人5名,體外循環10例(肝素鈉,按360~500U/kg給葯),血液透析23
例(10例肝素鈉、5例小劑量肝素鈉、3例大劑量肝素鈉分別按65、10.5、120U/kg
給葯;5例肝素鈣按50U/kg給葯)以上均為一次性給葯,給葯後30min采血。
2 儀器與試劑
Bio-Focus 3000 Capillary Electrophoresis System(美國Bio—RAD公司);未塗漬
毛細管(30cm×50μm,河北永年光導纖維廠);肝素鈉水溶液(250000U/L,上海
生物制葯廠產品),肝素鈣水溶液(500000U/L,雲南生化制葯有限公司產品)。
以上2種肝素抗凝活性用美國葯典(USP)的標准肝素鈉(350000U/L)校正。與廠家
標示量相符。SDS(Bio—RAD,USA)電泳純級,乙腈為色譜純級,硼砂、氫氧化
鈉均為國產分析純級。
3 實驗方法
3.1 血樣處理 研究對象靜脈采血2mL(109m mol/L的枸櫞酸鈉1∶9抗凝),離心,
分離出血漿約1.0mL(3000g×15min),加入乙腈(血漿與乙腈比例為2∶3)混勻,
充分混合後放置1min,待蛋白沉澱後再次離心(3000g×15min),取上清液,儀器
自動進樣。未經乙腈處理的血漿可保存,但不超過一周,不允許反復凍融。
3.2 對照品溶液的配製 精確取250000U/L的肝素鈉、500000U/L的肝素鈣各
10μL混合作為對照液,用雙蒸水稀釋成500μL。
3.3 電泳條件 25m mol/L SDS、pH8.5、25m mol/L硼砂電泳緩沖液,配製方
法及毛細管的處理方法按文獻〔5〕。毛細管溫度20℃,電壓20kV,檢測波長270nm,
自動壓力進樣55.16kPa。計算採用外標法,用樣本與標準的峰面積比求得肝素含量。
4 結果
4.1 電泳圖 肝素鈉與肝素鈣相對遷移時間均為2.58min,峰型對稱,分離良好,
達到基線分離。正常人未檢出肝素,見圖1。含肝素鈣血漿標本色譜圖與肝素鈉類似。
a.肝素鈉 b.血漿中雜峰
4.2 線性范圍與最低檢測限 用雙蒸水將250000U/L的肝素鈉、500000U/L的
肝素鈣水溶液分別稀釋成0.1、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0(×103)U/L。
以所使用的肝素作相對標准,測得肝素量與峰掃描積分面積之間呈線性關系,回
歸方程為:
Y=131253.1X-13895.6 r=0.9988
本實驗條件下最低檢測限為25U/L,S/N為2,肝素含量在80~7000U/L之間線
性關系良好。
4.3 回收率測定 取正常人血漿1mL 3份,分別加入250、1000、5000U/L肝素鈉,
按上述方法測出峰面積與雙蒸水稀釋的標准積分面積對應,計算絕對回收率,每
份檢測3次,得平均回收率分別為95.6%、97.5%、98.7%,RSD分別為6.2%、5.4%、
3.5%。
4.4 重復性測定 用2份濃度為500、2500U/L肝素鈉測定20次,並作連續監測,
其批內RSD分別為3.24%、1.48%;批間RSD分別為4.48%、2.74%。
4.5 對研究對象含肝素血樣用凝血酶法〔3〕和HPCE法分別進行測定,結果見表1。
兩法結果近似,P>0.05
兩種方法測定血漿肝素含量比較(U/L,X±S)
組別 例數(n) 凝血酶法 HPCE
體外循環 10 5100±510 5230±490
血液透析
肝素鈉 10 290±100 300±120
肝素鈣 5 200±100 215±110
小劑量抗凝 5 100±20 110±30
大劑量抗凝 3 5345±1023 6043±60
『拾』 請教:血液透析用的肝素12500U和低分子肝素2500U分別等於多少毫克請教
1.25萬單位相當於100毫克,只是低分子肝素不用換算成毫克的!透析時一般一次量給5000-6000單位
靜注,凝血障礙的可給2500——3000單位。治療腎病抗凝時
5000-6000單位,
皮下注射
,12小時一次。